常見細菌課件

第六章病原性微生物

第一節(jié)常見病原性細菌葡萄球菌屬概述生物學(xué)特性致病性免疫性微生物學(xué)檢查防治原則內(nèi)容概述萄球菌屬廣泛分布于自然界，包括30多個種，其中金黃色葡萄球菌（S.aureus

）是人類最重要的化膿性細菌，近年來，由于廣泛應(yīng)用抗生素，耐藥菌株迅速增加，尤其是耐甲氧西林金黃色葡萄球菌（methicillin-resistant

S.aureus

，MRSA），已成為醫(yī)院感染的最重要的病原菌

生物學(xué)性狀形態(tài)與染色培養(yǎng)特性生化反應(yīng)抗原結(jié)構(gòu)分類抵抗力

生物學(xué)性狀1.形態(tài)和染色

球形或橢圓形，典型排列呈葡萄串狀，無鞭毛，無芽胞，體外培養(yǎng)時一般不形成莢膜，革蘭染色為陽性。2.培養(yǎng)特性血平板營養(yǎng)要求不高形成脂溶性的金黃色、白色或檸檬色等色素血瓊脂平板上，有的菌株菌落周圍出現(xiàn)溶血

普通平板3.生化反應(yīng)(1)觸酶陽性。(2)多數(shù)能分解葡萄糖,麥芽糖和

蔗糖，產(chǎn)酸不產(chǎn)氣。(3)致病菌株能分解甘露醇，非致

病菌株不分解。

⑴葡萄球菌A蛋白(SPA)

特點:

①存在于90%的金黃色葡萄球菌。

②可與人類IgG(1.2.4)的Fc段發(fā)生非特

異結(jié)合，結(jié)合后有兩中不同結(jié)果：

a:協(xié)同凝集

b:致病作用4.抗原結(jié)構(gòu)⑵多糖抗原5、分類：

（1）根據(jù)凝固酶的有無來分類，分為兩大類:凝固酶陽性菌株凝固酶陰性菌株（2）根據(jù)色素、生化反應(yīng)等不同，分為三種：性狀

金黃色葡萄球菌表皮葡萄球菌腐生葡萄球菌色素

金黃色白色白色或檸檬色凝固酶+--甘露醇+--溶血性β--耐熱核酸酶+--SPA+--致病性強弱無

三種葡萄球菌的主要性狀6、抵抗力（1）強于其它無芽胞細菌。在干燥膿汁、痰液中可存活2-3個月。（2）耐鹽性強在含10%-15%NaCl培養(yǎng)基中仍能生長。（3）耐藥性嚴重

耐甲氧西林金黃色葡萄球菌。㈠致病物質(zhì)

Pathogenesis葡萄球菌溶素殺白細胞素腸毒素表皮剝脫毒素

毒性休克綜合征毒素-1小結(jié)凝固酶其他酶類（二）所致疾病Pathogenesis㈠致病物質(zhì)1、凝固酶（coagulase)

能使含有枸櫞酸鈉或肝素等抗凝劑的人或兔血漿發(fā)生凝固的酶類物質(zhì)鑒別葡萄球菌有無致病性的重要指標。凝固酶與葡萄球菌的毒力關(guān)系①抗吞噬細胞的吞噬。②保護細菌不受血清中殺菌物質(zhì)的破壞。③易局限化。④形成血栓與此酶生成有關(guān)。2、葡萄球菌溶素

對人致病的主要是α溶素。

蛋白質(zhì)，不耐熱，可溶解紅細胞，對多種細胞如血小板、白細胞、皮膚細胞有損傷作用。

3、殺白細胞素（PVL)只攻擊中性粒細胞和巨噬細胞，抵抗宿主吞噬細胞，增強病菌侵襲力。

4.腸毒素(enterotoxin)

分為A、B…H9個血清型均能引起食物

中毒。

蛋白質(zhì)，耐熱，100℃30min不被滅活，抵抗胃液中的蛋白酶的水解作用，引起食物中毒。5、表皮剝脫毒素

也稱表皮溶解毒素，引起燙傷樣皮膚綜合征（也稱剝脫性皮炎）。

開始皮膚有紅斑，1-2天后表皮起皺出現(xiàn)大疤，然后脫落。6、毒性休克綜合征毒素-1

(toxicshocksyndrometoxin,TSST-1)

起機體發(fā)熱，增加對內(nèi)毒素的敏感性。亦可引起機體多個器官系統(tǒng)的功能紊亂或毒性休克綜合征。７、其他酶類：

耐熱核酸酶（致病性鑒別）

透明質(zhì)酸酶

纖維蛋白溶酶

㈡所致疾病

1、化膿性疾病

（1)局部感染:如皮膚軟組織感染如膿皰瘡、癤、癰、蜂窩組織炎等，及肺炎、膿胸等器官感染。（2)全身感染:敗血癥、膿毒血癥等2、毒素性疾?。?)

食物中毒（2)燙傷樣皮膚綜合征（3)

毒性休克綜合征3、葡萄球菌性腸炎

免疫性人類對葡萄球菌有一定天然免疫力，只有皮膚受傷或機體免疫力下降時，才易感染。感染后免疫力不強，下次可以再次感染。Laboratorydiagnosis診斷路線：鏡檢采集標本分離培養(yǎng)純培養(yǎng)

鏡檢生化反應(yīng)結(jié)論動物試驗(一)標本1、化膿感染2、敗血癥3、腦膜炎4、食物中毒Laboratorydiagnosis——膿汁——血液——腦脊液——剩余食物、嘔吐

物、糞便。(二)直接涂片染色鏡檢根據(jù)形態(tài)、排列和染色性可作初步診斷。(三)分離培養(yǎng)和鑒定作為致病菌株的參考指標：產(chǎn)生凝固酶產(chǎn)生金黃色色素有溶血性發(fā)酵甘露醇。產(chǎn)生耐熱核酸酶(四)葡萄球菌腸毒素檢查將可疑菌以肉湯培養(yǎng)后，取濾液注射6-8周齡幼貓腹腔，注射后4小時內(nèi)發(fā)生嘔吐、腹瀉、體溫升高或死亡等現(xiàn)象，提示有腸毒素。防治原則防

注意個人衛(wèi)生

防止醫(yī)源性感染

注意消毒隔離

防止耐藥性產(chǎn)生治

抗菌素藥敏試驗自身菌苗療法1.致病性與非致病性葡萄球菌的鑒別要點。2.血漿凝固酶定義，類型，使血漿凝固的原理。3.金黃色葡萄球菌所致疾病以及防治原則。

腸道桿菌概述

大多為正常菌群，某些情況下可成為條件致病菌。

部分為致病菌。如：傷寒沙門菌，志賀菌、致病性大腸埃希菌。

一大群寄居于人、動物腸道內(nèi)的生物學(xué)性狀相似的G－桿菌。共同特性：1、形態(tài)、結(jié)構(gòu)：中等大小、G－桿菌、無芽胞，多數(shù)有鞭毛（除志賀菌、EIEC）

、菌毛。2、培養(yǎng)特性：

兼性厭氧或需氧。營養(yǎng)要求不高。3、生化反應(yīng)：乳糖發(fā)酵試驗：在初步鑒別腸道致病菌與非致病菌有重要意義。致病菌：

非致病菌：一般不分解乳糖多數(shù)分解乳糖4、Ag結(jié)構(gòu)：(1)菌體(O)Ag：存在于所有G－細胞壁脂多糖層，耐熱。(2)鞭毛(H)Ag：鞭毛蛋白，不耐熱。(3)莢膜或包膜Ag：Vi抗原，K抗原。(4)腸道桿菌共同抗原(5)菌毛抗原5、變異：耐藥性變異6、傳播途徑專一性7、致病物質(zhì)同一性埃希菌屬E.coliwithfimbriae一、致病性致病物質(zhì)：黏附素：菌毛、定居因子抗原內(nèi)毒素外毒素K抗原一、致病性——所致疾病(一)腸外感染：以化膿性感染和泌尿道感染

最常見，如敗血癥，新生兒腦膜炎，泌尿

道感染。(二)腸道感染:某些血清型引起，與食入污

染的食品和飲水有關(guān)，有六種類型1、腸產(chǎn)毒型大腸埃希菌

(enterotoxigenic

E.coli,ETEC)(1)所致疾病：嬰幼兒,旅游者腹瀉(2)致病物質(zhì)：腸毒素、定植因子(3)致病機理：

不耐熱腸毒素(heatlabileenterotoxin,LT):（由1個A亞單位，5個B亞單位組成）

B亞單位：與腸粘膜上皮細胞表面GM1

神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合。A亞單位：作用于腺苷環(huán)化酶→ATP轉(zhuǎn)

化為cAMP→液體、電解質(zhì)過

度分泌，導(dǎo)致腹瀉。

耐熱腸毒素:

(heatstableenterotoxin,ST)

激活腸粘膜細胞上鳥苷環(huán)化酶

→胞內(nèi)cGMP↑，腹瀉。2、腸侵襲型大腸埃希菌(enteroinvasiveE.coli,EIEC)(1)疾?。阂疠^大兒童、成人膿血便、類似菌痢，有發(fā)熱，腹痛、腹瀉、里急后重。(2)致病機理：不產(chǎn)生腸毒素，侵襲結(jié)腸粘膜上皮細胞。3、腸致病型大腸埃希菌(enteropathogenicE.coli,EPEC)

主要引起嬰幼兒腹瀉。不產(chǎn)生腸毒素，也無侵襲力，病菌黏附于微絨毛，導(dǎo)致刷狀緣被破壞，微絨毛萎縮、上皮細胞排列及功能紊亂，造成水樣腹瀉。

4、腸出血型大腸埃希菌（enterohemorrhagic

E.coli,EHEC)引起出血性腸炎和溶血性尿毒綜合征機制：志賀毒素Ｓtx中斷蛋白質(zhì)合成，引起上皮細胞微絨毛的破壞。5、腸集聚型大腸桿菌（enteroaggregativeE.coli,EAEC)

引起嬰兒持續(xù)性腹瀉，水樣便。機理：菌毛黏附于腸上皮細胞表面并形成磚塊狀排列，產(chǎn)生毒性的物質(zhì)并干擾腸液吸收。引起腹瀉的大腸埃希菌

菌株

作用

部位

疾病與癥狀

致病機制

ETEC

小腸

旅行者腹瀉，嬰幼兒腹瀉，水樣便，惡心，嘔吐，腹痛，低熱

LT和（或）ST腸毒素，大量分泌液體和電解質(zhì)

EIEC

大腸

水樣便，少量血便，腹痛，發(fā)熱

質(zhì)粒介導(dǎo)侵襲和破壞結(jié)腸粘膜上皮細胞

EPEC

小腸

嬰兒腹瀉，水樣便，惡心，嘔吐，發(fā)熱

質(zhì)粒介導(dǎo)粘附和破壞上皮細胞

EHEC

大腸

水樣便，大量出血，劇烈腹痛，低熱或無，可并發(fā)HUS、血小板減少性紫癜

SLT-I或SLT-II，中斷蛋白質(zhì)合成

EAggEC

小腸

嬰兒持續(xù)性腹瀉，嘔吐，脫水，低熱

集聚性粘附上皮細胞，阻止液體吸收

(一)標本

腸道外感染取中段尿、血液、膿液、腦脊液，腸道內(nèi)感染取糞便。(二)分離培養(yǎng)和鑒定

初步鑒定靠IMViC（++--），最后鑒定靠系列生化試驗。二、微生物學(xué)檢查法

水、食品等衛(wèi)生細菌學(xué)檢查我國衛(wèi)生標準：

每升飲水≤3個大腸菌群每100ml瓶裝汽水、果汁等≤5個防治原則疫苗母乳中sIgA可中和大腸埃希菌腸毒素，故母乳喂養(yǎng)嬰兒可減少嬰兒腹瀉的發(fā)生。治療選用磺胺、慶大霉素、氟派酸等，但易產(chǎn)生耐藥性。沙門菌屬

(Salmonella)寄生于人、動物腸道。對人致?。簜?、副傷寒的沙門菌。對動物和人致病的有鼠傷寒沙門菌、腸炎沙門菌、豬霍亂沙門菌等。一、生物學(xué)性狀1、形態(tài)結(jié)構(gòu)：

有周鞭毛、菌毛、無莢膜。2、生化反應(yīng)：

不發(fā)酵乳糖。

3、Ag結(jié)構(gòu)：主要有O、H、ViAgOAg：至少58種,每個沙門菌的血清型含有一種或多種抗原刺激機體產(chǎn)生IgM。HAg：分為第Ⅰ和第Ⅱ相兩種，刺激機體產(chǎn)生IgG。ViAg：Ag性弱，不穩(wěn)定,可阻止O抗原與其相應(yīng)的抗體起凝集反應(yīng)。4、抵抗力較差水中能存活2-3W糞便中可活1-2個月冰凍土壤中可過冬耐受膽鹽、煌綠及其他染料對熱耐力差二、致病性：(一)致病物質(zhì)：

1、侵襲力：耐酸應(yīng)答基因、菌毛、Vi抗原菌毛：與M細胞結(jié)合，SPI-Ⅰ分泌侵襲蛋白通過M細胞輸入到巨噬細胞，引起宿主細胞內(nèi)肌動纖維的重排，誘導(dǎo)細胞膜內(nèi)陷，導(dǎo)致細菌內(nèi)吞，并且在吞噬小泡內(nèi)生長繁殖導(dǎo)致宿主細胞死亡，并且可擴散進入鄰近的淋巴細胞組織。耐酸應(yīng)答基因：使在胃和吞噬體內(nèi)得到保護。

Vi抗原：(一)致病物質(zhì)：

2內(nèi)毒素：、

3、腸毒素：

宿主體溫↑，WBC↓，腸熱癥主要由內(nèi)毒素引起。引起腹瀉。(二)所致疾?。?、傷寒和副傷寒病菌-→消化道-→穿過小腸粘膜-→淋巴結(jié)-→大量繁殖-→入血(第一次菌血癥)-→全身多個器官-→再次入血(第二次菌血癥)1.腸熱癥攝入的細菌腸系膜淋巴結(jié)胸導(dǎo)管全身疼痛、不適發(fā)熱（前驅(qū)期）菌血癥肝、脾、腎及膽囊等吞噬細胞吞噬膽囊腎臟持續(xù)高熱、肝脾腫大、全身中毒、玫瑰疹、相對緩脈

菌血癥進入腸壁淋巴組織糞便尿并發(fā)癥：腸穿孔、血栓性靜脈炎、膽囊炎典型病例病程為3-4W孤立和集合淋巴結(jié)壞死潰瘍淋巴管(二)所致疾病：典型癥狀前驅(qū)癥狀：發(fā)熱、不適、全身疼痛等第二次菌血癥：體溫階梯上升（３９-４０℃），保持７-１０天；相對脈緩；肝脾腫大；玫瑰疹。并發(fā)癥：腸出血和腸穿孔。傷寒瑪麗2、食物中毒(腸炎型)：一次攝入大量病菌。

癥狀:發(fā)熱、惡心、嘔吐、腹痛、水樣腹瀉，偶有黏液或膿性腹瀉。

3、敗血癥：

多見于兒童或免疫力低下的成人。癥狀：高熱、寒戰(zhàn)、厭食、貧血等，腸道癥狀少，并發(fā)腦膜炎、骨髓炎、膽囊炎、關(guān)節(jié)炎等。４.無癥狀帶菌者

與年齡、性別關(guān)系密切三、免疫性：細胞免疫為主病后有較牢固免疫力四、微生物學(xué)檢查傷寒和付傷寒 食物中毒敗血癥第1周取靜脈血 可疑食物 血第1-3周取骨髓液 嘔吐物 第2周起取糞、尿 糞 標本SS平板生化反應(yīng)血清學(xué)鑒定雙糖發(fā)酵等玻片凝集試驗肥達反應(yīng)（Widalreaction）用已知傷寒沙門菌O、H和甲型副沙寒沙門菌和肖氏沙門菌H抗原與病人血清做定量凝集試驗，用以輔助診斷腸熱癥判定結(jié)果時，應(yīng)著重考慮：正常凝集價傷寒沙門菌O抗體的凝集價1：80以上，H抗體1：160以上甲型副傷寒、肖氏沙門菌H抗體凝集價在1：80以上動態(tài)觀察O與H抗體的診斷意義H與O抗體的性質(zhì)及其消長意義預(yù)防接種；非特異性回憶反應(yīng)感染早期、其他沙門菌引起的交叉反應(yīng)患腸熱癥可能性大高低高出現(xiàn)較晚，維持時間長IgGH抗體低高高出現(xiàn)較早，維持時間短IgMO抗體體內(nèi)出現(xiàn)情況體內(nèi)出現(xiàn)情況抗體類型防治原則加強水源和食品衛(wèi)生管理疫苗傷寒、甲及乙型副傷寒3聯(lián)菌苗Ty2la傷寒沙門菌口服活菌苗傷寒Vi莢膜多糖疫苗治療以氯霉素效果較好病史：任某，男，21歲，醫(yī)學(xué)院學(xué)生，于三周前進行細菌學(xué)實驗時，不慎將裝培養(yǎng)物的試管打破，菌液濺到手指和桌面，當即用肥皂洗手多次，下課后進食堂用餐?；厥疑岷蟀l(fā)現(xiàn)自己的指甲過長，便修剪了指甲。于5天前無明顯誘因出現(xiàn)發(fā)冷發(fā)燒，全身不適，多汗，食欲不振等。體檢：患者呈急性面容、潮紅、神清但略有呆滯，前胸見散在的細小紅色丘疹。體溫39.4℃，脈緩52次/min，睥可觸及，白細胞3600/mm3，余均正常。問題：該同學(xué)感染了什么細菌，診斷是什么疾病，如何檢查？Laboratorydiagnosis診斷路線：鏡檢采集標本分離培養(yǎng)純培養(yǎng)

鏡檢生化反應(yīng)結(jié)論血清學(xué)試驗思考題1.常見的痢疾是由哪些細菌引起？2.腸產(chǎn)毒型大腸桿菌的致病機制？3.肥達氏反應(yīng)的原理以及結(jié)果判斷？一、生物學(xué)性狀形態(tài)染色G+細桿狀，周毛菌，無莢膜，芽胞正圓形，位于菌體頂端，大于菌體寬度，呈鼓槌狀。破傷風(fēng)梭菌

培養(yǎng)特性專性厭氧，血平板上呈擴散生長，有β溶血，不發(fā)酵糖類，不分解蛋白質(zhì),肉渣培養(yǎng)基生長良好（混濁、變黑、有腐臭味）。抵抗力強，芽胞在干燥土壤中可存活數(shù)十年，耐熱100℃1h，對青霉素敏感致病性與免疫性傳染途徑及傷口條件破傷風(fēng)為創(chuàng)口感染能否發(fā)生感染的條件——傷口的厭氧微環(huán)境傷口窄而深，混有泥土及異物壞死組織多，局部缺血伴有需氧菌或兼性厭氧菌的混合感染

致病物質(zhì)——破傷風(fēng)痙攣毒素（外毒素）為神經(jīng)毒素，毒性強，僅次于肉毒毒素，與脊髓前角運動細胞及腦干細胞有高度的親和力。毒素與中樞神經(jīng)組織結(jié)合非常牢固，一旦結(jié)合即非抗毒素所能中和。破傷風(fēng)痙攣毒素可與中樞神經(jīng)抑制性突觸前膜的神經(jīng)節(jié)苷脂結(jié)合，阻斷抑制性介質(zhì)的釋放，導(dǎo)致神經(jīng)持續(xù)興奮，骨骼肌強直性痙攣，肌張力↑

特點為：不耐熱，65℃30min即被破壞；易被蛋白酶分解破壞破傷風(fēng)痙攣毒素破傷風(fēng)痙攣毒素的作用機制所致疾病——破傷風(fēng)潛伏期：幾天至幾周典型體征：牙關(guān)緊閉、吞咽困難、苦笑面容、角弓反張等，陣發(fā)性抽搐等，嚴重者因呼吸肌痙攣窒息死亡。微生物學(xué)檢查：臨床診斷防治原則正確處理傷口——防止形成厭氧微環(huán)境人工自動免疫——類毒素（百白破三聯(lián)疫苗）人工被動免疫——破傷風(fēng)抗毒素緊急預(yù)防特異性治療治療—抗毒素+抗生素+鎮(zhèn)靜解痙藥物微生物學(xué)檢查與防治分枝桿菌屬(Mycobacterium)分枝桿菌屬是一類細長略彎曲的桿菌，有時呈分枝生長趨勢，故得名?？顾崛旧栃裕殖士顾釛U菌主要包括：結(jié)核分枝桿菌、麻風(fēng)分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌結(jié)核分枝桿菌

（M.tuberculosis)

結(jié)核病的病原菌世界上1/3人感染，70%在亞洲形態(tài)與染色細長略帶彎曲，呈分枝狀抗酸染色陽性L型Much顆粒專性需氧生長緩慢營養(yǎng)要求高，在羅氏固體培養(yǎng)基中生長良好，呈菜花狀培養(yǎng)特性“懶、饞、變”花菜樣菌落生化反應(yīng)

結(jié)核分枝桿菌大多數(shù)觸酶試驗陽性，而熱觸酶試驗陰性，非結(jié)核分枝桿菌則大多數(shù)兩種試驗均陽性抵抗力

（四怕）（四不怕）對乙醇敏感對濕熱敏感對紫外線敏感對抗結(jié)核藥物敏感抗干燥抵酸堿抗堿性染料對青霉素等抗生素耐藥強變異性可發(fā)生形態(tài)變異、菌落變異、毒力變異、耐藥性變異卡介苗（BCG）：是毒力變異株耐藥變異：多重耐藥結(jié)核?。∕DRTB）（一）致病物質(zhì)無毒素與侵襲性酶類與菌體成分有關(guān)1、脂質(zhì)索狀因子：為分枝菌酸和海藻糖結(jié)合的糖脂，與結(jié)核桿菌索狀生長現(xiàn)象有關(guān)；能破壞細胞線粒體膜，影響細胞呼吸，抑制白細胞游走和引起慢性肉芽腫；分枝菌酸與細菌的抗酸性染色有關(guān)。磷脂：促使單核細胞增生，與結(jié)核結(jié)節(jié)的形成及干酪樣壞死有關(guān)。蠟質(zhì)D：是肽糖脂和分枝菌酸的復(fù)合物，可激發(fā)機體產(chǎn)生遲發(fā)型超敏反應(yīng)。硫酸腦苷脂：抑制吞噬細胞中吞噬體與溶酶體的結(jié)合，使細菌能在吞噬細胞中長期存活。1、脂質(zhì)2、蛋白質(zhì)是結(jié)合菌素的主要成分，和蠟質(zhì)D結(jié)合后能使機體發(fā)生超敏反應(yīng)。在形成結(jié)核結(jié)節(jié)中發(fā)揮一定作用。3、多糖與脂質(zhì)成分結(jié)合存在于胞壁中，致病作用尚不清楚（二）所致疾病感染方式呼吸道、消化道或皮膚損傷等多途徑侵入機體致病機制：細菌增殖引起的炎癥反應(yīng)菌體成分的毒性作用機體產(chǎn)生超敏反應(yīng)1、肺部感染原發(fā)感染多發(fā)生于兒童原發(fā)綜合征繼發(fā)感染多發(fā)生于成人病灶局限，不易擴散易發(fā)生干酪樣壞死和空洞2、肺外感染結(jié)核分枝桿菌可進入血液循環(huán)引起肺內(nèi)、外播散，如腦、腎結(jié)核、脊柱結(jié)核等。結(jié)核分枝桿菌進入消化道可引起腸結(jié)核、結(jié)核性腹膜炎等。（三