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專題4同位素標(biāo)記法的應(yīng)用用3H標(biāo)記亮氨酸用18O、14C、3H作為示蹤原子來研究光合作用過程中某些物質(zhì)的變化過程用18O作為示蹤原子研究細(xì)胞呼吸過程中物質(zhì)的轉(zhuǎn)變途徑研究礦質(zhì)元素的吸收部位時,常用放射性同位素32P細(xì)胞的分裂期用3H標(biāo)記胸腺嘧啶脫氧核苷酸探究DNA分子半保留復(fù)制的特點15N在研究蛋白質(zhì)和DNA在遺傳中的作用時,分別放射性標(biāo)記蛋白質(zhì)和DNA的特征元素,用32P標(biāo)記噬菌體的DNA,大腸桿菌內(nèi)發(fā)現(xiàn)放射性物質(zhì),用35S標(biāo)記噬菌體的蛋白質(zhì)在研究甲狀腺腺體與甲狀腺激素、促甲狀腺激素的分泌時,一般選用131I進(jìn)行同位素原子的示蹤標(biāo)記基礎(chǔ)知識點一般常用的放射性元素有:15N、3H、32P、14C、18O、35S(1)用放射性元素
35S、32P
分別標(biāo)記噬菌體,可以驗證噬菌體侵染細(xì)菌的過程,DNA分子能保持連續(xù)性,從而說明DNA是生物的遺傳物質(zhì)。(2)用放射性元素
15N
標(biāo)記研究DNA的復(fù)制過程,可以說明DNA具有半保留復(fù)制的特點。(3)用3H標(biāo)記氨基酸,可以研究氨基酸在細(xì)胞內(nèi)合成分泌蛋白質(zhì)所經(jīng)途徑。氨基酸→核糖體→內(nèi)質(zhì)網(wǎng)→高爾基體→經(jīng)細(xì)胞膜分泌到細(xì)胞外(4)用放射性元素18O研究光合作用的氧氣來源于H2O。H218O+CO2→18O2H2O+C18O2→O2(5)研究光合作用中碳的同化途徑的方法14CO2→C3→C6。(6)用放射性元素32P標(biāo)記胸腺嘧啶可以研究DNA的合成去向及細(xì)胞分裂情況。(7)用放射性元素32P標(biāo)記尿嘧啶可以研究RNA的合成去向及蛋白質(zhì)的合成情況。基礎(chǔ)知識點變式訓(xùn)練-1(2011·江蘇)關(guān)于“噬菌體侵染細(xì)菌的實驗”的敘述,正確的是:()A.分別用含有放射性同位素35S和放射性同位素32P的培養(yǎng)基培養(yǎng)噬菌體B.分別用35S和32P標(biāo)記的噬菌體侵染未被標(biāo)記的大腸桿菌,進(jìn)行長時間的保溫培養(yǎng)C.用35S標(biāo)記噬菌體的侵染實驗中,沉淀物存在少量放射性可能是攪拌不充分所致D.32P、35S標(biāo)記的噬菌體侵染實驗分別說明DNA是遺傳物質(zhì)、蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)答案C解析:本題考查在遺傳物質(zhì)的探索過程中,噬菌體侵染細(xì)菌的實驗,意在考查考生對實驗的方法、步驟及結(jié)果的分析能力。A、錯誤,噬菌體營寄生生活,不能用培養(yǎng)基直接培養(yǎng);B、錯誤,保溫時間不能過長,若保溫時間太長則可能有含32P子代的噬菌體釋放出來,離心后存在于上清液中,導(dǎo)致上清液中也能檢測到放射性;C、正確,35S標(biāo)記的是噬菌體的蛋白質(zhì),理論上應(yīng)存在于上清液中,但可能因攪拌不充分而使部分噬菌體仍吸附在細(xì)菌表面,離心后存在于沉淀物中;D、錯誤,本實驗可說明DNA是遺傳物質(zhì),但不能證明蛋白質(zhì)不是遺傳物質(zhì)。變式訓(xùn)練-2有人以豌豆完整植株為材料研究植物側(cè)芽的生長受生長素(IAA)及其他物質(zhì)的共同影響,進(jìn)行了以下實驗:實驗一:分組進(jìn)行去除頂芽、去頂并在切口涂抹IAA處理后,定時測定側(cè)芽長度,見圖1;實驗二:用14CO2飼喂葉片,測定去頂8h時側(cè)芽附近14C放射性強度和IAA含量,見圖2.據(jù)圖分析,下列說法錯誤的是()圖1圖2變式訓(xùn)練-2A. 實驗一中,去頂32h時Ⅲ組側(cè)芽長度明顯小于Ⅱ組,原因可能是人工涂抹的IAA起到抑制作用B. 實驗二中,a、b兩組側(cè)芽附近14C放射性強度差異明顯,說明去頂后往側(cè)芽分配的光合產(chǎn)物增加C. 去頂8h時Ⅰ組和Ⅱ組側(cè)芽附近的IAA濃度關(guān)系為Ⅰ組等于Ⅱ組D. 去頂8h時Ⅱ組側(cè)芽長度明顯大于Ⅰ組可能原因是生長素濃度降低,抑制生長的效果被解除答案D解析:A、實驗一中,去頂32h時,Ⅲ組側(cè)芽長度明顯小于Ⅱ組,其原因是人工涂抹的IAA后,導(dǎo)致側(cè)芽部位生長素濃度過高,起到抑制作用.A正確;B、實驗二中,14CO2進(jìn)入葉綠體后,首先能檢測到含14C的有機物是C3化合物,該物質(zhì)被還原成糖類需要光反應(yīng)提供AP和[H],a、b兩組側(cè)芽附近14C信號強度差異明顯,說明去頂后往側(cè)芽分配的光合產(chǎn)物增加.B正確;C、綜合兩個實驗的數(shù)據(jù)推測,去頂8h時Ⅰ組、Ⅱ組和Ⅲ組側(cè)芽附近的IAA濃度關(guān)系為:Ⅰ組等于Ⅱ組,但大于Ⅲ組,C正確;D、去頂8h時Ⅱ組側(cè)芽長度明顯大于Ⅰ組,據(jù)圖2可知,II組去頂后IAA的含量并沒有降低,去頂后往側(cè)芽分配的光合產(chǎn)物增多,促進(jìn)側(cè)芽的生長.D錯誤.變式訓(xùn)練-3有關(guān)DNA分子的研究中,常用32P來標(biāo)記DNA分子。用α、β和γ表示ATP或dATP(d表示脫氧)上三個磷酸基團(tuán)所處的位置(A-Pα~Pβ~Pγ或dA-Pα~Pβ~Pγ)?;卮鹣铝袉栴};(1)某種酶可以催化ATP的一個磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA末端上,同時產(chǎn)生ADP.若要用該酶把32P標(biāo)記到DNA末端上,那么帶有32P的磷酸基團(tuán)應(yīng)在ATP的
(填“α”“β”或γ”)位上。(2)若用帶有32P標(biāo)記的dATP作為DNA生物合成的原料,將32P標(biāo)記到新合成的DNA分子上,則帶有32P的磷酸基團(tuán)應(yīng)在dATP的
(填“α”“β”或γ”)位上。(3)將一個帶有某種噬菌體DNA分子的兩條鏈用32P進(jìn)行標(biāo)記,并使其感染大腸桿菌,在不含有32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng)一段時間。若得到的所有噬菌體雙鏈DNA分子都裝配成噬菌體(n個)并釋放,則其中含有32P的噬菌體所占比例為2/n,原因是
。答案(1)γ(3分)(2)α(3分)(3)DNA復(fù)制有半保留特點(2分),最初兩條32P親代鏈最終分開在兩個子代噬菌體中(2分)解析:(1)ATP分子中遠(yuǎn)離A的高能磷酸鍵容易斷裂和重新生成,故某種酶可以催化ATP的一個磷酸基團(tuán)轉(zhuǎn)移到DNA末端上,同時產(chǎn)生ADP.那么該酶作用的磷酸基團(tuán)應(yīng)在ATP的γ位上.(2)合成DNA的原料應(yīng)該是4種脫氧核苷酸,每個脫氧核苷酸都是一分子磷酸、一分子脫氧核糖、一分子含氮堿基組成,其中磷酸和脫氧核糖之間的化學(xué)鍵是普通磷酸鍵,用帶有32P標(biāo)記的dATP作為DNA生物合成的原料,將32P標(biāo)記到新合成的DNA分子上(合成過程中,dATP要脫掉兩個高能磷酸鍵),則帶有32P的磷酸基團(tuán)應(yīng)在dATP的α位上.(3)因為一個含32P標(biāo)記的噬菌體雙鏈DNA分子經(jīng)半保留復(fù)制后,標(biāo)記的兩條單鏈只能分配到2個噬菌體的雙鏈DNA分子中,因此得到的n個噬菌體中,只有2個帶標(biāo)記.變式訓(xùn)練-4某基因(14N)含有3000個堿基,腺嘌呤占35%。若該DNA分子用15N同位素標(biāo)記過的四種游離脫氧核苷酸為原料復(fù)制3次,再將全部復(fù)制產(chǎn)物進(jìn)行密度梯度離心,得到甲圖結(jié)果;如果將全部復(fù)制產(chǎn)物加入解旋酶再離心,得到乙圖結(jié)果。下列有關(guān)分析正確的是()A.X層全部是僅含14N的基因B.W層中含15N標(biāo)記的胞嘧啶6300個C.X層中含有的氫鍵數(shù)是Y層的1/3D.W層與Z層的核苷酸數(shù)之比是1∶4答案C解析:A、第一次離心后,應(yīng)有三種DNA,第一種是兩條鏈全部為15N,第二種是一條含14N一條含15N,第三種是全部為14N,所以X層應(yīng)都是第二種,故錯誤。B、因為一個DNA中含有3000個堿基,腺嘌呤占35%,那么胞嘧啶占15%,故胞嘧啶的堿基數(shù)為450個。復(fù)制3次一共得到8個DNA,這樣需要的胞嘧啶數(shù)為450×7=3150個,故錯誤。C、復(fù)制得到的DNA所含有的堿基數(shù)都是相同的,那么氫鍵數(shù)也應(yīng)該是相同的,X層有2個DNA,Y層有6個DNA,這樣它們的氫鍵數(shù)之比即為DNA數(shù)之比,即X層中含有的氫鍵數(shù):Y層中含有的氫鍵數(shù)=1:3。X層中含有的氫鍵數(shù)是Y層的1/3倍,故正確。D、復(fù)制后的8個DNA一共含有16條鏈,其中14N的鏈2條(分布在Z層),15N的鏈14條(分布在W層)。因為該基因含有3000個堿基,故每條鏈的核苷酸數(shù)為1500,這樣Z層的核苷酸數(shù)為1500×2=3000,W層的核苷酸數(shù)為1500×14=21000個,故W層與Z層的核苷酸數(shù)之比為7:1,故錯誤。變式訓(xùn)練-5將染色體上全部DNA分子雙鏈經(jīng)32P標(biāo)記的雄性哺乳動物細(xì)胞(染色體數(shù)為20)置于不含32P的培養(yǎng)基中培養(yǎng).細(xì)胞只進(jìn)行一次分裂,下列推斷中,正確的是()A、若減數(shù)分裂結(jié)束,則產(chǎn)生的子細(xì)胞中有5對同源染色體,每條都含32PB、若完成一次有絲分裂,則產(chǎn)生的子細(xì)胞中含20條染色體,其中10條含32PC、若進(jìn)行減數(shù)分裂,則每個減Ⅱ后期細(xì)胞中均含2個Y染色體且都含32PD、若進(jìn)行一次有絲分裂,則分裂中期細(xì)胞的染色體上共有40個DNA分子且都含32P答案D解析:A、減數(shù)分裂結(jié)束,同源染色體分離,因此子細(xì)胞中不存在同源染色體,A錯誤;B、若進(jìn)行一次有絲分裂產(chǎn)生的子細(xì)胞中含20條染色體,20條染色體上的DNA分子均有一條脫氧核苷酸鏈被標(biāo)記,即20條染色體都含標(biāo)記,B錯誤;C、若進(jìn)行減數(shù)分裂,則只有一個減Ⅱ后期細(xì)胞中含2個Y染色體且都含32P,C錯誤;D、若進(jìn)行一次有絲分裂,在分裂中期細(xì)胞的染色體上共有40個DNA分子,且每個DNA分子均有一條脫氧核苷酸鏈被標(biāo)記,D正確.變式訓(xùn)練-6(2014?江蘇)為研究吲哚乙酸(IAA)與脫落酸(ABA)的運輸特點,用放射性同位素14C標(biāo)記IAA和ABA開展如圖所示的實驗.請回答下列問題:(1)若圖中AB為莖尖切段,瓊脂塊①和②中出現(xiàn)較強放射性的是______(填序號);瓊脂③塊和④中均出現(xiàn)了較強放射性,說明ABA在莖尖的運輸______(填“是”或“不是”)極性運輸.若先用某種抑制劑(不破壞IAA、不影響細(xì)胞呼吸)處理莖尖切段,再重復(fù)上述實驗,結(jié)果瓊脂塊①和②中放射性強度相近,該抑制劑的作用機理可能是______.變式訓(xùn)練-6(2)若圖中AB為成熟莖切段,瓊脂塊①、②、③和④均出現(xiàn)較強放射性,說明IAA在成熟莖切段中的運輸______(填“是”或“不是”)極性運輸.(3)適宜的激素水平是植物正常生長的保證.黃豆芽伸長胚軸的提取液,加入IAA溶液中可顯著降解IAA,但提取液沸水浴處理冷卻后,不再降解IAA,說明已伸長胚軸中含有______.研究已證實光也有降解IAA的作用.這兩條IAA降解途徑,對于種子破土出芽后的健壯生長______(填“有利”、“不利”或“無影響”).答案(1)①不是抑制劑與運輸IAA的載體結(jié)合(2)不是(3)IAA氧化(降解)酶有利解析:(1)對照圖示A為形態(tài)學(xué)上端,B為形態(tài)學(xué)下端,IAA在幼嫩的植物組織中發(fā)生極性運輸,即只能由形態(tài)學(xué)上端向形態(tài)學(xué)下端運輸,故①②中放射性強的是①;瓊脂塊③④中都出現(xiàn)較強放射性,說明脫落酸不進(jìn)行極性運輸。IAA的極性運輸屬于主動運輸,用某種抑制劑處理莖尖后,瓊脂塊①②的放射強度相近說明不能進(jìn)行極性運輸了,考慮該抑制劑不破壞IAA也不影響細(xì)胞呼吸供能,那么很可能是該抑制劑與運輸IAA的載體結(jié)合抑制了IAA與之結(jié)合。(2)IAA在幼嫩的植物組織中進(jìn)行極性運輸,在成熟植物組織中(如韌皮部)進(jìn)行非極性運輸。(3)沸水能使蛋白質(zhì)變性,黃豆芽伸長胚軸的提取液能降解IAA,說明其中含有降解IAA的酶,沸水浴后酶失活不能再降解IAA。適宜的激素濃度是植物正常生長的保證,低濃度IAA促進(jìn)生長而高濃度IAA會抑制生長,種子破土而出的芽尖在光照后IAA適當(dāng)降解有利于促進(jìn)其快速生長。變式訓(xùn)練-7如圖不是光合作用和有氧呼吸過程中C、H、O、三種元素的轉(zhuǎn)移途徑以及能量轉(zhuǎn)換過程。圖中序號表示相關(guān)的生理過程。下列敘述錯誤的是()A.在元素轉(zhuǎn)移途徑中,④與⑧、⑦與⑨表示的生理過程相同B.在元素轉(zhuǎn)移途徑中,能在小麥根尖成熟區(qū)細(xì)胞中發(fā)生的生理過程有②③⑥⑦⑨
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