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華南師范大學實驗報告學生姓名學號專業(yè)生物科學年級、班級課程名稱生理學實驗實驗項目實驗類型□驗證□設計□綜合實驗時間2012年5月28日實驗指導老師胡學軍實驗評分家兔尿生成的影響因素及與血壓的關系一、實驗目的1、學習輸尿管插管技術。2、觀察血漿膠體滲透壓、血糖濃度、腎小球毛細血管壓變化對尿生成的影響。3、觀察影響腎小管重吸收藥物對尿生成的影響。二、實驗對象與材料家兔、生理鹽水、20%葡萄糖注射液、肝素、1∶10,000去甲腎上腺素、垂體后葉素、20%甘露醇、Na2SO4、戊巴比妥鈉、微型計算機及生物信號采集與處理系統(tǒng)、保護電極、兔手術臺和手術器械、動脈插管、動脈夾、注射器、酒、輸液裝置、手術燈、絲線等。三、實驗步驟1、麻醉家兔并進行頸部手術,插入氣管插管、分離迷走神經(jīng)并穿線備用。2、恥骨聯(lián)合前方剪開腹部,進行輸尿管插管手術。3、開啟計算機采集系統(tǒng),記錄尿滴情況。4、實驗觀察,待尿流量穩(wěn)定后,進行以下實驗。(1)記錄正常尿滴曲線。(2)耳緣靜脈注射溫熱生理鹽水30ml,觀察尿量的變化。(3)耳緣靜脈注射腎上腺素0.5ml,觀察尿量的變化。(4)耳緣靜脈注射20%葡萄糖15ml,觀察尿量的變化。(5)耳緣靜脈注射10%Na2SO44ml,觀察尿量的變化。(6)耳緣靜脈注射垂體后葉素2單位,觀察尿量的變化。(7)結(jié)扎并剪斷右側(cè)頸迷走神經(jīng),用中等強度的連續(xù)脈沖刺激其外周端20~30s,觀察變化。四、實驗結(jié)果1、正常情況下尿液的生產(chǎn)情況圖1正常情況下尿液的生產(chǎn)情況正常情況下,家兔無尿液生成或生成少而慢。2、注入30ml生理鹽水后尿液的生成情況圖2注入30ml生理鹽水后尿液的生成情況靜脈快速注射30ml生理鹽水可使家兔尿量少量增加3、注入0.3ml腎上腺素后尿液的生成情況圖3注入0.3ml腎上腺素后尿液的生成情況靜脈快速注射0.3ml腎上腺素可使家兔尿量減少4、注射葡萄糖后的尿生成情況圖3注入15ml20%的葡萄糖后尿液的生成情況靜脈快速注射15ml20%的葡萄糖可使家兔尿量顯著增加5、注入0.33mL垂體后葉素后尿液的生成情況圖5注入0.33mL垂體前葉素后尿液的生成變化情況靜脈快速注射0.33mL垂體后葉素可使家兔尿量顯著減少6、注入3mLNa2SO4后尿液的生成情況圖6注入3mLNa2SO4后尿液的生成情況靜脈快速注射3mLNa2SO4可使家兔尿量顯著增加7、注入6mL甘露醇后尿液的生成情況圖7注入6mL甘露醇后尿液的生成情況靜脈快速注射6mL甘露醇可使家兔尿量顯著增加8、刺激迷走神經(jīng)后尿液的生成情況圖8刺激迷走神經(jīng)后尿液的生成情況刺激家兔迷走神經(jīng)后尿液的生成量減少五、實驗分析 尿的生成過程包括:腎小球的濾過作用;腎小管與集合管的重吸收作用;腎小管與集合管的分泌作用。這三個過程往往受到生理性的調(diào)節(jié)。凡是影響這些過程的因素,都可影響尿的生成而影響尿量的改變。1、正常情況下,家兔無尿液生成或生成少而慢,如圖1。可能是因為實驗前家兔飲水比較少,抗利尿激素由下丘腦視上核、室旁核的神經(jīng)元合成,經(jīng)下丘腦-垂體束運送到神經(jīng)垂體貯存、釋放。抗利尿激素的主要作用是提高遠曲小管和集合管上皮細胞對水的通透性,從而增加對水的重吸收,使尿液濃縮,尿量減少。2、靜脈快速注射生理鹽水后,尿量增加,如圖2。原因是靜脈快速注入大量生理鹽水,血漿蛋白被稀釋,血漿膠體滲透壓下降,腎小球有效濾過壓增加,而且腎小球血漿流量也增加,尿液生成增加。另外循環(huán)血量的增加可刺激容量感受器,血壓升高可刺激壓力感受器,反射性的抑制抗利尿激素的分泌和釋放,使水的重吸收減少,尿量增多。3、靜脈注射腎上腺素可使血壓升高,尿量減少,如圖3,。原因是腎上腺素可興奮血管平滑肌上的α-腎上腺素能受體,引起血管收縮,外周阻力增加,從而導致血壓上升。去甲腎上腺素可使入球小動脈和出球小動脈收縮,但前者收縮比后者更明顯,使腎小球毛細血管血漿流量減少,腎小球毛細血管血壓下降,腎小球的有效濾過壓下降,尿生成減少。4、靜脈注射20ml葡萄糖,尿量增加,如圖4。原因是近球小管對葡萄糖的重吸收有一定限度,稱為腎糖閾(160~180mg/ml)。實驗中葡萄糖的注射量已經(jīng)超過腎小管的吸收極限,腎小管液中就會有葡萄糖,進而腎小管液的溶質(zhì)濃度增加,滲透壓增加,妨礙了腎小管特別是近球小管對水和氯化鈉的重吸收,氯化鈉及水的排出均增加,尿量增加。5、注射垂體后葉素可使家兔尿量減少,如圖5。原因是垂體后葉素包括催產(chǎn)素和抗利尿激素,抗利尿激素可與遠曲小管和集合管上皮細胞管周膜上的V2受體結(jié)合,通過興奮性G蛋白激活腺苷酸環(huán)化酶,使胞內(nèi)cAMP生成增多,最終增加管腔膜上的水通道,從而提高遠曲小管和集合管上皮對水的通透性,增加水的重吸收而使尿量減少。6、注射Na2SO4后家兔尿量顯著增加,如圖6。原因是Na2SO4可作為尿蛋白沉析劑與尿蛋白相互作用而沉析,不能被腎小管重吸收,因此提高了腎小管液中溶質(zhì)濃度,從而使腎臟濃縮尿液的能力下降,導致水重吸收減少,尿量增加。7、靜脈快速注射6mL甘露醇可使家兔尿量顯著增加,如圖7。原因是甘露醇是單糖,在體內(nèi)很少被分解,使得血液滲透壓提高,組織中的水分進入血液,甘露醇從腎小球濾過時,在腎小管中不易重被吸收,使腎小管中的原尿的滲透壓增高,帶出大量的水分而起到利尿作用。8、電刺激迷走神經(jīng)末梢端可使家兔尿量減少,如圖8。刺激迷走神經(jīng)外周端,引起心臟活動抑制,導致心輸出量的減少,導致全身動脈血壓的下降,當全身血壓超過腎血流量自身調(diào)節(jié)的范圍時,引起腎小球有效濾過壓下降,最后引起尿量的減少。另外血壓降低,對頸動脈竇壓力感受器的刺激減弱,經(jīng)迷走神經(jīng)傳入中樞的沖動減少,反射性地使抗利尿激素分泌和釋放增多,水重吸收增多,尿量減少。六、實驗結(jié)論正常情況下,家兔尿液生成少而慢。靜脈快速注射30ml生理鹽水,家兔尿量少量增加。靜脈快速注射0.3ml

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