SNT 1763.3-2006出入境口岸生物毒素檢驗(yàn)規(guī)程

中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)出入境口岸生物毒素檢驗(yàn)規(guī)程第3部分：蓖麻毒素Examinationcodesforbiologicaltoxinatentry-exitport-Part3:Ricin每2006-11-15實(shí)施國家質(zhì)量監(jiān)督檢驗(yàn)檢疫總局I-—第3部分：蓖麻毒素。本部分是SN/T1763的第3部分。1出入境口岸生物毒素檢驗(yàn)規(guī)程SN/T1763的本部分規(guī)定了在出入境口岸對非臨床來源樣品檢驗(yàn)蓖麻毒素的程序和方法。本部分適用于在出入境口岸對可疑食品、水源和土壤及其他可疑污染物等非臨床來源樣品進(jìn)行蓖麻毒素現(xiàn)場快速檢驗(yàn)與實(shí)驗(yàn)室檢驗(yàn)。2規(guī)范性引用文件下列文件中的條款通過SN/T1763的本部分的引用而成為本部分的條款。凡是注日期的引用文協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件，其最新版本適用于本部分。GB19489-2004實(shí)驗(yàn)室生物安全通用要求SN/T1763.1—2006出入境口岸生物毒素檢驗(yàn)規(guī)程肉毒毒素SN/T1763.1—2006確立的以及下列術(shù)語和定義適用于SN/T1763的本蓖麻籽中含有的一種具細(xì)胞毒性作用的高毒性蛋白4.1實(shí)驗(yàn)室應(yīng)按照GB19489—2004和WS233—2002對生物安全2級(BSL-2)實(shí)驗(yàn)室的生物安全要4.2使用過的實(shí)驗(yàn)用品應(yīng)按照GB19489—2004對廢棄物進(jìn)行無害化處理。2應(yīng)按照SN/T1763.1—2006中7.1～7.4的規(guī)定進(jìn)行。8.2初篩試驗(yàn)和確認(rèn)試驗(yàn)可同時(shí)進(jìn)行。確認(rèn)試驗(yàn)結(jié)果是最終判定結(jié)果的依據(jù)。本試驗(yàn)可用于快速檢驗(yàn)樣品中有無蓖麻毒索。用微量移液器或刻度吸管吸取120μL處理后的樣品液，加入檢驗(yàn)卡的樣品孔，10min后觀測結(jié)9.1.2結(jié)果判定示檢驗(yàn)卡失效或?qū)嶒?yàn)失敗。具體判定模式見圖1。O 〇a)1條沉淀線b)兩條沉淀線c)無大于等于5mm,試管10mL～25mL,刻度吸管5mL、10mL和量筒100mL。9.2.2試劑酸(98%)和四氨基聯(lián)苯胺(TMB),上述試劑均為分析純，存放于常溫通風(fēng)干燥處。蓖麻毒素單克隆抗9.2.2.20.85%生理鹽水，pH6.50.15mol/LPBSA、B底物反應(yīng)液等溶液配制見SN/T1763.1—2006附錄A。9.2.3.1包被：每孔加入100μL蓖麻毒素B鏈兔血清多抗(最佳稀釋倍數(shù)為1:2000)到40孔酶標(biāo)板9.2.3.3封閉：每孔加入100μL封閉液，37℃封閉30min,重復(fù)9.2.3.2步驟洗滌。白對照，37℃孵育30min,重復(fù)9.2.3.2步驟洗滌。鏈單抗(最佳稀釋倍數(shù)為1:1000),9.2.3.6加底物顯色：每孔加入A、B底物緩沖液各50μL,37℃顯色10min。9.2.3.7終止反應(yīng)：加入2mol/L硫酸終止液50μL,終止反應(yīng)3min,測定Aisom值。9.2.4結(jié)果判定與計(jì)算9.2.4.2用酶標(biāo)儀檢驗(yàn)樣品的A?om值。以空白對照孔調(diào)零后測量。若大于陰性對照均值的2.1倍，9.2.5.1待檢樣品應(yīng)作平行孔。兩孔