微生物學(xué)藥學(xué)專業(yè)分枝桿菌屬

微生物學(xué)藥學(xué)專業(yè)分枝桿菌屬分類分枝桿菌屬歸類于放線菌對(duì)人致病的放線菌可分含和不含分枝菌酸兩類。前者有諾卡菌屬、分枝桿菌屬、棒狀桿菌屬，后者有放線菌屬分枝桿菌屬概述是一類生物學(xué)性狀獨(dú)特的，細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲的桿菌，有分枝生長(zhǎng)的趨勢(shì)，因而得名。最顯著的特性:胞壁中含有大量類脂，可達(dá)菌體干重的40%左右，生長(zhǎng)形成粗糙的菌落，難以用一般染料染色。若使之著色后，又不易被3%HCI的酒精脫色，能抵抗鹽酸酒精的脫色故稱為抗酸桿菌。有致病性及非致病性兩大類。引起人類疾病的有：（1）人型和牛型結(jié)核桿菌和幾種非典型分枝桿菌；（2）麻風(fēng)桿菌。引起的感染多為慢性感染過(guò)程，長(zhǎng)期遷延，并有破壞性的組織病變。主要特點(diǎn)抗酸染色，故又稱抗酸桿菌生長(zhǎng)大多緩慢致病多為慢性一、結(jié)核分枝桿菌結(jié)核病的病原菌，俗名結(jié)核桿菌。1882年由德國(guó)微生物學(xué)家郭霍（Koch）發(fā)現(xiàn)。世界上1/3人感染，70%在亞洲世界防治結(jié)核病日對(duì)人類有致病性的為人型，牛型和非洲型結(jié)核桿菌。（一）生物學(xué)性狀1.形態(tài)與染色細(xì)長(zhǎng)略帶彎曲，呈單個(gè)或分枝狀排列，無(wú)莢膜、無(wú)鞭毛、無(wú)芽胞。在陳舊的病灶和培養(yǎng)物中，形態(tài)常不典型，可呈顆粒狀，串球狀，短棒狀，長(zhǎng)絲形等。一般常用抗酸染色法染色，結(jié)核桿菌染成紅色，其他非抗酸性細(xì)菌及細(xì)胞漿質(zhì)等呈藍(lán)色L型Much

結(jié)核桿菌抗酸染色抗酸染色法染色，結(jié)核桿菌染成紅色2.培養(yǎng)特性為專性需氧菌。最適pH6.5～6.8最適溫度為37℃營(yíng)養(yǎng)要求高，在含有蛋黃、馬鈴薯、甘油和天門冬素等的固體培養(yǎng)基上才能生長(zhǎng)。生長(zhǎng)慢，接種后培養(yǎng)3～4周出現(xiàn)肉眼可見(jiàn)的菌落。菌落為干燥、堅(jiān)硬、表面呈顆粒狀、乳酪色或黃色，形似菜花樣。在液體培養(yǎng)內(nèi)呈粗糙皺紋狀菌膜生長(zhǎng)。

結(jié)核桿菌培養(yǎng)：菌落3.抵抗力（四怕）對(duì)乙醇敏感對(duì)濕熱敏感對(duì)紫外線敏感對(duì)鏈霉素、異煙肼、利福平、環(huán)絲氨酸、乙胺丁醇、卡那霉素、對(duì)氨基水楊酸等抗癆藥物敏感。但長(zhǎng)期用藥容易出現(xiàn)耐藥性抵抗力（四不怕）對(duì)干燥的抵抗力特別強(qiáng)結(jié)核分枝桿菌對(duì)酸（3%HCl或6%H2SO4)或堿（4%NaOH)有抵抗力，15min不受影響對(duì)堿性染料有抵抗力對(duì)青霉素等抗生素耐藥4.變異性可發(fā)生形態(tài)、菌落、毒力、免疫原性和耐藥性等變異卡介苗（BCG）：卡～介二氏將牛型結(jié)核桿菌培養(yǎng)于膽汁、甘油、馬鈴薯培養(yǎng)基中，經(jīng)230次傳代，歷時(shí)13年，使其毒力發(fā)生變異，成為對(duì)人無(wú)致病性，而仍保持良好免疫性的菌苗株，稱為卡介菌(BCG)?？ń榫臃N人體后，可獲得抗結(jié)核免疫力。對(duì)鏈霉素、利福平、異煙肼等抗結(jié)核藥物較易產(chǎn)生耐藥性。（二）致病性與免疫性致病性

菌體成份與作用

結(jié)核桿菌無(wú)內(nèi)毒素，也不產(chǎn)生外毒素和侵襲性酶類致病作用主要靠菌體成份，特別是胞壁中所含的大量脂質(zhì)。脂質(zhì)含量與結(jié)核桿菌的毒力呈平行關(guān)系，含量愈高毒力愈強(qiáng)。1.致病物質(zhì)莢膜脂質(zhì)蛋白質(zhì)莢膜成分－－多糖、脂質(zhì)和蛋白質(zhì)有助于粘附與入侵可降解宿主組織中的大分子物質(zhì)，為細(xì)菌繁殖提供營(yíng)養(yǎng)防止宿主的有害物質(zhì)進(jìn)入細(xì)菌可抑制吞噬體與溶酶體的融合脂質(zhì)索狀因子若將其從細(xì)菌中提出，則細(xì)菌喪失毒力磷脂硫酸腦苷脂蠟質(zhì)D索狀因子由分枝菌酸和海藻糖結(jié)合的一種糖脂能使細(xì)菌在液體培養(yǎng)基中呈蜿蜒索狀排列能破壞細(xì)胞線粒體膜，影響細(xì)胞呼吸抑制白細(xì)胞游走和引起慢性肉芽腫磷脂促使單核細(xì)胞增生與結(jié)核結(jié)節(jié)的形成有關(guān)硫酸腦苷脂抑制吞噬細(xì)胞中吞噬體與溶酶體的結(jié)合使細(xì)菌能在吞噬細(xì)胞中長(zhǎng)期存活蠟質(zhì)D肽糖脂和分枝菌酸的復(fù)合物具有佐劑作用，可激發(fā)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)蛋白質(zhì)有抗原性，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機(jī)體發(fā)生超敏反應(yīng)在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮一定作用致病性的機(jī)理結(jié)核桿菌的致病作用可能是細(xì)菌在組織細(xì)胞內(nèi)頑強(qiáng)增殖引起炎癥反應(yīng)，以及誘導(dǎo)機(jī)體產(chǎn)生遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)性損傷有關(guān)。2.所致疾病感染方式呼吸道、消化道或皮膚損傷侵入機(jī)體所致疾病侵犯多種組織器官，引起相應(yīng)器官的結(jié)核病。以肺結(jié)核最常見(jiàn)肺結(jié)核的表現(xiàn)類型人類肺結(jié)核有兩種表現(xiàn)類型：

原發(fā)感染：多發(fā)生于兒童原發(fā)綜合征形成結(jié)核結(jié)節(jié)（即結(jié)核肉芽腫）轉(zhuǎn)歸繼發(fā)感染（原發(fā)后感染）原發(fā)感染

是首次感染結(jié)核桿菌引起的感染，多見(jiàn)于兒童。結(jié)核桿菌隨同飛沫和塵埃通過(guò)呼吸道進(jìn)入肺泡，引起滲出性炎癥病灶，稱為原發(fā)灶。原發(fā)灶內(nèi)的結(jié)核桿菌可經(jīng)淋巴管擴(kuò)散至肺門淋巴結(jié)，引起淋巴管炎和淋巴結(jié)腫大，X線胸片顯示啞鈴狀陰影，稱為原發(fā)綜合征。隨著機(jī)體免疫力的建立，原發(fā)灶大多可纖維化和鈣化而自愈。原發(fā)灶內(nèi)可長(zhǎng)期潛伏少量結(jié)核桿菌，不斷刺激機(jī)體強(qiáng)化已建立起的抗結(jié)核免疫力，也可作為以后內(nèi)源性感染的來(lái)源。只有極少數(shù)免疫力低下者，結(jié)核桿菌可經(jīng)淋巴、血流擴(kuò)散至全身，導(dǎo)致全身粟粒性結(jié)核或結(jié)核性腦膜炎。

繼發(fā)感染也稱原發(fā)后感染，多見(jiàn)于成年人。大多為內(nèi)源性感染，極少由外源性感染所致。特點(diǎn)是病灶局限，一般不累及鄰近的淋巴結(jié)，主要表現(xiàn)為慢性肉芽腫性炎癥，形成結(jié)核結(jié)節(jié)，發(fā)生纖維化或干酪樣壞死。病變常發(fā)生在肺尖部位。少數(shù)患者因結(jié)核桿菌在病灶中大量繁殖，形成液化灶，甚至空洞，病菌可隨咳痰排除體外，此為開(kāi)放性肺結(jié)核。肺外感染部分患者結(jié)核分枝桿菌可進(jìn)入血液循環(huán)引起肺內(nèi)、外播散，如腦、腎結(jié)核痰菌被咽入消化道或食入了消毒不嚴(yán)格的牛奶也可引起腸結(jié)核、結(jié)核性腹膜炎等大多與結(jié)核分枝桿菌L型有關(guān)3.免疫性人類對(duì)結(jié)核桿菌的感染率很高，發(fā)病率較低，表明人體感染后可獲得一定的抗結(jié)核免疫力。免疫力的持久性，依賴于結(jié)核桿菌在機(jī)體內(nèi)的存活，一旦體內(nèi)結(jié)核桿菌消亡，抗結(jié)核免疫力也隨之消失，這種免疫稱為有菌免疫或傳染性免疫。主要是細(xì)胞免疫，包括致敏的T淋巴細(xì)胞和被激活的巨噬細(xì)胞。致敏的T淋巴細(xì)胞可直接殺死帶有結(jié)核桿菌的靶細(xì)胞，同時(shí)釋放多種作用于巨噬細(xì)胞的淋巴因子，使巨噬細(xì)胞聚集在病灶周圍形成以單核細(xì)胞為主的增生性炎癥。免疫機(jī)制屬胞內(nèi)感染菌，其免疫主要是以T細(xì)胞為主的細(xì)胞免疫結(jié)核的免疫屬于感染免疫，又稱有菌免疫免疫與超敏反應(yīng)細(xì)胞免疫為主,遲發(fā)型超敏反應(yīng)同時(shí)存在在結(jié)核桿菌感染時(shí)，細(xì)胞免疫與遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)同時(shí)存在，可用郭霍氏現(xiàn)象說(shuō)明郭霍氏現(xiàn)象①在健康豚鼠皮下首次注射一定量結(jié)核桿菌，10～14天后注射部位緩慢地出現(xiàn)潰瘍，深而不易愈合，鄰近淋巴結(jié)腫大，細(xì)菌擴(kuò)散至全身，此時(shí)結(jié)核菌素測(cè)試為陰性。②用相同等量的結(jié)核桿菌注入曾感染已康復(fù)的豚鼠皮下，在1～2天內(nèi)即迅速發(fā)生潰瘍，但潰瘍淺而易愈合，鄰近淋巴結(jié)不腫大，細(xì)菌也很少擴(kuò)散，結(jié)核菌素測(cè)試為陽(yáng)性。③在康復(fù)的豚鼠皮下注射大量結(jié)核桿菌，則引起注射局部及全身嚴(yán)重的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)，甚至導(dǎo)致動(dòng)物死亡。郭霍氏現(xiàn)象的解釋首次感染出現(xiàn)的炎癥反應(yīng)，潰瘍深而不易愈合，細(xì)菌擴(kuò)散，說(shuō)明機(jī)體尚未建立起抗結(jié)核免疫力再次感染發(fā)生的炎癥發(fā)應(yīng)，潰瘍淺而易愈合，細(xì)菌不擴(kuò)散，說(shuō)明機(jī)體對(duì)結(jié)核桿菌已具有一定的細(xì)胞免疫力，而潰瘍迅速形成，則說(shuō)明在產(chǎn)生免疫的同時(shí)有遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)用過(guò)量的結(jié)核桿菌進(jìn)行再次感染，則引起劇烈的遲發(fā)型變態(tài)反應(yīng)人類的原發(fā)性肺結(jié)核，繼發(fā)性肺結(jié)核，嚴(yán)重而惡化的肺結(jié)核，相當(dāng)于郭霍氏現(xiàn)象的三種情況。

結(jié)核菌素試驗(yàn)是應(yīng)用結(jié)核菌素進(jìn)行皮膚試驗(yàn)來(lái)測(cè)定機(jī)體對(duì)結(jié)核分枝桿菌是否能引起遲發(fā)性超敏反應(yīng)（Ⅳ型變態(tài)反應(yīng)）的一種試驗(yàn)結(jié)核菌素試劑舊結(jié)核菌素（OT)每0.1ml含5單位純蛋白衍化物(PPD)人結(jié)核分枝桿菌制成的PPD-C卡介苗制成的BCG-PPD每0.1ml含5單位試驗(yàn)方法與意義2種PPD5個(gè)單位兩前臂掌側(cè)皮內(nèi)注射48～72h后紅腫硬結(jié)超過(guò)5mm者為陽(yáng)性≥15mm為強(qiáng)陽(yáng)性，對(duì)臨床診斷有意義陰性反應(yīng)：雖有紅腫但無(wú)硬結(jié)或硬結(jié)直徑不到5毫米者則為陰性。應(yīng)注意受試者處于原發(fā)感染早期，變態(tài)反應(yīng)尚未發(fā)生，或正患嚴(yán)重的結(jié)核病如全身粟粒性結(jié)核和結(jié)核性腦膜炎時(shí)機(jī)體無(wú)反應(yīng)能力，或患其他嚴(yán)重疾?。檎睢⒔Y(jié)節(jié)病、惡性腫瘤），如用過(guò)免疫抑制劑時(shí)，結(jié)核菌素反應(yīng)均可轉(zhuǎn)為陰性。應(yīng)用選擇卡介苗接種對(duì)象和測(cè)定卡介苗接種后的免疫效果。結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性者應(yīng)接種或補(bǔ)種卡介苗在未接種卡介苗的人群中作結(jié)核桿菌感染的流行病學(xué)調(diào)查,了解人群自然感染率作為嬰幼兒(尚未接種過(guò)卡介苗者)結(jié)核病的輔助診斷測(cè)定腫瘤患者的細(xì)胞免疫功能（三）防治原則預(yù)防近20年國(guó)際組織提出控制結(jié)核病主要方法有發(fā)現(xiàn)和治療痰菌陽(yáng)性者新生兒接種卡介苗凍干疫苗核糖體RNA(rRNA)疫苗預(yù)防接種

卡介苗接種是預(yù)防結(jié)核病的有效措施之一，廣泛接種卡介苗能大大地降低結(jié)核病的發(fā)病率。嬰兒因免疫力低，為卡介苗接種的主要對(duì)象。6個(gè)月以內(nèi)健康兒童可直接接種，較大兒童結(jié)核菌素試驗(yàn)陰性者接種。一般在接種后2-3月如結(jié)核菌素試驗(yàn)轉(zhuǎn)陽(yáng)，則表示接種者已產(chǎn)生免疫力。試驗(yàn)陰性者應(yīng)再行接種。皮內(nèi)接種卡介苗后，結(jié)核菌素試驗(yàn)轉(zhuǎn)陽(yáng)率可達(dá)96～99%，陽(yáng)性反應(yīng)可維護(hù)6-10年左右。

治療一般治療：合理營(yíng)養(yǎng)，注意休息結(jié)核病的治療在于早發(fā)現(xiàn)、早治療、聯(lián)合用藥、分階段治療、堅(jiān)持全程和徹底治愈。常用的藥物有異菸肼（INH）、鏈霉素、對(duì)氨水楊酸鈉（PAS）、利福平、乙胺丁醇等。聯(lián)合用藥時(shí)，因各藥有協(xié)同作用，能降低耐藥性的產(chǎn)生，減少毒性作用。因耐藥菌株出現(xiàn)較多，在治療過(guò)程中，應(yīng)定期分離結(jié)核菌株作藥敏試驗(yàn)，以測(cè)定耐藥性的產(chǎn)生情況。二、麻風(fēng)分枝桿菌

麻風(fēng)分枝桿菌是麻風(fēng)病的病原菌。麻風(fēng)是一種慢性傳染病，主要表現(xiàn)為皮膚、粘膜和神經(jīng)末梢的損害。晚期可侵犯深部組織和器官，形成肉芽腫病變。在世界各地均有流行，我國(guó)不少地區(qū)亦可見(jiàn)，但經(jīng)大力開(kāi)展防治工作后，病例已逐漸減少。（一）生物學(xué)性狀形態(tài)上麻風(fēng)桿菌與結(jié)核桿菌酷似，難以區(qū)別，亦表現(xiàn)明顯的抗酸染色特性，常在病人潰破皮膚滲出液的細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)，呈束狀排列。麻風(fēng)分枝桿菌是一種典型胞內(nèi)菌：麻風(fēng)細(xì)胞麻風(fēng)桿菌是至今唯一仍不能人工培養(yǎng)的細(xì)菌。以麻風(fēng)桿菌感染小鼠足墊或接種至犰狳可引起動(dòng)物的進(jìn)行性麻風(fēng)感染，為研究麻風(fēng)的一種動(dòng)物模型。麻風(fēng)桿菌（二）致病性與免疫性在自然界只有人感染麻風(fēng)。細(xì)菌隨病人鼻分泌物、痰、汗液、乳汁、精液或陰道分泌物排出，通過(guò)直接接觸或由飛沫傳播。潛伏期長(zhǎng)，發(fā)病慢、病程長(zhǎng)。遷延不愈。根據(jù)臨床表現(xiàn)、免疫病理變化、細(xì)菌檢查結(jié)果等將麻風(fēng)分為3種類型：

1．瘤型麻風(fēng)

2．結(jié)核樣型

3．界線類綜合征麻風(fēng)的免疫主要是靠細(xì)胞免疫

瘤型麻風(fēng)為疾病的進(jìn)行性和嚴(yán)重的臨床類型，如不進(jìn)行治療，往往發(fā)展至最終死亡。細(xì)菌侵犯皮膚、粘膜及各臟器，形成肉芽腫病變。用抗酸染色法檢查，可見(jiàn)有大量的麻風(fēng)桿菌集聚，含菌量多，且各臟器均有發(fā)現(xiàn)，傳染性強(qiáng)。本型麻風(fēng)病人的T細(xì)胞免疫應(yīng)答有所缺陷，表現(xiàn)為細(xì)胞免疫低下或免疫抑制，巨噬細(xì)胞活化功能低，故麻風(fēng)桿菌能在體內(nèi)繁殖。細(xì)胞免疫的低下或抑制是由于細(xì)菌感染后的結(jié)果。變態(tài)反應(yīng)皮膚試驗(yàn)（麻風(fēng)菌素試驗(yàn)）陰性。血清中抗體含量高，有免疫復(fù)合物沉積，導(dǎo)致出現(xiàn)肉芽腫病變，形成結(jié)節(jié)性紅斑或疣狀結(jié)節(jié)，如獅面。

結(jié)核樣型麻風(fēng)此型麻風(fēng)常為自限性疾病，較穩(wěn)定，損害可自行消退。病變主要在皮膚，侵犯真皮淺層，早期病