抗生素的分離

第二節(jié)抗生素的分離磚頭1分離抗生素產(chǎn)品時(shí)應(yīng)注意的幾個(gè)問(wèn)題

從發(fā)酵液中提取抗生素時(shí)，通常要注意以下幾個(gè)問(wèn)題：1)發(fā)酵液的組成成分非常復(fù)雜，有數(shù)百種甚至更多，各種化合物的形狀、大小、相對(duì)分子質(zhì)量和理化性質(zhì)都各不相同，有的迄今還是未知物，而且這些化合物在分離時(shí)仍在不斷的代謝變化中。2)在發(fā)酵液中，有些抗生素含量很低或極微，有的只有1/10000，甚至更少。制備時(shí)，原材料用量很大，得到產(chǎn)品很少，與投料量相比“虎頭蛇尾”。23)許多抗生素，一旦離開了生物體內(nèi)環(huán)境，很易變性和被破壞，應(yīng)十分注意保護(hù)這些化合物的生物活性，常選擇十分溫和的條件，盡可能在較低溫度和潔凈環(huán)境中進(jìn)行。一般來(lái)說(shuō)制備的操作時(shí)間長(zhǎng)、手續(xù)較繁瑣。因?yàn)樵S多大分子在分離過(guò)程中，過(guò)酸、過(guò)堿、重金屬離子、高溫、劇烈的機(jī)械作用、強(qiáng)烈的輻射和機(jī)體內(nèi)自身酶的作用，均可破壞這些分子的結(jié)構(gòu)或生理活性。4)抗生素的分離制備過(guò)程幾乎都在溶液中進(jìn)行，各種溫度、pH、離子強(qiáng)度等參數(shù)，對(duì)溶液中各種組成的綜合影響，常常無(wú)法固定，有些實(shí)驗(yàn)或工藝的設(shè)計(jì)理論性不強(qiáng)，常帶有很大的經(jīng)驗(yàn)成分。因此，要建立重復(fù)性好的成熟工藝，對(duì)生物材料、各種試劑及其輔助材料等都要嚴(yán)格地加以規(guī)定。3常用的的抗生素提取方法包括溶劑萃取法離子交換沉淀法膜分離法吸附法4

菌體細(xì)胞的分離固體懸浮物的去除蛋白質(zhì)的去除重金屬離子的去除色素、熱原質(zhì)、毒性物質(zhì)等有機(jī)物質(zhì)的去除改善培養(yǎng)液的處理性能調(diào)節(jié)適宜的PH和溫度

培養(yǎng)液預(yù)處理的主要內(nèi)容5

加熱由于加熱可能使某些熱敏感性蛋白發(fā)生不可逆的變性，因此這種預(yù)處理方法僅適用于對(duì)非熱敏感性產(chǎn)品發(fā)酵液的預(yù)處理。適當(dāng)加熱之后，發(fā)酵液中的蛋白由于變性而凝聚，形成較大的顆粒，發(fā)酵液的粘度就會(huì)降低，一般加熱的用65-80度。調(diào)節(jié)PH值適當(dāng)?shù)腜H值可以提高產(chǎn)物的穩(wěn)定性，減少其在隨后的分離純化過(guò)程中的損失。此外，發(fā)酵液PH值的改變會(huì)影響發(fā)酵液中某些成分的電離程度，從而降低發(fā)酵液的粘度。在調(diào)節(jié)PH值時(shí)要注意選擇比較溫和的酸和堿，以防止局部過(guò)酸或過(guò)堿。草酸是一種較常用的PH值調(diào)節(jié)劑。加入絮凝劑通常情況下，細(xì)菌的表面都帶有負(fù)電荷，可以在發(fā)酵液中加入帶正電荷的絮凝劑，從而使菌體細(xì)胞與絮凝劑結(jié)合形成絮狀沉淀，降低發(fā)酵液的上粘度，利于菌體的收獲。培養(yǎng)液的固液分離方法分離前的處理6雜質(zhì)溶質(zhì)原溶劑萃取劑LightphaseHeavyphase溶液萃取過(guò)程溶劑萃取法提取抗生素7反萃取在溶劑萃取分離過(guò)程中，當(dāng)完成萃取操作后，為進(jìn)一步純化目標(biāo)產(chǎn)物或便于下一步分離操作的實(shí)施，往往需要將目標(biāo)產(chǎn)物轉(zhuǎn)移到水相。這種調(diào)節(jié)水相條件，將目標(biāo)產(chǎn)物從有機(jī)相轉(zhuǎn)入水相的操作就稱為反萃取（Backextraction)8萃取方式