中藥制劑的含量測定

中藥指紋圖譜與特征指紋圖譜指紋圖譜：系指中藥包括中藥材、飲片、提取物或中成藥經(jīng)適當(dāng)處理后，采用一定的分析手段，得到的能夠標(biāo)示該中藥主要化學(xué)成分特性的色譜或光譜圖譜，中藥質(zhì)量評價中常用色譜指紋圖譜。特征指紋圖譜：系指從中藥指紋圖譜中選取若干專屬性強的色譜峰或色譜峰組合組成特征指紋圖譜。主要用于中藥的專屬性鑒別。中藥制劑教研室中藥指紋圖譜與特征指紋圖譜指紋圖譜：系指中藥包括中藥材、飲片1特點中藥制劑教研室特點中藥制劑教研室2特點中藥制劑教研室特點中藥制劑教研室3中藥制劑教研室中藥制劑分析工作的基本程序？

一、取樣二、供試品溶液的制備三、鑒別四、檢查五、含量測定六、原始記錄和檢驗報告復(fù)習(xí)中藥制劑教研室中藥制劑分析工作的基本程序？一、取4中藥制劑教研室復(fù)習(xí)TLC鑒別的實驗步驟？供試品溶液的制備

對照物的選擇薄層板的制備點樣展開顯色與檢視結(jié)果記錄與保存

中藥制劑教研室復(fù)習(xí)TLC鑒別的實驗步驟？供試品溶液的制備5中藥制劑教研室1.對照品對照：一種或幾種對照品2.陰陽對照法：陽性對照液/陰性對照液3.對照藥材和對照品同時對照

對照物的選擇？復(fù)習(xí)中藥制劑教研室1.對照品對照：一種或幾種對照品對照物的選擇6中藥制劑教研室第四章中藥制劑的含量測定中藥制劑教研室第四章7中藥制劑教研室大綱要求掌握中藥制劑含量測定的目的特點掌握含量測定樣品處理的目的及作用掌握方法學(xué)考察試驗內(nèi)容熟悉樣品提取分離常見的方法及其特點熟悉色譜法分離凈化樣品常用填料及其特點中藥制劑教研室大綱要求掌握中藥制劑含量測定的目的特點8中藥制劑教研室概述目的通過制劑中某種成分的含量高低是否符合規(guī)定來判定藥物是否合格意義保證中藥制劑的質(zhì)量，達到臨床用藥有效、安全、穩(wěn)定中藥制劑教研室概述目的通過制劑中某種成分的含量9第一節(jié)樣品處理第一節(jié)樣品處理10中藥制劑教研室含量測定樣品的處理1.除去雜質(zhì)、純化樣品，提高分析方法的重現(xiàn)性和準(zhǔn)確度2.富集濃縮或進行衍生化3.制成便于分析測定的穩(wěn)定試樣4.使試樣的形式及所用溶劑符合分析測定的要求目的中藥制劑教研室含量測定樣品的處理1.除去雜質(zhì)、純化樣品，提高11中藥制劑教研室含量測定樣品的處理1.粉碎2.提取3.分離凈化步驟中藥制劑教研室含量測定樣品的處理1.粉碎步驟12中藥制劑教研室含量測定樣品的處理一、樣品的粉碎目的：1.保證所取樣品均勻而有代表性，提高測定結(jié)果的精密度和準(zhǔn)確度2.加速被測定組分的提取完全中藥制劑教研室含量測定樣品的處理一、樣品的粉碎13中藥制劑教研室含量測定樣品的處理一、樣品的粉碎1.避免過細2.避免樣品受污染3.避免粉塵飛散及揮發(fā)性成分的損失4.避免丟棄不易通過篩孔的部分顆粒粉碎機、研缽、高速勻漿機、玻璃勻漿器細粉：全部通過5號篩（80目），并含能過6號篩（100目）不少于95％的粉末注意設(shè)備中藥制劑教研室含量測定樣品的處理一、樣品的粉碎細粉：全部通過14中藥制劑教研室含量測定樣品的處理二、樣品的提取冷浸法（浸泡提取法）回流提取法連續(xù)回流提取法超聲提取法超臨界流體提取法中藥制劑教研室含量測定樣品的處理二、樣品的提取15中藥制劑教研室含量測定樣品的處理浸泡提取法中供試品的制備方式1.部分測定法（分量法）：即將浸泡后的溶液，用適宜濾器濾過，精密量取一定體積，進行測定注：此法不適宜揮發(fā)性較大的提取溶劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理浸泡提取法中供試品的制備方式16中藥制劑教研室含量測定樣品的處理浸泡提取法中供試品的制備方法2.全部測定法（即總量測定法）：將浸泡后的溶液濾過，濾渣充分用溶劑洗滌至提取完全，合并濾液及洗液，濃縮或蒸干，殘留物用另一溶劑溶解，定量轉(zhuǎn)入量瓶中，稀釋至刻度，搖勻，進行測定注意：轉(zhuǎn)移完全中藥制劑教研室含量測定樣品的處理浸泡提取法中供試品的制備方法17中藥制劑教研室乙肝寧顆粒（黃芪甲苷）中國藥典2005年版一部P291供試品溶液的制備取裝量差異下的本品，研細，取約5g或1g（無蔗糖），精密稱定，加水20ml使溶解，用以水飽和的正丁醇振搖提取4次，每次20ml，合并正丁醇液，用氨試液20ml分2次洗滌，取正丁醇液，用以正丁醇飽和的水20ml分2次洗滌，取正丁醇液，蒸干，殘渣加甲醇適量使溶解，移至5ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，濾過，取續(xù)濾液，即得。中藥制劑教研室乙肝寧顆粒供試品溶液的制備取裝量差18中藥制劑教研室三、樣品的分離凈化原則：從提取液中除去對測定有干擾的雜質(zhì)，而又不損失被測定成分依據(jù)：被測定成分和雜質(zhì)在理化性質(zhì)上的差異，結(jié)合測定方法的要求中藥制劑教研室三、樣品的分離凈化19中藥制劑教研室含量測定樣品的處理三、樣品的分離凈化（色譜法）固相萃?。⊿olid-PhaseExtraction）/液-固萃?。↙iquid-SolidExtraction)

當(dāng)目標(biāo)分析物與SPE填料極性相似時，樣品流過SPE柱后，目標(biāo)化合物在填料上有較好的保留，而極性與填料相差較遠的非目標(biāo)化合物或雜質(zhì)直接流出，再用適當(dāng)洗脫液把目標(biāo)化合物洗脫、收集，可直接分析或濃縮后分析；或使雜質(zhì)保留于柱上，直接洗脫被測成分進行測定。原理中藥制劑教研室含量測定樣品的處理三、樣品的分離凈化（色譜法）20中藥制劑教研室含量測定樣品的處理LSE常用的凈化劑（填料）硅膠、氧化鋁鍵合相硅膠大孔樹脂聚酰胺硅藻土離子交換樹脂中藥制劑教研室含量測定樣品的處理LSE常用的凈化劑（填料）21中藥制劑教研室含量測定樣品的處理硅膠作用機制：溶質(zhì)在吸附劑表面的極性吸附作用特點：通常適于酸性和中性物質(zhì)的分離；如分離堿性物質(zhì)，可在展開劑中加入少量稀堿（如三乙醇胺）常見的商品硅膠柱為SEP-PAKLSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理硅膠LSE常用的凈化劑22中藥制劑教研室含量測定樣品的處理鍵合相硅膠借助于化學(xué)反應(yīng)的方法將固定液的官能團鍵合在硅膠的表面而構(gòu)成鍵合相硅膠。有機硅烷與硅膠表面化學(xué)鍵合反應(yīng)，形成的-Si-O-Si-C-鍵是對溶劑、熱和化學(xué)穩(wěn)定的結(jié)構(gòu)LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理鍵合相硅膠LSE常用的凈化劑23中藥制劑教研室含量測定樣品的處理鍵合相硅膠

常用的有十八烷基（octadecylsilane；C18/ODS)、氨基、氰基鍵合相鍵合相硅膠。分別將氨丙硅烷基（-Si-CH2-CH2-CH2-NH2）及氰乙硅烷基（-Si-CH2-CH2-CN）鍵合在硅膠上而制成。LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理鍵合相硅膠LSE常用的24中藥制劑教研室中藥制劑教研室25中藥制劑教研室含量測定樣品的處理氧化鋁類型：堿性氧化鋁、中性氧化鋁和酸性氧化鋁分離機制：溶質(zhì)在吸附劑表面的極性吸附作用堿性氧化鋁適于堿性和中性物質(zhì)的分離酸性和中性氧化鋁適于分析酸性和中性物質(zhì)LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理氧化鋁LSE常用的凈化劑26中藥制劑教研室八寶坤順丸中國藥典2005年版一部P311對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含30ug的溶液，搖勻，即得。供試品溶液的制備取重量差異項下的本品，剪碎，取約2g，精密稱定，精密加入70%甲醇50ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，通過中性氧化鋁柱（100~200目，2g，內(nèi)徑1cm，用50%甲醇濕法裝柱），收集至50ml量瓶中，再用50%甲醇洗脫，收集洗脫液至近刻度，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得。測定法分別精密吸取對照品溶液10ul與供試品溶液10~15ul，注入液相色譜儀，測定，即得。本品每丸含白芍以芍藥苷計，不得少于2.6mg。中藥制劑教研室八寶坤順丸對照品溶液的制備27中藥制劑教研室中藥制劑教研室28中藥制劑教研室含量測定樣品的處理大孔樹脂類型：極性和非極性特點：表面積大，傳質(zhì)速率較高，具有不同的極性及適于吸附較大分子極性大孔樹脂：為丙稀酰胺聚合物，對極性化合物有相對強的吸附力非極性大孔樹脂：為苯乙烯和二乙烯苯的共聚物，對非極性水溶性成分有吸附力LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理大孔樹脂LSE常用的凈化劑29中藥制劑教研室含量測定樣品的處理大孔樹脂使用處理：使用前用甲醇、乙醇、丙酮等有機溶劑除去雜質(zhì)LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理大孔樹脂LSE常用的凈化劑30中藥制劑教研室含量測定樣品的處理聚酰胺機制：主要通過與溶質(zhì)形成氫鍵而產(chǎn)生吸附作用用于含酚、酸、醌類藥物樣品液的凈化分離LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理聚酰胺LSE常用的凈化劑31中藥制劑教研室含量測定樣品的處理硅藻土、纖維素親水性填料機制：分配作用應(yīng)用：多以水基質(zhì)液為固定相，與水不混溶的有機溶劑為流動相，較親脂的成分從固定相轉(zhuǎn)移到流動相，而被洗脫。LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理硅藻土、纖維素LSE常用的凈32中藥制劑教研室含量測定樣品的處理離子交換樹脂特點：可除去樣品中的離子，防止組分分解，用于萃取樣品液中可解離化合物弱酸性藥物：中性和堿性條件下用陰離子交換樹脂柱，水及有機溶劑洗脫后，酸性溶液洗目標(biāo)成分LSE常用的凈化劑中藥制劑教研室含量測定樣品的處理離子交換樹脂LSE常用的凈化33中藥制劑教研室含量測定樣品的處理活化以與樣品溶劑性質(zhì)相似的溶劑對SPE柱進行活化，用量約1-2ml/100mg。上樣液態(tài)或溶解后的樣品倒入活化后的SPE柱，使樣品勻速通過SPE柱。淋洗用洗脫能力較弱的溶劑淋洗，以去除雜質(zhì)。洗脫用洗脫能力較強的溶劑把仍保留在填料上的目標(biāo)化合物洗脫、收集。LSE使用方法中藥制劑教研室含量測定樣品的處理活化以與樣品溶劑性質(zhì)相似34中藥制劑教研室中藥制劑教研室35中藥制劑教研室LLE與LSE法的區(qū)別成本低：減少溶劑的使用量回收率高精確度高：無乳化現(xiàn)象蒸發(fā)少安全易自動化含量測定樣品的處理中藥制劑教研室LLE與LSE法的區(qū)別成本低：減少溶劑的使用36中藥制劑教研室常用定量分析方法一、化學(xué)分析法(5)二、可見－紫外分光光度法(4)三、薄層掃描法(3)四、氣相色譜法(2)五、高效液相色譜法(1)六、熒光分析法(6)七、原子吸收分光光度法(7)八、高效毛細管電泳法中藥制劑教研室常用定量分析方法一、化學(xué)分析法(5)37中藥制劑教研室系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容一、理論踏板數(shù)二、分離度三、重復(fù)性四、拖尾因子中藥制劑教研室系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容一、理論踏板數(shù)38中藥制劑教研室理論塔板數(shù)(有效塔板數(shù))是衡量色譜柱分離能力高低的重要指標(biāo)，買來一個色譜柱，一定先看它給出的柱效指標(biāo)(N)，就是指N的大小，只有N比較大，對難分離的物質(zhì)才能夠給出滿意的結(jié)果。理論踏板數(shù)系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容中藥制劑教研室理論塔板數(shù)(有效塔板數(shù))是衡量色譜柱分離39中藥制劑教研室定義

在規(guī)定的色譜條件下，注入供試品溶液或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)溶液，記錄色譜圖，量出供試品主成分峰或內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰的保留時間（tR)和半高峰寬(Wh/2)，按下式計算色譜柱的理論塔板數(shù)。N=5.54(tR/Wh/2)2保留時間tR：從進樣開始到組分出現(xiàn)濃度極大點時所需時間，即組分通過色譜柱所需要的時間理論踏板數(shù)系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容中藥制劑教研室定義N=5.54(tR/Wh/2)2保留時40中藥制劑教研室系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容色譜圖：樣品被流動相沖洗，通過色譜柱，流經(jīng)檢測器，所得到的信號－洗脫時間曲線稱為色譜流出曲線（簡稱流出曲線），即色譜圖中藥制劑教研室系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容色譜圖：樣品被流動相沖洗，通過色41中藥制劑教研室半峰寬W1/2：峰高一半處所對應(yīng)的峰寬峰寬W：正態(tài)分布色譜曲線兩拐點切線與基線相交的截距系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容中藥制劑教研室半峰寬W1/2：峰高一半處所對應(yīng)峰寬W：正態(tài)分42中藥制劑教研室

指待測峰與其他峰、內(nèi)標(biāo)峰或特定的雜質(zhì)對照峰之間的分離情況。分離度衡量色譜分離條件優(yōu)劣的參數(shù)系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容TLC中藥制劑教研室指待測峰與其他峰、內(nèi)標(biāo)峰或特定的雜質(zhì)對43中藥制劑教研室中藥制劑教研室44中藥制劑教研室取對照品溶液，連續(xù)進樣5次，求峰面積的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD),一般應(yīng)不大于2.0％重復(fù)性系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容HPLC/GC同一供試品溶液在同一薄層板上平行點樣的待測成分的峰面積測量值的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差應(yīng)不大于3.0％，需顯色后測定的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差不大于5.0％TLC中藥制劑教研室取對照品溶液，連續(xù)進樣5次，求峰面積的相45中藥制劑教研室

拖尾因子T=W0.05h/2d1W0.05h:為0.05峰高處的峰寬d1：為峰頂點至峰前沿之間的距離T應(yīng)在0.95～1.05之間(峰高法定量時）系統(tǒng)適應(yīng)性內(nèi)容中藥制劑教研室拖尾因子T=W0.05h/2d1W0.046中藥制劑教研室方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）一、專屬性二、線性與范圍三、精密度試驗四、準(zhǔn)確度試驗五、穩(wěn)定性試驗六、檢測靈敏度及檢測限的測定七、耐用性中藥制劑教研室方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）一、專屬性47中藥制劑教研室專屬性（specificity）

指在其他成分（雜質(zhì)、降解物、輔料等）可能存在情況下，采用的方法能準(zhǔn)確測定出被測物的特性，能反映該方法在有共存物時對供試物準(zhǔn)確而專屬的測定能力，是指該法用于復(fù)雜樣品分析時是否受到相互干擾程度的度量。方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室專屬性（specificity）指48中藥制劑教研室A:陰性對照溶液色譜圖；B:歐前胡素對照品溶液色譜圖；C:供試品溶液色譜圖方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室A:陰性對照溶液色譜圖；方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）49中藥制劑教研室線性（Linearity）與范圍設(shè)計的范圍內(nèi)，測試結(jié)果與試樣中被測物濃度直接呈正比關(guān)系的程度。方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）線性的含義線性考察的方法濃度點n應(yīng)為5～7，用濃度c對峰高h或被測物的響應(yīng)值之比進行回歸處理，建立回歸方程，r≥0.999（TLC≥0.995)中藥制劑教研室線性（Linearity）與范圍設(shè)計的范50中藥制劑教研室線性（Linearity）與范圍

確定樣品濃度與峰面積/峰高是否呈線性關(guān)系

確定線性范圍

直線是否通過原點方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）目的范圍的含義指達到一定精密度、準(zhǔn)確度和線性，測試方法適用的高、低限濃度或量的區(qū)間中藥制劑教研室線性（Linearity）與范圍方法學(xué)驗證（效51中藥制劑教研室qqμg)峰面積均值0.08106201.02885201.0119200.994900.24318605.17249609.8347614.496890.32424805.34619804.7837804.221250.486361211.549191211.23081210.912350.648481617.023321614.73281612.442380.810602006.691772006.55982006.42786中藥制劑教研室qqμg)峰面積均值0.08106201.0252中藥制劑教研室中藥制劑教研室53中藥制劑教研室精密度試驗（precision）定義指在規(guī)定條件下，同一個均勻樣品，經(jīng)多次取樣測定所得結(jié)果之間的接近程度。用偏差（d）、標(biāo)準(zhǔn)偏差(SD)、相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(RSD)（變異系數(shù)，CV）表示。方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室精密度試驗（precision）定義方法學(xué)驗證54中藥制劑教研室重復(fù)性

(repeatability)中間精密度（mid-precision)重現(xiàn)性(reproducibility)精密度試驗（precision）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室重復(fù)性(repeatability)精密度試55中藥制劑教研室在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)果的精密度。重復(fù)性(repeatability)方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）在規(guī)定的范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，至少測6次進行評價或設(shè)計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液進行測定，用9次測定結(jié)果評價定義要求中藥制劑教研室在相同條件下，由同一個分析人員測定所得結(jié)56編號取樣量（ml）峰面積平均峰面積測得量（μg）含量（μg/ml）平均值（μg/ml）RSD（%）14.00894.21088898.50323896.357055182.09345.5244.701.0924.00867.93341867.21960867.576505176.24644.0634.00876.81049878.23889877.52469178.26744.5744.00885.51129883.42120884.466245179.67844.9254.00879.37677877.07513878.22595178.41044.664.00875.81073877.34985876.58029178.07644.52取同一批號（20100701）的本品4ml，精密量取，平行取6份，依法制成供試品溶液，分別量取20μl各供試品溶液及對照品溶液注入液相色譜儀測定，計算歐前胡素含量及相對標(biāo)準(zhǔn)偏差，結(jié)果見表，表明方法重復(fù)性好。編號取樣量（ml）峰面積平均峰面積測得量（μg）含量（μg/57中藥制劑教研室

2.中間精密度同一實驗室，不同時間由不同分析人員用不同設(shè)備所得結(jié)果的精密度。

3.重現(xiàn)性(reproducibility)不同實驗室，不同分析人員測定結(jié)果的精密度。

方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）已有重現(xiàn)性驗證，不需驗證中間精密度重現(xiàn)性只有在該分析方法將被法定標(biāo)準(zhǔn)采用時做中藥制劑教研室2.中間精密度同一實驗室，不同時間由58中藥制劑教研室偏差（d）：測量值與平均值之差方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室偏差（d）：測量值與平均值之差方法學(xué)驗證（效能59中藥制劑教研室標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（SD或S）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（SD或S）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）60中藥制劑教研室相對標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（RSD）也稱變異系數(shù)（CV）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室相對標(biāo)準(zhǔn)（偏）差（RSD）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)61中藥制劑教研室指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近的程度，用百分回收率表示。準(zhǔn)確度（accuracy）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）定義回收試驗法加樣回收試驗法

方法中藥制劑教研室指用該方法測定的結(jié)果與真實值或參考值接近62中藥制劑教研室空白+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M。1、回收試驗（化學(xué)藥品）準(zhǔn)確度（accuracy）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室空白+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值63中藥制劑教研室已準(zhǔn)確測定藥物含量P的真實樣品+已知量A的對照品（或標(biāo)準(zhǔn)品）測定，測定值為M2、加樣回收試驗（中藥）準(zhǔn)確度（accuracy）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室已準(zhǔn)確測定藥物含量P的真實樣品+已知量64中藥制劑教研室規(guī)定的范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個測定結(jié)果進行評價或設(shè)計3個不同濃度，每個濃度各分別制備3份供試品溶液進行測定，用9次測定結(jié)果評價中間濃度加入量與供試品含量控制在1：1一般要求在95～105%范圍內(nèi)RSD一般在3%以內(nèi)數(shù)據(jù)要求準(zhǔn)確度（accuracy）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室規(guī)定的范圍內(nèi)，取同一濃度的供試品，用6個65編號取樣量（ml）原有量（μg）加入量（μg）測得量（μg）回收率（%）平均回收率（%）RSD（%）高13134.1137.808277.422104.0199.022.97高23134.1137.808266.54196.11高33134.1137.808273.726101.32中1289.491.868180.06698.69中2289.491.868182.147100.96中3289.491.868177.55495.96低1144.745.93489.61297.78低2144.745.93488.56695.50低3144.745.93491.039100.88編號取樣量（ml）原有量（μg）加入量（μg）測得量（μg）66中藥制劑教研室目的選定最佳的測定時間范圍方法

取對照品和樣品液各一份，分別在制備后4、8、12、16、24、48h測定求RSD≦2.0%穩(wěn)定性試驗中藥制劑教研室目的穩(wěn)定性試驗67時間0h4h8h12h32h40h48hRSD(%)供試品885.8881879.8532878.0195880.7465883.9976894.3388898.10.8608對照品530.5790528.9254531.8159535.3059535.3739541.4097542.50.9771時間0h4h8h12h32h40h48hRSD(%)供試品868中藥制劑教研室檢測限（limitofdetection，LOD）定義指試樣在確定的實驗條件下，被測物能被檢測出的最低濃度或含量。要求是限度檢驗效能指標(biāo)，無需定量測定，只要指出高于或低于該規(guī)定濃度即可。方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室檢測限（limitofdetection，69中藥制劑教研室檢測限（limitofdetection，LOD）確定LOD方法1.直觀法：用一系列已知濃度的供試品進行分析，試驗出能被可靠地檢測出的最低濃度或量2.信噪比法：把已知低濃度供試品測出的信號與空白樣品測出的信號進行比較，算出能被可靠地檢測出的最低濃度或量。

方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）一般以信噪比為3：1或2：1時相應(yīng)濃度或注入儀器的量確定檢測限中藥制劑教研室檢測限（limitofdetection，70中藥制劑教研室指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結(jié)果應(yīng)具有一定準(zhǔn)確度和精密度要求。常用信噪比法確定定量限，一般以信噪比（S/N）為10∶1時相應(yīng)的濃度或注入儀器的量進行確定。定量限（limitofquantitaion，LOQ）方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室指樣品中被測物能被定量測定的最低量，結(jié)果71中藥制劑教研室1.指測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的承受程度，為常規(guī)檢驗提供依據(jù)。2.開始研究分析方法時，就應(yīng)考慮其耐受性3.如果條件要求苛刻，應(yīng)在方法中寫明4.變動因素：測試液的穩(wěn)定性、樣品提取次數(shù)、時間5.液相色譜法：流動相的組成和pH值，不同廠牌或不同批號的同類色譜柱、柱溫，流速等。6.GC法：不同廠牌或批號的色譜柱、固定相，不同類型的擔(dān)體及柱溫、進樣口和檢測器溫度等7.TLC法：吸附劑或薄層板的型號和廠牌，展開時的溫度、濕度等耐受性方法學(xué)驗證（效能指標(biāo)）中藥制劑教研室1.指測定條件有小的變動時，測定結(jié)果不受影響的72柱溫變動的影響樣品不同柱溫條件下峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差%35℃25℃對照品535.3740(32h)541.07400.6892537.1292(32h)541.9327供試品883.9976(32h)889.91310.2190887.3354(32h)886.9148柱溫變動的影響樣品不同柱溫條件下峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差%35℃73中藥制劑教研室流動相組成比例變化的影響樣品不同流動相組成條件下峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差%63:3755:45供試品885.8881（0h）863.01731.7307%886.3683（0h）866.3838中藥制劑教研室流動相組成比例變化的影響樣品不同流動相組成條74中藥制劑教研室色譜柱的影響樣品不同色譜柱條件下峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差%色譜柱1色譜柱2對照品541.4097(40h)543.59810.3096542.4932(48h)545.0605供試品894.3388(40h)904.46230.4719898.0939(48h)899.9722中藥制劑教研室色譜柱的影響樣品不同色譜柱條件下峰面積相對標(biāo)75中藥制劑教研室流動相流速的影響樣品不同流速條件下峰面積相對標(biāo)準(zhǔn)偏差%1.0ml/min*0.8ml/min對照品541.0740675.9177915.54541.9327674.57849供試品889.91311106.6318415.83886.91481118.04224供試品（μg/ml）44.3344.510.287中藥制劑教研室流動相流速的影響樣品不同流速條件下峰面積相對標(biāo)76中藥制劑的含量測定77中藥制劑教研室常用定量計算方法外標(biāo)法內(nèi)標(biāo)法中藥制劑教研室常用定量計算方法外標(biāo)法78中藥制劑教研室外標(biāo)法

用與待測組分相同的對照品作對照，以對照品的量對比求算試樣中含量的方法叫外標(biāo)法。

常用定量方法中藥制劑教研室外標(biāo)法用與待測組分相同的對照品作對照，79中藥制劑教研室

類型1、外標(biāo)一點法2、外標(biāo)兩點法3、外標(biāo)工作曲線法外標(biāo)法常用定量方法中藥制劑教研室外標(biāo)法常用定量方法80中藥制劑教研室=Cs×VsAsCr×VrArCrVrArCsVsAs外標(biāo)法一點法常用定量方法中藥制劑教研室Cs×VsAsCr×VrArCrVr81中藥制劑教研室對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含30μg的溶液，搖勻，即得。（30.2μg/ml）供試品溶液的制備取重量差異項下的本品，剪碎，取約2g，精密稱定，精密加入70%甲醇50ml，稱定重量，加熱回流30分鐘，放冷，再稱定重量，用70%甲醇補足減失的重量，濾過，精密量取續(xù)濾液25ml，通過中性氧化鋁柱（100～200目，2g，內(nèi)徑1cm，用50%甲醇濕法裝柱），收集至50ml量瓶中，再用50%甲醇洗脫，收集洗脫液至近刻度，加50%甲醇至刻度，搖勻，即得。（2.0035g）測定法分別精密吸取對照品溶液、供試品溶液10μl，注入液相色譜儀，測定，即得。Ar=50.3As=48.41、當(dāng)對照品與供試品溶液進樣量均為均為10μl時，供試品中芍藥苷含量？2、對照品溶液進樣量為10μl，供試品溶液進樣量15μl時，供試品中芍藥苷含量？中藥制劑教研室對照品溶液的制備取芍藥苷對照品適量，82中藥制劑教研室(C1,A1)(C2,A2