中藥粉末顯微鑒別技術(shù)

中藥粉末顯微鑒別技術(shù)第一節(jié) 取樣、制片、染色一、 取樣取樣的代表性直接影響到結(jié)果的判斷準(zhǔn)確，因此必須重視取樣的各個(gè)環(huán)節(jié)。（一） 對(duì)照品對(duì)照品粉末是檢定供試品的參照物，其制備是顯微鑒別的先決條件。有經(jīng)驗(yàn)者，可自取標(biāo)本，鑒定后制作，或購(gòu)買藥材經(jīng)品種基原鑒定。還應(yīng)注意有些藥材的顯微特征受生長(zhǎng)年限及環(huán)境的影響，會(huì)產(chǎn)生一定的波動(dòng)，所以對(duì)于供試品的產(chǎn)地、采收期、加工方法等也應(yīng)當(dāng)認(rèn)真記錄。（二） 供試品中藥材原藥材應(yīng)注意基原、產(chǎn)地、規(guī)格的完整性、清潔程度以及有無(wú)水跡、霉變或其他物質(zhì)污染等情況，并詳細(xì)記錄。（1） 從同批藥材包件中抽取有代表性的檢定用樣品。（2） 對(duì)破碎的、粉末狀的或大小在1cm以下的藥材，一般藥材100g-500g；粉末狀藥材25g；貴重藥材5g-10g；個(gè)體大的藥材，根據(jù)實(shí)際情況抽取代表性的樣品。（3） 將所取有代表性樣品混合均勻，即為總樣品量。（4） 前處理：將供試品撿凈后，用量較小時(shí)，可以用乳體或小型電磨粉碎過《中國(guó)藥典》6號(hào)篩（1.0rm-250頃）備用。1、中成藥（1）取樣：從各批號(hào)的箱、包、瓶中隨機(jī)取樣，記錄好廠家、批號(hào)，從各包裝盒中任意取1丸，每批號(hào)不得少于3次。各供試品留樣保存，保存期限至少1年。水丸無(wú)包衣時(shí)，可直接取2丸-3丸，乳缽中研成細(xì)粉后，取少量置裁玻片上，滴加規(guī)定的試液，攪拌均勻，使粘結(jié)的細(xì)胞、組織分離，再按粉末特征加水合氯醛試液或其他適當(dāng)試液處理后觀察。水蜜丸或大蜜丸；可直接用刀片橫向切開取一薄片，或用小鋼鏟取一小塊（約15mg）放置在載玻片上制片觀察。（1） 去包衣：中藥片劑常見包衣為糖衣，隔離層常使用膠漿、糖漿和滑石粉。水丸和糊丸等（掛）衣的材料有滑石、蔗糖、朱砂、雄黃、青黛、百草霜、礞石、赫石等。可用刀片將包衣剝?nèi)?，?jiǎn)單的辦法也可將片劑或丸劑斷為兩半，直接取內(nèi)心，粉碎進(jìn)行觀察。（2） 添加劑：為便于觀察，可對(duì)中成藥的制造過程中使用的添加劑做適當(dāng)?shù)那疤幚?。除去水溶性干擾物：將檢品置于蒸餾水中研勻，離心處理，取沉淀物檢查。除去脂溶性干擾物：將檢品滴加適量氯仿，離心處理，取沉淀?yè)]干氯仿后檢查。除去淀粉，糊化淀粉的干擾：將檢品滴加蒸餾水研勻，置燒杯中煮沸、冷卻，離心處理，取沉淀檢查。以上操作中，為防止某些顯微特征的流失，應(yīng)進(jìn)行留樣觀察。二、 制片（一） 制片1、 載玻片與蓋玻片載玻片與蓋玻片是影響圖像質(zhì)量的因素之一。因載物臺(tái)下的聚光器是按使用一定厚度的載玻片設(shè)計(jì)的。首先應(yīng)選擇規(guī)格統(tǒng)一的載玻片（厚0.9mm-1.2mm）與蓋玻片（厚0.12mm-0.17mm）。使用前，將載玻片與蓋玻片用無(wú)水乙醇浸泡后，用柔軟的綢布或無(wú)纖維人造紙揩擦，至表面潔凈無(wú)暇。2、 制片將供顯微觀察的粉末藥材或樣品置于載玻片上，然后加入適宜的試液1滴，用玻璃棒攪勻，用鑷子將蓋玻片沿一側(cè)輕輕放下，使液體自然展勻即可?？捎脼V紙吸拭溢出的液體或從蓋玻片邊緣補(bǔ)充液體不足的空隙。（二） 制片按使用試劑分類1、 稀碘液制片主要用于觀察含淀粉粒。2、 斯氏試液制片試液由醋酸：甘油：水（1：1：1）組成。用于觀察包括淀粉粒在內(nèi)的所有顯微鑒別特征。3、 水合氯醛制片水合氯醛試液能滲透組織，使皺縮的細(xì)胞膨脹并能溶解淀粉粒、蛋白質(zhì)、樹脂、揮發(fā)油和葉綠素等，使細(xì)胞組織變得透明而清晰。4、乙醇裝片在觀察的切片中有菊糖、粘液、樹膠等時(shí)，使用95%以上的乙醇。（三）制片按保存時(shí)間分類1、 臨時(shí)制片封藏介質(zhì)一般為流動(dòng)性液體，不耐久藏。但制作簡(jiǎn)易、適用于一般的顯微觀察及顯微化學(xué)反應(yīng)。2、 半永久性制片在上述臨時(shí)制片周圍，直接使用加拿大樹膠，將蓋玻片周圍封嚴(yán)，室溫放置1天干燥后，置冰箱內(nèi)，一般可供10年以上觀察使用。封藏介質(zhì)還可以選用半固體的甘油明膠。3、 永久性制片封藏介質(zhì)一般呈固態(tài)，可長(zhǎng)期保存，但制作費(fèi)時(shí)，多用于教學(xué)標(biāo)本。制作方法一般是先將粉末用無(wú)水乙醇浸潤(rùn)，隨后瀝去乙醇，用二甲苯浸潤(rùn)，再瀝去二甲苯，滴加加拿大樹膠的二甲苯溶液后，自然揮發(fā)干燥固定后即可。三、染色為使標(biāo)本片特征顯著，可根據(jù)細(xì)胞壁及細(xì)胞內(nèi)含物的性質(zhì)，加入不同染色劑染色。常見的顯微化學(xué)反應(yīng)如下（所有試液的配制方法參見《中國(guó)藥典》）。（一） 細(xì)胞壁性質(zhì)的檢定1、 木化細(xì)胞壁，加間苯三酚試液1滴-2滴，稍放置，加鹽酸1滴，因木化程序不同，顯粉色、紅色或紫紅色。此操作最好在水合氯醛透化后再進(jìn)行，其效果較好。2、 木栓化或角質(zhì)化細(xì)胞壁，加蘇丹III試液，稍放置或微熱，呈橘紅色至紅色。3、 纖維素細(xì)胞壁加氯化鋅碘試液，或先加碘試液濕潤(rùn)后，稍放置，再加硫酸溶液33-50）顯藍(lán)色或紫色。（二） 細(xì)胞內(nèi)含物性質(zhì)的檢定1、 淀粉粒加稀碘試液，呈藍(lán)色或紫色。2、 糊粉粒（1）加碘試液，呈黃棕色。（2）加硝酸汞試液，呈磚紅色（材料中如含有多量脂肪油，宜先用乙醚或石油醚脫脂后進(jìn)行）。3、 脂肪油、揮發(fā)油和樹脂（1）加蘇丹III試液，呈橘紅色，紅色或紫紅色。（2）加90%乙醇、脂肪油和樹脂不溶解（蓖麻油及巴豆油例外），揮發(fā)油則溶解。4、 菊糖加10%a-萘酚乙醇溶液，再加80%硫酸1滴-2滴，顯紫紅色并很快溶解。5、 粘液加釘紅試液，呈紅色。6、 草酸鈣結(jié)晶（1）加稀醋酸不溶解，加稀鹽酸即溶解但無(wú)氣泡發(fā)生。（2）加硫酸（1-2）逐漸溶解。片刻后析出針狀硫酸鈣結(jié)晶。7、 碳酸鈣（鐘乳體），加稀鹽酸溶解，同時(shí)有氣泡發(fā)生。8、 硅質(zhì)加硫酸不溶解。第二節(jié) 顯微鏡及顯微攝影為能如實(shí)地記錄，客觀地反映中藥材粉末的顯微鑒別特征，掌握顯微鏡攝影技術(shù)是十分重要的。一、顯微鏡顯微鏡主要是由機(jī)械部分與光學(xué)部分組成，雖然新型顯微鏡不斷面市，但其原理及各部分的構(gòu)造均大同小異。（一）機(jī)械部分主要包括鏡座、鏡臂、鏡筒、載物臺(tái)、物鏡轉(zhuǎn)換盤、焦距調(diào)節(jié)裝置等。1、 鏡座用于保持顯微鏡的穩(wěn)定與平衡。2、 鏡臂用于支持鏡筒及取放顯微鏡時(shí)便于握持之用。3、 鏡筒為一中空的金屬圓筒，用以固定物鏡與目鏡用的距離?，F(xiàn)以雙筒傾斜式為常見。4、 載物臺(tái)用于放置載玻片之用，并有夾壓片固定。裝置較完善的顯微鏡，載物臺(tái)一側(cè)附有旋鈕，可控制載玻片前后左右的移動(dòng)。4、 物鏡轉(zhuǎn)換盤具有3個(gè)-6個(gè)螺旋品，每個(gè)螺旋品配置有不同放大倍率的物鏡。5、 焦距調(diào)節(jié)裝置通過鏡筒與載物臺(tái)的升降，調(diào)節(jié)物鏡與標(biāo)本間的距離。主要包括粗調(diào)節(jié)器和細(xì)調(diào)節(jié)器2個(gè)部分。（二）光學(xué)部分主要由一系列的放大透鏡組合而成。除了主要用于放大的透鏡組外，尚有光密度調(diào)節(jié)裝置、濾光片、光源裝置等。1、物鏡物鏡是決定顯微鏡性能的最重要部分，內(nèi)裝有多組復(fù)式透鏡。2、目鏡內(nèi)裝有一組放大率較小的透鏡組。其作用在于將物鏡所成圖像作進(jìn)一步的放大。3、光密度調(diào)節(jié)裝置（1） 聚光器：由數(shù)片透鏡組成，位于載物臺(tái)下方，用于將光線集中到所要觀察的標(biāo)本上。聚光器的一側(cè)，尚裝有升降調(diào)節(jié)輪，供會(huì)聚光線密度所用。聚光器的光闌開孔最好為物鏡數(shù)值孔鏡的60%-70%。（2） 場(chǎng)光闌：位于光源的上方，主要功能是靠減少物鏡反射光斑來(lái)控制圖像的光。二、顯微攝影1、 鏡頭的選擇（1） 物鏡：顯微照像時(shí)，必須選用平場(chǎng)消色差鏡或平場(chǎng)復(fù)消色差物鏡，如帶有廣視野的物鏡則更優(yōu)。（2） 目鏡：應(yīng)選擇生產(chǎn)廠家原配置的照像專用目鏡。2、 取景與對(duì)焦現(xiàn)常用者多為專用的顯微攝影裝置。這類裝置主要由一個(gè)取景目鏡和一個(gè)目鏡照像機(jī)組成。3、 顯微照明現(xiàn)一般的顯微鏡均附有透射式中心照明光源，即采用了柯勒照明法，以獲得強(qiáng)而均勻的照明。4、 濾光片為減少顯微鏡觀察所造成的疲勞，一般裝在光圈上端的濾光片架內(nèi)，放置一個(gè)中等密度的濾光片可以減弱圖像的亮度，達(dá)到令人舒適的光亮程度。5、 曝光控制顯微攝影的裝置中，多具有自動(dòng)曝光控制功能，以PM-10AD10全自動(dòng)顯微照像裝置為例。在曝光操作盤上，裝有下列操作鈕。膠片尺寸與選擇鈕：可選擇35mm膠片到大尺寸照片。膠片感光度設(shè)定：ISO設(shè)定鈕。膠片倒易失效校正鈕：參考微機(jī)處理機(jī)上所附有的常用牌號(hào)膠片倒易率失效特性數(shù)據(jù)，將旋鈕擰到所用膠片的位置，即可自動(dòng)地調(diào)節(jié)曝光時(shí)間。標(biāo)本暗視野補(bǔ)償鈕：根據(jù)視場(chǎng)內(nèi)的標(biāo)本分布的明暗反差狀態(tài)，把膠片的有效感光速度在額度值的0.25-4之間轉(zhuǎn)換。攝影方式選擇鈕：選擇自動(dòng)或手動(dòng)方式。三、其他注意事項(xiàng)1、 顯微鏡的使用使用顯微鏡觀察時(shí)，應(yīng)當(dāng)注意兩先兩后，即先低倍、后高倍、先粗調(diào)、后微調(diào)。2、 顯微鏡的維護(hù)應(yīng)特別注意防塵、防潮與防腐。避免載玻片上滴加過多的液體試劑，避免試劑流出引起腐蝕。3、 顯微測(cè)量法鑒定藥材粉末時(shí)，一般需要采用顯微長(zhǎng)度測(cè)量的方法。長(zhǎng)度的測(cè)量時(shí)，需要用2種標(biāo)尺，即臺(tái)測(cè)微尺與目測(cè)微尺。臺(tái)測(cè)微尺為顯微長(zhǎng)度測(cè)量的標(biāo)準(zhǔn)，用于校正目測(cè)微尺的長(zhǎng)度。全長(zhǎng)1mm，分10個(gè)大格，每個(gè)大格再分為10個(gè)小格，故每個(gè)小格相當(dāng)于10^m。目測(cè)微尺為一圓形的小玻片，一面印有標(biāo)尺，長(zhǎng)度通常為1cm，分為100個(gè)小格，使用時(shí)注意將有刻度的一面朝下。膠片的選擇 顯微標(biāo)本一般都是靜態(tài)的，所以膠片的感光度并不重要。彩色膠片分日光型和燈光型，只要在光路中置一正確的濾光片使照明調(diào)節(jié)到日光光質(zhì)，不論哪一類都能在顯微攝影中成功地使用。膠片的有效期限，在包裝盒上印的有效期限之前使用，過期膠片易發(fā)生色平衡的變化。沖擴(kuò)沖擴(kuò)為最后一步，把握不好，將功虧一簣。自己沖洗時(shí)，應(yīng)認(rèn)真做好觀察記錄。送到照像館擴(kuò)印時(shí)，應(yīng)同時(shí)附上樣片，照片后一般自動(dòng)記錄有顯影條件，可供調(diào)試沖擴(kuò)條件時(shí)參考。圖像欠佳的原因圖像不清晰時(shí)，應(yīng)檢查一下顯微鏡的微調(diào)焦方面是否有“滑輪”現(xiàn)象。是否因按快門時(shí)過重或太快造成震動(dòng)。取景目鏡中的雙十宇線是否看清。如有油跡出現(xiàn)在物鏡前透鏡上，或標(biāo)本的載玻片上，則圖像是模糊的。照片亮度不勻時(shí)，應(yīng)檢查一下照明器及其里面的光源與顯微鏡是否成一直線，如照明不均勻，將對(duì)所拍攝照片有明顯影響，其背景或檢體的圖像常一邊偏暗。中藥材粉末及中成藥的顯微鑒別第一節(jié) 中藥材粉末顯微鑒別要點(diǎn)生物的各種組織形態(tài)均具有較為穩(wěn)定的顯微特征，中藥材被粉碎時(shí)，其組織、細(xì)胞、內(nèi)含物等依然可見。了解并掌握這些基本特征，是開展中藥粉末鑒別的基礎(chǔ)。一、根及根莖類藥材根及根莖類藥材的粉末顯微鑒別，以具有特征性的后含物、厚壁組織、分泌組織為觀察重點(diǎn)，其次是導(dǎo)管、木栓細(xì)胞等。細(xì)胞后含物(1)淀粉粒：其形態(tài)隨植物種類而異。觀察時(shí)，應(yīng)注意淀粉粒的多少，形狀、類型、大小、臍點(diǎn)形狀及位置，層紋等特征。菊糖：為菊科、桔梗科植物藥所特有。結(jié)晶：大多為草酸鈣結(jié)晶，偶有含硅質(zhì)塊的。分泌組織 如有分泌細(xì)胞、分泌腔(室)、分泌管(道)及乳汁管等類型。厚壁組織(])纖維：常分為韌皮纖維和木纖維兩大類。其中木纖維又分為韌型纖維和纖維管胞。(2)石細(xì)胞：多成群或單個(gè)散在，有的與木栓細(xì)胞或薄壁細(xì)胞相連接，如蒼術(shù)等。觀察時(shí)，應(yīng)注意石細(xì)胞的形狀，大小、細(xì)胞壁增厚形態(tài)和程度，紋孔形狀及大小、孔溝密度等特征。導(dǎo)管導(dǎo)管多為梯紋、網(wǎng)紋或具緣紋孔，少為螺紋和環(huán)紋。木栓組織雙子葉植物根和根莖中常見，單子葉植物根莖中少有存在。后生皮層僅見于為數(shù)不多的雙子葉植物根和單子葉植物根莖。表皮及下皮表皮一般在單子葉植物藥材中較普遍，雙子葉植物藥材僅見于較細(xì)長(zhǎng)的須狀根。內(nèi)皮層細(xì)胞多見于單子葉植物根、根莖類粉末中，如澤瀉等。少數(shù)雙子葉植物的根具有分隔的內(nèi)皮層細(xì)胞，如龍膽等。薄壁細(xì)胞包括皮層、韌皮部、木質(zhì)部、射線及髓部的薄壁細(xì)胞。薄壁細(xì)胞中的后含物或特殊物質(zhì)是重要的鑒別特征，如熟地黃具黑棕色核狀物的薄壁組織等。二，皮類藥材主要指木本植物形成層以外的部分，顯微鑒別時(shí)，以觀察厚壁細(xì)胞、木栓組織等為重點(diǎn)。木栓細(xì)胞大多為棕色，極少數(shù)淺紅色或紫紅色，少數(shù)無(wú)色，常有不同顏色的后含物。木栓細(xì)胞表面觀大多為多角形，細(xì)胞壁栓質(zhì)化；也有的細(xì)胞壁呈不均勻木化增厚，并具紋孔，形似石細(xì)胞.如肉桂等。纖維普遍存在。應(yīng)注意是單個(gè)散在或成束，顏色、形狀、直徑、長(zhǎng)短、壁增厚的程度，紋孔及孔溝形狀等特征。同時(shí)注意有無(wú)晶纖維，如黃柏等。石細(xì)胞較普遍存在。應(yīng)注意形狀、大小、顏色，細(xì)胞壁形態(tài)、有無(wú)分枝、有無(wú)內(nèi)含物等特征。射線細(xì)胞多碎斷。應(yīng)注意觀察射線細(xì)胞的寬度和高度(有時(shí)破碎不易看清)、細(xì)胞內(nèi)含物等特征。篩管為皮類藥材的標(biāo)志，觀察其分子端壁的篩板及篩域的分布狀態(tài)，如厚樸等。裸子植物皮類藥材無(wú)篩管，而有篩胞，如土荊皮等。此外，還應(yīng)注意分泌組織的有無(wú)、類型、形狀、大小及分泌物的顏色，細(xì)胞后含物晶體、淀粉粒等)的有無(wú)、形態(tài)，大小等特征。三、木類藥材主要指雙子葉植物莖的心材，顯微鑒別時(shí)，導(dǎo)管，纖維、木薄壁細(xì)胞等為觀察重點(diǎn)。1、 導(dǎo)管一般較發(fā)達(dá)，多為具緣紋孔和網(wǎng)紋導(dǎo)管，其分子的寬度、長(zhǎng)度、紋孔的排列方式是重要的鑒別特征，如降香的具緣紋孔導(dǎo)管。木纖維分為韌型纖維及纖維管胞，前者細(xì)胞壁無(wú)紋孔或單斜紋孔，后者有具緣紋孔，注意紋孔口的狀況、有否形成晶纖維，含晶細(xì)胞壁的厚度及是否木化等。木薄壁細(xì)胞木薄壁細(xì)胞的胞壁大都木化、具紋孔，如蘇木的木薄壁細(xì)胞。木射線細(xì)胞應(yīng)注意木射線細(xì)胞的形狀、寬度和高度、細(xì)胞壁的增厚程度等，如降香的木射線細(xì)胞。四、 藤莖類藥材藥用者多為木質(zhì)藤莖，皮類和木類藥材的組織特點(diǎn)均可察見，少數(shù)帶有葉的莖類藥材可見到葉肉組織、氣孔或毛茸，機(jī)械組織較發(fā)達(dá)，草酸鈣結(jié)晶常見，淀粉粒常較小等。其他鑒別要點(diǎn)參見皮類和木類藥材鑒別要點(diǎn)。五、 葉類藥材葉肉組織和氣孔是葉類藥材的主要標(biāo)志。觀察時(shí)應(yīng)注意以下特征。表皮細(xì)胞 表面觀。斷面觀的形狀，顏色、垂周壁的彎曲程度、胞壁增厚狀況、角質(zhì)層的形態(tài)以及有無(wú)紋孔等。氣孔 軸式及副衛(wèi)細(xì)胞數(shù)目。毛茸腺毛：重點(diǎn)觀察腺頭的形狀、細(xì)胞數(shù)目、大小、分泌物的顏色及腺柄的細(xì)胞數(shù)目、大小等特征，如桑葉;唇形科植物葉的腺毛形成腺鱗，頭部由8個(gè)細(xì)胞組成，如薄荷葉。非腺毛：重點(diǎn)觀察形狀、大小、細(xì)胞數(shù)目、表面有無(wú)紋理、疣點(diǎn)等特征。如艾葉等菊科植物葉的非腺啟字形，多細(xì)胞；石韋非腺毛為星狀，多細(xì)胞，番瀉葉非腺毛為單細(xì)胞，壁厚，具疣狀突起；荷葉非腺毛則為非腺毛聚合體等。晶體注意觀察其類型、大小及存在方式。有的葉類藥材有2種以上晶體形態(tài)，如番瀉葉兼有草酸鈣簇晶和柱晶；桑葉既有鐘乳體結(jié)晶又有草酸鈣簇晶和方晶；穿心蓮葉含大形螺狀鐘乳體。此外，還要注意柵欄細(xì)胞的列數(shù)，長(zhǎng)度和直徑，導(dǎo)管的類型和直徑、厚壁組織的有無(wú)，如茶葉含有石細(xì)胞等特征。六、花類藥材以花粉粒、花粉囊內(nèi)壁細(xì)胞、毛茸、柱頭表皮細(xì)胞為主要鑒別點(diǎn)。此外，觀察時(shí)還應(yīng)注意草酸鈣結(jié)晶如丁香，分泌組織如紅花、纖維如菊花等特征的存在。花粉粒是鑒別花類藥材的主要特征。主要注意花粉粒的形狀、大小、萌發(fā)孔形態(tài)、外壁構(gòu)造及紋飾(理)等特征。形狀：指立體狀態(tài)或極面觀、赤道面觀的輪廓。大?。撼龍A球形只測(cè)其直徑外，一般需分別測(cè)量極軸或赤道軸的長(zhǎng)度?；ǚ郾冢夯ǚ垡话憔哂休^厚的外壁和較薄的內(nèi)壁。萌發(fā)孔：為花粉外壁較薄的區(qū)域，當(dāng)花粉有萌發(fā)時(shí)，花粉內(nèi)壁由萌發(fā)孔向外伸出形成花粉管?；ǚ哿５男螤?、數(shù)目及大小，因種而異?；ǚ勰覂?nèi)壁注意其紋飾類型。毛茸注意其類型、形狀、大小、細(xì)胞數(shù)目、排列及表面特征等。七、果實(shí)類藥材果實(shí)類藥材一般為完整果實(shí)或果實(shí)的某一部分。顯微鑒別時(shí)，以外果皮、中果皮、內(nèi)果皮為觀察重點(diǎn)。外果皮注意觀察細(xì)胞形狀，垂周壁增厚狀況。中果皮注意觀察分泌組織。內(nèi)果皮注意觀察石細(xì)胞。對(duì)含有種子的果實(shí)類藥材，還應(yīng)注意種皮、肝乳組織等特征。八、 種子類藥材種子類藥材一般為干燥成熟的種子，有的只用種子的某一部分。顯微鑒別時(shí)，多以觀察特化為厚壁細(xì)胞的種皮細(xì)胞為重點(diǎn)。厚壁細(xì)胞豆科及旋花科植物等大都有種皮柵狀細(xì)胞，要注意種皮柵狀細(xì)胞的列數(shù)、形狀、有無(wú)光輝帶及所處位置等。種皮細(xì)胞常由石細(xì)胞構(gòu)成，是重要的鑒別依據(jù)。其次應(yīng)注意種皮支持細(xì)胞、油細(xì)胞、色素細(xì)胞的有無(wú)和形態(tài)；有無(wú)毛茸、草酸鈣結(jié)晶、淀粉粒、分泌組織碎片等。有時(shí)胚乳細(xì)胞也是鑒別依據(jù)。如砂仁等。九、 全草類藥材大多為草本植物的地上部分、少數(shù)為帶根的全株。全草類包括了草本植物藥的各個(gè)部位；除草質(zhì)莖外，其他前文均已淪述。草質(zhì)莖與木質(zhì)莖藥材粉末的主要區(qū)別在于：機(jī)械組織較少，導(dǎo)管直徑較小；一般無(wú)木栓組織：綠色薄壁組織較多：毛茸多見。表皮角質(zhì)層紋理、氣孔較明顯，如麻黃的啞鈴狀特異型氣孔是該藥的重要鑒別特征。十、菌類藥材大多以子實(shí)體或菌核的形式入藥。無(wú)淀粉粒和高等植物的顯微特征。觀察時(shí)應(yīng)注意菌絲的形狀、有無(wú)分枝、顏色，大?。粓F(tuán)塊、孢子的形態(tài)：結(jié)晶有無(wú)及形態(tài)、大小與類型。十一、動(dòng)物類藥材因藥用部位不同，有動(dòng)物體、分泌物、病理產(chǎn)物和角甲類之分。動(dòng)物全體應(yīng)注意皮膚碎片細(xì)胞的形態(tài)與色素顆粒的顏色。分泌物和病理產(chǎn)物應(yīng)注意團(tuán)塊的顏色及其包埋物的性質(zhì)特征，表皮脫落組織，毛茸及其他細(xì)胞的形狀、大小、顏色等特征，如麝香、牛黃等。角甲類藥材應(yīng)注意碎塊的形狀、顏色、橫斷面和縱斷面觀的形態(tài)特征及色素顆粒顏色，如羚羊角等。十二、礦物類藥材除龍骨等少數(shù)化石類藥材外，一般無(wú)植（動(dòng)）物性顯微特征。主要應(yīng)注意晶體的大小，直徑或長(zhǎng)徑；晶形的棱角、銳角或鈍角；色澤、透明度、表面紋理及方向、光潔度；偏光顯微鏡下的特征等，如朱砂、石膏、雄黃等。第二節(jié)中成藥顯微鑒別要點(diǎn)一、 了解劑型制法，熟悉組方藥材了解劑型和制法，熟悉處方中組成藥物的顯微特征是中成藥鑒別的基礎(chǔ)。中成藥的顯微鑒別與中藥材粉末顯微鑒別相比要復(fù)雜得多，因?yàn)橹谐伤幰话愣嘤啥兑陨现兴幉牟捎枚喾N方法制備而成。制備方法的不同對(duì)顯微鑒別會(huì)產(chǎn)生一定的影響。而且組成藥物及各種輔料的顯微特征還會(huì)出現(xiàn)相互影響和干擾。在對(duì)中成藥鑒別前，首先要盡可能地了解該藥的劑型和制法，分析可能檢出的藥物有多少。例如牛黃解毒丸中的8味藥都是原粉人藥，均可檢出。在牛黃解毒片中，黃苓、桔梗，甘草3味藥為煎汁投料，這些藥便看不到各自的顯微特征，不能檢出。應(yīng)視具體情況做具體分析，不可一概而論。賦形劑常使用淀粉的種類有玉蜀黍、木薯、小麥、米及馬鈴薯。對(duì)于組成藥物的顯微特征，可分出熟悉的、基本熟悉的和不熟悉的3類，只有熟悉之后，方可靈活應(yīng)用。對(duì)于不熟悉的特征，必須先對(duì)照藥材粉末進(jìn)行研究，將粉末藥材的主要特征制作標(biāo)準(zhǔn)彩色圖版，以供對(duì)照觀察之用。二、 排除交叉干擾，明確專屬特征排除交叉干擾，確定專屬性特征是中成藥鑒別的關(guān)鍵。在對(duì)各組成藥物粉末分析比較觀察時(shí)，分析處方，選取各藥在中成藥中的專屬性特征，作為鑒別依據(jù)。因此，單一藥材粉末的主要特征在成藥中有時(shí)不一定能作為鑒別依據(jù)，而某些較次要特征有時(shí)則可起到鑒別作用。選取各組成藥物顯微特征時(shí)要考慮到2點(diǎn)：一是所選特征在該處方中的專屬性；二是該特征盡可能在處方外的中藥中也要有專屬性。一般地說(shuō)，每味組成藥選取1個(gè)能代表該藥的專屬特征即可，如果該特征與其他組成藥的類似組織，細(xì)胞、內(nèi)含物或賦形劑有交叉。則應(yīng)選取其他特征。如果改換其他特征亦較難時(shí)，可考慮增加1個(gè)一二個(gè)輔助性特征；但要本著少而精的原則，避免繁亂。三、 熟練正規(guī)操作，確保結(jié)果準(zhǔn)確顯微鑒別與一般的儀器分析方法相比，受主觀因素影響較大，對(duì)操作者來(lái)說(shuō)，不僅要有扎實(shí)的生藥學(xué)理論基礎(chǔ)，還要有嫻熟的顯微觀察技能和攝影技術(shù)。每個(gè)樣品應(yīng)制5枚標(biāo)準(zhǔn)片，先重點(diǎn)觀察后，再縱向掃描觀察30行，每次觀察幅寬約0.5mm（有的顯微鏡可通過自動(dòng)移動(dòng)裝置控制）。一般可在100-400倍下照相記錄，含細(xì)胞后含物較多者，制片靜置一周后應(yīng)復(fù)查制片的穩(wěn)定性。關(guān)于各種顯微特征的量度測(cè)定，一般應(yīng)取20個(gè)測(cè)量其平均值，力求客觀。因此，在中成藥中的顯微特征的量度值與藥材原粉中測(cè)量的數(shù)值不一定完全相同，但大都在原粉末量度值范圍內(nèi)。還應(yīng)指出的是，中成藥的顯微鑒別，分為已知組成樣品和未知組成樣品2類，以上所及僅為已知處方的樣品。至于未知組成樣品的鑒別，難度相應(yīng)增大。但只要掌握大量的單味藥粉末顯微特征，積累豐富的鑒別經(jīng)驗(yàn)，同樣可以逐步解決。鑒別時(shí)，為方便觀察，還應(yīng)考慮多種手段的應(yīng)用。如某些特殊的組成藥材，粉末顯微特征不易確定，可用微量升華的方法來(lái)解決，如冰片等。偏光顯微鏡在中藥顯微鑒別中的應(yīng)用中藥材粉末的偏光特征：偏振光顯微鏡(p01arizingmicroscope)簡(jiǎn)稱偏光顯微鏡。與普通的明視野顯微鏡相比，偏光顯微鏡利用了自然光在通過各向異性透明體(如方解石等)時(shí)，可產(chǎn)生偏振光的作用原理，在構(gòu)造上增加了2個(gè)尼科爾棱鏡(NicolPrism)或2塊人造偏振片。一塊置于光源和待檢物之間，作為“起偏振器’；另一塊置于物鏡和目鏡之間，作為“檢偏振