血細(xì)胞化學(xué)染色

關(guān)于血細(xì)胞化學(xué)染色一、概述（一）研究對(duì)象

外周血和骨髓新鮮涂片單個(gè)細(xì)胞中的化學(xué)物質(zhì)：

酶類、脂類、糖類、鐵、蛋白質(zhì)、核酸等

第2頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

（二）臨床應(yīng)用

1.鑒別各類血細(xì)胞

2.輔助血液系統(tǒng)等疾病診斷和鑒別診斷

3.觀察疾病療效和判斷預(yù)后

第3頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

二、常用細(xì)胞化學(xué)染色方法

過氧化物酶染色中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色過碘酸-雪夫反應(yīng)

α-醋酸萘酚酯酶染色鐵染色

第4頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天過氧化物酶染色

（peroxidase,POX）

第5頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天POX

新生態(tài)氧

[O]↑過氧化氫（基質(zhì)中）四甲基聯(lián)苯胺（無色）聯(lián)苯胺藍(lán)（藍(lán)色）亞硝基鐵氰化鈉

藍(lán)色顆粒（漿內(nèi)酶部位）粒、單核細(xì)胞胞漿【原理】第6頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【結(jié)果判斷】

-、+、++、+++、++++弱陽(yáng)性顆粒小，分布稀疏陽(yáng)性顆粒稍粗，分布較密集強(qiáng)陽(yáng)性顆粒粗大，密布于整個(gè)胞漿第7頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【正常血細(xì)胞染色反應(yīng)】1.粒細(xì)胞系統(tǒng)

POX主要存在于粒系細(xì)胞中。分化差的原粒細(xì)胞陰性;

分化好的原粒細(xì)胞至中性成熟粒細(xì)胞各階段均呈陽(yáng)性，陽(yáng)性反應(yīng)程度隨細(xì)胞的成熟逐漸增強(qiáng)。

第8頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

2.單核細(xì)胞系統(tǒng)陰性或弱陽(yáng)性

3.淋巴細(xì)胞系統(tǒng)紅細(xì)胞系統(tǒng)巨核細(xì)胞系統(tǒng)陰性漿細(xì)胞組織細(xì)胞

第9頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天第10頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【臨床評(píng)價(jià)】

急性髓細(xì)胞白血病急性淋巴細(xì)胞白血病

鑒別第11頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

1.急性髓細(xì)胞白血?。?）急性粒細(xì)胞白血病

陽(yáng)性反應(yīng)

（2）急性單核細(xì)胞白血病

弱陽(yáng)性反應(yīng)第12頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

2.急性淋巴細(xì)胞白血病

陰性反應(yīng)或陽(yáng)性率<3%(殘留原粒細(xì)胞)第13頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

中性粒細(xì)胞堿性磷酸酶染色

（neutrophilicalkaline

phosphatase，NAP）第14頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天磷酸萘酚鈉（基質(zhì)中）中性粒細(xì)胞胞漿中NAP磷酸鈉α-萘酚

重氮鹽（堅(jiān)牢藍(lán)鹽RR）＋紫黑色偶氮染料

（胞漿中）水解【原理】Kaplow偶氮偶聯(lián)法第15頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【結(jié)果判斷】

胞漿中有紫黑色顆粒為陽(yáng)性(+~++++）第16頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【正常血細(xì)胞染色反應(yīng)】1.中性成熟粒細(xì)胞陽(yáng)性反應(yīng)其他細(xì)胞呈陰性反應(yīng)第17頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天第18頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

2.NAP積分值計(jì)數(shù)100個(gè)成熟中性粒細(xì)胞（桿狀和分葉）,分別記錄其分級(jí)情況：

第19頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天(-)0分

(+)1分

(++)2分

(+++)3分

(++++)4分

陽(yáng)性率全部陽(yáng)性反應(yīng)細(xì)胞之和

積分值各種陽(yáng)性程度細(xì)胞的分值之和第20頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

3.參考值

積分值35-70分

(各實(shí)驗(yàn)室參考值不同)

第21頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【臨床評(píng)價(jià)】（1）細(xì)菌性感染與病毒性感染

（尤其是化膿性感染）

明顯增加無明顯變化第22頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天(2）類白血病反應(yīng)與慢性粒細(xì)胞白血病明顯增加明顯下降且常為零分，緩解時(shí)又上升到正常第23頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天過碘酸-雪夫反應(yīng)

(糖原染色)

（periodicacid-Schiffreaction，PAS）第24頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天雙醛基過碘酸雪夫試劑中的無色品紅

紫紅色化合物

(附于含多糖類的胞漿內(nèi))

乙二醇基(多糖類物質(zhì)含有)氧化【原理】第25頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【結(jié)果判斷】陽(yáng)性胞漿內(nèi)紅色陽(yáng)性物呈彌散狀、顆粒狀或塊狀。陰性胞漿內(nèi)無色或無顆粒,核淡綠。

第26頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【正常血細(xì)胞染色反應(yīng)】

1.粒細(xì)胞系統(tǒng)分化差的原粒細(xì)胞為陰性；分化好的原粒細(xì)胞至中性分葉核粒細(xì)胞各階段均呈陽(yáng)性反應(yīng)，陽(yáng)性程度隨細(xì)

胞的成熟逐漸增強(qiáng)。

陽(yáng)性物呈細(xì)顆粒、均勻紅色。第27頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

2.紅細(xì)胞系統(tǒng)

陰性

3.單核細(xì)胞系統(tǒng)

絕大多數(shù)陽(yáng)性呈細(xì)顆粒，有時(shí)分布于細(xì)胞邊緣的陽(yáng)性顆粒較粗大。第28頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天4.淋巴細(xì)胞系統(tǒng)

大多數(shù)淋巴細(xì)胞呈陰性；

少于20%淋巴細(xì)胞呈粗顆粒狀或塊狀陽(yáng)性。5.巨核細(xì)胞系統(tǒng)

呈顆粒狀或塊狀陽(yáng)性（含血小板）。第29頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【臨床評(píng)價(jià)】1.紅血病或紅白血病幼紅細(xì)胞陽(yáng)性巨幼細(xì)胞性貧血幼紅細(xì)胞陰性

第30頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天第31頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

3.鑒別急性白血病類型（1）急性淋巴細(xì)胞白血病

陽(yáng)性率20%-80%，呈紅色粗顆粒狀或塊狀。第32頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天（2）急性粒細(xì)胞白血病

少數(shù)陽(yáng)性，呈細(xì)顆粒狀或均勻紅色。（3）急性單核細(xì)胞白血病

可陽(yáng)性，呈細(xì)顆粒狀、彌散分布，有時(shí)胞質(zhì)邊緣處顆粒較粗大。第33頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天α-醋酸萘酚酯酶染色

（α-naphtholacetateesterase，α-NAE）第34頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天α-醋酸萘酚酯酶（細(xì)胞內(nèi)）α-醋酸萘酚（基質(zhì)液中）α-萘酚

重氮鹽（堅(jiān)牢藍(lán)B）胞漿不溶性灰黑色或棕黑色沉淀水解【原理】第35頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【結(jié)果判斷】

胞漿內(nèi)有灰黑色或棕黑色彌散性顆粒狀沉淀為陽(yáng)性。第36頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

氟化鈉抑制試驗(yàn)

在基質(zhì)液中加入適量NaF,其余染色方法同上。兩種方法染色后用油鏡計(jì)數(shù)100或200個(gè)被檢細(xì)胞，分別計(jì)算出抑制前和抑制后的陽(yáng)性率或陽(yáng)性積分。第37頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

氟化鈉抑制率=抑制前陽(yáng)性率或陽(yáng)性積分-抑制后陽(yáng)性率或陽(yáng)性積分抑制前陽(yáng)性率或陽(yáng)性積分100%第38頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【正常血細(xì)胞染色反應(yīng)】1.單核細(xì)胞系統(tǒng)

原始單核細(xì)胞

分化差陰性分化好陽(yáng)性

幼稚及成熟單核細(xì)胞陽(yáng)性被氟化鈉抑制第39頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

2.粒細(xì)胞系統(tǒng)

原粒細(xì)胞陰性或弱陽(yáng)性以下階段為弱陽(yáng)性

3.淋巴細(xì)胞系統(tǒng)

多數(shù)陰性，少數(shù)弱陽(yáng)性

不被氟化鈉抑制第40頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天第41頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【臨床評(píng)價(jià)】急單急粒急性早幼粒急粒單急淋α-NAE+++或-或++陽(yáng)性-++++弱+NaF被抑制不被不被抑制部分被抑制抑制部分未被抑制主要用于鑒別急性白血病類型第42頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天鐵染色

（ferricstain）第43頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天亞鐵氰化鉀

亞鐵氰化鐵(藍(lán)色沉淀在含F(xiàn)e部位)鐵＋酸性環(huán)境普魯士藍(lán)反應(yīng)

骨髓小粒中的含F(xiàn)e血黃素（細(xì)胞外鐵）骨髓中貯存鐵幼紅細(xì)胞內(nèi)的Fe（細(xì)胞內(nèi)鐵）原理第44頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天【結(jié)果判斷】

幼紅細(xì)胞核染色為鮮紅色,鐵粒呈藍(lán)綠色。

第45頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞外鐵

低倍鏡觀察涂片尾部和骨髓小粒,細(xì)胞外鐵位于幼紅細(xì)胞外或骨髓小粒巨噬細(xì)胞漿內(nèi)，呈藍(lán)色顆粒狀、小珠狀或團(tuán)塊狀。

第46頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

再用油鏡判斷陽(yáng)性程度，根據(jù)鐵量多少分五級(jí):

（-）（+）（++）（+++）（++++）第47頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天第48頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞內(nèi)鐵

存在于中幼紅細(xì)胞、晚幼紅細(xì)胞及成熟紅細(xì)胞中的鐵。

油鏡下計(jì)數(shù)100個(gè)中幼紅細(xì)胞和晚幼紅細(xì)胞，記錄胞漿中含有藍(lán)色顆粒細(xì)胞的百分率。第49頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天

根據(jù)細(xì)胞內(nèi)鐵顆粒的數(shù)目、大小、染色深淺和顆粒分布情況,將鐵粒幼紅細(xì)胞分為四型:

Ⅰ型

Ⅱ型

Ⅲ型

Ⅳ型第50頁(yè),共58頁(yè)，2024年2月25日，星期天細(xì)胞內(nèi)鐵第51頁(yè),共58頁(yè)，2024年