SN 1590-2005進出口食品中蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、IN檢測方法

中華人民共和國出入境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準進出口食品中蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、NDeterminationofSudanI,SudanⅡ,SudanⅢandSudanN2005-12-01實施國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗檢疫總局I本標(biāo)準的附錄A為資料性附錄。本標(biāo)準由國家認證認可監(jiān)督管理委員會提出并歸口。本標(biāo)準起草單位：中華人民共和國河北出人境檢驗檢疫局。本標(biāo)準系首次發(fā)布的出人境檢驗檢疫行業(yè)標(biāo)準。1進出口食品中蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、N本標(biāo)準規(guī)定了進出口食品中蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、N的液相色譜(HPLC)測定方法和液相色譜一質(zhì)譜(HPLC-MS/MS)確證方法。2測定方法2.1方法提要紫外可見檢測器的高效液相色譜儀測定，外標(biāo)法定量，或用乙腈提取直接用HPLC測定。對于用HPLC方法檢出陽性的樣品，采用HPLC-MS/MS方法進行定性確證2.2試劑和材料除另有規(guī)定外，所用試劑均為分析純，水為去離子水，配流動相水為超純水。2.2.1正已烷。2.2.3乙腈(HPLC級)。2.2.4甲醇(HPLC級)。2.2.5三氯甲烷。2.2.6甲醇-水溶液(98+2):2mI.水用甲醇定容至100mL。2.2.7中性氧化鋁：100目～200目，500℃灼燒4h,貯于干燥器中備用，使用前130℃活化4h。2.2.8蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV標(biāo)準品：純度≥98%。2.2.9標(biāo)準儲備液：分別精確稱取蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV標(biāo)準品各100mg,分別用三氯甲烷溶解，最后用正己烷各自定容至100mL,配制成1.0mg/mL的標(biāo)準儲備液。此溶液在1℃~4℃下保存。2.2.10混合標(biāo)準中間液：移取蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、N標(biāo)準儲備液各5mL至100mL容量瓶中，用正己烷定容至刻度。配制成混合標(biāo)準中間液，濃度為50μg/mL。2.2.11混合標(biāo)準工作液：根據(jù)需要，取適量混合標(biāo)準中間液，用甲醇稀釋至所需濃度。2.3儀器和設(shè)備2.3.1高效液相色譜儀配有紫外-可見檢測器。2.3.2高效液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用儀。2.3.3平板搖床。2.3.4超聲波清洗器。2.3.5均質(zhì)器。2.3.6旋渦混和器。2.3.7固相萃取儀及配件(貯液器，連接頭)。2.3.8凈化柱：塑料柱，6.5cm×1.4cm(內(nèi)徑),準確稱取3.0g已活化的中性氧化鋁填入，敲擊，使之填實，安裝到固相萃取儀上待用。2.3.9真空泵。22.4.3測定 (1)式中：3b)流動相：0.1%乙酸水溶液+乙腈(15+85),流速：0.3mL/min;2.4.4.3定性確證結(jié)果的判斷進行樣品測定時，如果檢出的質(zhì)量色譜峰保留時間與標(biāo)準樣品一致，則通過扣除背景后的樣品譜圖中，各定性離子的相對豐度與濃度接近的同樣條件下得到的標(biāo)準溶液譜圖相比，誤差不超過表1規(guī)定的范圍，則可判斷樣品中存在對應(yīng)的被測物。在上述色譜和質(zhì)譜條件下，四種被測物的保留時間和定性離子見表2,總離子流圖及二級質(zhì)譜圖參見附錄A。表1定性確證時相對離子豐度的最大允許誤差`相對離子豐度允許的相對誤差士50表2四種被測物的保留時間和定性離子被測物蘇丹Ⅱ蘇丹Ⅲ蘇丹N保留時間/min碰撞電壓母離子子離子260、120,156本方法測定低限：甜椒或紅辣椒粉中蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV定量低限均為1.0mg/kg,辣椒醬和肉制品中蘇丹I、Ⅱ、Ⅲ、IV定量低限均為0.5mg/kg。不同商品回收率如下：辣椒粉中添加水平為1mg/kg、2mg/kg、5mg/kg、10mg/kg時，蘇丹I回收率為91.5%~98.2%;蘇丹Ⅱ回收率為93.5%～98.7%;蘇丹Ⅲ回收率為85.5%～91.4%;蘇丹IN回收率為辣椒醬中添加水平為0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg時，蘇丹I回收率為94.0%～99.5%;蘇丹Ⅱ回收率為93.5%～99.0%;蘇丹Ⅲ回收率為84.4%～88.8%;蘇丹IV回收率為89.5%～96.0%。雞肉制品中添加水平為0.5mg/kg、1mg/kg、2mg/kg時，蘇丹I回收率為95.0%～102.5%;蘇丹Ⅱ回收率為93.0%～101.5%;蘇丹Ⅲ回收率為94.0%～102.5%;蘇丹IV回收率為99.9%~4(資料性附錄)Minutes1——蘇丹I;3——蘇丹Ⅲ;4——蘇丹V?！鰣DA.1標(biāo)準品液相色譜圖m51圖A.6蘇丹N的MS/6!7ThisstandardwasdraftedbypublicofChina.firsttime.8SN/T1590—2005ThisstandardspecifiesthemethodofsamplepreparationanddeterminatMS/MS.peppers,chillipowder,spicesandmcleanedupwithaluminmatography-tandemmassspectrograph.Unlessspecificallynoted,allreagentsusedshouldbeA.R.and“water”2.2.6Methanol-water(98+2):2m2.2.7Alumina:pH=7±0.5,100mesh~200mesh,igniteat500℃for4h,conservedinthedesic-9chloroform,thendilutetoscalewithn-hexane,theconcentrationofthefourstandardstocksolutionsane.Theconcentrationof2.2.11Workingstandardtherequiredconcentrationasworkingstandardsolution.2.3Apparatusandeq2.3.1Highperformanceliquidchromatog2.3.2Highperformanceliquidchromatography-tandemmas2.3.5Homogenizer.2.3.7Solidphaseextractionequipmentwithaccessories2.3.8Aluminacolumn:plasticcolumn6.5cm×1.4cm(id),Accuratelyweigh3.0gactivatedaluby.2.4.1.1Peppers,chillipowderandspices:Weight10g(accuratSN/T1590—20052.4.1.3Meatandmeatproduction:Weight20g(accurateto0.01passedthrough0.45μmfilterandreadyforHPLCdetermination.tone,rejecttheeffluents.Elute2.4.3.Determinationa)Column:Cg(5μm),250mm×4.6mm(i.d.),orequivalent;b)Mobilephase:Acetonitrile+water(95+5),flowrate;1.0mL/min;d)Columntemperature:35℃;samplesolution,selectthestandardworkingsolutionwithsimilarpeakareatothatofthesampleso-andsamplesolutionshouldbewithinthelinearrangeoftheinstrumentdetection.Thestandardwork-ingsolutionandthesamTheoperationoftheblanktestisthesameasthedescribedinthemethodoftheomissionofsampleaddition.processororaccordingtoformulWhere:X——thecontentofSudanintestsample,mg/kg;A----thepeakareaofanalyteofthesamplesolution,mm2;c——theconcentrationV——thefinalvolumeoft2.4.4ConfirmationForthosepositiveresua)Column:C,150mm×2.1mm(i.d.).5μm,orequivalent;b)Mobilephase:0.1%aceticacid+Acetonitrile(15+85),flowrate:0.3mL/min;2.4.4.3JudgeofthequalitativeconfirmationrIftheretentiontimesofsamplechromatogrampeaksareconsisentwiththestandards,andafterbackgroundcompensation,therelativeionintensitysSN/T1590—2005Relativeintensity>20%to50%>10%to20%PermittedtolerancesAnalyteSudanⅡSudanⅢSudanNRetentiontiem/minlsolationMassDaughterlon232、93、156260、120、156336、197、156364、224、1563.1Limitofdeterminationpepperpasteandmeat.Recoveriesofdifferentkindsofcommoditiesareasfollowed.~91.4%;SudanVis92.8%～96.3%,whenfortifiedinchilllpowderattheconcentrationof1mg,kg,2mg/kg,5mg/kg,10mg/kg.Therecovery