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球菌(Coccus)

革蘭陽(yáng)性球菌

革蘭陰性球菌1ppt課件球菌(Coccus)

革蘭陽(yáng)性球菌

革蘭陰性球菌1ppt課12024/4/32JamesVersalovic(EDITORINCHIEF)ASMPressCopyright:2011衛(wèi)生部醫(yī)政司葉應(yīng)嫵王毓三申子瑜主編出版日期:2006年11月東南大學(xué)出版社2ppt課件2024/4/22JamesVersalovic衛(wèi)生部醫(yī)政2精品資料精品資料3你怎么稱呼老師?如果老師最后沒有總結(jié)一節(jié)課的重點(diǎn)的難點(diǎn),你是否會(huì)認(rèn)為老師的教學(xué)方法需要改進(jìn)?你所經(jīng)歷的課堂,是講座式還是討論式?教師的教鞭“不怕太陽(yáng)曬,也不怕那風(fēng)雨狂,只怕先生罵我笨,沒有學(xué)問(wèn)無(wú)顏見爹娘……”“太陽(yáng)當(dāng)空照,花兒對(duì)我笑,小鳥說(shuō)早早早……”微生物42024/4/35周庭銀趙虎主編

出版日期:2007年1月上海科學(xué)技術(shù)出版社陳東科孫長(zhǎng)貴主編

出版日期:2011年1月人民衛(wèi)生出版社5ppt課件2024/4/25周庭銀趙虎主編陳東科孫長(zhǎng)貴主編52024/4/36目錄概述第一節(jié)葡萄球菌屬第二節(jié)鏈球菌屬第三節(jié)腸球菌屬第四節(jié)奈瑟菌屬6ppt課件2024/4/26目錄概述6ppt課件62024/4/37概述根據(jù)革蘭染色特性不同,分:革蘭陽(yáng)性球菌(gram-positivecocci)革蘭陰性球菌(gram-negativecocci)7ppt課件2024/4/27概述根據(jù)革蘭染色特性不同,分:7ppt72024/4/3臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)-專升本8概述葡萄球菌屬(Staphylococcus)鏈球菌屬(Streptococcus)腸球菌屬(Enterococcus)奈瑟菌屬(Neisseria)紫色:革蘭陽(yáng)性紅色:革蘭陰性常見球菌卡他莫拉菌(Moraxella.catarrhalis)8ppt課件2024/4/2臨床微生物學(xué)檢驗(yàn)-專升本8概述葡萄球菌82024/4/39第一節(jié)葡萄球菌屬

(Staphylococcus)9ppt課件2024/4/29第一節(jié)葡萄球菌屬

(Sta92024/4/310主要種類金黃色葡萄球菌(S.aureus)表皮葡萄球菌(S.

epidermidis)頭狀葡萄球菌(S.capitis)山羊葡萄球菌(S.caprae)解糖葡萄球菌(S.saccharolyticus)華納葡萄球菌(S.warneri)巴氏葡萄球菌(S.pasteuri)溶血葡萄球菌(S.heamolyticus)人葡萄球菌(S.hominis)里昂葡萄球菌(S.lugdunensis)耳葡萄球菌(S.auricularis)腐生葡萄球菌(S.saprophyticus)孔氏葡萄球菌(S.cohnii)木糖葡萄球菌(S.xylosus)

模仿葡萄球菌(S.simulans)

10ppt課件2024/4/210主要種類金黃色葡萄球菌(S.aureu102024/4/311分類(Taxonomy)隸屬于微球菌科迄今所知由35個(gè)種和17個(gè)亞種組成葡萄球菌屬11ppt課件2024/4/211分類(Taxonomy)隸屬于微球菌科112024/4/312分類(Taxonomy)除伯杰分類外,還有傳統(tǒng)分類(型)方法,如:根據(jù)是否產(chǎn)凝固酶分型:凝固酶陽(yáng)性和凝固酶陰性葡萄球菌(coagulasenegativestaphylococcus,CNS)按噬菌體分型:將金黃色葡萄球菌分為5群26型葡萄球菌屬12ppt課件2024/4/212分類(Taxonomy)除伯杰分類外,122024/4/313臨床意義---致病物質(zhì)酶:血漿凝固酶、耐熱核酸酶、透明質(zhì)酸酶等毒素:殺白細(xì)胞毒素、表皮剝脫毒素、腸毒素、葡萄球菌溶血素、中毒性休克綜合征毒素-1等葡萄球菌屬13ppt課件2024/4/213臨床意義---致病物質(zhì)酶:血漿凝固酶、耐132024/4/314臨床意義---所致疾病(1)1.侵襲性疾病皮膚感染內(nèi)臟感染尿路感染全身感染葡萄球菌性毛囊炎葡萄球菌屬14ppt課件2024/4/214臨床意義---所致疾?。?)1.侵襲性疾142024/4/315臨床意義---所致疾病(2)2.毒素性疾?。菏澄镏卸緜文ば阅c炎中毒性休克綜合癥燙傷樣皮膚綜合癥等燙傷樣皮膚綜合癥葡萄球菌屬15ppt課件2024/4/215臨床意義---所致疾病(2)2.毒素性疾152024/4/316金黃色葡萄球菌小菌落變種金黃色葡萄球菌小菌落變種(small-colonyvariants,SCVs)是S.aureus的一個(gè)亞群它生長(zhǎng)緩慢,在常規(guī)培養(yǎng)時(shí)形成小菌落常引起患者的持續(xù)感染,如囊性纖維化和慢性骨髓炎16ppt課件2024/4/216金黃色葡萄球菌小菌落變種金黃色葡萄球菌小162024/4/317形態(tài)特征

形態(tài):呈球形或橢圓形染色性:革蘭染色陽(yáng)性排列:不規(guī)則葡萄串狀特殊結(jié)構(gòu):無(wú)鞭毛,無(wú)芽胞,少數(shù)有莢膜葡萄球菌屬17ppt課件2024/4/217形態(tài)特征形態(tài):呈球形或橢圓形葡萄球菌屬172024/4/318培養(yǎng)特征

兼性厭氧菌最適生長(zhǎng)溫度30~37℃最適pH7.4~7.6

營(yíng)養(yǎng)要求不高菌落可出現(xiàn)金黃色、白色或檸檬色等色素血平板上,金黃色葡萄球菌可形成

-溶血環(huán)表皮葡萄球菌呈白色菌落葡萄球菌屬18ppt課件2024/4/218培養(yǎng)特征兼性厭氧菌表皮葡萄球菌呈白色菌182024/4/319金黃色葡萄球菌形成

-溶血環(huán)金黃色葡萄球菌金黃色色素葡萄球菌屬19ppt課件2024/4/219金黃色葡萄球菌形成-溶血環(huán)金黃色葡萄球192024/4/320生化反應(yīng)特征觸酶陽(yáng)性、氧化酶陰性可于10%NaCl條件中生長(zhǎng)發(fā)酵葡萄糖呋喃唑酮敏感(S≥15mm):與微球菌區(qū)別呋喃唑酮敏感試驗(yàn)葡萄球菌屬20ppt課件2024/4/220生化反應(yīng)特征觸酶陽(yáng)性、氧化酶陰性呋喃唑酮202024/4/321常用鑒定試驗(yàn)1.觸酶試驗(yàn)觸酶試驗(yàn)是檢測(cè)細(xì)菌是否具有觸酶的特性,具有觸酶的細(xì)菌能催化過(guò)氧化氫生成水與新生態(tài)氧,繼而形成分子氧出現(xiàn)水泡(3%H2O2)陽(yáng)性:葡萄球菌微球菌陰性:鏈球菌、腸球菌屬注意:細(xì)菌要求新鮮;紅細(xì)胞內(nèi)含觸酶,可出現(xiàn)假陽(yáng)性;同時(shí)用已知菌作陽(yáng)性對(duì)照和陰性對(duì)照陽(yáng)性觸酶陰性葡萄球菌屬21ppt課件2024/4/221常用鑒定試驗(yàn)1.觸酶試驗(yàn)陽(yáng)性212024/4/322(-)凝固酶(+)2.凝固酶試驗(yàn)是檢測(cè)細(xì)菌能否產(chǎn)生血漿凝固酶的特性,有些細(xì)菌能產(chǎn)生血漿凝固酶,使動(dòng)物新鮮血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白,而使血漿發(fā)生凝集

玻片法少許菌落+兔血漿10s內(nèi)出現(xiàn)凝集為陽(yáng)性陽(yáng)性:金葡、中間葡陰性:其它葡萄球菌試管法:取試管2支,各加0.5ml兔血漿,挑取被檢菌和陽(yáng)性對(duì)照菌分別加入血漿混勻,于37℃水浴3~4h

22ppt課件2024/4/222(-)凝固酶(+)2.凝固酶試驗(yàn)陽(yáng)性:222024/4/323致病性葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶一種是結(jié)合凝固酶,結(jié)合在細(xì)胞壁上,使血漿中的纖維蛋白原變成纖維蛋白而附著于表面,發(fā)生凝集,可用玻片法測(cè)出另一種是分泌至菌體外的游離凝固酶,作用類似凝血酶原物質(zhì),可被血漿中的協(xié)同因子激活變?yōu)槟笜游镔|(zhì),而使纖維蛋白原變成纖維蛋白,從而血漿凝固,可用試管法測(cè)出23ppt課件2024/4/223致病性葡萄球菌可產(chǎn)生兩種凝固酶23ppt232024/4/324

陰性膠乳凝集陽(yáng)性3.其它凝固酶試驗(yàn)有商品化的膠乳凝集試驗(yàn)和間接血凝試驗(yàn)檢測(cè)凝固酶4.VP試驗(yàn)

檢測(cè)細(xì)菌分解葡萄糖后能否產(chǎn)生乙酰甲基甲醇,在堿性環(huán)境中,乙酰甲基甲醇可被空氣中的氧氣氧化成二乙酰,后者又與蛋白胨培養(yǎng)基中精氨酸所含的胍基作用,生成一種紅色化合物,為VP試驗(yàn)陽(yáng)性

陽(yáng)性陰性24ppt課件2024/4/224陰性膠乳凝集陽(yáng)性3242024/4/3255.β半乳糖苷酶試驗(yàn)(ONPG試驗(yàn))

某些具有β半乳糖苷酶,可分解鄰-硝基β半乳糖苷酶(ONPG),生成黃色的鄰-硝基酚,即出現(xiàn)黃色為陽(yáng)性反應(yīng)

陽(yáng)性陰性6.磷酸酶試驗(yàn)

大多數(shù)表皮葡萄球菌、金黃色葡萄球菌、施氏葡萄球菌、中間葡萄球菌和豬葡萄球菌該試驗(yàn)陽(yáng)性7.耐熱核酸酶試驗(yàn)檢測(cè)細(xì)菌能否產(chǎn)生耐熱核酸酶的特性某些致病菌(如金黃色葡萄球菌)可以產(chǎn)生耐熱的核酸酶(通常100℃15min不被破壞),是測(cè)定葡萄球菌有無(wú)致病性的重要指標(biāo)

25ppt課件2024/4/2255.β半乳糖苷酶試驗(yàn)(ONPG試驗(yàn))252024/4/3268.DNA酶試驗(yàn)?zāi)承┘?xì)菌可產(chǎn)生細(xì)胞外DNA酶,DNA酶可水解DNA長(zhǎng)鏈,形成數(shù)個(gè)單核苷酸組成的寡核苷酸鏈。長(zhǎng)鏈DNA可被酸沉淀,而水解后形成的寡核苷酸則可溶于酸,當(dāng)在菌落平板上加入酸后,若在菌落周圍出現(xiàn)透明環(huán),表示該菌具有DNA酶。

腸桿菌科中的沙雷菌和變形桿菌可產(chǎn)生DNA酶,革蘭陽(yáng)性球菌中,只有金黃色葡萄球菌產(chǎn)生DNA酶26ppt課件2024/4/2268.DNA酶試驗(yàn)?zāi)c桿菌科中的262024/4/3279.新生霉素敏感試驗(yàn)挑取待檢菌落數(shù)個(gè),制成相當(dāng)0.5號(hào)麥?zhǔn)瞎軡舛染海奘米咏妇?,擠去余液,均勻涂在M-H上,貼上每片含5μg的新生霉素紙片,35℃

孵育16~20h,抑菌環(huán)直徑<16mm為陽(yáng)性(耐藥)。注意:試驗(yàn)時(shí)應(yīng)以金黃色葡萄球ATCC25923做對(duì)照(敏感),以確認(rèn)紙片是否是否有效!27ppt課件2024/4/2279.新生霉素敏感試驗(yàn)注意:試驗(yàn)時(shí)應(yīng)以金272024/4/328涂片:G+C觸酶試驗(yàn)鏈球菌腸球菌+-葡萄球菌、微球菌拉絲試驗(yàn)氧化酶-+微球菌葡萄球菌凝固酶試驗(yàn)鑒定流程圖+-金葡表葡、腐生新生霉素表葡腐生SR28ppt課件2024/4/228涂片:G+C觸酶試驗(yàn)鏈球菌+-葡萄球菌、282024/4/32929ppt課件2024/4/22929ppt課件292024/4/330金葡中間葡家畜葡表皮葡溶血葡人葡木糖葡腐生葡凝聚因子(玻片法)+d------凝固酶(試管法)++d-----V-P+--+++++ONPG-+-----+ALP++++----脲酶d+d+-+++NV敏感試驗(yàn)SSSSSSRR30ppt課件2024/4/230金葡中間葡家畜葡表皮葡溶血葡人葡木糖葡腐302024/4/33131ppt課件2024/4/23131ppt課件312024/4/332將葡萄球菌菌懸液調(diào)成0.5麥?zhǔn)蠞岫?1×108/ml),用棉簽涂布平板,貼上藥敏紙片,350C18-24h,量取抑菌圈直徑,判斷結(jié)果16mm

M-H平板

24mm6mmRSI藥敏試驗(yàn)結(jié)果:敏感(S)、中介(I)、耐藥(R)32ppt課件2024/4/232將葡萄球菌菌懸液調(diào)成0.5麥?zhǔn)蠞岫?1×322024/4/333NCCLS,NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandardsCLSI,ClinicalandLaboratoryStandardInstitute33ppt課件2024/4/233NCCLS,NationalComm332024/4/334報(bào)告結(jié)果和解釋

從臨床標(biāo)本中分離到金黃色葡萄球菌,應(yīng)考慮是致病菌,金黃色葡萄球該屬產(chǎn)毒素和毒性酶最多、毒力最強(qiáng)的種,引起人類機(jī)會(huì)性和醫(yī)院內(nèi)感染,是引發(fā)疾病和死亡的主要致病菌之一

凝固酶陰性葡萄球菌(CoNS)是人類正常微生物叢的主要菌種組分,尤其是表皮葡萄球菌引發(fā)醫(yī)院內(nèi)感染。確定其病原性,應(yīng)注意:純培養(yǎng)分離菌株來(lái)自無(wú)菌體體液或感染部位;同一菌種反復(fù)多次分離到,或占優(yōu)勢(shì)生長(zhǎng)34ppt課件2024/4/234報(bào)告結(jié)果和解釋從臨床標(biāo)本中分離到342024/4/335

腐生葡萄球菌從尿道感染患者尿中分離到,一直被認(rèn)為是致病菌

溶血葡萄球菌、里昂葡萄球菌等凝固酶陰性葡萄球菌易引起先天性瓣膜心內(nèi)膜炎,必須快速鑒定此菌

除金黃色葡萄球菌外,另外2種產(chǎn)葡萄球菌凝固酶的是中間葡萄球菌和豬葡萄球菌,主要引起動(dòng)物的機(jī)會(huì)感染,尤其是中間葡萄球菌對(duì)人類往往與動(dòng)物咬傷、抓傷有關(guān),該菌也可發(fā)生感染性食物中毒

葡萄球菌可引起偽膜性腸炎大便涂片:球桿比1:10,球桿比失調(diào)、球>桿35ppt課件2024/4/235腐生葡萄球菌從尿道感染患者尿中分352024/4/336

MRS(mechicillinresistantstaphylococcus)

MRS,指耐甲氧西林的葡萄球菌,可編碼低親和力青霉素結(jié)合蛋白導(dǎo)致耐甲氧西林,所有β-內(nèi)酰胺類抗菌藥(包括碳青霉烯類)和β-內(nèi)酰胺/酶抑制劑的復(fù)方制劑對(duì)該菌即使體外呈抗菌活性,體內(nèi)也無(wú)效。該菌是醫(yī)院感染的常見病原菌,多發(fā)生于老年、免疫缺陷、燒傷及手術(shù)患者,容易暴發(fā)流行,治療困難。臨床常用糖肽類抗生素(如:萬(wàn)古霉素、替考拉寧)進(jìn)行治療。36ppt課件2024/4/236

MRS(mechicillinre362024/4/337MRSA(mechicillinresistantstaphylococcusaureus)耐甲氧西林的金黃色葡萄球菌MSSA(methicillinsensitiveStaphylococcusaureus)

對(duì)甲氧西林敏感的金黃色葡萄球菌MRCNS(mechicillinresistantcoagulasenegativestaphylococcus)耐甲氧西林的凝固酶陰性葡萄球菌37ppt課件2024/4/237MRSA(mechicillinre372024/4/338BackgroundofMRSA40年代青霉素問(wèn)世后,金黃色葡萄球菌引起感染性疾病受到較大控制,但由于廣泛使用,金黃色葡萄球菌產(chǎn)生青霉素酶,能水解

-內(nèi)酰胺環(huán)人們又研究出一種新的能耐青霉素酶的半合成青霉素,即甲氧西林,以控制產(chǎn)酶株感染,1959年用于臨床1961年,英國(guó)Jevons首次發(fā)現(xiàn)了MRSA病原菌60年代歐美、亞洲相繼報(bào)道;70年代中國(guó)發(fā)現(xiàn)MRSA;80年代感染率上升;90年代遍及全球,成為院內(nèi)感染的重要病源菌

38ppt課件2024/4/238BackgroundofMRSA40382024/4/339MRSA耐藥機(jī)理MSSA中含有5種與β-內(nèi)酰胺類抗生素親和力高的青霉素結(jié)合蛋白(PBP),即PBP1、2、3、3’和4,總稱為PBPs,PBPs參與細(xì)胞壁粘肽層的合成PBPs共價(jià)結(jié)合于β-內(nèi)酰胺類藥物的活動(dòng)位點(diǎn)上,導(dǎo)致細(xì)菌死亡MRSA產(chǎn)生了一種獨(dú)特的PBP(PBP2a或PBP2’),PBP2a對(duì)β-內(nèi)酰胺類抗生素親和力很低,從而表現(xiàn)出耐藥性

PBP2a的產(chǎn)生是受染色體甲氧西林耐藥基因(mecA)來(lái)調(diào)節(jié)的

編碼PBP2a的mecA基因不是MRSA固有的,而是一個(gè)外來(lái)的插入片段,該片段以基因復(fù)合體的形式存在,攜帶mec基因盒(staphylococcalcassettechromosomemec,SCC-mec)39ppt課件2024/4/239MRSA耐藥機(jī)理MSSA中含有5種與β392024/4/340MRSA檢測(cè)方法苯唑西林法:1μg/片,抑菌圈≤10mm為耐藥,≥13mm為敏感。質(zhì)控菌株為金葡ATCC29213(耐藥菌株),ATCC25923(敏感菌株)頭孢西丁法:2004年NCCLS推薦用的MRSA確證實(shí)驗(yàn)肉湯稀釋(MIC)法,瓊脂稀釋(MIC)法,濃度梯度(Etest)法PCR法:檢測(cè)mecA基因40ppt課件2024/4/240MRSA檢測(cè)方法苯唑西林法:1μg/402024/4/341MRSA的治療萬(wàn)古霉素是目前臨床上治療MRSA唯一療效肯定的抗生素,應(yīng)用30多年來(lái)未發(fā)現(xiàn)耐藥菌株

1996年日本報(bào)道第一例對(duì)萬(wàn)古霉素中度敏感(MIC=8μg/ml)的金黃色葡萄球菌

(VISA)1997年美國(guó)也從一個(gè)腹膜炎患者分離出對(duì)萬(wàn)古霉素中度敏感的金黃色葡萄球菌

41ppt課件2024/4/241MRSA的治療萬(wàn)古霉素是目前臨床上治療M412024/4/342第二節(jié)鏈球菌屬

(Streptococcus)42ppt課件2024/4/242第二節(jié)鏈球菌屬

422024/4/343分類

分子水平的分類學(xué)研究帶來(lái)了鏈球菌屬(Streptococcus)分類的重大改變過(guò)去屬于

D群鏈球菌的腸球菌獨(dú)立成為腸球菌屬(Enterococcus)

屬于

N群鏈球菌的乳球菌現(xiàn)已獨(dú)立成為乳球菌屬(Lactococcus)

厭氧性鏈球菌歸為消化球菌屬鏈球菌屬鏈球菌電鏡圖43ppt課件2024/4/243分類分子水平的分類學(xué)研究帶來(lái)了鏈球432024/4/344傳統(tǒng)的分類方法根據(jù)溶血現(xiàn)象分:(鏈球菌在血平板有三種溶血現(xiàn)象)1.甲型溶血:1~2mm草綠色2.乙型溶血:2~4mm透明3.丙型溶血:無(wú)溶血環(huán)13244ppt課件2024/4/244傳統(tǒng)的分類方法根據(jù)溶血現(xiàn)象分4/345傳統(tǒng)的分類方法分為A、B、C、D、E、F、G等20群,可大致分為三大類:(1)具有A、C、G抗原群β-溶血性鏈球菌(2)具有B群抗原的β-溶血性鏈球菌,稱為無(wú)乳鏈球菌(3)其它草綠色溶血或不溶血鏈球菌鏈球菌屬Lancefield根據(jù)鏈球菌細(xì)胞壁中多糖C抗原,對(duì)其分群45ppt課件2024/4/245傳統(tǒng)的分類方法分為A、B、C、D、E、452024/4/346A群鏈球菌:化膿性鏈球菌B群鏈球菌:無(wú)乳鏈球菌D群鏈球菌:牛鏈球菌肺炎鏈球菌草綠色鏈球菌鏈球菌屬-臨床意義主要的鏈球菌46ppt課件2024/4/246A群鏈球菌:化膿性鏈球菌鏈球菌屬-臨床意462024/4/347化膿性鏈球菌(S.pyogenes)致病物質(zhì)表面物質(zhì):脂磷壁酸、M蛋白等

侵襲性酶:鏈激酶、鏈道酶、透明質(zhì)酸酶

致熱外毒素:又稱紅疹毒素或猩紅熱毒素鏈球菌溶素O和S:測(cè)定ASO含量可作為風(fēng)濕熱及其活動(dòng)性的輔助診斷指標(biāo)鏈球菌屬-臨床意義47ppt課件2024/4/247化膿性鏈球菌(S.pyogenes)致472024/4/348所致疾病化膿性疾?。貉恃?、扁桃體炎、呼吸道感染、皮膚感染、軟組織感染、心內(nèi)膜炎、腦膜炎、產(chǎn)褥熱、關(guān)節(jié)炎等中毒性疾?。盒杉t熱或中毒性休克綜合癥變態(tài)反應(yīng)性疾?。猴L(fēng)濕熱和急性腎小球腎炎

鏈球菌屬-臨床意義48ppt課件2024/4/248所致疾病鏈球菌屬-臨床意義48ppt課件482024/4/349肺炎鏈球菌(S.pneumoniae

)致病物質(zhì)莢膜溶血素神經(jīng)氨酸酶

所致疾病大葉性肺炎支氣管炎其它繼發(fā)性感染鏈球菌屬-臨床意義此菌是社區(qū)獲得性肺炎的重要病因49ppt課件2024/4/249肺炎鏈球菌(S.pneumoniae492024/4/350其它鏈球菌無(wú)乳鏈球菌(S.agalactiae)新生兒-敗血癥、腦膜炎和肺炎;成人-菌血癥、骨髓炎、腎盂腎炎、女性子宮內(nèi)膜炎等草綠色鏈球菌(viridansgroupstreptococci)亞急性細(xì)菌性心內(nèi)膜炎和深部膿腫最常見的病原菌豬鏈球菌(S.suis)人豬鏈球菌病等

鏈球菌屬-臨床意義50ppt課件2024/4/250其它鏈球菌無(wú)乳鏈球菌(S.agalac502024/4/351肺炎鏈球菌的形態(tài)特征染色:G+c形態(tài):矛頭狀,寬端相對(duì),尖端向外排列:成雙排列特殊結(jié)構(gòu):可有莢膜鏈球菌屬51ppt課件2024/4/251肺炎鏈球菌的形態(tài)特征染色:G+c鏈球菌屬512024/4/352肺炎鏈球菌菌落兼性厭氧,營(yíng)養(yǎng)要求較高

5%~10%CO2環(huán)境下,培養(yǎng)基中加入血液、血清、葡萄糖、氨基酸等,生長(zhǎng)良好菌落特點(diǎn)在血平板上形成草綠色溶血、灰色、圓形、略扁、直徑約0.5~1.0mm的菌落

“臍窩”狀:孵育時(shí)間超過(guò)48h,菌落常呈中央下陷、邊緣隆起的“臍窩”狀

肺炎鏈球菌的培養(yǎng)特點(diǎn)52ppt課件2024/4/252肺炎鏈球菌菌落兼性厭氧,營(yíng)養(yǎng)要求較高肺炎522024/4/353其它鏈球菌形態(tài)特征染色性:G+c形態(tài):球形或橢圓形排列:鏈狀排列,長(zhǎng)短不一特殊結(jié)構(gòu):幼齡菌可有莢膜鏈球菌屬53ppt課件2024/4/253其它鏈球菌形態(tài)特征染色性:G+c鏈球菌屬532024/4/354其它鏈球菌培養(yǎng)特征最適生長(zhǎng)溫度:35~37℃

營(yíng)養(yǎng)要求較高血平板:灰白色圓形凸起的細(xì)小菌落,不同菌株溶血不一肉湯:一般呈沉淀生長(zhǎng)化膿性鏈球菌草綠色鏈球菌鏈球菌屬54ppt課件2024/4/254其它鏈球菌培養(yǎng)特征最適生長(zhǎng)溫度:35~3542024/4/355鑒定流程觸酶試驗(yàn):陰性鏈球菌屬觀察血平板上溶血環(huán)β-溶血環(huán)非β-溶血環(huán)Optochin、桿菌肽、膽七、高鹽

桿菌肽、CAMP、膽七、高鹽

55ppt課件2024/4/255鑒定流程觸酶試驗(yàn):陰性鏈球菌屬觀察血平板552024/4/356常用鑒定試驗(yàn)1.桿菌肽試驗(yàn)原理:A群鏈球菌對(duì)桿菌肽幾乎全部敏感,而其他鏈球菌絕大多數(shù)對(duì)其耐藥;方法:挑取被檢菌落,密涂于血平板,貼上桿菌肽紙片(0.04U),35℃

過(guò)夜;結(jié)果:抑菌環(huán)直徑>10mm為敏感,則推斷被檢菌為A群鏈球菌(如:化膿性鏈球菌)鏈球菌屬56ppt課件2024/4/256常用鑒定試驗(yàn)1.桿菌肽試驗(yàn)鏈球菌屬56562024/4/3572.Optochin試驗(yàn)原理:

Optochin可干擾肺炎鏈球菌葉酸合成,抑制該菌的生長(zhǎng)方法:挑取被檢菌落,涂在血平板上,貼上Optochin紙片(5μg)于接種處,35℃CO2培養(yǎng)18-24h;結(jié)果:1.抑菌環(huán)直徑>14mm為敏感,推斷為肺炎鏈球菌2.抑菌環(huán)直徑≤

14mm,應(yīng)再做膽汁溶菌試驗(yàn)57ppt課件2024/4/2572.Optochin試驗(yàn)結(jié)果:57pp572024/4/3583.膽汁溶菌試驗(yàn)原理:膽汁或膽鹽可溶解肺炎鏈球菌方法:1.平板法:用10%去氧膽酸鈉溶液直接滴加在可疑菌落上,置35℃30min后觀察被檢菌落是否已溶解;

2.試管法:2支0.9ml被檢菌液,分別加入10%去氧膽酸鈉和生理鹽水(對(duì)照)0.1ml,搖勻后置35℃10~30min觀察結(jié)果結(jié)果:1.平板法:“菌落消失”為陽(yáng)性;

2.試管法:“加膽鹽培養(yǎng)物透明,對(duì)照管混濁”為陽(yáng)性陽(yáng)性為肺炎鏈球菌58ppt課件2024/4/2583.膽汁溶菌試驗(yàn)58ppt課件582024/4/3594.CAMP試驗(yàn)原理:B群鏈球菌能產(chǎn)生CAMP因子,可促進(jìn)葡萄球菌的β-溶血素溶解紅細(xì)胞的活性,因此在兩菌交界處溶血力增加,出現(xiàn)矢形(半月形)的溶血區(qū);方法:先以產(chǎn)β-溶血素的金黃色葡萄球菌劃一橫線接種于血平板上,再將被檢菌與其垂直劃線接種,兩線相距0.5~1.0cm,于37℃培養(yǎng)18~24h,觀察結(jié)果,每次實(shí)驗(yàn)均應(yīng)設(shè)陰性和陽(yáng)性對(duì)照;結(jié)果:兩劃線交界處出現(xiàn)箭頭樣的溶血區(qū)為陽(yáng)性,陽(yáng)性則推斷為B群鏈球菌(即無(wú)乳鏈球菌)。59ppt課件2024/4/2594.CAMP試驗(yàn)59ppt課件592024/4/360β-溶血鏈球菌的鑒定

60ppt課件2024/4/260β-溶血鏈球菌的鑒定60ppt課件602024/4/361非β-溶血鏈球菌的鑒定61ppt課件2024/4/261非β-溶血鏈球菌的鑒定61ppt課件612024/4/362商品化鑒定系統(tǒng)商品化鑒定系統(tǒng)對(duì)檢測(cè)鏈球菌提供了極大的幫助但對(duì)于經(jīng)過(guò)分類學(xué)和命名學(xué)變化后的鏈球菌的鑒定則處于滯后狀態(tài)傳統(tǒng)的血清學(xué)和推測(cè)性生化試驗(yàn)在鑒定中仍無(wú)法替代62ppt課件2024/4/262商品化鑒定系統(tǒng)商品化鑒定系統(tǒng)對(duì)檢測(cè)鏈球菌622024/4/363PRSPPenicillinresistantstreptococcuspneumoniae

青霉素耐藥肺炎鏈球菌肺炎鏈球菌作為CAP最重要的致病原之一,其耐藥問(wèn)題備受國(guó)內(nèi)外學(xué)者關(guān)注自1967年首次報(bào)告了青霉素耐藥肺炎鏈球菌(PRSP)以來(lái),各國(guó)相繼發(fā)現(xiàn)了PRSP,且肺炎鏈球菌對(duì)青霉素耐藥率的增加已成為全球趨勢(shì)PRSP的發(fā)生率在不同國(guó)家甚至在同一國(guó)家的不同地區(qū)都有顯著差異63ppt課件2024/4/263PRSPPenicillinresis632024/4/364第三節(jié)腸球菌屬

(Enterococcus)

64ppt課件2024/4/264第三節(jié)腸球菌屬

642024/4/365分類腸球菌原歸于鏈球菌屬,與D群鏈球菌血清型相適應(yīng)1984年Schleifer和Kipper-Bale將其單獨(dú)成立為腸球菌屬腸球菌屬65ppt課件2024/4/265分類腸球菌原歸于鏈球菌屬,與D群鏈652024/4/366人感染腸球菌主要種類

糞腸球菌(E.faecalis)屎腸球菌(E.faecium)鉛黃腸球菌(E.casseliflavus)棉子糖腸球菌(E.raffinosus)鳥腸球菌(E.avium)盲腸腸球菌(E.cecorum)殊異腸球菌(E.dispar)耐久腸球菌(E.durans)鶉雞腸球菌(E.gallinarum)空腸腸球菌(E.hirae)蒙氏腸球菌(E.mundtii)病臭腸球菌(E.malodoratus)從臨床標(biāo)本分離的腸球菌中,E.faecalis

占80~90%,E.faecium占5~10%66ppt課件2024/4/266人感染腸球菌主要種類糞腸球菌(E.f662024/4/367臨床意義是人和動(dòng)物腸道正常菌群之一嚴(yán)重基礎(chǔ)疾病的老年人和免疫力低下的患者易被感染主要引起尿路感染,腹腔和盆腔的傷口感染次之,亦可引起全身性感染等隨著抗生素耐藥率的增加,腸球菌的感染率正不斷上升腸球菌屬67ppt課件2024/4/267臨床意義是人和動(dòng)物腸道正常菌群之一腸球菌672024/4/368形態(tài)特征染色性:革蘭陽(yáng)性球菌形態(tài):球形或橢圓形排列:?jiǎn)蝹€(gè)、成對(duì)或短鏈狀排列特殊結(jié)構(gòu):無(wú)芽胞和莢膜,少數(shù)菌株有稀疏鞭毛腸球菌屬68ppt課件2024/4/268形態(tài)特征染色性:革蘭陽(yáng)性球菌腸球菌屬68682024/4/369兼性厭氧菌最適生長(zhǎng)溫度35~37℃血平板:灰白色、不透明、圓形凸起、有α或γ的溶血菌落麥康凱:較小、稍干燥、粉紅色菌落糞腸球菌菌落腸球菌屬培養(yǎng)特征69ppt課件2024/4/269兼性厭氧菌糞腸球菌菌落腸球菌屬培養(yǎng)特征692024/4/370生化特征不含細(xì)胞色素酶和觸酶6.5%NaCl培養(yǎng)基上生長(zhǎng)pH9.6肉湯生長(zhǎng)膽汁七葉苷試驗(yàn)陽(yáng)性發(fā)酵糖,產(chǎn)酸不產(chǎn)氣含鏈球菌

D群抗原

膽汁七葉苷試驗(yàn)6.5%NaCl生長(zhǎng)腸球菌屬70ppt課件2024/4/270生化特征不含細(xì)胞色素酶和觸酶膽汁七葉苷試702024/4/371腸球菌屬的細(xì)菌分群試驗(yàn)Ⅰ群Ⅱ群Ⅲ群Ⅳ群Ⅴ群甘露醇

++--+山梨糖

+----精氨酸

-++--腸球菌屬71ppt課件2024/4/271腸球菌屬的細(xì)菌分群試驗(yàn)Ⅰ群Ⅱ群Ⅲ群Ⅳ群Ⅴ712024/4/37272ppt課件2024/4/27272ppt課件722024/4/373

腸球菌屬內(nèi)鑒別表腸球菌屬73ppt課件2024/4/273腸球菌屬73ppt課件732024/4/374結(jié)果報(bào)告和解釋現(xiàn)已確定腸球菌含有多種潛在性毒力因素,但對(duì)人類致病作用的毒力,未被建立腸球菌屬菌種,引發(fā)人類感染,最常見的是尿路感染,其次為膽道感染及菌血癥人類腸球菌感染中以糞腸球菌最常見,其次是屎腸球菌,其他菌種占很少比例腸球菌可引起呼吸道、中樞神經(jīng)系統(tǒng)、耳炎、膿毒性關(guān)節(jié)炎和眼內(nèi)炎等,但極少見74ppt課件2024/4/274結(jié)果報(bào)告和解釋現(xiàn)已確定腸球菌含有多種潛在742024/4/375VREVancomycin-resistantenterococci

耐萬(wàn)古霉素腸球菌TheemergenceofvancomycinresistanceasatherapeuticprobleminenterococcalstrainswasfirstdocumentedinWesternEuropeandintheUnitedStates.Sincethen,theisolationofVREhasbeencontinuouslyreportedindiv

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