人教高中生物選修課件：微生物的實驗室培養(yǎng)和分離完整版

酵母菌18-25℃有氧：有氧呼吸，大量繁殖無氧：無氧呼吸，產(chǎn)生酒精醋酸菌30-35℃有氧：糖源充足，將糖分解成醋酸缺少糖原，將乙醇變?yōu)橐胰┰僮優(yōu)榇姿崦沟?5-18℃蛋白酶將蛋白質(zhì)分解成肽、氨基酸脂肪酶將脂肪分解成甘油和脂肪酸乳酸菌無氧：無氧呼吸，產(chǎn)生乳酸30-40℃酵母菌18-25℃有氧：有氧呼吸，大量繁殖無氧：無氧呼吸，產(chǎn)微生物包括哪五類：病毒細菌放線菌真菌原生動物

原核生物界

原生生物界真菌界病毒界微生物包括哪五類：病毒原核生物界原生生物界真菌界病毒界1.細菌的形態(tài)球菌弧菌桿菌1.細菌的形態(tài)球菌弧菌桿菌單個或少數(shù)菌體2.特征：大小、形狀、光澤度、顏色、透明度等。3.功能：1.定義：菌落(P18)鑒定菌種的重要依據(jù)固體培養(yǎng)基上大量繁殖肉眼可見的子細胞群體單個2.特征：大小、形狀、光澤度、3.功能：1.定義：菌落([三]微生物的培養(yǎng)與觀察根霉曲霉青霉人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)[三]微生物的培養(yǎng)與觀察根霉幾種菌落及其形態(tài)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)幾種菌落及其形態(tài)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室?guī)追N菌落及其形態(tài)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)幾種菌落及其形態(tài)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室課題1微生物的實驗室培養(yǎng)

1.提供營養(yǎng)和條件2.防止污染人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)課題1微生物的實驗室培養(yǎng)一、培養(yǎng)基1、概念：

人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)的不同需求，配置出供其生長繁殖的營養(yǎng)基質(zhì)。人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)一、培養(yǎng)基1、概念：人們按照微生物對營養(yǎng)物質(zhì)按物理性質(zhì)劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基表面生長固體培養(yǎng)基：菌落沉淀生長均勻混濁生長半固體培養(yǎng)基：2、分類：人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)按物理性質(zhì)劃分固體培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基表面生長固體培按用途劃分基礎(chǔ)培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基:含有一般微生物生長繁殖所需的基本營養(yǎng)物質(zhì)的培養(yǎng)基（牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基）用來將某種或某類微生物從混雜的微生物群體中分離出來的培養(yǎng)基。在培養(yǎng)基中加入特殊營養(yǎng)物質(zhì)或化學(xué)物質(zhì)，有利于特定微生物的生長，同時抑制其它微生物的生長。如

的培養(yǎng)基。選擇培養(yǎng)基:用于鑒別不同類型微生物的培養(yǎng)基。微生物產(chǎn)生某種代謝產(chǎn)物，與培養(yǎng)基中的特殊化學(xué)物質(zhì)發(fā)生特定的化學(xué)反應(yīng)，產(chǎn)生明顯的特征變化。如？以尿素為唯一氮源、以纖維素為唯一碳源在以尿素為唯一氮源的培養(yǎng)基中加入酚紅指示劑，以纖維素為唯一碳源的培養(yǎng)基中加入剛果紅。人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)按用途劃分基礎(chǔ)培養(yǎng)基：鑒別培養(yǎng)基:含有一般微生物生長繁殖所需選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基:

分離酵母菌、霉菌等真菌加入高濃度食鹽的培養(yǎng)基:

分離金黃色葡萄球菌不加氮源的無氮培養(yǎng)基:

分離固氮菌不加含碳有機物的無碳培養(yǎng)基:

分離自養(yǎng)型微生物加入青霉素等抗生素的培養(yǎng)基:

分離導(dǎo)入了目的基因的受體細胞人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)選擇培養(yǎng)基加入青霉素的培養(yǎng)基:人教高中生物選修1課件：2.1【例】以下是單克隆抗體制備流程示意圖：根據(jù)培養(yǎng)基的________分類，圖中HAT培養(yǎng)基屬于________培養(yǎng)基選擇用途人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)【例】以下是單克隆抗體制備流程示意圖：根據(jù)培養(yǎng)基的____一、培養(yǎng)基一般都含有

四類物質(zhì)，此外還要滿足微生物生長對、

以及

的要求。3、營養(yǎng)成分：碳源、氮源、水、無機鹽

pH特殊營養(yǎng)物質(zhì)O2

例如:生長因子(即細菌生長必需，而自身不能合成的化合物,如維生素、某些氨基酸、嘌呤、嘧啶)以及氧氣、二氧化碳、滲透壓等的要求。

培養(yǎng)霉菌時：酸性培養(yǎng)細菌：中性或弱堿性人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)一、培養(yǎng)基一般都含有微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)是：微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能1.碳源2.氮源3.生長因子4.無機鹽5.水：凡是能為微生物提供所需碳元素的營養(yǎng)物質(zhì)。①無機碳源：CO2；CO32-、NaHCO3等②有機碳源：糖類、牛肉膏、蛋白胨、脂肪酸、花生粉餅、石油等①構(gòu)成細胞物質(zhì)和一些代謝產(chǎn)物②異養(yǎng)微生物的能源⑴.概念⑵.來源：⑶.作用：1.微生物的碳源自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)微生物需要的五大類營養(yǎng)要素物質(zhì)是：微生物需要的營養(yǎng)物質(zhì)及功能①無機氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有機氮源：尿素、牛肉膏、蛋白胨、氨基酸等凡是能夠為微生物提供N元素的營養(yǎng)物質(zhì)。主要用于合成蛋白質(zhì)、核酸及含N的代謝產(chǎn)物。2.微生物的氮源⑴.概念：⑵.來源：⑶.作用：3.生長因子⑶.常見的生長因子：⑴.概念：⑵.作用：微生物生長不可缺少的微量有機物。酶和核酸的組成成分。維生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。①無機氮源：N2、NH4+、NO3-、NH3等。②有機氮源：N2NH3等有機物中的氮（還有尿素）無機氮牛肉膏、蛋白胨圓褐固氮菌、硝化細菌和大腸桿菌分析氮源：N2NH3等有機物中的氮（還有尿素）無機氮牛肉膏、蛋白胨圓褐3基本成分：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、無機鹽⑴碳源無機碳源：有機碳源：CO2、CO32-、HCO3-葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等自養(yǎng)微生物異養(yǎng)微生物⑵氮源無機氮源：有機氮源：N2、NH4＋、NO3-等牛肉膏、蛋白胨、酵母膏、尿素等注：含C、H、O、N的有機物是異養(yǎng)型微生物的碳源、氮源、能源3基本成分：思考：微生物“吃”什么？碳源、氮源、水、無機鹽⑴4.培養(yǎng)基的用途液體培養(yǎng)基：增菌、工業(yè)生產(chǎn)固體培養(yǎng)基：純化（分離），鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種半固體培養(yǎng)基：動力檢測4.培養(yǎng)基的用途液體培養(yǎng)基：增菌、工業(yè)生產(chǎn)劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)化學(xué)成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)基用途鑒別培養(yǎng)基培養(yǎng)基的種類不加凝固劑加凝固劑，如瓊脂工業(yè)生產(chǎn)觀察微生物的運動、分類鑒定微生物分離、鑒定、活菌計數(shù)、保藏菌種含化學(xué)成分不明確的天然物質(zhì)工業(yè)生產(chǎn)培養(yǎng)基成分明確分類、鑒定在培養(yǎng)基中加入某種化學(xué)物質(zhì),以抑制不需要的微生物的生長,促進所需要的微生物的生長培養(yǎng)、分離出特定微生物在培養(yǎng)基中加入某種指示劑或化學(xué)藥品,用以鑒別不同種類的微生物鑒別不同種類微生物選擇培養(yǎng)基液體培養(yǎng)基半固體培養(yǎng)基固體培養(yǎng)基P84劃分標準培養(yǎng)基種類特點用途物理性質(zhì)化學(xué)成分天然培養(yǎng)基合成培養(yǎng)5.配制原則⑴目的明確：⑵營養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當⑶適宜的pH值：有機碳源異養(yǎng)型：根據(jù)微生物的種類、培養(yǎng)目的選擇原料自養(yǎng)型：不加碳源加入緩沖劑細菌偏堿，真菌偏酸（CO2碳源）生產(chǎn)科研5.配制原則⑴目的明確：⑵營養(yǎng)全面、濃度適宜、比例恰當⑶適自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()A．碳源B．氮源C．無機鹽D．特殊營養(yǎng)物質(zhì)A自養(yǎng)型微生物與異養(yǎng)型微生物的培養(yǎng)基的主要差別是()思考：1.獲得純凈培養(yǎng)物的關(guān)鍵？2.無菌技術(shù)除了用來防止實驗室的培養(yǎng)物被其他外來微生物污染外，還有什么目的？（P15旁欄思考）3.消毒和滅菌有何不同？4.常用的消毒和滅菌方法有哪些？無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。㈣.無菌技術(shù)防止外來雜菌的入侵思考：無菌技術(shù)還能有效避免操作者自身被微生物感染。㈣.無菌技二、無菌技術(shù)思考：1.無菌技術(shù)的關(guān)鍵是？2.無菌技術(shù)的目的是？防止外來雜菌的入侵目的：防止實驗室的培養(yǎng)物

；同時避免__________________________。被其他微生物污染避免操作者自身被微生物感染3.無菌技術(shù)的常用方法有？消毒和滅菌二、無菌技術(shù)思考：1.無菌技術(shù)的關(guān)鍵是？2.無菌技術(shù)的目的是

（１）消毒定義：利用化學(xué)或物理方法，殺死大部份致病微生物的過程。2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別

以化學(xué)劑或物理方法消滅所有微生物，包括所有細菌的繁殖體、芽孢、霉菌及病毒，而達到完全無菌之過程。

（2）滅菌的定義：（１）消毒定義：2.消毒與滅菌的概念及兩者的區(qū)別以化芽孢有些細菌在一定的條件下，細胞里面形成一個橢圓形的休眠體，叫做芽孢。芽孢的壁很厚，對干旱、低溫、高溫等惡劣的環(huán)境有很強的抵抗力。例如，有的細菌的芽孢，煮沸3小時以后才死亡。芽孢又小又輕，可以隨風(fēng)飄散。當環(huán)境適宜（如溫度、水分適宜）的時候，芽孢又可以萌發(fā)，形成一個細菌孢子細菌、原生動物、真菌和植物等產(chǎn)生的一種有繁殖作用的生殖細胞。能直接發(fā)育成新個體。人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)芽孢有些細菌在一定的條件下，細胞里面形成一個橢圓形的休眠體，惡劣環(huán)境下，一個細菌產(chǎn)生一個芽孢，條件適宜時重新成為一個細菌，數(shù)量沒有增加，因此芽孢不是細菌的繁殖體，是休眠體，因此稱作“芽胞”更為確切。芽孢某些細菌（芽孢桿菌，梭狀芽孢桿菌，少數(shù)球菌等）在其生長發(fā)育后期，在細胞內(nèi)形成的一個圓形或橢圓形，厚壁，含水量低，抗逆性強的休眠體構(gòu)造，稱為芽孢。人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)惡劣環(huán)境下，一個細菌產(chǎn)生一個芽孢，條件適宜時重新成為一個細菌消毒滅菌概念指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)部的

微生物(不包括

)指使用強烈的理化因素殺死物體內(nèi)外

微生物，包括

。常用方法適用對象操作空間、液體、雙手等接種環(huán)、接種針、玻璃器皿，培養(yǎng)基等部分芽孢和孢子所有芽孢和孢子煮沸消毒法、巴氏消毒法、化學(xué)藥劑消毒法、紫外線消毒法灼燒滅菌、干熱滅菌、高壓蒸汽滅菌《三維P11》人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)消毒滅菌概念指使用較為溫和的物理或化學(xué)方法僅殺死物體表面或內(nèi)消毒的方法：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min2、巴氏消毒法：70-75℃下煮30min或

80℃下煮15min3、化學(xué)藥劑消毒法:用75%酒精、新潔爾滅等進行皮膚消毒;氯氣消毒水源4、紫外線或化學(xué)藥物消毒人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)消毒的方法：1、煮沸消毒法:100℃煮沸5-6min人教高中滅菌的方法：1、灼燒滅菌2、干熱滅菌：160-170℃下加熱1-2h。3、高壓蒸汽滅菌：100kPa、121℃下維持15-30min.人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)人教高中生物選修1課件：2.1微生物的實驗室培養(yǎng)和分離(共59張PPT)滅菌的方法：1、灼燒滅菌人教高中生物選修1課件：2.1微生物請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合適的方法。⑴培養(yǎng)細菌用的培養(yǎng)基與培養(yǎng)皿⑵玻棒、試管、燒瓶和吸管⑶實驗操作者的雙手答：（1）、（2）需要滅菌；（3）需要消毒。P16旁欄思考請你判斷以下材料或用具是否需要消毒或滅菌。如果需要，請選擇合（1）對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行

。（2）將用于微生物培養(yǎng)的器皿、接種用具和培養(yǎng)基等器具進行

.（3）為避免周圍環(huán)境中微生物的污染，實驗操作應(yīng)在酒精燈火焰附近進行。（4）實驗操作時應(yīng)避免已經(jīng)滅菌處理的材料用具與周圍的物品相接觸。清潔和消毒滅菌防雜菌污染包括以下幾方面（1）對實驗操作的空間、操作者的衣著和手，進行煮沸消毒法：巴氏消毒法：化學(xué)藥劑：紫外線：針對不耐高溫的液體接種室、超凈工作臺培養(yǎng)皿.吸管等玻璃器皿耐高溫、需保持干燥灼燒滅菌：干熱滅菌：高壓蒸汽滅菌：接種環(huán)等金屬工具實驗操作者的雙手培養(yǎng)基1、消毒方法2、滅菌方法煮沸消毒法：針對不耐高溫的液體接種室、超凈工作臺培養(yǎng)皿.吸管計算

稱量

溶化

滅菌

倒平板三、微生物培養(yǎng)的實驗操作1、制備培養(yǎng)基制備培養(yǎng)基純化大腸桿菌大腸桿菌的純化培養(yǎng)計算稱量溶化滅菌倒平板三、微生物培養(yǎng)的實驗操作1、制三、實驗操作

（一）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細菌）三、實驗操作（一）制備牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基（用于培養(yǎng)細菌1．計算、稱量2．溶化3．調(diào)pH：pH7．6

4．過濾：這一步可以省去。5．分裝：分裝過程中注意不要使培養(yǎng)基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。分裝三角燒瓶的量以不超過三角燒瓶容積的一半為宜。6．加塞7．包扎操作步驟1．計算、稱量操作步驟8．滅菌:將50ml培養(yǎng)基用玻棒轉(zhuǎn)移至三角錐瓶中，塞上棉花塞，包上牛皮紙，再放入高壓蒸氣滅菌鍋，在壓力為100kPa、溫度為121℃，滅菌15～30min。將培養(yǎng)基用舊報紙包裹，放入干熱滅菌箱內(nèi)，在160～170℃下滅菌2h。9．倒平板:待培養(yǎng)基冷卻到50℃左右時，在酒精燈附近倒平板。（倒平板操作見課本）2d后觀察平板，無雜菌污染才可用來接種.10．無菌檢查：將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24—48小時，以檢查滅菌是否徹底。8．滅菌:1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你用什么辦法來估計培養(yǎng)基的溫度？用手觸摸，剛剛不燙手時2.為什么需要使錐形瓶的瓶口通過火焰？灼燒滅菌，防止瓶口的微生物的污染有關(guān)問題3.平板冷凝后，為什么要將平板倒置？答：①防止皿蓋上的水珠落入培養(yǎng)基造成污染②避免培養(yǎng)基中水分過快蒸發(fā)。1.培養(yǎng)基滅菌后，需要冷卻到50℃左右時，才能用來倒平板。你4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的部位，這個平板還能用來培養(yǎng)微生物嗎？為什么？答：最好不要用這個平板培養(yǎng)微生物。防止空氣中的微生物可能在皿蓋與皿底之間的培養(yǎng)基上滋生。4.在倒平板的過程中，如果不小心將培養(yǎng)基濺在皿蓋與皿底之間的2、純化大腸桿菌平板劃線法:稀釋涂布平板法:(1)接種方法...連續(xù)劃線，...逐步稀釋......梯度稀釋，...分別涂布...2、純化大腸桿菌平板劃線法:稀釋涂布平板法:(1)...連續(xù)將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)_______在_______旁冷卻接種環(huán)，并打開棉塞將試管口通過火焰.將已______的接種環(huán)伸入菌液中蘸取一環(huán)菌液左手將皿蓋打開一條縫隙，右手將沾有菌種的接種環(huán)迅速伸入平板內(nèi)，劃__________條平行線，蓋上皿蓋。注意不要劃破培養(yǎng)基。.將試管通過火焰，并塞上棉塞火焰冷卻三至五灼燒接種環(huán)，待其冷卻后，從第一區(qū)域劃線的_______開始往第二區(qū)域內(nèi)劃線。重復(fù)以上操作，在三、四、五區(qū)域內(nèi)劃線。注意不要將最后一區(qū)的劃線與第一區(qū)相連。末端燒紅將平板_____放入培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。

倒置將接種環(huán)放在火焰上灼燒，直到接種環(huán)_______在_____平板劃線的操作方法

平板劃線的操作方法人教高中生物選修課件：微生物的實驗室培養(yǎng)和分離PPT完整版答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物污染培養(yǎng)物；每次劃線前灼燒接種環(huán)是為了殺死上次劃線結(jié)束后，接種環(huán)上殘留的菌種，使下一次劃線時，接種環(huán)上的菌種直接來源于上次劃線的末端，從而通過劃線次數(shù)的增加，使每次劃線時菌種的數(shù)目逐漸減少，以便得到菌落。劃線結(jié)束后灼燒接種環(huán)，能及時殺死接種環(huán)上殘留的菌種，避免細菌污染環(huán)境和感染操作者。問題討論1.為什么在操作的第一步以及每次劃線之前都要灼燒接種環(huán)？在劃線操作結(jié)束時，仍然需要灼燒接種環(huán)嗎？為什么？答：操作的第一步灼燒接種環(huán)是為了避免接種環(huán)上可能存在的微生物2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免接種環(huán)溫度太高，殺死菌種。3.在作第二次以及其后的劃線操作時，為什么總是從上一次劃線的末端開始劃線？答：劃線后，線條末端細菌的數(shù)目比線條起始處要少，每次從上一次劃線的末端開始，能使細菌的數(shù)目隨著劃線次數(shù)的增加而逐步減少，最終能得到由單個細菌繁殖而來的菌落。2.在灼燒接種環(huán)之后，為什么要等其冷卻后再進行劃線？答：以免6支試管，分別加入9ml無菌水1ml1011ml1021ml1031ml1041ml1051ml106⑵稀釋涂布平板法：a.梯度稀釋菌液：菌液微量移液器怎樣得到稀釋度為101，102，103，104，105，106的菌液？6支試管，分別加入9ml無菌水1ml1011ml1021ml將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中

取少量稀釋液滴加到培養(yǎng)基表面

待酒精燃盡后冷卻8～10s

將沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃灼燒用涂布器將菌液均勻地涂布在培養(yǎng)基表面。涂布時可轉(zhuǎn)動培養(yǎng)皿，使涂布均勻稀釋涂布平板法將菌液進行一系列梯度稀釋，然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面，進行培養(yǎng)。在稀釋度足夠高的菌液里，聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞，從而能在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落。將涂布器浸在盛有酒精的燒杯中取少量稀釋液滴加到培養(yǎng)基表面浸⑵稀釋涂布平板法：a.梯度稀釋菌液：b.涂布平板：不超過0.1ml各梯度分別涂布3個平板1個不涂布作空白對照滴灼涂浸⑵稀釋涂布平板法：a.梯度稀釋菌液：b.涂布平板：不超過0稀釋103倍稀釋104倍稀釋105倍稀釋103倍稀釋104倍稀釋105倍平板劃線法稀釋涂布平板法下圖分別用什么接種法相同點：可以觀察菌落特征，用于菌種的純化區(qū)別：平板劃線法，不能計數(shù)；稀釋涂布平板法，能計數(shù)平板劃線法稀釋涂布平板法下圖分別用什么接種法相同點：可以觀察3個劃線平板1個不劃線平板（重復(fù)實驗）（空白對照）接種的培養(yǎng)基倒置放入37℃的恒溫箱中培養(yǎng)12h～24h（3）培養(yǎng)純化大腸桿菌的實驗是否需要設(shè)置對照實驗？3個劃線平板1個不劃線平板（重復(fù)實驗）（空白對照）接種的培養(yǎng)怎么確定所倒平板未被雜菌污染？將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室中培養(yǎng)24～48小時，觀察是否有菌落存在以確定是否被污染或滅菌是否徹底。有關(guān)問題怎么確定所倒平板未被雜菌污染？將滅菌的培養(yǎng)基放入37℃的溫室(4)實驗結(jié)果觀察:

①未接種的培養(yǎng)基表面是否有菌落生長？②菌落的形態(tài)、大小、顏色？培養(yǎng)12h和24小時后，觀察到的結(jié)果相同嗎？(4)實驗結(jié)果觀察:培養(yǎng)12h和24小時后，觀察到的結(jié)果相同菌種的保存1、臨時保藏：接種到固體斜面培養(yǎng)基，菌落長成后置于4℃冰箱保存。2、長期保存：甘油冷凍管藏法固體斜面這種方法保存的時間不長，菌種容易被污染或產(chǎn)生變異。菌種的保存1、臨時保藏：接種到固體斜面培養(yǎng)基，菌落長成后置于1.下列有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述,錯誤的是(

)A.首先將菌液進行一系列的梯度稀釋B.然后將不同稀釋度的菌液分別涂布

到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面C.適宜條件下培養(yǎng)D.結(jié)果都可在培養(yǎng)基表面形成單個的菌落2.高中生物學(xué)實驗中,在接種時不進行嚴格無菌操作對實驗結(jié)果影響最大的一項是(

)A.將少許干酵母加入到新鮮的葡萄汁中B.將毛霉菌液接種在切成小塊的鮮豆腐上C.將轉(zhuǎn)基因植物葉片接種到無菌培養(yǎng)基上D.將土壤浸出液涂布在無菌的選擇培養(yǎng)基上DC1.下列有關(guān)稀釋涂布平板法的敘述,錯誤的是()DC【典例解析】例3:關(guān)于微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是()A.是碳源的物質(zhì)不可能同時是氮源B.凡碳源都提供能量C.除水以外的無機物只提供無機鹽D.無機氮源也能提供能量D【典例解析】例3:關(guān)于微生物營養(yǎng)物質(zhì)的敘述中，正確的是(4.下表為某微生物培養(yǎng)基的配方,請回答下列問題(1)該培養(yǎng)基未加入凝固劑

,依據(jù)物理性質(zhì),該培養(yǎng)基屬于

培養(yǎng)基。

(2)該培養(yǎng)基中的碳源是

,因為該物質(zhì)是有機物,因此也可給培養(yǎng)的微生物提供

。

成分含量成分含量NaNO3[來源:學(xué)§科3g§網(wǎng)Z§X§X§K]K2HPO41gKCl0.5gMgSO4·7H2O0.5gFeSO40.01g(CH2O)[來源:30gZ]青霉素0.1萬單位H2O1000mL瓊脂液體(CH2O)能源4.下表為某微生物培養(yǎng)基的配方,請回答下列問題(1)該培養(yǎng)（1）表中營養(yǎng)成分共有

類。（2）不論何種培養(yǎng)基，在各種成分都溶化后分裝前，要進行的是

。（3）右表中各成分重量確定的原則

。（