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自來水中細(xì)菌總數(shù)的測定系別:專業(yè):班級:姓名學(xué)號:指導(dǎo)老師:自來水中細(xì)菌總數(shù)的測定(生物系學(xué)號:指導(dǎo)老師:)摘要水中細(xì)菌總數(shù)測定是測定水中需氧菌、兼性厭氧菌和異養(yǎng)菌的總數(shù)。水中細(xì)菌總數(shù)可作為判定被檢水樣被有機(jī)物污染程度的標(biāo)志,細(xì)菌數(shù)量越多,則水中有機(jī)質(zhì)含量越大。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用平板計數(shù)技術(shù)測定水中細(xì)菌總數(shù)。以1ml水樣在營養(yǎng)瓊脂培養(yǎng)基中,于37℃培養(yǎng)24h后所生長的細(xì)菌菌落的總數(shù),作為水體受細(xì)菌污染程度的標(biāo)志,我國規(guī)定1ml自來水中細(xì)菌總數(shù)不得超過100個。關(guān)鍵詞水中細(xì)菌總數(shù)牛肉膏蛋白胨瓊脂培養(yǎng)基引言水是生命之源,人的生存離不開水環(huán)境。水源日漸被生活污水和工業(yè)廢水所污染。水質(zhì)的好壞對人們的生活起著至關(guān)重要的作用,直接影響人們的身體健康。水是微生物廣泛分布的天然環(huán)境。各種天然水中常含有一定數(shù)量的微生物。水中細(xì)菌總數(shù)越多則水被污染越重。因此測定細(xì)菌在水中的數(shù)目就尤為重要。1.材料與方法1.1實(shí)驗(yàn)材料牛肉膏天平電磁爐培養(yǎng)箱燒杯玻璃棒滅菌三角瓶滅菌培養(yǎng)皿滅菌吸管溫度計高壓蒸汽滅菌鍋1.2實(shí)驗(yàn)方法1.2.1稱取牛肉膏蛋白胨粉4.8g于燒杯中,倒入100ml水在微波爐上加熱,加熱煮沸至少持續(xù)5min。冷卻至45—50℃傾注平板。1.2.2自來水:先將自來水龍頭用酒精燈火焰灼燒滅菌,再開放水龍頭使水流5min,以滅菌三角瓶接取水樣以備分析1.2.3實(shí)驗(yàn)組:用滅菌吸管吸取水樣1ml,注入滅菌培養(yǎng)皿中。共做2個平皿。分別傾注冷卻至45℃左右的培養(yǎng)基于培養(yǎng)皿中約1/3-2/3高度,在平整的桌面上作平面旋轉(zhuǎn)搖動,使樣與培養(yǎng)基充分混勻。空白組:不加水樣,傾注培養(yǎng)基于培養(yǎng)皿中約1/3-2/3高度1.2.4待培養(yǎng)基凝固后,倒置于37℃培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h,進(jìn)行菌落計數(shù)。1.2.5兩個實(shí)驗(yàn)組的菌落數(shù)減去空白組的菌落數(shù)的和除以2得到兩個平板的平均菌落數(shù),即為1ml水樣的細(xì)菌總數(shù)。2結(jié)果及分析2.1實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1實(shí)驗(yàn)結(jié)果平板菌落數(shù)1ml自來水中細(xì)菌總數(shù)空白組3148實(shí)驗(yàn)組172實(shí)驗(yàn)組2862.2數(shù)據(jù)分析由表可知,實(shí)驗(yàn)室中1ml自來水的菌落總數(shù)在我國自來水衛(wèi)生指標(biāo)的范圍內(nèi),故自來水合格。一般情況下,實(shí)驗(yàn)結(jié)果在60到100個屬正常,而本實(shí)驗(yàn)結(jié)果低于60個每毫升,細(xì)菌數(shù)過少。造成這種結(jié)果可能是培養(yǎng)基溫度過高就倒平板導(dǎo)致細(xì)菌被燙傷或燙死影響其生長和平板上細(xì)菌分布情況(如菌苔等)導(dǎo)致計數(shù)時的主觀誤差。3討論實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明,我校自來水符合我國自來水標(biāo)準(zhǔn)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果受三方面影響,一是自來水本身水質(zhì)影響,二是實(shí)驗(yàn)誤差的影響。水中細(xì)菌種類繁多,它們對營養(yǎng)和其他生長條件的差別很大,不可能找到一種培養(yǎng)基在一種條件下,使水中細(xì)菌均能生長繁殖,因此計算出來的水中細(xì)菌總數(shù)僅是近似值。本實(shí)驗(yàn)除采用菌落計數(shù)測定細(xì)菌總數(shù)外,現(xiàn)在已有許多快捷迅速簡便的微生物檢測儀等也用來測定細(xì)菌總數(shù)。在實(shí)驗(yàn)中需注意:倒掉滅菌培養(yǎng)皿中的冷凝水,在此過程中盡量少在空氣中暴露。水樣即取即用。倒平板時要用溫度計測定培養(yǎng)基溫度,防止溫度過高,燙傷或燙死細(xì)菌,又有防止溫度過低培養(yǎng)基凝固,不易倒平板。倒平板時平面旋轉(zhuǎn)不要過快,倒平板時間不要過長,倒完一個立刻用另一個滅菌培養(yǎng)皿蓋住。確保培養(yǎng)基完全凝固后將其倒置放入培養(yǎng)箱中。計數(shù)時。到達(dá)規(guī)定培養(yǎng)時間,應(yīng)立即計數(shù)。計數(shù)時難免存在誤差,必要時用放大鏡檢查以防遺漏。平板出現(xiàn)的效果:細(xì)菌菌落過少、細(xì)菌菌落分散均勻易于計數(shù)、細(xì)菌菌落聚集成片狀,培養(yǎng)基被霉菌污染。菌落過少,可能是培養(yǎng)基溫度過高導(dǎo)致,燙傷或燙死細(xì)菌。菌落聚集成片狀是倒平板時水樣沒有與培養(yǎng)基充分混勻所致。細(xì)菌太多鋪滿整個培養(yǎng)基可能是水樣取太早,倒平板不熟練等使其暴露空氣中時間過長,空氣中細(xì)菌落入。4結(jié)論水孕育了生命,使地球上的一切都生機(jī)勃勃。而隨著人類發(fā)展的需要,
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