中國(guó)藥典與美英藥典微生物限度比較

中國(guó)藥典與美英藥典微生物限度檢查法的比較

蘇德模.1.收載的檢查工程

CPBPUSP需氣菌+++真菌+++大腸埃希菌+++沙門菌+++銅綠色假單胞菌+++金黃色葡萄球菌+++梭菌++

大腸菌群+++腸桿菌科及其他某些革蘭陰性桿菌

+腸道菌、腸桿菌科支原體

+

分枝桿菌

+

病毒的其他因子

+

活螨+

.2.檢驗(yàn)量CP取10g或10ml供試品BP、USP10g或10ml供試品數(shù)份

.

CPBPUSP一般制劑0.9%的氯化鈉溶液pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液其他合適培養(yǎng)基pH7.2磷酸鹽緩沖液,大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基,乳糖液體培養(yǎng)基非水溶性的制劑（膏劑、油劑）司盤80、單硬脂酸甘油酯、吐溫-80十四烷酸異丙酯5克吐溫-20或吐溫-80十四烷酸異丙酯吐溫-20其他助溶劑其他不溶于水的膜劑腸溶膠囊制備供試液最終pH調(diào)至7.0氣霧劑制備法樣品加稀釋劑至培養(yǎng)基時(shí)間不超過(guò)1hr3.供試液制備

.

4.制劑抑菌作用確實(shí)定〔陽(yáng)性對(duì)照試驗(yàn)〕*0.4%l卵磷脂，4.0%吐溫

CPBPUSP控制菌陽(yáng)性菌加量10~102個(gè)102個(gè)105~106個(gè)需氣菌及真菌計(jì)數(shù)50~100回收率大小于70%判斷是否有抑菌作用25~200個(gè)金葡、白念、枯草、大腸菌在有無(wú)制劑存在下生長(zhǎng)的稀釋級(jí)差別大小判斷是否有抑菌作用根據(jù)控制菌陽(yáng)性菌生長(zhǎng)的結(jié)果判斷

抑菌作用處理方法

中和法+++*稀釋法+++薄膜過(guò)濾法+++離心沉淀法+

.5.需氣菌和真菌計(jì)數(shù)

CPBPUSP方法

平皿法++（澆碟、涂抹）+試管法

++薄膜過(guò)濾法++

培養(yǎng)基營(yíng)養(yǎng)瓊脂大豆酪蛋白消化瓊脂大豆酪蛋白消化瓊脂

玫瑰紅鈉瓊脂含抗生素的沙氏葡萄糖瓊脂沙氏葡萄糖瓊脂.5.需氣菌和真菌計(jì)數(shù)(續(xù))稀釋級(jí)的選擇3個(gè)連續(xù)稀釋級(jí)1個(gè)2個(gè)培養(yǎng)溫度30~35℃23~28℃30~35℃20~25℃30~35℃20~25℃培養(yǎng)時(shí)間（天）

需氣菌2(5~7)52~3真菌3(5~7)55~7計(jì)數(shù)結(jié)果

需氣菌真菌一般30~30030~100不生長(zhǎng)按〈10個(gè)/1g或ml報(bào)告〈300〈10030~300不生長(zhǎng)按〈10個(gè)/1g或ml報(bào)告結(jié)果報(bào)告1g或ml1g或ml1g或ml.6.大腸埃希菌

CPBPUSP方法MI法I法IMViC法檢驗(yàn)量（g或ml）1110稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖液體培養(yǎng)基預(yù)增菌

大豆酪胨肉湯35~37℃18~48h

增菌BL增菌培養(yǎng)基35~37℃18~24hM-I35~37℃5、24h

Mac肉湯43~45℃18~24h乳糖液體培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離Mac.瓊脂平板35~37℃18~72hMac、EMB瓊脂平板35~37℃24~48h生化試驗(yàn)MI及IMViC++

.7.大腸菌群

CPBPUSP檢驗(yàn)量（g或ml）11

稀釋劑pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯

預(yù)增菌

35~37℃2~5h

增菌0.1g,0.01g0.001gBL培養(yǎng)基35~37℃18~24h0.1g,0.01g,0.001g乳糖肉湯培養(yǎng)基35~37℃24~48h

分離EMB或Mac.C瓊脂平板35~37℃18~24hVRB.瓊脂平板35~37℃18~24h

生化試驗(yàn)+-

.8.銅綠假單胞菌

CPBPUSP檢驗(yàn)量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.2磷酸鹽緩沖液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基增菌膽鹽乳糖增菌培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃18~48h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離溴化十六烷基三甲銨瓊脂平板35~37℃18~24h

Cetrimide瓊脂，培養(yǎng)18~72h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基41~43℃18~48h。薄膜過(guò)濾大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基18~48h，Cetrimide瓊脂平板Cetrimide瓊脂35~37℃72h生化試驗(yàn)5種1種（42±1）3種.9.金黃色葡萄球菌

CPBPUSP檢驗(yàn)量1（g或ml）1（g或ml）10（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液pH7.0氯化鈉-蛋白胨緩沖液

大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基

增菌營(yíng)養(yǎng)肉湯（或含亞碲酸甲）培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃18~48hh大豆酪蛋白消化培養(yǎng)基35~37℃24~48h分離甘露醇氯化鈉瓊脂平板、卵黃氯化鈉瓊脂平板35~37℃24~48hBP瓊脂平板35~37℃18~72hVJ(甘露醇氯化鋰)瓊脂、MS(甘露醇氯化鈉)瓊脂、BP瓊脂平板35~37℃24~48h凝固酶試驗(yàn)+凝固酶、DNA酶+.10.沙門菌

CPBPUSP檢驗(yàn)量1（g或ml）10（g或ml）10（g或ml）稀釋劑09%氯化鈉溶液、pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液pH7.0氯化鈉蛋白胨緩沖液

乳糖液體培養(yǎng)基增菌營(yíng)養(yǎng)肉湯培養(yǎng)基35~37℃18~24h大豆酪胨肉湯35~37℃18~24h乳糖液體培養(yǎng)基35~37℃培養(yǎng)二次增菌TTB培養(yǎng)基35~37℃18~24h四硫酸鹽肉湯培養(yǎng)基41~43℃18~24hSC、TTB液體培養(yǎng)基35~37℃12~24h分離EMB、Mac.C、DHL、SS瓊脂平板35~37℃18~24hDC、XLD、BG.瓊脂平板35~37℃18~72hBG、XLD、BS瓊脂平板35~37℃24~48h生化試驗(yàn)+++.11梭菌

CPBPUSP檢驗(yàn)量（g或ml）11010

稀釋劑09%無(wú)菌氯化鈉溶液pH7.0無(wú)菌氯化鈉-蛋白胨緩沖液乳糖肉湯

加熱處理1份80℃10min另1份不加熱1份80℃10min另1份不加熱

增菌100ml0.1%葡萄糖庖肉培養(yǎng)基35~37℃72~96h100ml梭菌增菌培養(yǎng)基35~37℃厭氧48h

分離含慶大霉素哥倫比亞瓊脂平板35~37℃48~72h含和不含慶大霉素哥倫比亞瓊脂平板35~37℃48h

過(guò)氧化氫酶試驗(yàn)++

.12.結(jié)果判斷及復(fù)試

CPBPUSP控制菌一次檢出為準(zhǔn)一次檢出為準(zhǔn)不符合標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定，取大于25g的樣品復(fù)試需氣菌和真菌第一次試驗(yàn)結(jié)果超過(guò)規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)，重新抽樣復(fù)試兩次，三次結(jié)果平均值報(bào)告測(cè)定結(jié)果在規(guī)定的限度標(biāo)準(zhǔn)5倍以內(nèi)均為合格同上.微生物限度標(biāo)準(zhǔn)1.收載方式

CPBPUSP各論項(xiàng)下+++制劑通則++

專論+++.2.制劑通那么中規(guī)定微生物限度的劑型CPBPUSP注射液1、植入劑1、酊劑、栓劑、軟乳糊劑2、眼用劑2、糖漿、氣粉噴霧2膜、口服液混懸乳劑、散劑2、滴耳2、滴鼻、洗沖灌腸劑2、搽涂摸劑、凝膠劑、貼劑無(wú)微生物限度：片、膠囊、丸、顆粒中藥除膏藥、橡膠膏劑、巴布膏劑外藥典均有規(guī)定膠囊劑、口膠劑、顆粒劑、搽劑、泡騰劑1、灌洗劑1、滴鼻劑2、口服液、口服散劑、注射液1、直腸制劑、棒劑1