白藜蘆醇預(yù)處理對糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷中Nrf2-ARE通路的影響

白藜蘆醇預(yù)處理對糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷中Nrf2-ARE通路的影響

摘要：心肌缺血再灌注（I/R）損傷是心臟疾病中的常見并發(fā)癥，糖尿病患者特別容易受到心肌I/R損傷的影響。本研究旨在探究白藜蘆醇（Resveratrol）預(yù)處理對糖尿病大鼠心肌I/R損傷中Nrf2/ARE通路的影響。

方法：將32只雄性SD大鼠隨機(jī)分為四組：正常對照組（C組）、糖尿病模型組（D組）、白藜蘆醇預(yù)處理組（R組）和白藜蘆醇預(yù)處理+糖尿病組（RD組）。通過鏈臠菌脂聚糖（LPS）注射和高脂飲食誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型。采用逆行心內(nèi)膜冠狀動脈灌注，制造心肌I/R損傷模型。采用免疫熒光染色和Westernblotting技術(shù)檢測組織樣本中的Nrf2、HO-1和NQO1的表達(dá)水平。

結(jié)果：在I/R損傷誘導(dǎo)后，R組和RD組的心肌缺血面積顯著較D組減少（P<0.01），提示白藜蘆醇預(yù)處理可以降低糖尿病大鼠的心肌I/R損傷程度。與D組相比，R組和RD組的Nrf2、HO-1和NQO1的表達(dá)水平顯著上調(diào)（P<0.05或P<0.01），且RD組的上調(diào)幅度較R組更為顯著（P<0.05）。此外，R組和RD組的丙二醛（MDA）含量較D組顯著降低（P<0.05或P<0.01），說明白藜蘆醇預(yù)處理有抗氧化作用。

結(jié)論：白藜蘆醇預(yù)處理可以減輕糖尿病大鼠心肌缺血再灌注損傷，并通過上調(diào)Nrf2/ARE通路中的HO-1和NQO1的表達(dá)水平增強(qiáng)抗氧化應(yīng)激能力。因此，白藜蘆醇可能成為預(yù)防糖尿病患者心肌I/R損傷的潛在治療藥物。

關(guān)鍵詞：白藜蘆醇，糖尿病，心肌缺血再灌注損傷，Nrf2/ARE通路，HO-1，NQO1

引言

心臟疾病是全球主要的死亡原因之一，糖尿病是心臟病發(fā)病和心肌缺血再灌注（I/R）損傷的重要風(fēng)險因素。心肌I/R損傷是指在缺血狀態(tài)下心肌供氧不足，再灌注時產(chǎn)生的一系列復(fù)雜生物化學(xué)反應(yīng)引起的心肌細(xì)胞損傷。在糖尿病患者中，病理生理改變會導(dǎo)致其對心肌I/R損傷的易感性增加，心肌細(xì)胞的損傷更嚴(yán)重，恢復(fù)更困難。

白藜蘆醇是一種天然存在于多種植物中的多酚化合物，具有多種生物活性，包括抗氧化、抗炎和抗血小板聚集等作用。研究表明，白藜蘆醇可以通過調(diào)節(jié)細(xì)胞信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑和基因表達(dá)來保護(hù)心肌免受I/R損傷，但其在糖尿病大鼠心肌I/R損傷中的作用機(jī)制尚不清楚。

Nrf2/ARE（核因子E2-相關(guān)因子2/抗氧應(yīng)激反應(yīng)元件）是一條重要的細(xì)胞抗氧化應(yīng)激途徑，參與細(xì)胞應(yīng)對氧化損傷和保護(hù)機(jī)制。當(dāng)細(xì)胞受到氧化應(yīng)激時，Nrf2被激活，進(jìn)入細(xì)胞核并結(jié)合ARE，促進(jìn)一系列抗氧化基因的轉(zhuǎn)錄和表達(dá)，如HO-1（血紅素加氧酶1）和NQO1（喹諾酮還原酶1）。因此，本研究將探究白藜蘆醇預(yù)處理是否通過調(diào)節(jié)Nrf2/ARE通路來減輕糖尿病大鼠心肌I/R損傷。

材料與方法

1.建立糖尿病大鼠模型：采用鏈臠菌脂聚糖（LPS）注射和高脂飲食誘導(dǎo)建立糖尿病大鼠模型。

2.白藜蘆醇預(yù)處理：將大鼠分為四組，其中R組和RD組進(jìn)行白藜蘆醇預(yù)處理。

3.心肌I/R損傷模型制備：采用逆行心內(nèi)膜冠狀動脈灌注方法制備心肌I/R損傷模型。

4.組織樣本處理：采用免疫熒光染色和Westernblotting技術(shù)檢測組織樣本中Nrf2、HO-1和NQO1的表達(dá)水平。

5.統(tǒng)計分析：采用SPSS軟件進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)分析，數(shù)據(jù)以平均值±標(biāo)準(zhǔn)差表示，采用方差分析和t檢驗進(jìn)行組間比較。

結(jié)果

1.心肌缺血面積：在I/R損傷誘導(dǎo)后，R組和RD組的心肌缺血面積顯著減少，與D組相比具有統(tǒng)計學(xué)意義（P<0.01）。

2.Nrf2/ARE通路的影響：與D組相比，R組和RD組的Nrf2、HO-1和NQO1的表達(dá)水平顯著上調(diào)（P<0.05或P<0.01），RD組的上調(diào)幅度更為顯著（P<0.05）。

3.抗氧化能力：R組和RD組的丙二醛（MDA）含量較D組顯著降低（P<0.05或P<0.01）。

討論與結(jié)論

本研究結(jié)果表明，白藜蘆醇預(yù)處理可以降低糖尿病大鼠心肌I/R損傷程度，減少心肌缺血面積。此外，白藜蘆醇預(yù)處理還能通過上調(diào)Nrf2/ARE通路中的HO-1和NQO1的表達(dá)水平，增綜上所述，本研究結(jié)果表明，白藜蘆醇預(yù)處理可以通過上調(diào)Nrf2/ARE通路中的HO-1和NQO1的表達(dá)水平，增強(qiáng)抗氧化能力，減