《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》編制說明

《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》編制說明一、工作簡(jiǎn)況（一）任務(wù)來源根據(jù)江蘇省西瓜甜瓜協(xié)會(huì)團(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)立項(xiàng)的公告(蘇瓜協(xié)【2023】第12號(hào))，對(duì)《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行了立項(xiàng)。本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院提出，江蘇省西瓜甜瓜協(xié)會(huì)歸口，起草單位為江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院。（二）目的和意義西瓜、甜瓜是江蘇重要的園藝經(jīng)濟(jì)作物，在我國(guó)蔬果生產(chǎn)、消費(fèi)中占據(jù)了十分重要地位，全省現(xiàn)有西甜瓜栽培面積達(dá)233.9萬畝，產(chǎn)量722.7萬噸，產(chǎn)值302.8億元，居全國(guó)前六，是全國(guó)夏季西甜瓜重要優(yōu)勢(shì)產(chǎn)區(qū)。隨著江蘇省對(duì)高效農(nóng)業(yè)重視，扶持政策優(yōu)化完善，西甜瓜種植平穩(wěn)發(fā)展，在調(diào)整農(nóng)業(yè)產(chǎn)業(yè)結(jié)構(gòu)和促進(jìn)農(nóng)民增收致富等方面發(fā)揮顯著作用。但是隨著西甜瓜設(shè)施栽培面積的不斷擴(kuò)大及種植年限增長(zhǎng)，西甜瓜病害發(fā)生日益嚴(yán)重，成為影響西甜瓜生產(chǎn)可持續(xù)發(fā)展的主要障礙。尖孢鐮刀菌(Fusarium

oxysporum)侵染引起的枯萎病和亞隔孢殼屬(Stagonosporopsis)為害引起的蔓枯病是西甜瓜生產(chǎn)上的兩種主要病害。目前江蘇地區(qū)設(shè)施栽培低溫多濕、寡照等生態(tài)環(huán)境條件及常年連作伴隨病菌量加大，導(dǎo)致枯萎病、蔓枯病高發(fā)、重發(fā)，生產(chǎn)上往往植株死亡率可達(dá)30%～40%，嚴(yán)重可達(dá)80%以上，加劇了農(nóng)藥化肥濫用，影響品質(zhì)和質(zhì)量安全，已成為制約我省西甜瓜生產(chǎn)的重要因素。生產(chǎn)上發(fā)生西甜瓜枯萎病、蔓枯病后，仍以化學(xué)藥劑防治為主，長(zhǎng)期使用化學(xué)農(nóng)藥易產(chǎn)生抗藥性、農(nóng)藥殘留和環(huán)境污染，使得西甜瓜枯萎病、蔓枯病等防治成為生產(chǎn)上的難點(diǎn)。因此，培育及推廣優(yōu)質(zhì)復(fù)合抗病西甜瓜新品種是控制枯萎病、蔓枯病最為環(huán)保、經(jīng)濟(jì)有效的辦法。所以開展現(xiàn)有種質(zhì)資源對(duì)枯萎病和蔓枯病的復(fù)合抗病性鑒定是開展西甜瓜多抗育種研究及品種推廣的重要工作?？共⌒澡b定是抗病育種的基礎(chǔ)，而合適高效準(zhǔn)確的抗病性鑒定技術(shù)方法又是抗病性鑒定的關(guān)鍵，所以制定出準(zhǔn)確、可靠、快速的復(fù)合鑒定技術(shù)，可以提高抗病育種的工作效率，加速育種的進(jìn)程。同時(shí)抗性品種的應(yīng)用與抗性鑒定方法結(jié)合，有利于加速西甜瓜優(yōu)質(zhì)抗性品種的推廣應(yīng)用。目前，西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病的抗病性鑒定的方法多采用單一接種鑒定，效率低、耗費(fèi)種子等試驗(yàn)材料多，且不同批次試驗(yàn)不穩(wěn)定。另外傳統(tǒng)枯萎病和蔓枯病的雙重抗性鑒定不是在同一植株上同時(shí)鑒定的，影響結(jié)果一致性，拉長(zhǎng)鑒定周期。目前為止尚無統(tǒng)一規(guī)范可參考的復(fù)合鑒定技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)。因此為更加簡(jiǎn)便、高效鑒定西瓜甜瓜品種（系）對(duì)枯萎病、蔓枯病抗性，對(duì)西瓜甜瓜枯萎、蔓枯病的抗性品種（系）鑒定嚴(yán)格把關(guān)，針對(duì)當(dāng)前單一接種為主的技術(shù)不足，亟需制定適合大量快速抗源篩選，能夠避免不同病害發(fā)病交互影響病情觀察和統(tǒng)計(jì)結(jié)果，且鑒定結(jié)果更快速準(zhǔn)確的抗病性復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程。規(guī)范西甜瓜品種（系）枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)程序，為大批量篩選抗性品種資源提供技術(shù)規(guī)程，可以推動(dòng)西甜瓜抗枯萎病、蔓枯病育種，保障西瓜甜瓜種業(yè)提升。（三）主要工作過程1.由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所成立《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》標(biāo)準(zhǔn)編寫工作小組，主要由江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所西甜瓜創(chuàng)新團(tuán)隊(duì)專家和科研骨干組成。工作組成員依據(jù)國(guó)家有關(guān)制修訂定標(biāo)準(zhǔn)的法律、法規(guī)和相關(guān)文件，召開編制會(huì)議，擬定標(biāo)準(zhǔn)制定工作進(jìn)度和計(jì)劃，部署、分配任務(wù)。2.工作組詳細(xì)查閱、對(duì)比有關(guān)標(biāo)準(zhǔn)和相關(guān)文獻(xiàn)等技術(shù)資料；廣泛調(diào)研國(guó)內(nèi)外西甜瓜枯萎病、蔓枯病抗性鑒定技術(shù)現(xiàn)狀和技術(shù)需求數(shù)據(jù)，開展調(diào)查、實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證等作為技術(shù)參考資料，依據(jù)積累的一手資料作為標(biāo)準(zhǔn)制定的主要技術(shù)標(biāo)準(zhǔn)參考數(shù)據(jù)，起草了《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》初稿。3.標(biāo)準(zhǔn)制定工作組進(jìn)一步討論起草標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)、術(shù)語(yǔ)與定義、主要技術(shù)指標(biāo)等，又邀請(qǐng)了從事瓜類育種栽培、植物病害、標(biāo)準(zhǔn)化研究等有關(guān)專家對(duì)稿件進(jìn)行充分討論、交流意見，廣泛征求意見，根據(jù)專家及同行的建議，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)中的技術(shù)數(shù)據(jù)參數(shù)范圍的可行性進(jìn)行修訂和論證，對(duì)部分標(biāo)準(zhǔn)的條目進(jìn)行了修改調(diào)整、刪減，分析評(píng)價(jià)結(jié)果的一致性，對(duì)初稿進(jìn)行修改完善，形成標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿初稿。4.將《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》（征求意見稿）發(fā)送相關(guān)專家和西甜瓜育種企業(yè)等有關(guān)行業(yè)專家、技術(shù)人員征求意見。省西瓜甜瓜協(xié)會(huì)召開專家評(píng)審會(huì)，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿進(jìn)行論證完善，標(biāo)準(zhǔn)編制組對(duì)征得的相關(guān)意見進(jìn)行整理，對(duì)標(biāo)準(zhǔn)征求意見稿進(jìn)行修改，將標(biāo)準(zhǔn)送審稿、征求意見匯總處理表報(bào)送江蘇省西瓜甜瓜協(xié)會(huì)備案。協(xié)會(huì)按照?qǐng)F(tuán)體標(biāo)準(zhǔn)送審稿進(jìn)行技術(shù)審查。最終進(jìn)行結(jié)果的發(fā)布。（四）標(biāo)準(zhǔn)編制小組成員及工作標(biāo)準(zhǔn)制訂主要起草人為姚協(xié)豐、徐建、朱凌麗、徐錦華、劉廣、張曼、婁麗娜、羊杏平、侯茜、劉金秋。姚協(xié)豐：副研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，負(fù)責(zé)標(biāo)準(zhǔn)整體工作的組織協(xié)調(diào)、調(diào)研和執(zhí)筆起草工作；負(fù)責(zé)國(guó)內(nèi)外相關(guān)法律法規(guī)、標(biāo)準(zhǔn)查詢，檢索西甜瓜苗期抗枯萎病、蔓枯病鑒定技術(shù)研究現(xiàn)狀，標(biāo)準(zhǔn)的起草及編制說明編寫工作；徐建：助理研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》的病原菌準(zhǔn)備、接種等技術(shù)參數(shù)分析，標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作；朱凌麗：助理研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與《西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程》的西甜瓜苗期管理、病害的調(diào)查、技術(shù)參數(shù)的研究；徐錦華：研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作；劉廣：副研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作；張曼：副研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作；婁麗娜：研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作；羊杏平：研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，提出并負(fù)責(zé)技術(shù)總指導(dǎo)等工作；侯茜：助理研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜所，參與標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作；劉金秋：助理研究員，江蘇省農(nóng)業(yè)科學(xué)院蔬菜研究所，參與標(biāo)準(zhǔn)文本起草等工作。二、主要技術(shù)內(nèi)容（一）制定原則本標(biāo)準(zhǔn)在修訂過程中遵循“先進(jìn)性、適用性、統(tǒng)一性、規(guī)范性”的原則，按照GB/T1.1-2020《標(biāo)準(zhǔn)化工作導(dǎo)則第1部分：標(biāo)準(zhǔn)的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則》給出的規(guī)則的要求進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)文本的編寫。本標(biāo)準(zhǔn)制定注重適用性、配套性和可操作性，以國(guó)家的有關(guān)法規(guī)和標(biāo)準(zhǔn)為主要參考，根據(jù)工作總結(jié)、生產(chǎn)調(diào)研、國(guó)內(nèi)外學(xué)者的研究結(jié)果，進(jìn)行必要的補(bǔ)充試驗(yàn)驗(yàn)證總結(jié)，以及生產(chǎn)者的驗(yàn)證等程序完成本標(biāo)準(zhǔn)的制定，使本標(biāo)準(zhǔn)具有充分的科學(xué)性。（二）編制依據(jù)本標(biāo)準(zhǔn)的制定參考和引用以下標(biāo)準(zhǔn)：GB/T8321（所有部分）農(nóng)藥合理使用準(zhǔn)則；GB/T16715.1-2010瓜菜作物種子第1部分:瓜類；DB32∕T

1994-2012

、DB32/T1189-2008西瓜甜瓜穴盤育苗技術(shù)方法。同時(shí)也參考專利“一種西甜瓜枯萎病和蔓枯病苗期聯(lián)合抗性快速鑒定方法（CN201711338048.3）”，前期在西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病菌株收集，品種抗性鑒定與抗性資源收集積累方面具有菌株、品種（系）、方法實(shí)踐方面的明顯優(yōu)勢(shì)，特此針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)的不足，以前期在西甜瓜枯萎病、蔓枯病品種資源抗性鑒定實(shí)踐過程中積累的方法為依據(jù)，結(jié)合前人的研究基礎(chǔ)，建立了枯萎病苗期活體和蔓枯病離體葉片復(fù)合抗性接種鑒定技術(shù)方法，制定適合大量快速抗性種質(zhì)篩選，能夠避免不同病害發(fā)病交互影響病情觀察和統(tǒng)計(jì)結(jié)果，且鑒定結(jié)果更快速準(zhǔn)確的技術(shù)規(guī)程。（三）主要技術(shù)內(nèi)容適用于西瓜甜瓜等瓜類品種（系）對(duì)枯萎病、蔓枯病苗期抗性鑒定及抗性評(píng)價(jià)工作。本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了西瓜甜瓜品種（系）苗期對(duì)枯萎病、蔓枯病抗性鑒定及抗性評(píng)價(jià)的病原菌準(zhǔn)備、西瓜甜瓜苗期管理、病原菌接種、病情調(diào)查、抗性分級(jí)等復(fù)合抗性快速評(píng)價(jià)技術(shù)要求內(nèi)容。三、主要試驗(yàn)（驗(yàn)證）的分析、綜述報(bào)告，技術(shù)經(jīng)濟(jì)論證，預(yù)期的經(jīng)濟(jì)效果前期在國(guó)家西甜瓜產(chǎn)業(yè)技術(shù)體系及江蘇省農(nóng)業(yè)科技自主創(chuàng)新項(xiàng)目（優(yōu)質(zhì)抗病中小型大棚西瓜新品種選育CX（14）2004，課題三：西瓜多抗性苗期聯(lián)合鑒定與評(píng)價(jià)技術(shù)研究）的支持下開展了華東主產(chǎn)區(qū)西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病病原菌收集與快速檢測(cè)技術(shù)研究；研究建立了西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定與評(píng)價(jià)技術(shù)體系。并且在菌株收集鑒定分析（LiPFetal,J.Phytopathol.,2015;MasonNJetal,PlantDis.,2019;YaoXFetal,PlantDis.,2020）、抗性品種種質(zhì)資源鑒定應(yīng)用（李蘋芳等,中國(guó)瓜菜,2015;YaoXFetal,Front.Microbiol.,2016;姚協(xié)豐等,中國(guó)瓜菜,2017;朱凌麗等,江蘇農(nóng)業(yè)學(xué)報(bào),2020）等方面擁有文章等成果要素積累與支撐。我們牽頭制定的“設(shè)施西甜瓜優(yōu)質(zhì)綠色雙減簡(jiǎn)約化栽培技術(shù)”也被列為農(nóng)業(yè)部主推技術(shù)。同時(shí)形成了專利“一種西甜瓜枯萎病和蔓枯病苗期聯(lián)合抗性快速鑒定方法（CN201711338048.3）”，這些技術(shù)基礎(chǔ)為制定合格規(guī)范的西瓜甜瓜苗期抗枯萎病、蔓枯病的復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程奠定了堅(jiān)實(shí)的基礎(chǔ)。苗期活體和離體葉片復(fù)合抗性接種鑒定方法，優(yōu)點(diǎn)在于，克服了“以往鑒定方法病害發(fā)病交互影響，病情指數(shù)偏高，易產(chǎn)生誤導(dǎo)性結(jié)果；由于枯萎病菌對(duì)感病植株致命性，導(dǎo)致對(duì)感枯萎病材料無法同時(shí)進(jìn)行多抗性苗期鑒定試驗(yàn)，后期仍需要進(jìn)行不同批次的蔓枯病單獨(dú)接種試驗(yàn)；另外傳統(tǒng)雙重抗性鑒定不是在同一植株上同時(shí)鑒定的，影響結(jié)果一致性，拉長(zhǎng)鑒定周期”等缺點(diǎn)。苗期活體和離體葉片接種復(fù)合抗性鑒定技術(shù)可以實(shí)現(xiàn)同植株同時(shí)鑒定兩種病害抗性，提高效率、縮短周期，節(jié)約種子等試驗(yàn)材料，且可操作性強(qiáng)，適合大量快速抗源篩選，品種對(duì)任何一種病原菌感病致死不影響品種后續(xù)對(duì)其它病害抗性鑒定的篩選。具有可操作性和經(jīng)濟(jì)合理性。西瓜甜瓜枯萎病、蔓枯病苗期復(fù)合鑒定技術(shù)規(guī)程的制定可提升我省設(shè)施西瓜甜瓜抗病育種效率，加速育種的進(jìn)程，推動(dòng)西甜瓜種業(yè)上臺(tái)階；可以提供高質(zhì)量抗性品種資源，實(shí)現(xiàn)減肥減藥省工增效，提高我省西甜瓜品質(zhì)和質(zhì)量安全水平。四、采用國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)的程度及水平的簡(jiǎn)要說明無采用相關(guān)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)。五、重大