顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展培訓(xùn)課件

顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展3顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展1.1巢式PCR

（NestedPCR）本法需設(shè)計(jì)引物兩套，對(duì)腦脊液進(jìn)行兩步法基因擴(kuò)增，檢測(cè)其中含量低的病原體。巢式PCR對(duì)革蘭染色、培養(yǎng)或抗原檢測(cè)陰性或不確定時(shí)更有檢測(cè)價(jià)值。4顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展5顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展Takahashi等用巢式PCR檢測(cè)腦脊液中含量甚微的結(jié)核分枝桿菌，較傳統(tǒng)的PCR方法敏感度高出1000～10000倍。Failane等對(duì)疑有BCNI的兒童腦脊液應(yīng)用半巢式PCR檢測(cè)腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌和流感嗜血桿菌，陽(yáng)性和陰性預(yù)測(cè)值均為90%以上。TakahashiT,NakayamaT,TamuraM,etal.Nestedpolymerosechainreactionforassessingtheclinicalcourseoftuberculous.meningitis[J]Neurology,2005,64(10):1789-1793.FailaneL,WagnerM,CheskyM,etal.Simultaneousdetectionofnisseriameningitidis,haemophihtsinfluenzaeandStreptococcussp.bypolymerasechainreactionforthediagnosisofbacterialmeningitis[J].ArqNeuropsiquiatr,2005,63(4):920-924.6顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展1.2熒光定量PCR（Real-TimeQuantitativePCRRT-PCR）RT-PCR是常規(guī)PCR基礎(chǔ)上加入熒光探針，具有準(zhǔn)確性高、重復(fù)性好等特點(diǎn)，已廣泛用于基因表達(dá)、病原體檢測(cè)等領(lǐng)域。應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)細(xì)菌性腦膜炎的病原菌，陽(yáng)性檢出率(39%)顯著高于腦脊液培養(yǎng)(10%)。BrajonG,MandasD,LiciardiM,eta1.Developmentandfieldtestingofareal--timePCRassayforcaprinearthritis-encephaliis-Virus(CAEV)EJ3[J].OpenVirolJ,2012,6(1):82-90．ChibaN,MurayamaSY,MorozumiM,etal.RapiddetectionofeightcausativepathogensforthediagnosisofbacterialmeningitisbyrealtimePCR[J].JInfectChemother,2009,15(2):92-98.7顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展應(yīng)用RT-PCR檢測(cè)腦脊液中肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌和腦膜炎奈瑟菌敏感性和特異性分別達(dá)95.7%和94.3%，且不受抗菌藥物應(yīng)用影響。研究表明，RT-PCR的檢測(cè)周期平均比傳統(tǒng)PCR短24小時(shí)，有助于快速診斷，縮短患者住院時(shí)間并減少住院費(fèi)用。

WuHM,CordeiroSM,HarcourtBH,etal.Accuracyofreal-timePCR,GramstainandcultureforStreptococcuspnemoniae,NeisseriameningitisandHaemoplilusinfluenzaemeningitisdiagnosis[J].BMCinfectionsDiseases,2013,13(4):26-35.DaheeJin,MD,TaeHoonHeo,MD,JungHyeByeon.Analysisofclinicalinformationandreversetranscriptase-polymerasechainreactionforearlydiagnosisofenteroviralmeningitis[J].KoreanJPediatr2015;58(11):446-450.8顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展1.3基于16SrRNA基因序列分析技術(shù)16SrRNA基因核苷酸序列具有高度保守性，存在于所有細(xì)菌的染色體基因組中，其在保守區(qū)之間有9～10個(gè)變異區(qū)，利用16SrRNA可變區(qū)與恒定區(qū)的特性，設(shè)計(jì)細(xì)菌通用引物，能對(duì)臨床分離的任何病原菌進(jìn)行準(zhǔn)確鑒定和定位及不同種屬細(xì)菌的分類，較傳統(tǒng)的細(xì)菌培養(yǎng)有更高敏感性。9顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展應(yīng)用16SrRNA基因擴(kuò)增技術(shù)設(shè)計(jì)快速檢測(cè)顱內(nèi)感染常見病原菌的檢測(cè)方法，能準(zhǔn)確、快速且高效地檢測(cè)腦脊液中病原菌。高通量測(cè)序技術(shù)與16SrRNA基因檢測(cè)相結(jié)合，可以大幅度提高病原體檢測(cè)速度并降低檢測(cè)成本。

AliRezaMoayedi,AbdolazimNejatizadeh,MaryamMohammadian.Accuracyofuniversalpolymerasechainreaction(PCR)fordetectionofbacterialmeningitisamongsuspectedpatients[J].ElectronicPhysician,2015,12:1609-1612.

AicuiLiu,ChaoWang,ZhijuanLiang.High-throughputsequencingof16SrDNAampliconscharacterizesbacterialcompositionincerebrospinalfluidsamplesfrompatientswithpurulentmeningitis[J].DrugDesign,DevelopmentandTherapy2015:94417–442910顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展1.4

基因芯片檢測(cè)技術(shù)：基因芯片技術(shù)是一種快速、高效、高通量的核酸分析技術(shù)，已廣泛用于基因檢測(cè)、藥物或耐藥基因的篩選、疾病相關(guān)基因的診斷、病原微生物感染的鑒定等領(lǐng)域。11顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展侯曉霖等通過NCBI數(shù)據(jù)庫(kù)檢索，篩選了包括腦膜炎奈瑟菌、肺炎鏈球菌、流感嗜血桿菌、金黃色葡萄球菌、大腸埃希菌、表皮葡萄球菌及其他凝固酶陰性葡萄球菌等化膿性腦膜炎常見細(xì)菌的多條16SrRNA序列特異性探針（覆蓋腦膜炎常見病原菌90%的亞種），并根據(jù)臨床流行情況變化進(jìn)行探針增減來滿足臨床需求。侯曉霖,梁志娟,王振海.化膿性腦膜炎腦脊液常見病原菌基因芯片的構(gòu)建[J].中國(guó)醫(yī)科大學(xué)報(bào),2013,42(1):14-18.12顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展劉志忠等應(yīng)用基因芯片法檢測(cè)臨床腦脊液感染常見的10個(gè)種（屬）病原菌，包括金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、肺炎克雷伯菌、鮑曼不動(dòng)桿菌、陰溝腸桿菌,與傳統(tǒng)細(xì)菌培養(yǎng)比較符合率為97.0%，證實(shí)了芯片診斷技術(shù)篩查腦脊液病原菌的可行性，具有簡(jiǎn)便、快速、準(zhǔn)確和高通量等優(yōu)點(diǎn)，對(duì)臨床樣本檢測(cè)及流行病學(xué)調(diào)查有重要意義。劉志忠,張艷,石廣志.基因芯片法檢測(cè)腦脊液病原菌的臨床應(yīng)用[J/CD].中華實(shí)驗(yàn)和臨床感染病雜志:電子版,2013,6(3):210-213.13顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展14顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.1生物化學(xué)標(biāo)志物2.1.1乳酸(LacticAcid)腦脊液乳酸是腦組織能量代謝的底物，是鑒別細(xì)菌性及病毒性顱內(nèi)感染常用的生化標(biāo)志物之一，細(xì)菌性感染時(shí)其含量升高，病毒性感染時(shí)無顯著改變。

MekitarianFilhoE,HoritaSM,GilioAE,eta1.Cerebrospinalfluidlactatelevelasadiagnosticbiomarkerforbacterialmeningitisinchildren[J].hatJEmergMed,2014,7:14.MorichiS,KasshiwagiY,TakekumaK,etal.Expressionofbrainderivedneurotrophicfactor(BDNF)incerespinalfluidandplasmaofchildrenwithmeningitisandencephslitis/enephalopathy[J].IntJNeurosci,2013,123(1):17-23.15顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展Sakushima等對(duì)有關(guān)腦脊液乳酸檢測(cè)在細(xì)菌性顱內(nèi)感染診斷價(jià)值的33個(gè)研究進(jìn)行薈萃分析發(fā)現(xiàn)，腦脊液乳酸含量升高診斷細(xì)菌性顱內(nèi)感染的合并敏感性為93%，特異性為96%，當(dāng)腦脊液乳酸>35mg/dL時(shí),診斷的特異性可高達(dá)99%。

SakushimaK,HayashinoY,KawaguchiT,eta1.Diagnosticaccuracyofcerebrospinalfluidlactatefordifferentiatingbacterialmeningitisfromasepticmeningitis:ameta-analysis[J].JInfect,2011,62(4):255-262．16顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.1.2尿酸(UricAcid，UA)

腦脊液中的UA是由腦細(xì)胞中核酸轉(zhuǎn)化而來的，因此腦脊液UA含量可作為腦細(xì)胞損傷的指標(biāo)。發(fā)生顱內(nèi)感染時(shí)，腦脊液UA含量顯著增高(>40μmol/L)，主要是由細(xì)菌感染致使腦細(xì)胞損傷、破壞，自身代謝增強(qiáng)所致，同時(shí)也可能是由于炎癥刺激使血腦屏障通透性增高，UA移行入腦脊液，使腦脊液中的UA增高。

劉曉華.腦脊液中尿酸的測(cè)定及其在兒童病毒性腦炎中的意義[J].齊齊哈爾醫(yī)學(xué)院學(xué)報(bào),2008,29(8):944．17顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.1.3一氧化氮（NO）各種傷害性刺激均可誘發(fā)腦內(nèi)各區(qū)NO含量明顯升高，顱內(nèi)感染患者腦脊液NO含量均高于正常(>20mol/L)，但就細(xì)菌或病毒感染而言差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05)NO升高幅度與腦損傷程度有關(guān)，與感染病因無關(guān)，N0含量測(cè)定有助于腦脊液常規(guī)、生化正常的顱內(nèi)感染的診斷。18顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.1.4臭氧（ReactiveOxygenSpecies）細(xì)菌性腦膜炎患者CSF中臭氧含量明顯高于非腦膜炎患者，其差異具有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。便捷的臭氧檢測(cè)方式是目前主要的研究方向。

Anne-ClaireLukaszewicz1,ValérieFaivre1,HélèneBout.MulticenterTestingoftheRapidQuantificationofRadicalOxygenSpeciesinCerebrospinalFluidtoDiagnoseBacterialMeningitis[J].Journal,2015,May,26.19顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2腦脊液蛋白20顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展細(xì)菌性顱內(nèi)感染發(fā)生時(shí)，腦脊液中上述各種蛋白的含量，除胱抑素C外均較病毒性顱內(nèi)感染時(shí)升高，而腦脊液胱抑素C水平則以病毒性顱內(nèi)感染升高顯著。腦脊液中新型蛋白含量的測(cè)定因不受抗生素使用的干擾，為顱內(nèi)感染病原菌的鑒別診斷提供了新的方向。JesseS,SteinackerP,LehnertS,eta1.Aproteomicapproachforthediagnosisofbacterialmeningitis[J].PLoSOne,2010,5(4):e10079．TsaiHC,ShiMH,LeeSS,eta1.Expressionofmatrixmetalloproteinasesandtheirtissueinhibitorsintheserumandcerebrospinalfluidofpatientswithmeningitis[J]ClinMicrobiolInfect,2011,17(5):780-784．王艷,王谷聲,周世俊.血清與腦脊液降鈣素原檢測(cè)在兒童中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的應(yīng)用[J]右江醫(yī)學(xué),2012,40(3)：347-348．張麗琴.腦脊液免疫球蛋白、乳酸脫氫酶及腺苷脫氨酶檢測(cè)在成人顱內(nèi)感染鑒別診斷中的臨床意義[J]中華醫(yī)院感染學(xué)雜志,2012,22(8):1752-1754．21顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.1

降鈣素原

（Procalcitonin，PCT）PCT是人類降鈣素(calcitonin)的前體物質(zhì)，1993年由Assicot等首次報(bào)道其可作為細(xì)菌感染的早期標(biāo)志物，2001年國(guó)際膿毒癥會(huì)議把PCT作為膿毒癥診斷指標(biāo)之一。與CRP、WBC計(jì)數(shù)、中性粒細(xì)胞比例不同，在某些自身免疫性疾病(如類風(fēng)濕病)，PCT無明顯增高(一般小于0.01ng/mL)。22顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展Jereb等發(fā)現(xiàn)若以腦脊液PCT水平>0.5ng/mL為閾值，其對(duì)細(xì)菌性腦膜炎和病毒性腦膜腦炎的陽(yáng)性預(yù)測(cè)值分別為100%和74%。還有學(xué)者研究認(rèn)為血清PCT>0.05ng/mL是診斷細(xì)菌性腦膜炎的指標(biāo)，而局灶性感染和病毒性腦膜炎患者血清PCT水平一般不會(huì)高于此值。

JerebM,KotarT,JureaT,eta1.Usefulnessofprocalcitoninfordiagnosisofinfectiveendocantifis[J].InternEmergMed,2009,4(3):221-226．馮輝斌,周青山.促炎性細(xì)胞因子及降鈣素原在顱內(nèi)感染性質(zhì)鑒別中的應(yīng)用價(jià)值[J].實(shí)用臨床醫(yī)藥雜志，2013,17(13):17-19．23顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展

AlainViallon,ElisabethBotelho-Nevers,FabriceZeni.Clinicaldecisionrulesforacutebacterialmeningitis:currentinsights[J].OpenAccessEmergencyMedicine2016:87–1624顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展一項(xiàng)來自于28項(xiàng)研究涵蓋2058個(gè)患者薈萃研究顯示，腦脊液PCT診斷細(xì)菌性腦膜炎的敏感度和特性度分別為80%和86%。研究認(rèn)為，腦脊液PCT較腦脊液白細(xì)胞計(jì)數(shù)誤診率低，較血清PCT敏感性高。

JensVikse,BrandonMichaelHenry,JoyeetaRoy.Theroleofserumprocalcitonininthediagnosisofbacterialmeningitisinadults:asystematicreviewandmeta-analysis[J].InternationalJournalofInfectiousDiseases2015(38):68–76.Ting-TingWei,Zhi-DeHu,Bao-DongQin.DiagnosticAccuracyofProcalcitonininBacterialMeningitisVersusNonbacterialMeningitis[J].Medicine,2016,(11):e3079.25顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.2C-反應(yīng)蛋白

（C-reactiveprotein，CRP）CRP是人體被細(xì)菌感染或者創(chuàng)傷后反應(yīng)最為敏感的一種急性時(shí)相蛋白。可以通過免疫熒光法進(jìn)行定量檢測(cè)，它是反映細(xì)胞和組織損傷的一種非特異性指標(biāo)，正常情況下僅少量存在于人體體液中。

McCarthyM,RosengartA,SchuetzAN,etal.Moldinfectionsofthecentralnervous.system[J].

NEnglJMed，2014;371(2):150-60.26顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展CRP升高可見于中樞神經(jīng)系統(tǒng)炎癥患者的腦脊液中并在恢復(fù)期消失?；撔曰蚪Y(jié)核性腦膜炎時(shí)，腦脊液、血清CRP水平均明顯增高；病毒性腦膜炎時(shí)CRP升高僅見于腦脊液中，而血清中并不增高。

MallaKK,MallaT,RaoKS,eta1.IscerebrospinalfluidC-reactiveproteinabettertoolthanbloodC-reactiveproteininlaboratorydiagnosisofmeningitisinchildren[J]?SultanQaboosUnivMedJ,2013,13：93-99．劉春虹,杜彥輝.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者腦脊液IFN-γ、hCRP、NSE的變化及臨床意義[J].寧夏醫(yī)學(xué)雜志,2013,35(6):485-487．27顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.3

神經(jīng)元特異性烯醇化酶

（NeuronspecificEnolaseNSE）NSE存在于腦神經(jīng)元胞質(zhì)中，腦損傷時(shí)，神經(jīng)細(xì)胞崩解，血腦屏障破壞，NSE釋放入腦脊液中，使其濃度升高，是神經(jīng)元損害的敏感性標(biāo)志物。CNSI可造成不同程度腦實(shí)質(zhì)損傷，使腦脊液中NSE濃度增高，NSE升高可直接反應(yīng)腦損害的存在。28顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展病毒性腦炎病毒依靠細(xì)胞的胞飲作用穿透神經(jīng)元細(xì)胞，造成對(duì)神經(jīng)元的直接侵犯，胞釋放NSE，因此病腦組NSE升高最為明顯。結(jié)腦患者可導(dǎo)致腦梗死、腦水腫，可加重神經(jīng)元損傷。所以NSE升高也比較明顯?；X組的病變主要在腦膜，腦實(shí)質(zhì)損害相對(duì)較輕。

LibbeyJE,FujinamiRS.Adaptiveimmuneresponsetoviralinfectionsinthecentralnervoussystem[J].

HandbClinNeurol,2014;123(3):225-47.29顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.4

膽堿酯酶

（Cholinesterase，CHE）顱內(nèi)感染時(shí)，由于血腦屏障被破壞，血漿中大分子CHE可能進(jìn)入腦脊液中，從而使其CHE含量增加。顱內(nèi)感染時(shí)，腦組織中的CHE可能被釋放進(jìn)入腦脊液中，從而使其在腦脊液中水平升高。30顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展細(xì)菌性感染時(shí)CHE的上升幅度比病毒性感染更明顯，可能是由于細(xì)菌性感染對(duì)血腦屏障的破壞更明顯，血漿中CHE更易透過從而進(jìn)入腦脊液所致。不同病毒對(duì)腦脊液CHE的活性影響不同，在已知的幾種病毒中，柯薩奇B組病毒(CVB)對(duì)CHE活性的影響最大。

瞿少剛,張秀萍.病毒性腦膜炎、腦炎患兒的病原分析及部分生化指標(biāo)變化的l臨床意義[J]..現(xiàn)代醫(yī)藥衛(wèi)生,2006,22(6):798-800．張秀萍,瞿少剛,章曉聯(lián),等.病毒性腦膜炎、腦炎腦脊液膽堿酯酶活性與血清病毒抗體的關(guān)系[J].華中醫(yī)學(xué)雜志,2004,28(2):107-108．31顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.5

白細(xì)胞酯酶

（LeukocyteEsterase，LET）LET是細(xì)胞內(nèi)含有的一種特異性酶類，這種酶類只在中性粒細(xì)胞內(nèi)存在。一些學(xué)者將尿液分析的白細(xì)胞酯酶試紙條用于腦脊液的細(xì)菌感染快速診斷。有資料表明，腦脊液中LET的檢出與細(xì)菌培養(yǎng)陽(yáng)性、潘氏試驗(yàn)陽(yáng)性、白細(xì)胞總數(shù)和蛋白質(zhì)升高以及葡萄糖降低之間存在統(tǒng)計(jì)學(xué)上的相關(guān)性。

劉仁淳,肖正勤,盧森廳.白細(xì)胞酯酶檢測(cè)在腦脊液細(xì)菌感染快速診斷中的應(yīng)用[J].廣東醫(yī)學(xué),2008,29(2):277-278．32顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.6

基質(zhì)金屬蛋白酶

（MatrixMetalloproteinaseMMPs）MMPs是一組結(jié)構(gòu)與功能同源的鋅離子依賴性中性蛋白酶超基因家族，可由體內(nèi)中性粒細(xì)胞，巨噬單核細(xì)胞及血管內(nèi)皮細(xì)胞產(chǎn)生。在中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染性疾病中，MMP-9參與多種病理生理活動(dòng)，可協(xié)同降解多種細(xì)胞外基質(zhì)（ECM）成分，促進(jìn)炎癥性浸潤(rùn)的發(fā)生，破壞血腦屏障（BBB）。SavarinC,BergmannCC,HintonDR,StohlmanSA.MMP-independent

role

ofTIMP-1atthebloodbrainbarrierduringviralencephalomyelitis[J].ASNNeuro.2013Nov26;5(5):e00127.33顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展MMP-9在化膿性腦膜炎腦脊液中水平增高表達(dá)增強(qiáng),腦脊液中MMP-9的水平與腦炎的嚴(yán)重程度具有很好的正性相關(guān)，這對(duì)病情的判斷及預(yù)后有具有重要的評(píng)估意義。抑制MMP-9的活性對(duì)治療病毒性腦炎有輔助作用。目前認(rèn)為TIMPs是最重要的抑制物，但這一新途徑由于技術(shù)的限制還有待探索。

IrmeliRoine,TuulaPelkonen,AnneliLauhio.ChangesinMMP-9andTIMP-1ConcentrationsinCerebrospinalFluidafter1WeekofTreatmentofChildhoodBacterialMeningitis[J].JClinMicrobiol,2015(53):2340–2342TsaiHC,ShiMH,LeeSS,eta1.ExpressionofmatrixmetaUopmteinasesandtheirtissueinhibitorsintheserumandcerebrospinalfluidofpatientswithmeningitis[J].ClinMiembiolInfect,2011,17:780-784．34顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.7

腺苷脫氨酶

（AdenosineAeaminaseADA）ADA是腺嘌呤核苷代謝中的重要酶類．該酶的活性與淋巴細(xì)胞激活相關(guān)．特殊病原菌感染如結(jié)核桿菌感染可激活淋巴細(xì)胞，引起ADA增高。相關(guān)研究發(fā)現(xiàn)．細(xì)菌性顱內(nèi)感染發(fā)生時(shí)，腦脊液中ADA升高以結(jié)核性腦膜炎為多，化膿性腦膜炎升高次之。

KarsenH,KorukST,KarahocagilMK,eta1.Comparativeanalysisofcerebrospinalfluidadenosinedeaminaseactivityinmeningitis[J]SwissMedWkly.2011.141:w13214．

GopalChandraGhosh,BrijeshSharma.CSFADADeterminationinEarlyDiagnosisofTuberculousMeningitisinHIV-InfectedPatients[J].Scientifica(Cairo).2016;2016:5820823.35顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.8

β2-微球蛋白

（Beta-2Microglobulin，

β2-MG）：β2-MG是一種小分子蛋白質(zhì)，其存在于所有有核細(xì)胞表面，主要分布于淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞表面。正常腦脊液β2-MG含量很少，CNSI時(shí)中樞神經(jīng)系統(tǒng)內(nèi)免疫系統(tǒng)被激活，產(chǎn)生大量淋巴細(xì)胞及巨噬細(xì)胞，使β2-MG合成增加，大量β2-MG由細(xì)胞表面脫落進(jìn)入腦脊液。36顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展當(dāng)腦脊液中β2-MG含量明顯升高時(shí)可能存在細(xì)菌性腦膜炎或結(jié)核性腦膜炎，同時(shí)進(jìn)行結(jié)核感染相關(guān)檢驗(yàn)，則β2-MG可以作為細(xì)菌性腦膜炎與其他類型腦膜炎鑒別診斷的一項(xiàng)輔助指標(biāo)。β2-MG水平與細(xì)菌性腦膜炎病情的嚴(yán)重程度相關(guān)，檢測(cè)腦脊液中β2-MG水平可作為細(xì)菌性腦膜炎的診斷指標(biāo)，并有助于觀察療效與預(yù)后。

蔣荷萍．腦脊液乳酸、β2-微球蛋白、c反應(yīng)蛋白和酶活性測(cè)定在腦膜炎中的應(yīng)用[J]．檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)，2012，27：609-611．37顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.9

可溶性髓細(xì)胞觸發(fā)受體1

（SolubleTriggeringReceptorExpressedonMyeloidcells-l，STREM-1）TREM是主要表達(dá)于中性粒細(xì)胞及成熟單核細(xì)胞、巨噬細(xì)胞表面的免疫球蛋白超家族活化受體，具有活化炎性因子并抑制抗炎因子的作用，從而在炎性反應(yīng)的觸發(fā)及放大過程中發(fā)揮作用。STREM-1是TREM-1的可溶形式，在感染過程中被分泌到體液或血漿中。38顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展細(xì)菌性腦膜炎時(shí)，腦脊液中的STREM-1明顯升高，以25ng/L為界對(duì)細(xì)菌性腦膜炎診斷的靈敏度達(dá)90%，特異度達(dá)93.5%。隨著感染的有效控制STREM-1水平逐漸下降，動(dòng)態(tài)檢測(cè)腦脊液中STREM-1水平可以反映感染控制情況。

郭光輝,蔣巧雅,柬振華.可溶性髓系細(xì)胞觸發(fā)受體-1在細(xì)菌性腦膜炎診斷中的意義[J].國(guó)際檢驗(yàn)醫(yī)學(xué)雜志,2011,32,951-952,954．禚志紅,郭果,田培超等.可溶性髓樣細(xì)胞觸發(fā)受體-1、乳酸在細(xì)菌性腦膜炎患兒中的變化[J].中華實(shí)用兒科臨床雜志,2013,28:864-867．39顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.10S-100β蛋白S-100β被認(rèn)為是神經(jīng)元、膠質(zhì)細(xì)胞損傷的標(biāo)志物并且參與顱內(nèi)感染的病理過程，對(duì)CNSI病情判斷和預(yù)后評(píng)估有重要的臨床價(jià)值。40顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展研究發(fā)現(xiàn)細(xì)菌性腦膜炎腦脊液中S-100β含量明顯高于病毒性腦膜炎，而且當(dāng)S-100β取值3.1ng/mL時(shí)，其鑒別細(xì)菌性腦膜炎與病毒性腦膜炎的靈敏度可達(dá)90%，特異度達(dá)100%。MRI證實(shí)感染后存在神經(jīng)元損傷患者的腦脊液S100β水平明顯高于感染后未損傷組及正常對(duì)照組。

JungK,GoerdtC,LangeP,eta1.TheuseofS100βandTauproteinconcentrationsinthecerebrospinalfluidforthedifferentialdiagnosisofbacterialmeningitis:aretrospectiveanalysis[J].EurNeurel,2011,66:128-132．ParkJW,SuhGI,ShinHE.AssociationbetweencerebrospinalfluidS100Bproteinandneuronaldamageinpatientswithcentralnervoussysteminfections[J].YonseiMedJ,2013,54(3):567-571.41顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展急性期病毒性腦炎組腦脊液、血液S-100β水平明顯高于化腦組和對(duì)照組,提示病毒侵襲使主要存在于星形膠質(zhì)細(xì)胞中的S-100β大量釋放入腦脊液。手足口病并病腦患兒腦脊液S-100β水平與疾病嚴(yán)重程度密切相關(guān),可用來預(yù)測(cè)病腦的發(fā)生。

原芳,喬靜.S-100β

檢測(cè)在嬰幼兒中樞神經(jīng)感染診療中的應(yīng)用[J].中國(guó)社區(qū)師,2014,14(32):117,119.費(fèi)安興.手足口病患兒血清及腦脊液中S100β

和NSE的表達(dá)與病毒性腦炎發(fā)生的相關(guān)性分析[J].中國(guó)婦幼健康研究,2014(3):432-433,434.42顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展2.2.11

胱抑素C(Cystatin-C，Cys-C)Cys-C為人體所特有,主要由柔腦膜合成,由有核細(xì)胞分泌產(chǎn)生,且無組織特異性,廣泛分布在腦脊液、血液、唾液、尿液中,但以腦脊液中含量最高,濃度約為血清濃度的5倍左右。Cys-C的重要功能是抑制內(nèi)源性半胱氨酸蛋白酶活性,是目前發(fā)現(xiàn)的對(duì)組織蛋白酶B抑制作用最強(qiáng)的抑制劑。

武艷,孫靜娜,肖志敏,等.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染胱抑素C水平變化的臨床意義[J].現(xiàn)代中西醫(yī)結(jié)合雜志,2012,21(13):1442-1443.43顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展化腦早期,腦組織細(xì)胞大量變性、壞死釋放半胱氨酸蛋白酶,使腦脊液中Cys-C的分泌增加以抑制半胱氨酸蛋白酶的活性,而隨著病程發(fā)展,細(xì)菌對(duì)有核細(xì)胞的破壞增多,腦脊液中Cys-C水平可能會(huì)下降。病毒性腦膜炎為急性非化膿性炎性反應(yīng),表現(xiàn)為腦膜充血、水腫,淋巴細(xì)胞和纖維蛋白浸潤(rùn),細(xì)胞分泌Cys-C則較少。44顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展45顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展細(xì)菌性顱內(nèi)感染腦脊液中TNF-α儀水平顯著升高，當(dāng)TNF-α>75.8pg/ml時(shí)，鑒別細(xì)菌性及病毒性感染的敏感性及特異性均達(dá)100%。當(dāng)IL-6>90pg/dL時(shí)，鑒別細(xì)菌性及病毒性感染的敏感性可達(dá)92.3%．特異性可達(dá)100%。當(dāng)IL-8≥773.5pg/dL時(shí)，鑒別細(xì)菌性及病毒性感染的敏感性達(dá)100%，特異性達(dá)76%。

PrasadR,KapoorR,SrivastavaR,MishraOP,SinghTB.CerebrospinalfluidTNF-α,IL-6,andIL-8inchildrenwithbacterialmeningitis[J].PediatrNeurol2014;50:60-5.AbdelmoezAT,ZakyDZ,MaherAM.RoleofcerebrospinalfluidIL-8asamarkerfordifferentiationbetweenacutebacterialandasepticmeningitis[J].JEgyptSocParasitol2014;44:205-10.46顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展在顱腦損傷和CNSI致腦損傷等情況下，IL-1β的水平及活性明顯增高(可超過30ng/L)，可以作為中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的早期診斷指標(biāo)。CNSI腦脊液中可溶性白細(xì)胞介素2受體(slL-2R)明顯增高(>1000pg/mL)，且化腦患者腦脊液中slL-2R的增高較病毒性腦膜炎更顯著(P<0.05)。其水平高低與病情輕重正相關(guān)。張建強(qiáng),王滿俠,劉利寧,等.中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染患者腦脊液中可溶性白介素-2受體和可溶性細(xì)胞問黏附分子-1水平及其臨床意義[J].中國(guó)全科醫(yī)學(xué),2010,13(5):482-484．PrasadR,KapoorR,SrivastavaR,eta1.CembrospinalfluidTNF-a,IL-6,andIL-8inchildrenwithbacterialmeningitis[J].PediatrNeurol,2014,50:60-65．47顱內(nèi)感染的實(shí)驗(yàn)室診斷技術(shù)新進(jìn)展IL-10又稱為細(xì)胞因子合成抑制因子，在化膿性和病毒性腦膜炎等顱內(nèi)感染中，腦脊液IL-10水平顯著升高(>20pg/mL)。IFN-γ主要由活化的輔助性T1(Thl)樣細(xì)胞、活化的自然殺傷(NK)細(xì)胞產(chǎn)生，能增單核巨噬細(xì)胞的抗病毒能力，IFN-γ在病毒性腦炎患兒腦脊液中顯著升高(可達(dá)到28.7pg/mL)。

MistchenkoAS,FomariMC,ViegasM,eta1.Detectionofinterleukin10incerebrospinalfluidof