2010級(jí)臨本9班免疫試驗(yàn)設(shè)計(jì)_第1頁(yè)
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補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)一實(shí)驗(yàn)?zāi)康恼莆沼妹庖呷苎獧C(jī)制做指示系統(tǒng),來(lái)檢測(cè)另一反應(yīng)系統(tǒng)抗原或抗體的試驗(yàn)的原理及操作。二實(shí)驗(yàn)原理該試驗(yàn)中有5種成分參與反應(yīng),分屬于3個(gè)系統(tǒng):①反應(yīng)系統(tǒng),即已知的抗原(或抗體)與待測(cè)的抗體(或抗原);②補(bǔ)體系統(tǒng);③指示系統(tǒng),即綿羊紅細(xì)胞與相應(yīng)溶血素,試驗(yàn)時(shí)常將其預(yù)先結(jié)合在一起,形成致敏紅細(xì)胞。反應(yīng)系統(tǒng)與指示系統(tǒng)爭(zhēng)奪補(bǔ)體系統(tǒng),先加入反應(yīng)系統(tǒng)給其以優(yōu)先結(jié)合補(bǔ)體的機(jī)會(huì)。如果反應(yīng)系統(tǒng)中存在待測(cè)的抗體(或抗原),則抗原抗體發(fā)生反應(yīng)后可結(jié)合補(bǔ)體;再加入指示系統(tǒng)時(shí),由于反應(yīng)液中已沒有游離的補(bǔ)體而不出現(xiàn)溶血,是為補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陽(yáng)性。如果反應(yīng)系統(tǒng)中不存在的待檢的抗體(或抗原),則在液體中仍有游離的補(bǔ)體存在,當(dāng)加入指示系統(tǒng)時(shí)會(huì)出現(xiàn)溶血,是為補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)陰性(圖1)。因此補(bǔ)體結(jié)合試驗(yàn)可用已知抗原來(lái)檢測(cè)相應(yīng)抗體,或用已知抗體來(lái)檢測(cè)相應(yīng)抗原。三實(shí)驗(yàn)材料待測(cè)血清(破壞補(bǔ)體和除去一些非特異因素)、抗原、抗體、溶血素、羊紅細(xì)胞、補(bǔ)體、試管、微量加樣槍。四試驗(yàn)方法設(shè)定陽(yáng)性對(duì)照組、陰性對(duì)照組和待測(cè)組。向三組試管中先分別依次加入0.2ml補(bǔ)體、0.1ml抗原。添加0.1ml抗體于陽(yáng)性對(duì)照管,加0.1ml血清于待測(cè)組。分別向三組試管添加0.1ml溶血素,0.2ml羊紅細(xì)胞?;靹颍?7℃30min后觀察結(jié)果。五預(yù)期結(jié)果陽(yáng)性對(duì)照管不發(fā)生溶血,陰性對(duì)照管發(fā)生溶血。若待測(cè)組發(fā)生溶血,則不含與相應(yīng)抗原對(duì)應(yīng)的抗體;若不發(fā)生溶血,則含與相應(yīng)抗原對(duì)應(yīng)的抗體。六討論補(bǔ)體的生物學(xué)意義。設(shè)計(jì)者:李媛媛5110001386李兆瑋5110001387李茜5110001384李婷婷5110001385李磊5110001413

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