獸醫(yī)微生物學(xué) 第十三章 革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽孢桿菌

第十三章

革蘭氏陽(yáng)性無(wú)芽胞桿菌第一節(jié)李氏桿菌屬

（Listeria）本屬細(xì)菌的共同特性:G＋、無(wú)芽胞、無(wú)莢膜；20~25℃能運(yùn)動(dòng)、37℃不運(yùn)動(dòng)；需氧或兼性厭氧。2本屬分為2群共7個(gè)種第一群第二群產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌L.monocytogenes伊氏李氏桿菌L.ivanovii無(wú)害李氏桿菌L.innocua韋氏李氏桿菌L.welshimeri塞氏李氏桿菌L.seeligeri格氏李氏桿菌L.grayi莫氏李氏桿菌L.murrayi3其中產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌在動(dòng)物疾病中較為重要第一群第二群產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌L.monocytogenes伊氏李氏桿菌L.ivanovii無(wú)害李氏桿菌L.innocua韋氏李氏桿菌L.welshimeri塞氏李氏桿菌L.seeligeri格氏李氏桿菌L.grayi莫氏李氏桿菌L.murrayi4

產(chǎn)單核細(xì)胞李氏桿菌也稱為單核細(xì)胞增多性李氏桿菌。家畜、家禽均可感染，鼠類是主要帶菌者。病畜表現(xiàn)神經(jīng)癥狀、妊畜流產(chǎn)、血液中單核細(xì)胞增多。5本病為散發(fā)性，一般只有少數(shù)發(fā)病，但病死率較高。傳染途徑：消化道、呼吸道、眼結(jié)膜以及皮膚破傷。飼料和水可能是主要的傳染媒介。6一、形態(tài)與染色1、G+

，兩端鈍圓的短小桿菌，單在、呈Ｖ字排列、或成從排列；72、無(wú)芽胞、無(wú)莢膜，3、20~25℃：4根周身鞭毛；

37℃：一般不產(chǎn)生鞭毛，或產(chǎn)生1根鞭毛。4、R型菌多為長(zhǎng)絲狀。8二、培養(yǎng)特性1、兼性厭O2，營(yíng)養(yǎng)不高；對(duì)食鹽耐受力很強(qiáng)。

4

℃耐鹽高達(dá)30.5%。2、血液葡萄糖瓊脂：圓形、光滑、淡藍(lán)色、透明、露滴狀菌落，狹窄β溶血，有菌落下溶血。3、4

℃可生長(zhǎng)

—故稱“冰箱菌”，生長(zhǎng)溫度1-45℃，最適溫度30-37℃.9三、抵抗力抵抗力一般，耐堿不耐酸。55℃濕熱40min、常用消毒藥5～10min可殺死該菌?？垢稍锬芰?qiáng)，在干糞中能存活兩年以上。10四、抗原性與多種細(xì)菌有共同Ag，血清學(xué)診斷無(wú)意義。11五、致病性1.本菌為兼性胞內(nèi)寄生菌，可穿越宿主的腸道屏障、血腦屏障和血胎屏障。2.可自然感染多種家畜：豬、馬、牛、綿羊。3.病畜表現(xiàn)神經(jīng)癥狀、妊畜流產(chǎn)、血液中單核細(xì)胞增多。4.雞可全身感染，心肌壞死。5.成人腦膜炎，新生兒腦膜炎。12六、微生物學(xué)肝、脾、腦組織等涂片、革蘭氏染色、鏡檢，可見(jiàn)G＋的呈Ｖ字排列的小桿菌；病料乳劑接種在血液葡萄糖瓊脂，可長(zhǎng)出露滴狀菌落，β溶血；病料眼內(nèi)接種家兔或豚鼠，1天后發(fā)生結(jié)膜炎，不久就發(fā)生敗血癥死亡；妊娠2周的動(dòng)物被接種后可發(fā)生流產(chǎn)。13第二節(jié)

丹毒桿菌屬

（Erysipelothrix）本屬有3個(gè)種，致病的只包括1個(gè)種：豬丹毒絲菌。也稱為“豬丹毒桿菌”、“豬丹毒絲狀桿菌”；是豬丹毒的病原體，也可引起人的“類丹毒”。1415一、形態(tài)染色G+細(xì)長(zhǎng)小桿菌，0.2-0.4μm~0.5-2.5μm;無(wú)鞭毛，無(wú)芽胞，無(wú)莢膜；有形成長(zhǎng)絲的趨勢(shì)（陳舊培養(yǎng)物和慢性病豬的心內(nèi)膜增生組織）。肝臟涂片心內(nèi)膜增生組織涂片16豬丹毒桿菌為G+纖細(xì)小桿菌，

常單在、V型成對(duì)或成叢排列1718二、培養(yǎng)與生化特性

本菌為微需氧菌。pH在6.7～9.2范圍內(nèi)均可生長(zhǎng)，最適pH為7.2～7.6，生長(zhǎng)溫度為5~42℃，最適溫度為30～37℃。在普通瓊脂培養(yǎng)基和普通肉湯中生長(zhǎng)不良，如加入0.2%～0.5%葡萄糖或5%～10%血液、血清則生長(zhǎng)茂盛；在血瓊脂平皿上經(jīng)37℃24h培養(yǎng)可形成濕潤(rùn)、光滑、透明、灰白色、露珠樣的圓形小菌落，并形成α溶血環(huán)。在麥康凱培養(yǎng)基不生長(zhǎng)。在肉湯中呈輕度渾濁，有少量白色黏稠沉淀。不形成菌膜和菌環(huán)。19在加有5%馬血清和1%蛋白胨水的糖培養(yǎng)基中可發(fā)酵葡萄糖、果糖和乳糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣；不發(fā)酵甘露醇、山梨醇、肌醇、水楊素、鼠李糖、蔗糖、漁藻糖、棉實(shí)糖、菊糖。產(chǎn)生H2S，不產(chǎn)生靛基質(zhì)和接觸酶，不分解尿素。甲基紅及VP試驗(yàn)陰性。明膠穿刺生長(zhǎng)特殊，沿穿刺線橫向四周生長(zhǎng)，如試管刷狀，但明膠不液化。20三、抵抗力

本菌對(duì)腐敗和干燥環(huán)境有較強(qiáng)的抵抗力。在飲水中可存活5d，在污水中可存活15d，在深埋的尸體中可存活9個(gè)月。在病死豬熏制的火腿中3個(gè)月后仍可在深部分離出活菌。對(duì)熱和直射光較敏感，70℃經(jīng)5～15min可完全殺死。對(duì)常用消毒劑抵抗力不強(qiáng)，0.5%甲醛數(shù)十分鐘可殺死。用10%生石灰乳或0.1%過(guò)氧乙酸涂刷墻壁和噴灑豬圈是目前較好的消毒方法。本菌可耐0.2%的苯酚，對(duì)青霉素很敏感。21四、抗原結(jié)構(gòu)與血清型

本菌最初被分為A、B、N型。現(xiàn)通用阿拉伯?dāng)?shù)字為型號(hào)，用英文小寫字母表示亞型，目前共有25個(gè)血清型和1a、1b及2a、2b亞型。分型是依據(jù)菌體可溶性的耐熱肽聚糖的抗原性。大多數(shù)菌株為1型和2型(相當(dāng)于以前的A型和B型)，從急性敗血癥分離的菌株多為la型，從亞急性及慢性病病例分離的則多為2型。22五、致病機(jī)理與致病性

本菌通過(guò)消化道感染，進(jìn)入血流，而后定殖在局部或引致全身感染。已知無(wú)致病力菌株對(duì)消化道上皮細(xì)胞黏附力差，且易被吞噬細(xì)胞消化。但致病菌株的黏附素及抗吞噬物質(zhì)尚不清楚。23

末發(fā)現(xiàn)外毒素，有些菌株產(chǎn)生的透明質(zhì)酸酶和唾液酸酶，后者可降解宿主細(xì)胞表面的唾液酸，有助于細(xì)菌入侵。感染動(dòng)物能產(chǎn)生唾液酸酶抗體，已證實(shí)實(shí)驗(yàn)動(dòng)物通過(guò)對(duì)該酶的主動(dòng)或被動(dòng)免疫可獲得保護(hù)。

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經(jīng)損傷的皮膚和消化道感染，也可經(jīng)吸血昆蟲傳播。以豬多發(fā)，叫豬丹毒；其次是禽類，稱禽丹毒；羊丹毒又稱藥浴跛；人感染則稱類丹毒（與鏈球菌所致的丹毒相區(qū)別）；實(shí)驗(yàn)動(dòng)物：鴿子、小鼠（接種后2~5天死亡）。25豬丹毒

急性敗血癥：體溫升高，42℃，體表皮膚發(fā)紅(紫斑)，突然死亡，病程一般為3-4天，病死率達(dá)80%。亞急性疹塊型：體表皮膚出現(xiàn)疹塊（指壓褪色），疹塊稍突出于皮膚表面.

通常稱為“鬼打印”。慢性型：A.關(guān)節(jié)炎型，關(guān)節(jié)腫大、變形、纖維素性滲出，變成膠凍樣；B.心內(nèi)膜炎，疣狀贅生物。262728293031323334六、微生物學(xué)診斷1、顯微鏡檢查可采取高熱期病豬耳靜脈血作涂片，染色、鏡檢。死后可采取心血及新鮮肝、脾、腎、淋巴結(jié)等制成涂片，革蘭氏染色鏡檢。如發(fā)現(xiàn)少量典型桿菌，可初步確診。如為慢性心內(nèi)膜炎病例，可用心臟瓣膜增生物涂片，鏡檢。羔羊患關(guān)節(jié)炎病時(shí)，可檢查關(guān)節(jié)滑膜囊液。35

分離培養(yǎng)時(shí)可用含有0.2%(W/V)的葡萄糖或5%～10%無(wú)菌馬血清(W/V)的半固體瓊脂培養(yǎng)基。為提高分離率可采用含有1/100萬(wàn)結(jié)晶紫、l/5萬(wàn)疊氮鈉的10%馬血清肉湯及瓊脂平板。也可在馬丁肉湯中加入新霉素(400ug/ml)或萬(wàn)古霉素(70ug/ml)，抑制某些雜菌生長(zhǎng)。2、分離培養(yǎng)36

主要考慮與李氏桿菌鑒別診斷，區(qū)別要點(diǎn)見(jiàn)本章李氏桿菌有關(guān)內(nèi)容?？捎螟澴蛹∪庾⑸渑囵B(yǎng)物，死后取心血和脾臟涂片，染色、鏡檢，并同時(shí)分離細(xì)菌。血清型鑒定時(shí)，將待鑒定菌株的純培養(yǎng)物加入1%甲醛滅活，經(jīng)洗滌、高壓、離心處理后制成沉淀原，與模式菌株的高免血清作瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)。3、細(xì)菌鑒定374、血清學(xué)診斷

可采用生長(zhǎng)凝集試驗(yàn)診斷，是根據(jù)豬丹毒桿菌在生長(zhǎng)繁殖中能與該菌抗血清發(fā)生特異性凝集設(shè)計(jì)的。即在含有抗豬丹毒血清的培養(yǎng)基中接種被檢組織液或純培養(yǎng)物，置37℃培養(yǎng)18

～24h，觀察有無(wú)細(xì)菌凝集。檢測(cè)豬血清時(shí)，不發(fā)病豬凝集價(jià)在1:20以下，發(fā)病或有免疫力的豬凝集價(jià)在1:320以上。如檢測(cè)患豬組織或分離的待檢菌，有凝集者即判為陽(yáng)性。38免疫與治療

本菌具有良好的免疫原性，目前我國(guó)應(yīng)用豬丹毒GC42或C4T(l0)弱毒菌株制成的凍干苗，用20%鋁膠生理鹽水稀釋后，在仔豬斷奶后接種5～7億活菌，有良好的免疫力。若用GC42加倍口服也有效。應(yīng)用滅活苗也有較好的保護(hù)效果。39

世界衛(wèi)生組織提出的豬丹毒滅活苗的標(biāo)準(zhǔn)為：以干燥菌