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文檔簡介
生物選修3總結(jié)
1基因工程的誕生(識記)
基礎(chǔ)理論:DNA是遺傳物質(zhì):DNA雙螺旋結(jié)構(gòu)和中心法則的確立:遺傳密碼的破譯
技術(shù)支持:基因轉(zhuǎn)移載體的發(fā)現(xiàn);工具酶的發(fā)明;DNA體外重組的實(shí)現(xiàn);重組DNA表達(dá)實(shí)
驗(yàn)的成功
2基因工程的原理及技術(shù)(識記)
(I)基因重組的基本工具:
?限制性核酸內(nèi)切酶(限制酶):主要從原核生物中分離純化出來,這種酶在原核生物中的作
用是防止外來病原物的侵害,將外源DNA切割保證自身安全
它能識別DNA分子的某種特定核甘酸序列,并切割兩個(gè)核甘酸之間的磷酸二酯鍵,產(chǎn)生的末
端有黏性末端(如EcoRI切割的末端)和平末端
?DNA連接酶:EcoliDNA連接酶連接黏性末端的DNA片斷;T4DNA連接酶黏性末端和平末
端都可以連接;而DNA聚合酶是將單個(gè)的脫氧核昔酸加到DNA片斷上。
?載體:種類有質(zhì)粒(常用,并被人工改造)、動(dòng)植物病毒;
條件:能自我復(fù)制;有一個(gè)或多個(gè)酶切位點(diǎn);有標(biāo)記基因位點(diǎn);對受體細(xì)胞無害
(2)基因工程的基本操作程序:
?目的基因的獲?。焊爬ǖ卣f,主要有兩條途徑:一條是從供體細(xì)胞的DNA中直接分離基因;
另一條是人工合成基因。直接分離基因最常用的方法是“鳥槍法”,又叫“散彈射擊法”。這
種方法猶如用獵槍發(fā)射的散彈打鳥,無論哪一顆彈粒擊中目標(biāo),都能把鳥打下來。鳥槍法的
具體做法是:用限制酶將供體細(xì)胞中的DNA切成許多片段,將這些片段分別載入運(yùn)載體,然
后通過運(yùn)載體分別轉(zhuǎn)入不同的受體細(xì)胞,讓供體細(xì)胞所提供的DNA(外源DNA)的所有片段分
別在各個(gè)受體細(xì)胞中大量復(fù)制(在遺傳學(xué)中叫做擴(kuò)增),從中找出含有目的基因的細(xì)胞,再用一
定的方法把帶有目的基因的DNA片段分離出來。如許多抗蟲、抗病毒的基因都可以用上述方
法獲得。用“鳥槍法”獲取目的基因的缺點(diǎn)是工作量大,具有一定的盲目勝。又山于真核細(xì)
胞的基因含有不表達(dá)的DNA片段,不能直接用于基因的擴(kuò)增和表達(dá),因此,在獲取真核細(xì)胞
中的目的基因時(shí),一般是用人工合成基因的方法。目前人工合成基因的方法主要有兩條途徑。
一條途徑是以目的基因轉(zhuǎn)錄成的信使RNA為模板,反轉(zhuǎn)錄成互補(bǔ)的單鏈DNA,然后在酶的
作用下合成雙鏈DNA,從而獲得所需要的基因。另?條途徑是根據(jù)已知的蛋白質(zhì)的氨基酸序
列,推測出相應(yīng)的信使RNA序列,然后按照堿基互補(bǔ)配對原則,推測出它的結(jié)構(gòu)基因的核背
酸序列,再通過化學(xué)的方法,以單核甘酸為原料合成目的基因。如人的血紅蛋白基因、胰島
素基因等就可以通過人工合成基因的方法獲得。
?目的基因與運(yùn)載體結(jié)合:將目的基因與運(yùn)載體結(jié)合的過程,實(shí)際上是不同來源的DNA重新
組合的過程。如果以質(zhì)粒作為運(yùn)載體,首先要用一定的限制酶切割質(zhì)粒,使質(zhì)粒出現(xiàn)一個(gè)切
口,露出黏性末端。然后用同一種限制酶切斷目的基因,使其產(chǎn)生相同的黏性末端。將切下
的目的基因的片段插入到質(zhì)粒的切口處,再加入適量的DNA連接酶,質(zhì)粒的黏性末端與目的
基因DNA片段的黏性末端就會因堿基互補(bǔ)配對而結(jié)合,形成了一個(gè)重組DNA分子。如人的
胰島素基因就是通過這種方式與大腸桿菌中的質(zhì)粒DNA分子結(jié)合,形成重組DNA分子(也叫
重組質(zhì)粒)的。重組DNA分子的特點(diǎn):具有目的基因、啟動(dòng)子、終止子、以及標(biāo)記基因。
?將目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞:目的基因的片段與運(yùn)載體在生物體外連接形成重組DNA分子后,
下一步是將重組DNA分子引入受體細(xì)胞中進(jìn)行擴(kuò)增。基因工程中常用的受體細(xì)胞有大腸桿菌、
枯草桿菌、土壤農(nóng)桿菌、酵母菌和動(dòng)植物細(xì)胞等。用人工的方法使體外重組的DNA分子轉(zhuǎn)移
到受體細(xì)胞,主要是借鑒細(xì)菌或病毒侵染細(xì)胞的途徑。導(dǎo)入植物細(xì)胞:農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)化法(轉(zhuǎn)基
因抗蟲棉用的是花粉管通道法);導(dǎo)入動(dòng)物細(xì)胞:顯微注射技術(shù)(注射入受精卵中);如果運(yùn)
載體是質(zhì)粒,受體細(xì)胞是細(xì)菌,一般是將細(xì)菌用氯化鈣處理,以增大細(xì)菌細(xì)胞壁的通透性,
使含有目的基因的重組質(zhì)粒進(jìn)入受體細(xì)胞。目的基因?qū)胧荏w細(xì)胞后,就可以隨著受體細(xì)胞
的繁殖而復(fù)制,由于細(xì)菌繁殖的速度非???,在很短的時(shí)間內(nèi)就能夠獲得大量的目的基因。
?目的基因的檢測和表達(dá):以上步驟完成以后,在全部受體細(xì)胞中,真正能夠攝入重組DNA分
子的受體細(xì)胞是很少的。因此,必須通過一定的手段對受體細(xì)胞中是否導(dǎo)入了目的基因進(jìn)行
檢測。檢測的方法有很多種,1DNA上檢測是否有目的基因(利用DNA分子雜交技術(shù)):2目
的基因是否轉(zhuǎn)錄出mRNA(基因探針與mRNA雜交);3目的基因是否翻譯出蛋白質(zhì)(利用
抗原-抗體雜交);4性狀水平的檢測。例如,大腸桿菌的某種質(zhì)粒具有青霉素抗性基因,當(dāng)這
種質(zhì)粒與外源DNA組合在一起形成重組質(zhì)粒,并被轉(zhuǎn)入受體細(xì)胞后,就可以根據(jù)受體細(xì)胞是
否具有青霉素抗性來判斷受體細(xì)胞是否獲得了目的基因。重組的DNA分子進(jìn)入受體細(xì)胞后,
受體細(xì)胞必須表現(xiàn)出特定的性狀,才能說明目的基因完成了表達(dá)過程。例如,科學(xué)家最初做
抗蟲棉試驗(yàn)時(shí),雖然已經(jīng)檢測出棉的植株中含有抗蟲的基因,但讓棉鈴蟲食用棉的葉片時(shí),
棉鈴蟲并沒有被殺死,這說明抗蟲基因還不能在高等植物中表達(dá)??茖W(xué)家在研究的基礎(chǔ)上,
又一次對棉植株中的抗蟲基因進(jìn)行了修飾,然后再讓棉鈴蟲食用棉的葉片,結(jié)果食用的第二
天棉鈴蟲就中毒死亡了。這說明抗蟲基因在棉植株中得到了表達(dá)。
例如:用基因工程的方法,使大腸桿菌生產(chǎn)出鼠的B-珠蛋白。
(1)從小鼠中克隆出珠蛋白基因的編碼序列(cDNA)注:鼠是真核生物因此用人
工合成的方法來獲得目的基因
(2)將cDNA前接上在大腸桿菌中可以適用的啟動(dòng)子,另外加上抗四環(huán)素基因(為
了在受體細(xì)胞中篩選出含有目的基因的細(xì)胞),構(gòu)建成?個(gè)表達(dá)載體。
(3)將表達(dá)載體導(dǎo)入無四環(huán)素抗性的大腸桿菌中,然后在含有四環(huán)素的培養(yǎng)基上培
養(yǎng)大腸桿菌。如果表達(dá)載體未進(jìn)入大腸桿菌中,大腸桿菌會因不含有抗四環(huán)素基因而死掉;
如果培養(yǎng)基上長出大腸桿菌菌落,則表明6-珠蛋白基因已進(jìn)入其中。
(4)培養(yǎng)進(jìn)入了B-珠蛋白基因的大腸桿菌,收集菌體,破碎后從中提取B-珠蛋白。
3基因工程的應(yīng)用(理解)
(1)植物基因工程成果:抗蟲轉(zhuǎn)基因植物(抗蟲棉是轉(zhuǎn)入Bt毒蛋白基因培育的)
抗病轉(zhuǎn)基因植物(病毒外殼蛋白基因、病毒復(fù)制酶基因)
抗逆轉(zhuǎn)基因植物(生物的抗性基因)
轉(zhuǎn)基因改良植物(營養(yǎng)價(jià)值、實(shí)用價(jià)值、觀賞價(jià)值)
(2)動(dòng)物基因工程成果:提高動(dòng)物生長速度(外源生長激素基因)
改善畜產(chǎn)品的品質(zhì)
轉(zhuǎn)基因動(dòng)物生產(chǎn)藥物(牛、山羊等動(dòng)物乳腺生物反應(yīng)器中表達(dá)了抗
凝血酶、血清白蛋白、生長激素、a-抗胰蛋白酶)
轉(zhuǎn)基因動(dòng)物作器官移植的供體(導(dǎo)入調(diào)節(jié)因子,抑制抗原決定基因
表達(dá)或除去抗原決定基因培育沒有免疫排斥反應(yīng)的轉(zhuǎn)基因克隆器官)
基因工程藥物(利用轉(zhuǎn)基因工程菌生產(chǎn)細(xì)胞因子、抗體、疫苗等)
注:如果工程菌為原核生物,因其沒有內(nèi)質(zhì)網(wǎng)、高爾基體,所以不能生產(chǎn)糖蛋白類物質(zhì)
基因治療(從根本上治療遺傳病,不能治療傳染?。?/p>
4蛋白質(zhì)工程(識記)
(1)蛋白質(zhì)工程崛起的緣由:基因工程只能生產(chǎn)自然界已存在的蛋白質(zhì)
(2)蛋白質(zhì)工程的基本原理:它可以根據(jù)人的需求來設(shè)計(jì)蛋白質(zhì)的結(jié)構(gòu),又稱為第二代的基
因工程。
基本途徑:從預(yù)期的蛋白質(zhì)功能出發(fā),設(shè)計(jì)預(yù)期的蛋白質(zhì)結(jié)構(gòu),推測應(yīng)有的氨基酸序列,找
到相對應(yīng)的脫氧核甘酸序列(基因)以上是蛋白質(zhì)工程特有的途徑;以卜按照基因工程的一
般步驟進(jìn)行。(注意:目的基因只能用人工合成的方法)
設(shè)計(jì)中的困難:如何推測非編碼區(qū)以及內(nèi)含子的脫氧核甘酸序列
5植物的組織培養(yǎng)(理解)
(1)克隆的含義:克隆(clone)是指通過無性生殖而產(chǎn)生的遺傳上均一的生物群,即具有完
全相同的遺傳組成的一群細(xì)胞或者生物的個(gè)體?,F(xiàn)在則指個(gè)體、細(xì)胞、基因等不同水平上的
無性增殖物。(1)個(gè)體水平:在植物的無性增殖中,植物的發(fā)芽、插條等由同一個(gè)體通過無
性生殖而增長的個(gè)體群均被視為克隆。采用組織培養(yǎng)方法可使植物細(xì)胞培養(yǎng)發(fā)育成完全的個(gè)
體(愈傷組織),采用這種方法得到的具有相同基因型的個(gè)體群,也被稱為克??;在動(dòng)物的無
性增殖中,典型的例子是采用核移植實(shí)驗(yàn)方法,把分化細(xì)胞的核移植到一個(gè)事先去核的蛙卵
中,讓其發(fā)育并得到克隆蛙??寺?dòng)物具有均一遺傳性質(zhì),在研究環(huán)境條件對發(fā)育、分化的
影響以及藥物的檢測方面都是重要的實(shí)驗(yàn)材料。(2)細(xì)胞水平:由一個(gè)細(xì)胞經(jīng)過有絲分裂生
成的細(xì)胞群叫克隆。但如果培養(yǎng)細(xì)胞發(fā)生轉(zhuǎn)化,則很容易引起染色體變異。(3)基因水平:
利用基因重組操作技術(shù),使特定的基因與載體結(jié)合,在細(xì)菌等宿主中進(jìn)行增殖,有可能得到
均勻的基因群。克隆是重組DNA技術(shù)的核心部分。事實(shí)上,克隆技術(shù)現(xiàn)已被人們用來通過營
養(yǎng)方式繁殖病毒等微生物和植物的純種,從而保證了這些生物基因組的準(zhǔn)確連續(xù)性。細(xì)胞生
物的克隆只需要營養(yǎng)培養(yǎng)基,而基因的克隆則需要某種載體復(fù)制子、特定的寄主細(xì)胞和營養(yǎng)
培養(yǎng)基。
(2)植物細(xì)胞全能性的含義:生物的任何一個(gè)細(xì)胞都具有發(fā)育成完整植株的潛力。原因:細(xì)
胞中含有本物種全部的遺傳信息
(3)植物組織培養(yǎng)的概念:從植物體分離出符合需要的組織.器官或細(xì)胞,原生質(zhì)體等,通過
無菌操作,在人工控制條件下進(jìn)行培養(yǎng)以獲得再生的完整植株或生產(chǎn)具有經(jīng)濟(jì)價(jià)值的其他產(chǎn)
品的技術(shù)。
(4)植物組織培養(yǎng)過程:取外植體(離體的器官、組織、細(xì)胞),注意要消毒(可用次氯酸
鈉、無菌水處理,在超凈工作分上操作);將外植體接種到培養(yǎng)基,并封口(培養(yǎng)基成分:有
機(jī)物、生長素、細(xì)胞分裂素、水、礦質(zhì)元素、瓊脂);通過脫分化,形成愈傷組織(挑選出沒
有被污染的);進(jìn)行轉(zhuǎn)接到分化培養(yǎng)基上,進(jìn)行再分化(生長素濃度較高利于生根,細(xì)胞分裂
素濃度較高利于生芽);一段時(shí)間后誘導(dǎo)出試管苗;移栽到大田。
注意:整個(gè)過程要進(jìn)行無菌操作
愈傷組織細(xì)胞的特點(diǎn):排列疏松而無規(guī)則,是一種高度液泡化的薄壁細(xì)胞。
脫分化:由高度分化的植物器官、組織或細(xì)胞產(chǎn)生愈傷組織的過程。
再分化:產(chǎn)生的愈傷組織繼續(xù)進(jìn)行培養(yǎng),又可以重新分化成根、芽等器官。
(5)植物體細(xì)胞雜交技術(shù):去除細(xì)胞壁(用纖維素醐和果膠酶)得到原生質(zhì)體,誘導(dǎo)原生質(zhì)
體間的融合(方法:離心、振動(dòng)、電激、聚乙二醇),形成雜種細(xì)胞并再生出細(xì)胞壁,通過植
物組織培養(yǎng)技術(shù)得到雜種植株。
意義:克服不同生物遠(yuǎn)緣雜交不親和的障礙(通過基因工程技術(shù)也可以克服生殖隔離)
(6)植物細(xì)胞工程的實(shí)際應(yīng)用:
A植物繁殖
微型繁殖:可以高效快速地實(shí)現(xiàn)種苗的大量繁殖
作物脫毒:采用莖尖組織培養(yǎng)來除去病毒(因?yàn)橹参锓稚鷧^(qū)附近的病毒極少或沒有)
人工種子:以植物組織培養(yǎng)得到的胚狀體、不定芽、頂芽和腋芽等為材料,經(jīng)人工薄膜包裝
得到的種子。優(yōu)點(diǎn):完全保持優(yōu)良品種的遺傳特性,不受季節(jié)的限制;方便儲藏和運(yùn)輸
B作物新品種培育
單倍體育種:
a過程:植株(AaBb)通過減數(shù)分裂得到花粉(AB、Ab、aB、ab四種類型);對花粉進(jìn)行花
藥離體培養(yǎng)(技術(shù)是植物組織培養(yǎng));得到單倍體植株;對其幼苗時(shí)期進(jìn)行秋水仙素處理;得
到了正常的純合二倍體植株(AABB、AAbb、aaBB、aabb四種類型)。
b優(yōu)點(diǎn):明顯縮短育種年限
C突變體利用:在組織培養(yǎng)中會出現(xiàn)突變體,通過從有用的突變體中選育出新品種(如篩選
抗病、抗鹽、含高蛋白的突變體)
D細(xì)胞產(chǎn)物的生產(chǎn):通過能夠產(chǎn)生對人們有利的產(chǎn)物的細(xì)胞進(jìn)行組織培養(yǎng),從而讓它們能夠
產(chǎn)生大量的細(xì)胞產(chǎn)物。
6動(dòng)物的細(xì)胞培養(yǎng)與體細(xì)胞克?。ㄗR記)
(1)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的概念:從動(dòng)物體中取出相關(guān)的組織,將它分散成單個(gè)細(xì)胞,然后放在適
宜的培養(yǎng)基中,讓這些細(xì)胞生長和增殖。
(2)動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的基本過程:取出組織剪碎,用胰蛋白酶或膠原蛋白酶處理,使之分散成
單個(gè)細(xì)胞;用培養(yǎng)液(含有糖、氨基酸、促生長因子、無機(jī)鹽、微量元素、血清、血漿;注
意與植物培養(yǎng)基成分的區(qū)別)稀釋制成細(xì)胞懸液,在培養(yǎng)瓶中適宜條件下培養(yǎng)。
注意在此過程中的相關(guān)概念:
細(xì)胞貼壁:懸液中分散的細(xì)胞帖附在瓶壁上。
細(xì)胞的接觸抑制:細(xì)胞分裂生長到表面相互接觸時(shí)就會停止分裂增殖的現(xiàn)象。(癌細(xì)胞無)
原代培養(yǎng):動(dòng)物組織消化后的初次培養(yǎng)。
傳代培養(yǎng):貼滿瓶壁的細(xì)胞要重新用胰蛋白酶處理,然后分瓶繼續(xù)培養(yǎng),讓細(xì)胞繼續(xù)增殖
細(xì)胞株:原代培養(yǎng)的細(xì)胞傳至10到50代左右,這種傳代細(xì)胞叫細(xì)胞株(遺傳物質(zhì)未改變)
細(xì)胞系:有可能在培養(yǎng)條件下無限制傳代下去,這種傳代細(xì)胞稱細(xì)胞系(遺傳物質(zhì)已改變)
(3)培養(yǎng)條件:無菌、無毒;有營養(yǎng)(放在培養(yǎng)基中);溫度和pH值(分離細(xì)胞用胃蛋白酶
為什么不行?);氣體環(huán)境(CO2維持培養(yǎng)液pH)。
(4)應(yīng)用:病毒疫苗、干擾素、單克隆抗體都可以借助動(dòng)物細(xì)胞的大規(guī)模培養(yǎng)生產(chǎn),另外,
基因工程也離不開動(dòng)物細(xì)胞的培養(yǎng)(當(dāng)受體細(xì)胞為動(dòng)物細(xì)胞時(shí))。
(5)動(dòng)物細(xì)胞核移植的概念:將動(dòng)物細(xì)胞的細(xì)胞核移入已去掉細(xì)胞核的卵母細(xì)胞中,使其重
組并發(fā)育成一個(gè)新的胚胎,最終發(fā)育為動(dòng)物個(gè)體。哺乳動(dòng)物核移植分為胚胎細(xì)胞核移植和體
細(xì)胞核移植。注:動(dòng)物胚胎細(xì)胞分化程度低,恢復(fù)其全能性相對容易;而動(dòng)物體細(xì)胞分化程
度高,恢復(fù)其全能性十分困難。
細(xì)胞分化程度:體細(xì)胞〉生殖細(xì)胞〉受精卵;細(xì)胞全能性:受精卵>生殖細(xì)胞〉體細(xì)胞
(6)動(dòng)物細(xì)胞核移植的過程:高產(chǎn)奶牛(提供體細(xì)胞)進(jìn)行細(xì)胞培養(yǎng);同時(shí)采集卵母細(xì)胞,
在體外培養(yǎng)到減二分裂中期的卵母細(xì)胞,去核(顯微操作)[注:為什么要用卵細(xì)胞?它可以
提供充足的營養(yǎng);操作簡便;細(xì)胞質(zhì)不會抑制細(xì)胞核全能性的表達(dá)];將供體細(xì)胞注入去核卵
母細(xì)胞;通過電刺激使兩細(xì)胞融合,供體核進(jìn)入受體卵母細(xì)胞,構(gòu)建重組胚胎;將胚胎移入
受體(代孕)母牛體內(nèi);生出與供體奶牛遺傳基因相同的犢牛
(7)應(yīng)用:促進(jìn)優(yōu)良畜群繁育;保護(hù)瀕危物種;可作為生物反應(yīng)器,生產(chǎn)珍貴醫(yī)用蛋白;體
外培育組織、器官用于組織器官的移植
7細(xì)胞融合與單克隆抗體(識記)
(1)動(dòng)物細(xì)胞融合概念:是兩個(gè)或多個(gè)動(dòng)物細(xì)胞結(jié)合形成一個(gè)細(xì)胞的過程。
(2)原理:與植物原生質(zhì)體融合的基本原理相同;植物原生質(zhì)體融合的原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)
性;動(dòng)物細(xì)胞融合的原理:細(xì)胞膜的流動(dòng)性
(3)基本過程:不同DNA的兩個(gè)細(xì)胞進(jìn)行融合[方法:滅活的病毒、PEG、電激等];形成融
合細(xì)胞;再使之進(jìn)行有絲分裂后,得到兩個(gè)完整的雜交細(xì)胞。
(4)特點(diǎn):雜交細(xì)胞可以具備原先兩種細(xì)胞的特點(diǎn),突破了有性雜交方法的局限,使遠(yuǎn)緣雜
交成為可能。
(5)總結(jié)動(dòng)物細(xì)胞融合與植物細(xì)胞融合的異同
(6)應(yīng)用:單克隆抗體的制備(解決了獲得的抗體產(chǎn)量低、純度低、特異性差的問題)
(7)單克隆抗體的制備過程:對免疫小鼠注射特定的抗原蛋白(目的使小鼠產(chǎn)生了效應(yīng)B細(xì)
胞);提取B淋巴細(xì)胞;同時(shí)用動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)的方法培養(yǎng)骨髓瘤細(xì)胞并提?。淮偈顾鼈兗?xì)胞融
合[注:融合的結(jié)果是有很多不符合要求的;如有2個(gè)B淋巴細(xì)胞融合的細(xì)胞等,所以要進(jìn)行
篩選]:在特定的選擇培養(yǎng)基上篩選出融合的雜種細(xì)胞[特點(diǎn)是能迅速大量增殖,又能產(chǎn)生專-
的抗體];然后對它進(jìn)行克隆化培養(yǎng)和抗體檢測[篩選出能夠分泌所需抗體的雜種細(xì)胞];最后
將雜交瘤細(xì)胞在體外做大規(guī)模培養(yǎng)或注射入小鼠腹腔內(nèi)增殖,從細(xì)胞培養(yǎng)液或小鼠腹水中可
得到大量的單克隆抗體。
(8)單克隆抗體的優(yōu)點(diǎn):特異性強(qiáng),靈敏度高,并可能大量制備。
(9)實(shí)際應(yīng)用:作為診斷試劑,識別各種抗原物質(zhì)的細(xì)微差別;用于治療疾病和運(yùn)載藥物,
用于癌癥治療,可制成生物導(dǎo)彈。
8動(dòng)物胚胎發(fā)育的基本過程(識記)
(1)精子的發(fā)生:補(bǔ)充,精原細(xì)胞先進(jìn)行有絲分裂后進(jìn)行減數(shù)分裂;變形過程中,細(xì)胞核為
精子頭的主要部分,高爾基體發(fā)育為頂體,中心體演變?yōu)榫拥奈?,線粒體在尾基部形成線
粒體鞘膜,其他物質(zhì)濃縮為原生質(zhì)滴直至脫落。[線粒體為精子運(yùn)動(dòng)提供能量]
(2)卵子的發(fā)生:在胎兒時(shí)期,卵原細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂演變成初級卵母細(xì)胞[被卵泡細(xì)胞包圍],
減-分裂在排卵前后完成,形成次級卵母細(xì)胞和第極體進(jìn)入輸卵管準(zhǔn)備受精;減二分裂是
在受精過程中完成的。
(3)受精:精子獲能(在雌性動(dòng)物生殖道內(nèi));卵子的準(zhǔn)備(排出的卵子要在輸卵管中進(jìn)一
步成熟到減二中期才具備受精能力);受精階段[卵子周圍的結(jié)構(gòu)由外到內(nèi):放射冠、透明帶、
卵黃膜],a頂體反應(yīng):精子釋放頂體能溶解卵丘細(xì)胞之間的物質(zhì),穿越放射冠。
b透明帶反應(yīng):頂體酶可將透明帶溶出孔道,精子穿入,在精子觸及卵黃膜的瞬間阻止后來精
子進(jìn)入透明帶的生理反應(yīng)[它是防止多精子入卵受精的第一道屏障1:c卵黃膜的封閉作用:精
子外膜和卵黃膜融合,精子入卵后,卵黃膜會拒絕其他精子再進(jìn)入卵內(nèi)的過程[它是防止多精
子入卵受精的第二道屏障];精子尾部脫落,原有核膜破裂形成雄原核,同時(shí)卵子完成減二分
裂,形成雌原核[注意:受精標(biāo)志是第二極體的形成;受精完成標(biāo)志是雌雄原核融合成合子]。
(4)胚胎發(fā)育:a卵裂期:細(xì)胞進(jìn)行有絲分裂,數(shù)量增加,胚胎總體積不增加;b桑根胚:32
個(gè)細(xì)胞左右的胚胎[之前所有細(xì)胞都能發(fā)育成完整胚胎的潛能屬全能細(xì)胞];c囊胚:細(xì)胞開始
分化,其中個(gè)體較大的細(xì)胞叫內(nèi)細(xì)胞團(tuán)將來發(fā)育成胎兒的各種組織;而滋養(yǎng)層細(xì)胞將來發(fā)育
成胎膜和胎盤;胚胎內(nèi)部逐漸出現(xiàn)囊胚腔]注:囊胚的擴(kuò)大會導(dǎo)致透明帶的破裂,胚胎伸展出
來,這一過程叫孵化];d原腸胚:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)表層形成外胚層,下方細(xì)胞形成內(nèi)胚層,由內(nèi)胚
層包圍的囊腔叫原腸腔。[細(xì)胞分化在胚胎期達(dá)到最大限度]
9胚胎工程的理論基礎(chǔ)(識記)
(1)胚胎工程的概念及技術(shù)手段:對動(dòng)物早期胚胎或配子所進(jìn)行的多種顯微操作和處理技術(shù),
如胚胎移植、體外受精、胚胎分割、胚胎干細(xì)胞培養(yǎng)等技術(shù)。
(2)體外受精[屬有性生殖過程]:a卵母細(xì)胞的采集和培養(yǎng)對體型小的動(dòng)物用促性腺激素處理,
從輸卵管沖取卵子(可直接受精);對體型大的動(dòng)物從卵巢中采集卵母細(xì)胞(要在體外培養(yǎng)成
熟)b精子的采集假陰道法、手握法和電刺激法;獲能對嚙齒動(dòng)物、兔、豬等的精子用培養(yǎng)法
(放入人工配制的獲能液中);對牛、羊等精子用化學(xué)法(放在肝素或鈣離子載體溶液中)
(3)胚胎的早期培養(yǎng):a培養(yǎng)液成分:無機(jī)鹽、有機(jī)鹽、維生素、激素、氨基酸、核甘酸、
血清等[注意與動(dòng)物細(xì)胞培養(yǎng)液成分的比較];b當(dāng)胚胎發(fā)育到適宜的階段時(shí),可將其取出向受
體移植或冷凍保存。
(4)胚胎移植:a概念:將雌性動(dòng)物的早期胚胎移植到同種的、生理狀態(tài)相同的其他雌性動(dòng)
物的體內(nèi),使之繼續(xù)發(fā)育為新個(gè)體的技術(shù)。是生產(chǎn)胚胎的供體和孕育胚胎的受體共同繁殖后
代的過程,通過轉(zhuǎn)基因、核移植、體外受精獲得的胚胎必須移植給受體才能獲得后代。
b優(yōu)勢:可以充分發(fā)揮雌性優(yōu)良個(gè)體的繁殖潛力,縮短供體本身的繁殖周期。
C胚胎移植的生理學(xué)基礎(chǔ):同種動(dòng)物的供、受體生殖器官的生理變化是相同的[對供體和受體
進(jìn)行同期發(fā)情處理];早期胚胎形成后處于游離狀態(tài),為胚胎的收集提供可能;受體對移入子
宮的外來胚胎基本不發(fā)生免疫排斥反應(yīng);移入受體的供體胚胎的遺傳特性在孕育過程中不受
影響。
d胚胎移植的程序:對供、受體母牛進(jìn)行選擇,用激素進(jìn)行同期發(fā)情處理;對供體母牛用激素
做超數(shù)排卵處理;選擇同種優(yōu)秀公牛配種[有性生殖過程];對胚胎進(jìn)行收集[此時(shí)胚胎處于游
離狀態(tài)];對胚胎進(jìn)行質(zhì)量檢查[此時(shí)胚胎應(yīng)發(fā)育到桑根胚或囊胚];胚胎移植[或冷凍保存];檢
查受體母牛是否受孕;產(chǎn)下胚胎移植的犢牛。
(5)胚胎分割:a概念:用機(jī)械方法將早期胚胎切割成2、4、8等分等,經(jīng)移植獲得同卵雙
胎或多胎的技術(shù)[可看作是動(dòng)物無性繁殖或克隆]
b基本過程:選擇良好的桑根胚或囊胚移入培養(yǎng)皿中,用分割針或分割刀片將其切開,吸出其
中的半個(gè)胚胎注入透明帶中或直接移植給受體。[注意:內(nèi)細(xì)胞團(tuán)要均等分割,否則會影響胚
胎的恢復(fù)和進(jìn)一步發(fā)育]
10胚胎干細(xì)胞的移植(識記)
(1)胚胎干細(xì)胞的含義:由早期胚胎[囊胚]或原始性腺[胎兒]中分離出來的?類細(xì)胞,又叫
ES或EK細(xì)胞。
(2)特征:形態(tài)上體積小、細(xì)胞核大、核仁明顯;功能上具有發(fā)育的全能性,即可分化為成
年動(dòng)物體內(nèi)任何一種組織細(xì)胞。[體外培養(yǎng)下,ES細(xì)胞可以只增殖不分化]
(3)應(yīng)用:用于治療人類疾病,如利用ES細(xì)胞誘導(dǎo)其分化成新的組織細(xì)胞特性,移植ES細(xì)
胞可使壞死或退化的部位得以修復(fù)。
11胚胎工程的應(yīng)用(理解)
包含胚胎移植、胚胎分割等方面的內(nèi)容,詳見9、10
12轉(zhuǎn)基因生物的安全性問題(識記)
(1)轉(zhuǎn)基因成果:見考點(diǎn)3
(2)對轉(zhuǎn)基因生物安全性的疑問:擔(dān)心出現(xiàn)滯后效應(yīng)[即過一段時(shí)間后才出現(xiàn)不良效應(yīng)];擔(dān)
心出現(xiàn)新的過敏原;擔(dān)心營養(yǎng)成分改變等
實(shí)質(zhì)性等同:指在轉(zhuǎn)基因農(nóng)作物中只要某些重要成分沒有發(fā)生改變,就可以認(rèn)為與天然品種
“沒有差別”,因此不必再進(jìn)行安全性檢測。[食品安全]
可能破壞區(qū)域生態(tài)平衡;可能成為“入侵的外來物種”威脅生態(tài)系統(tǒng)中的其他生物;例如可
能重組中對人類或其他生物的病原體;抗除草劑
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