飼料中粗脂肪的測定 編制說明

1根據(jù)《國家標準化管理委員會關于下達2021年第二批推薦性國家標準計劃及相關標準外文版計劃的通知》（國標委發(fā)[2021]23號），本標準修訂項目的編號為測技術股份有限公司和通威股份有限公司。2022年6月，因通威股份有限公司內(nèi)部組要起草單位申請變更為中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術研究所[國家飼料質(zhì)量監(jiān)督檢驗中心（北京）]、四川威爾檢測技術股份有限公司和通威農(nóng)業(yè)發(fā)展有限公司。本標準由全國飼料工業(yè)標準化技術委員會（SAC/T類、B類產(chǎn)品分類”翻譯不準確，導致飼料質(zhì)檢機構、飼料企業(yè)無法按照標準進行明確的A類、B類產(chǎn)品分類，影響選擇后續(xù)的試驗步驟；另一方面，國內(nèi)外關于濾袋法相關的研究報道有很多，使用非常廣泛，濾袋法（利用高溫快速測定油脂法）已于2004表1國內(nèi)外食品、飼料中脂肪酸測定標準方法序號標準編號標準名稱測定方法1ISO6492-1999Animalfeedingstuffs—Determinationoffatcontent動物飼料-脂肪含量的測定索氏抽提法2ISO11085:2015Cereals，cereals-basedproductsandanimalfeedingstuffs—DeterminationofcrudefatandtotalfatcontentbytheRandallextractionmethod索氏抽提法3AOCSApprovedProcedureAm5-04RapidDeterminationofOil/FatUtilizingHighTemperat-ureSolventExtraction利用高溫快速測定油/脂法濾袋法2序號標準編號標準名稱測定方法4GB/T6433-2006飼料中粗脂肪的測定索氏抽提法5GB/T18868-2002飼料中水分、粗蛋白、粗纖維、粗脂肪、賴氨酸、蛋氨酸快速測定近紅外光譜法近紅外光譜法本次標準修訂擬修改采用ISO6492:1999、2021年8月，四川威爾檢測技術股份有限公司、中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與表2標準主要起草人員和任務分工任務分工張鳳枰教授級高工項目主持人，負責項目的全面工作研究員項目實施方案、標準文本和編制說明編寫和完善、征求意見、方法驗證副研究員樣品收集、樣品檢測、檢測方法研究高級工程師樣品收集、檢測方法研究、標準文本和編制說明編寫杜亞欣助理工程師樣品檢測、檢測方法研究修訂內(nèi)容和技術路線草案。2022年2月，中國農(nóng)業(yè)科學院農(nóng)業(yè)質(zhì)量標準與檢測技術研3圖1標準修訂技術路線圖4GB/T1.2－2020《標準化工作導則第2部分：以ISO/IEC標準化文件為基礎的標法”，修改采用《動物飼料—脂肪含量的測定》（ISO6492:），本文件適用于配合飼料、濃縮飼料、精料補充料和飼——單一動物源性飼料原料，包括乳制品；——使用了動物源性飼料原料和/或脂肪不經(jīng)預先水解不能提取的單一植物源性飼結(jié)合我國飼料行業(yè)粗脂肪檢測需要和檢測技術發(fā)展現(xiàn)狀，按照GB/T1.2－2020《標準5參照《AOCSApprovedProced酸水解的類別。為此選用10種飼料原料和飼料產(chǎn)品進行了酸水表3不同類型試樣直接抽提法和酸水解-抽提法粗脂肪測定結(jié)果比較樣品名稱直接抽提法酸水解-抽提法方法偏差（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果(%)平均值（%）玉米3.243.23.693.90.73.134.033.97玉米DDGS2.2豬濃縮飼料2.282.33.273.22.273.252.293.21烘焙貓糧0.7海水魚膨化配合飼料6.756.89.619.72.96.839.736.839.68豬肉骨粉4.284.37.227.33.04.247.204.307.37進口魚粉8.108.398.40.36樣品名稱直接抽提法酸水解-抽提法方法偏差（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果(%)平均值（%）8.098.438.098.26奶牛精料補充料3.643.72.03.673.64哺乳母豬配合飼料5.325.35.936.00.75.416.215.295.83菜粕（加拿大）2.732.82.832.88直接抽提法主要提取試樣中的游離脂肪，而酸水解-抽提法把結(jié)合態(tài)脂肪水解后，把游的水中的氫氧根分子量達到51，但同時會損失一個甘油分子（甘油分子溶于水，分子），肪含量建議標注直接抽提結(jié)果，經(jīng)酸水解后抽提測定的粗脂肪法比較試驗，結(jié)果見表4、圖2。結(jié)果表明，30批次魚粉樣品酸水解-抽提法結(jié)果在5.7%~11.8%之間，而直接抽提法測定結(jié)果在4.1%~10.6%之間，直接抽提法結(jié)果偏低0.4%~2.5%，絕大部分直接抽提法和酸水解-抽提法結(jié)果之間的偏差超出GB/T6433-7樣品酸水解-抽提法樣品酸水解-抽提法魚粉1魚粉16魚粉17魚粉18魚粉19魚粉20魚粉21魚粉22魚粉23魚粉10魚粉25魚粉11魚粉26魚粉12魚粉27魚粉13魚粉28魚粉29魚粉15魚粉30肪檢測結(jié)果分2.3.3血球粉和血漿粉直接抽提法和酸水解-抽提法結(jié)果比較分析血球粉和血漿粉加工過程經(jīng)過熱加工，試驗采集14批次血球粉、11批次血漿粉樣品開展直接抽提法和酸水解-抽提法比較試驗，結(jié)果見表5、圖2。表6、圖3結(jié)果表明，14批次血球粉樣品酸水解-抽提法粗脂肪結(jié)果分布在0.08%~4.20%之間，直接抽提法粗8脂肪測定結(jié)果分布在0.04%~1.25%之間，含量較高的血球粉直接抽提法和酸水解-抽提法結(jié)果之間的偏差大部分超出GB/T6433—2006規(guī)定允許偏差，且趨勢線斜率差異較大，兩種結(jié)果之間不完全成正比；11批次血漿粉樣品直接抽提法和酸水解-抽提法結(jié)果之間的偏差全部超出GB/T6433—2006規(guī)定允許偏差，兩種結(jié)果之間也不完全成正比。樣品抽提法樣品抽提法血球粉1血漿粉1血漿粉2血漿粉3血漿粉4血漿粉5血漿粉6血漿粉7血漿粉8血漿粉9血球粉10血漿粉10血球粉11血漿粉11血球粉12 血球粉13 左圖為血球粉粗脂肪檢測結(jié)果分9左圖為血漿粉粗左圖為血漿粉粗脂肪檢測結(jié)果分2.3.4其他常見動物性飼料原料直接抽提法和酸水解-抽提法結(jié)果比較分析試驗采集羽毛粉、骨粉、肉粉、肉骨粉開展直接抽提法和酸水解-抽提法比較試驗，結(jié)果見表6、圖4。結(jié)果表明，上表4種常見動物性飼料原料羽毛粉、骨粉、肉粉、肉骨粉樣品直接抽提法和酸水解-抽提法結(jié)果之間的偏差全部超出GB/T6433-2006規(guī)定允許偏差，偏差的比例各不相同，且沒有明確規(guī)律。樣品樣品酸水解-骨粉1肉粉1肉骨粉1肉粉2肉骨粉2肉粉3肉骨粉3肉粉4肉骨粉4肉粉5肉骨粉5肉粉6肉骨粉6肉粉7肉骨粉7樣品樣品肉粉8肉骨粉8肉粉9肉骨粉9肉粉10肉骨粉10肉粉11肉骨粉11肉粉12肉骨粉12肉粉13肉骨粉13肉粉14肉粉15 肉粉粗脂肪數(shù)據(jù)分布50肉骨粉粗脂肪數(shù)據(jù)分布50R飼料原料、經(jīng)熱加工的飼料原料和飼料產(chǎn)品，以B類試樣，直接抽提法和酸水解-抽提法粗脂肪測定結(jié)果差異較大，需要酸水解后抽提標準研究試驗采用用2種型號濾袋法飼料脂肪測定儀，儀器說明書推薦條件為：在的量（不超過酸水解裝置安全容量）加入1+3鹽酸溶液，打開冷凝水，小心加熱溶液并9對比結(jié)果顯示，濾袋法粗脂肪酸水解檢測中增加預抽提非常有必要，特別是粗脂肪含表7濾袋法預抽提必要性考察樣品儀器1儀器2直接酸水解預抽提-酸水解直接酸水解預抽提-酸水解結(jié)果（%）均值（%）結(jié)果（%）均值（%）結(jié)果（%）均值（%）結(jié)果（%）菜籽粕2.362.32.492.52.022.02.482.42.222.472.032.372.202.412.032.46哺乳母豬配合飼料4.974.95.705.75.225.05.285.54.735.805.055.584.895.484.795.53表8濾袋法酸水解時間對測定結(jié)果的影響（儀器1）樣品名稱酸水解40min酸水解50min酸水解60min酸水解70min酸水解80min測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）玉米2.232.22.452.63.833.73.824.03.863.82.042.583.344.003.722.192.713.974.133.66乳豬濃縮飼料2.953.22.862.93.023.03.433.42.993.03.382.863.013.362.993.353.103.023.372.96烘焙貓糧海水魚膨化配合飼料9.369.269.39.599.59.909.79.869.88.889.269.489.799.858.939.419.449.509.65豬肉骨粉6.426.76.877.27.597.67.207.57.547.66.817.087.677.807.516.777.727.477.507.76進口魚粉8.428.58.728.78.618.88.868.88.578.68.368.638.988.598.638.738.788.779.098.51奶牛精補料3.443.53.203.23.773.64.373.73.743.53.562.963.553.343.383.473.313.613.523.39哺乳母豬5.695.75.235.46.176.05.856.06.005.95.895.685.686.095.95測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果菜籽粕表9、圖6顯示，大部分樣品隨酸水解時間延長測得的粗脂肪含量增加，且達到60分鐘以后趨于穩(wěn)定，說明酸水解60min,結(jié)合脂肪水解較徹底，綜合考慮設定酸水解時考慮到酸水解后濾袋內(nèi)部完全打濕，專門考察水解后干燥條件的影響。選取玉米、玉米DDGS、乳豬濃縮飼料、烘焙貓糧、海水魚膨化配合飼料、豬肉骨粉、進口魚粉、奶牛精補料、哺乳母豬配合飼料、菜籽粕等10個樣品，按照儀器操作說明書預抽提、酸水解、抽提后，用濾紙吸掉內(nèi)外部殘余水分，于103℃±2℃干燥，考察預抽提、酸水解、抽提后干燥時間對粗脂肪測定結(jié)果的影響，結(jié)果見表9、圖7。結(jié)果表明，103℃±2℃干燥120min~360min結(jié)果都相對穩(wěn)定，顯示過長干燥時間并無必要，為保證干燥充分，綜合考慮確定干燥時間為180min。表9預抽提、酸水解后干燥時間對測定結(jié)果的影響（儀器1）樣品名稱干燥-120min干燥-180min干燥240min干燥-300min干燥-360min測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）測定結(jié)果（%）平均值（%）玉米3.763.73.663.63.603.53.573.53.553.53.553.453.373.363.353.803.703.613.553.53玉米DDGS乳豬濃縮飼料2.953.03.023.02.982.92.722.92.842.83.133.012.972.992.823.053.022.782.832.87烘焙貓糧海水魚膨化配合飼料9.989.89.599.59.579.69.489.59.529.49.779.489.789.659.299.789.449.549.289.37豬肉骨粉6.666.86.896.76.676.76.756.56.386.56.906.576.926.656.546.686.616.556.196.58進口魚粉8.959.08.618.88.898.88.498.58.448.58.968.988.698.628.438.778.778.458.76奶牛精補料3.693.63.773.63.503.63.653.63.463.43.483.553.623.613.173.633.613.553.573.58哺乳母豬5.885.96.176.06.076.05.535.75.925.85.965.685.945.725.715.896.075.915.835.78菜籽粕2.812.93.262.812.83.002.82.902.83.183.153.012.602.742.762.842.642.742.77進口魚粉、奶牛精料補充料、哺乳母豬配合飼料、菜籽粕等10個樣品，按照儀器操作300min對粗脂肪測定結(jié)果的影響，結(jié)果見表10。結(jié)果表明，抽提時間超過100分鐘后表10濾袋法酸水解后抽提時間對測定結(jié)果的影響(儀器1)測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果(%)測定結(jié)果(%)料測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果(%)測定結(jié)果(%)化配合飼料奶牛精補料哺乳母豬菜粕(加拿大)選取乳豬濃縮飼料、哺乳母豬配合飼料、烘焙貓糧共3個樣品，按照儀器操作說明書預抽提、水解、再抽提后，在103℃±2℃干燥，考察干燥時間對粗脂肪測定結(jié)果的影響，,測定結(jié)果見表11、圖9。結(jié)果表明，103℃±2℃干燥120min與180min、240min、300min、360min結(jié)果一致，過長干燥時間并無必要，綜合考慮確定抽提后干燥時間為120min。測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果哺乳母豬烘焙貓糧等10個樣品，按照上述確定的預抽提-酸水解-抽提方法和條件，與傳統(tǒng)酸水（%）（%）（%）料濾袋法儀器1測定結(jié)果測定結(jié)果測定結(jié)果哺乳母豬菜籽粕濾袋法儀器和傳統(tǒng)法方法比較試驗結(jié)果一玉米進口魚粉一菜籽粕濾袋法有直接抽提和預抽提-酸水解-抽提兩種模式，采集玉米、菜籽粕、玉米DDGS、豬肉骨粉、進口魚粉、哺乳母豬配合飼料、海水魚膨化配合飼料、乳豬濃縮料、奶牛精料補充料、烘焙貓糧等10個樣品，分別開展濾袋直接抽提法與傳統(tǒng)直接抽提法，濾袋預抽提-酸水解-抽提法與傳統(tǒng)酸水解-抽提法方法比較試驗，結(jié)果表13和圖11、表14和圖12。21計算結(jié)果%平均值%計算結(jié)果%平均值%3.203.23.363.383.33.202.922.913.202.953.509.172.402.42.262.42.362.42.402.502.452.402.312.487.207.26.726.77.047.07.106.746.987.206.667.035.505.45.925.86.026.05.506.226.215.305.215.668.508.67.897.88.228.38.608.028.298.607.358.472.302.22.573.02.802.82.203.282.732.202.885.405.45.245.05.305.45.504.835.485.404.775.470.8123（%）（%）（%）（%）（%）3.693.93.723.83.833.74.033.793.343.973.893.973.273.23.093.22.953.03.253.313.133.213.183.059.619.79.729.99.989.89.739.989.779.689.787.227.37.527.67.597.67.207.837.677.377.327.478.398.49.379.38.959.08.439.458.968.269.173.643.73.933.93.693.63.673.963.483.643.813.635.936.05.975.75.885.96.215.545.965.835.565.892.732.82.7