DB50T 1536-2023呼吸袋法生豬發(fā)酵飼料生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程

ICS65.120CCSB46重DB50DB50/T1536-2023本文件按照GB/T1.1—2020《標準化工作導(dǎo)則第1部分：標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》的規(guī)定起草。請注意本文件的某些內(nèi)容可能涉及專利。本文件的發(fā)布機構(gòu)不承擔識別專利的責任。本文件由重慶市農(nóng)業(yè)農(nóng)村委員會提出、歸口并組織實施。本文件起草單位：重慶三峽職業(yè)學(xué)院、重慶市畜牧技術(shù)推廣總站、西南大學(xué)、樂山市農(nóng)業(yè)科學(xué)研究院、重慶市潼南區(qū)新勝鎮(zhèn)農(nóng)業(yè)服務(wù)中心、宜賓市南溪區(qū)國科中農(nóng)生物科技有限公司。本文件主要起草人：何航、劉震坤、張傳師、陳開偉、朱燕、陳鮮鑫、陳亞強、付貴花、羅永莉、章杰、周勤飛、陳紅躍、何道領(lǐng)、楊強。1DB50/T1536-2023呼吸袋法生豬發(fā)酵飼料生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程本文件規(guī)定了呼吸袋法生豬發(fā)酵飼料生產(chǎn)的原料選擇、生產(chǎn)環(huán)境、主要設(shè)備、工藝流程等要求。本文件適用于呼吸袋法生產(chǎn)生豬發(fā)酵飼料。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本文件。GB4789.15食品安全國家標準食品微生物學(xué)檢驗霉菌和酵母計數(shù)GB5749生活飲用水衛(wèi)生標準GB13078飼料衛(wèi)生標準GB/T14699飼料采樣NY/T1444微生物飼料添加劑技術(shù)通則DB50/T1147豬用液態(tài)發(fā)酵飼料生產(chǎn)技術(shù)規(guī)程3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于本文件。發(fā)酵飼料fermentedfeed以一種或多種飼料原料為發(fā)酵底物，添加《飼料添加劑品種目錄》允許使用的微生物菌種，通過發(fā)酵所得到的飼料。3.2呼吸袋breathingbag帶有單向排氣閥的塑料袋。4原料選擇4.1飼料原料衛(wèi)生指標應(yīng)符合GB13078的要求。4.2發(fā)酵菌種應(yīng)為《飼料添加劑品種目錄》中允許使用的菌種，宜選用乳酸菌、芽孢桿菌、酵母菌等為主的單一或復(fù)合微生物制劑。4.3可選用酶制劑、酸化劑等添加劑。4.4微生物添加劑衛(wèi)生指標應(yīng)符合NY/T1444的要求。2DB50/T1536-20235生產(chǎn)環(huán)境5.1生產(chǎn)區(qū)的飼料原料庫、配料接種室、發(fā)酵車間和成品庫相對獨立。5.2發(fā)酵車間應(yīng)保溫隔熱，清潔干燥，定期消毒。5.3飼料原料庫和成品庫應(yīng)通風、干燥，避免受潮或陽光直射。6主要設(shè)備飼料粉碎機、飼料混合機、熱水供應(yīng)裝置、菌種活化裝置、熱封口機、打包機等設(shè)備。7工藝流程7.1生產(chǎn)流程呼吸袋法生豬發(fā)酵飼料生產(chǎn)流程見圖1。原料預(yù)處理配料接種及水分調(diào)節(jié)裝袋發(fā)酵發(fā)酵終點判斷存儲圖1生產(chǎn)流程圖7.2原料預(yù)處理7.2.1常規(guī)飼料原料的粉碎粒度宜控制在1.5mm以下。7.2.2地源性飼料原料可根據(jù)其特性進行篩分、粉碎、酶解或加熱等處理。7.3配料應(yīng)按照飼料配方的要求，將飼料原料依次投入飼料混合機中，充分混勻。7.4接種及水分調(diào)節(jié)7.4.1發(fā)酵菌液制備粉狀發(fā)酵劑宜加葡萄糖、紅糖或糖蜜等營養(yǎng)物質(zhì)在活化裝置中活化后使用。7.4.2接種按要求將發(fā)酵菌液加入到混合機中，與飼料原料充分混勻。7.4.3水分調(diào)節(jié)宜使用30℃~40℃的水調(diào)節(jié)含水量至30%～60%。水質(zhì)應(yīng)符合GB5749的要求。7.5裝袋混合接種后的飼料應(yīng)立即裝入呼吸袋，用熱封口機封口，再放入普通飼料編織袋。7.6發(fā)酵DB50/T1536-20237.6.1溫度發(fā)酵車間溫度宜控制在20℃~37℃。7.6.2時間應(yīng)不少于24h。7.6.3終點判斷發(fā)酵終點的判斷應(yīng)滿足以下條件：a）外觀色澤一致；b）具有發(fā)酵酸香味，無刺激異味；d）有效活菌數(shù)≥1×107CFU/g，乳酸菌、酵母菌的檢測方法按照DB50/T1147、GB4789.15的規(guī)定執(zhí)行，芽孢桿菌的檢測方法按照附錄A的規(guī)定執(zhí)行。7.7存儲制備好的發(fā)酵飼料，應(yīng)轉(zhuǎn)移成品庫存儲，做好相應(yīng)記錄。4DB50/T1536-2023（規(guī)范性）芽孢桿菌計數(shù)A.1設(shè)備和材料設(shè)備和材料包括：1)分析天平：感量0.1g，0.1mg；2)振蕩器；3)粉碎機；4)非旋風磨；5)恒溫水浴鍋；6)恒溫培養(yǎng)箱；7)pH計（精確到±0.1個單位）或精密pH試紙；8)滅菌三角燒瓶：500mL、250mL；9)無菌吸管：1mL（具0.01mL刻度）、10mL（具0.1mL刻度）或微量移液器及吸頭；10)滅菌試管：18mm×180mm、15mm×150mm；11)滅菌玻璃珠；12)滅菌玻璃或塑料培養(yǎng)皿；13)玻璃涂布棒。A.2培養(yǎng)基和試劑試劑為分析純，實驗用水為蒸餾水或去離子水。1)0.85%滅菌生理鹽水；2)營養(yǎng)瓊脂（NA）培養(yǎng)基：蛋白胨10g，牛肉膏3g，氯化鈉5g，瓊脂15g～20g，蒸餾水1000mL。加熱溶解，pH7.2±0.2，121℃高壓滅菌20min。A.3檢樣制備按照GB/T14699的要求采樣，采樣工具應(yīng)無菌。樣品應(yīng)盡快檢測。A.4操作步驟A.4.1試樣稀釋A.4.1.1在無菌條件下取樣25g，放入裝有225mL0.85%滅菌生理鹽水的三角瓶中，置振蕩器上振蕩30min，加入0.85%滅菌生理鹽水制成1：10的稀釋液。A.4.1.2吸取1mL的1:10稀釋液，按照十倍系列遞增稀釋法得到不同稀釋度的稀釋液。A.4.2接種和培養(yǎng)5DB50/T1536-2023選擇2個～3個適宜的稀釋度，80℃水浴10min，每個稀釋度吸取0.1mL稀釋液接種到2個營養(yǎng)瓊脂平板。室溫放置15min。將平板倒置于培養(yǎng)箱中，36℃培養(yǎng)48h。A.4.3芽孢桿菌計數(shù)A.4.3.1記錄稀釋倍數(shù)和相應(yīng)的菌落數(shù)量。菌落計數(shù)以菌落形成單位（colony-formingunits，CFU）表示。A.4.3.2選取單菌落數(shù)在30CFU～300CFU之間的平板計數(shù)。A.5結(jié)果與報告A.5.1芽孢桿菌總數(shù)計算方法A.5.1.1若只有1個稀釋度平板上的菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)，計算2個平板菌落數(shù)的平均值，再將平均值乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)，作為每g（mL）樣品中菌落總數(shù)結(jié)果。A.5.1.2若有2個連續(xù)稀釋度的平板菌落數(shù)在適宜計數(shù)范圍內(nèi)時，按下列公式計算：.....................................................................式中：N——樣品中菌落數(shù)；∑C——平板菌落數(shù)之和；n1——第一稀釋度（低稀釋倍數(shù)）平板數(shù)；n2——第二稀釋度（高稀釋倍數(shù)）平板數(shù)；d——稀釋因子（第一稀釋度）。A.5.1.3若所有稀釋度的平板上菌落數(shù)均大于300CFU，則對稀釋度最高的平板進行計數(shù)，結(jié)果按平均菌落數(shù)乘以最高稀釋倍數(shù)計算。A.5.1.4若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均小于30CFU，則應(yīng)按稀釋度最低的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。A.5.1.5若所有稀釋度（包括液體樣品原液）平板均無菌落生長，則以小于1乘以最低稀釋倍數(shù)計算。A.5.1.6若所有稀釋度的平板菌落數(shù)均不在30CFU～300CFU之間，其中一部分小于30CFU或大于300CFU時，則以最接近30CFU或300CFU的平均菌落數(shù)乘以稀釋倍數(shù)計算。A.5.2芽孢桿菌總數(shù)報告A.5.2.1菌落數(shù)小于100CFU時，