保健食品中泛酸鈣的測(cè)定 編制說明

《保健食品中泛酸的測(cè)定》意見稿）編制說明征求一、工作簡(jiǎn)況GB/T22246-2008《保健食食品原料目錄營(yíng)養(yǎng)素補(bǔ)充劑（2023年版二、國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)編制原則、主要內(nèi)容及其確定依據(jù)理化檢測(cè)》、GB/T27417-2017通過比較實(shí)驗(yàn)確定采用泛酸鈣為標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)可以準(zhǔn)確測(cè)定泛酸鈉中泛標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制中增加了泛酸鈣濃度換算成泛酸濃度的換算系），泛酸標(biāo)準(zhǔn)工作溶液：分別準(zhǔn)確吸取泛酸標(biāo)準(zhǔn)中間液1.01）試樣制備：近年保健食品的劑型不斷增加，根據(jù)市場(chǎng)調(diào)查，了前處理方法：軟膠囊和硬膠囊：取不少于20粒或不低于5g樣品，），）：用淀粉酶和蛋白酶酶解可以有效去除這2類大分子的影響，提取試劑未選擇酶解法。而采用調(diào)節(jié)pH至蛋白質(zhì)等電點(diǎn)并結(jié)合硫酸鋅溶液沉mol/L氫氧化鈉或0.1mol/L氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH至5.0±0.1，加刻度并充分混勻后，轉(zhuǎn)入離心管，8000r/min離心2min，取上清液方法增加了色譜檢測(cè)的進(jìn)樣量，將線性范圍修訂為：1μg/mL~32增加“注：必要時(shí)，試樣測(cè)定液用水進(jìn)行適當(dāng)稀釋（f使試樣濃1）與原標(biāo)準(zhǔn)相比，由于泛酸的含量相對(duì)宏量營(yíng)養(yǎng)素含量較低，且主要的添加量均不及1g/100g，因此將泛酸的含量單位修訂為2）原標(biāo)準(zhǔn)中標(biāo)準(zhǔn)溶液配制濃度為泛酸鈣的濃度，但在泛酸含量3）由于試樣前處理過程可能需求進(jìn)行額外的稀釋，故在公式中增加了稀釋倍數(shù)“f”。4）增加了由泛酸含量換算為D-泛酸鈉含量的換XVfm 毫升(μg/mL）；）；f——試樣測(cè)定液稀釋倍數(shù)。）；結(jié)果如以泛酸鈣計(jì)量，應(yīng)乘以1.087，如以泛酸鈉計(jì)量，應(yīng)乘以經(jīng)過實(shí)驗(yàn)確定了方法的檢出限和定量限為當(dāng)稱樣量為1g，定容三、試驗(yàn)驗(yàn)證分析方法線性關(guān)系：以泛酸鈣為定量外標(biāo)，在0.1~6μg/mL濃度范圍內(nèi)，相關(guān)系數(shù)R2大于0.999，線性關(guān)系良好。方法準(zhǔn)確度和精密度：該方法的回收率在97.17%～98.89%范圍區(qū)間，6次平行實(shí)驗(yàn)結(jié)果的RSD%在0.08%～1.49%范圍區(qū)間，說明該方法精確度較好，能夠滿四、預(yù)期經(jīng)濟(jì)社會(huì)效益五、與我國(guó)有關(guān)法律法規(guī)和其他標(biāo)準(zhǔn)的關(guān)系六、國(guó)外有關(guān)法律、法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)情況的說明1粉2Nutritional品七、重大分歧意見的處理經(jīng)過和依據(jù)八、涉及專利的有關(guān)說明九、實(shí)施國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)的要求，以及組織措施、技術(shù)措施、過渡期和實(shí)施日期的建議建議標(biāo)準(zhǔn)實(shí)施前有6個(gè)月以上的宣貫培訓(xùn)期、緩沖期和過渡準(zhǔn)備十、其他應(yīng)當(dāng)說明的事項(xiàng)附件1、特異性1)泛酸鈉與泛酸鈣的比對(duì)比較了泛酸鈉單獨(dú)進(jìn)樣，泛酸鈣單獨(dú)進(jìn)樣、泛酸鈉泛酸鈣等比例混進(jìn)樣3種進(jìn)樣模式，結(jié)果顯示，三種進(jìn)樣出峰時(shí)間一致，混合進(jìn)樣也未出現(xiàn)干擾峰。泛酸鈣和泛酸鈉在流動(dòng)相的作用下均轉(zhuǎn)化為泛酸，故而出峰一致。圖1三種標(biāo)準(zhǔn)溶液色譜圖對(duì)比為比較泛酸鈣和泛酸鈉的色譜響應(yīng)，按照標(biāo)準(zhǔn)中規(guī)定的標(biāo)準(zhǔn)曲線配制方案，分別配制泛酸鈣標(biāo)準(zhǔn)曲線、泛酸鈉標(biāo)準(zhǔn)曲線和等比例混合標(biāo)準(zhǔn)曲線，結(jié)果見表2,經(jīng)單因素方差分析，斜率無顯著差異，證明泛酸鈣、泛酸鈉以及等比例混合標(biāo)準(zhǔn)溶液響應(yīng)值無顯著差異。泛酸鈣表2三種標(biāo)準(zhǔn)曲線色譜檢測(cè)結(jié)果峰面積峰面積2)檢測(cè)方法的特異性針對(duì)軟膠囊試樣，比較了不去除雜質(zhì)、調(diào)節(jié)pH=5.0加硫酸鋅溶液沉淀雜質(zhì)和加入淀粉酶酶解后調(diào)節(jié)pH=5.0加硫酸鋅溶液沉淀雜質(zhì)三種前處理方法。結(jié)果見圖3。結(jié)果顯示淀粉酶酶解會(huì)造成基線動(dòng)，其余2種方法不會(huì)對(duì)上機(jī)造成影響。針對(duì)片劑也進(jìn)行了以上三種除雜的方法，結(jié)果見圖4,淀粉酶酶解會(huì)造成基線波動(dòng)，其余兩種不干擾泛酸測(cè)定，但如不去除雜質(zhì)，提取液經(jīng)0.45微米濾膜過濾后，并不能完成澄清。鋅溶液沉淀雜質(zhì)22不去除雜質(zhì)圖4片劑三種前處理方法的比較針對(duì)凝膠糖果也采用了以上三種前處理方法，結(jié)果見表5,結(jié)果與片劑相同。加入淀粉酶酶解后加入淀粉酶酶解后鋅溶液沉淀雜質(zhì)2碎溶液沉淀雜質(zhì)2aa不去除雜質(zhì)泛酸泛酸圖5凝膠糖果三種前處理方法的比較202bo32酸鋅溶液沉淀雜質(zhì)。結(jié)果見圖7,不進(jìn)行除雜無法過濾，不能上機(jī)測(cè)定，蛋白酶酶解后基線干擾嚴(yán)重，調(diào)節(jié)pH=5.0加硫酸鋅溶液沉淀雜錄錄2圖7蛋白粉三種前處理方法的比較測(cè)定：采用估算定量限濃度水平的有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)/標(biāo)準(zhǔn)樣度(%)率(%)RSD%1248樣品名稱本底值添加水平mg/100g實(shí)測(cè)值mg/100g回收率(%)平均回收率(%)相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD%固體飲料未檢出5.05.185.194.8496.85.045.265.235049.398.696.349.098.147.595.048.396.747.795.546.993.896.795.70.896.595.594.695.295.6軟膠囊未檢出5.04.9599.098.74.34.9799.44.6192.24.8196.15.075.225046.292.392.80.746.893.646.793.446.392.646.492.746.092.196.294.90.895.295.394.294.094.7蛋白粉未檢出5.04.8096.13.84.8296.45.035.255.105.225048.496.997.20.348.897.648.496.948.697.248.597.148.897.599.097.498.896.496.197.097.3片劑3.5158.8199.88.3596.78.508.0590.78.778.5352.397.63.252.898.653.299.455.355.456.198.798.997.497.699.4凝膠糖果未檢出5.05.352.95.245.465.495.465.095050.40.650.150.650.750.750.099.50.799.799.7編