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選修三練習(xí)1.(溫州市一模9月32T)卡那霉素和頭孢霉素都有抗菌作用,此外,卡那霉素還對(duì)葡萄細(xì)胞有抑制作用。探討人員將Barnase基因(雄性不育基因)轉(zhuǎn)入葡萄細(xì)胞,利用卡那霉素和頭孢霉素,通過植物克隆方法勝利培育出大粒、無核的葡萄新品種。請(qǐng)回答:(1)構(gòu)建含Barnase基因、β―葡糖苷酸酶基因和卡那霉素抗性基因的重組質(zhì)粒,導(dǎo)入農(nóng)桿菌,在固體培育基中培育形成以便鑒定是否混有雜菌,再用將農(nóng)桿菌轉(zhuǎn)移至LB培育基中進(jìn)行擴(kuò)大培育。構(gòu)建重組質(zhì)粒須要用到的工具酶是、。(2)將經(jīng)過的幼嫩葡萄葉片切成小塊,浸入農(nóng)桿菌懸浮液中,4分鐘后取出(此時(shí)已有較多農(nóng)桿菌附著在葉片小塊上)并接種到固體培育基中。培育至第3天時(shí),可以看到在葉片小塊四周出現(xiàn)和大量菌落。這時(shí)再用頭孢霉素處理葉片小塊,其目的是(A.抑制葡萄細(xì)胞脫分化B.促進(jìn)葡萄細(xì)胞再分化C.殺滅農(nóng)桿菌D.促進(jìn)農(nóng)桿菌生長(zhǎng))。(3)將葉片小塊放入卡那霉素培育基中培育一段時(shí)間后,轉(zhuǎn)移至生芽培育基中,待其長(zhǎng)出后,再轉(zhuǎn)移至生根培育基中接著培育形成試管苗??敲顾嘏嘤鹬饔?,植物克隆的技術(shù)基礎(chǔ)是。(4)在卡那霉素培育基中,由于轉(zhuǎn)化細(xì)胞對(duì)四周的非轉(zhuǎn)化細(xì)胞有愛護(hù)作用,獲得的試管苗中可能存在假的轉(zhuǎn)基因試管苗,因此還需對(duì)試管苗的基因的表達(dá)產(chǎn)物進(jìn)行生化檢測(cè),才能鑒別出真正的轉(zhuǎn)基因試管苗。(5)最終,對(duì)轉(zhuǎn)基因試管苗還需進(jìn)行漸漸濕度的熬煉,使適應(yīng)自然環(huán)境。(寧波九校17年1月聯(lián)考32T)(二)科學(xué)家將魚抗凍蛋白基因轉(zhuǎn)入番茄,使番茄的耐寒實(shí)力大大提高,可以在相對(duì)寒冷的環(huán)境中生長(zhǎng)。質(zhì)粒上有PstI、SmaI、HindIII、AIuI等四種限制性核酸內(nèi)切酶切割位點(diǎn),下圖是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程的示意圖(ampt為抗氨芐青霉素基因),其中①∽④是轉(zhuǎn)基因抗凍番茄培育過程中的相關(guān)步驟,I、II表示相關(guān)結(jié)構(gòu)或細(xì)胞。請(qǐng)據(jù)圖作答:(7分)在構(gòu)建重組DNA時(shí),可用一種或多種限制性核酸內(nèi)切酶進(jìn)行切割,為了避開目的基因和載體在酶切后產(chǎn)生的末端發(fā)生隨意連接,在此試驗(yàn)中應(yīng)當(dāng)選用限制性核酸內(nèi)切酶______________分別對(duì)_______________、__________進(jìn)行切割,切割后產(chǎn)生的DNA片段分別為__________、_________種。培育基中的氨芐青霉素會(huì)抑制番茄愈傷組織細(xì)胞的生長(zhǎng),要利用該培育基篩選已導(dǎo)入魚的抗凍蛋白基因的番茄細(xì)胞,應(yīng)使I重組DNA中含有____________作為標(biāo)記基因。探討人員通常采納___________法將魚抗凍蛋白基因?qū)敕鸭?xì)胞內(nèi)。3.(嘉興市17年3月32T)(二)我國(guó)目前臨床運(yùn)用的乙肝疫苗大多為基因工程疫苗,其有效成分是一種叫做乙肝表面抗原的蛋白質(zhì)(S蛋白),對(duì)應(yīng)的基因?yàn)閟基因。請(qǐng)回答:(1)在構(gòu)建重組DNA分子時(shí),要用限制性核酸內(nèi)切酶處理_________,并用_________酶使兩者結(jié)合。將重組DNA分子導(dǎo)入到哺乳動(dòng)物細(xì)胞,經(jīng)篩選得到工程細(xì)胞。在細(xì)胞培育過程中,工程細(xì)胞在生長(zhǎng)過程中有_________現(xiàn)象,須要定期運(yùn)用_________酶處理,以便于分瓶培育。為提髙工程細(xì)胞培育的勝利率,下列措施中不幸采納的是()A.取單個(gè)細(xì)胞進(jìn)行培育 B.加入胰島素C.二氧化碳培育箱 D.加入動(dòng)物血清由于哺乳動(dòng)物細(xì)胞培育較難,成本較高,近些年科學(xué)家們又獨(dú)創(chuàng)了“乳腺生物發(fā)生器”,進(jìn)而從轉(zhuǎn)基因動(dòng)物的乳汁中提取所需產(chǎn)品。在這種技術(shù)中,作為重組DNA分子受體細(xì)胞的一般是__________________。4.(二)科學(xué)家通過誘導(dǎo)黑鼠體細(xì)胞脫分化獲得誘導(dǎo)性多能干細(xì)胞(iPS),繼而利用iPS細(xì)胞培育出克隆鼠。流程如下:(1)從黑鼠體內(nèi)獲得一部分組織細(xì)胞,經(jīng)過消化,使其分散成單個(gè)的細(xì)胞,然后放入中保溫培育。在培育過程中細(xì)胞保持生長(zhǎng)、分裂(繁殖)乃至和有規(guī)律的蒼老、死亡等生命活動(dòng)現(xiàn)象。(2)下列關(guān)于動(dòng)物細(xì)胞培育的敘述,錯(cuò)誤的是。A.二倍體細(xì)胞大多具有異倍體核型B.某些癌細(xì)胞在合適條件下能逆轉(zhuǎn)為正常細(xì)胞C.細(xì)胞克隆的最基本要求是必需來源于單個(gè)細(xì)胞D.未經(jīng)克隆化培育的細(xì)胞系細(xì)胞往往遺傳性狀不均一(3)圖中重組囊胚通過技術(shù)移入白鼠子宮內(nèi)接著發(fā)育??寺∈蟮倪z傳物質(zhì)來自圖中鼠。為了提高勝利率,代孕母鼠需進(jìn)行激素處理,使其。5.(衢州、麗水、湖州、舟山四地市聯(lián)考32T)(二)世界首個(gè)細(xì)胞核移植“三父母”嬰兒已于2019年4月誕生,引起全球廣泛關(guān)注。醫(yī)生首先從母親的卵細(xì)胞取出細(xì)胞核,并將其注入已去掉細(xì)胞核的捐贈(zèng)者的卵細(xì)胞內(nèi),重組細(xì)胞就擁有了母親的核DNA以及捐贈(zèng)者的線粒體DNA,最終再利用精子進(jìn)行體外受精。請(qǐng)回答:醫(yī)生用這一方法同時(shí)培育了5個(gè)胚胎,因此母親的卵巢事先需經(jīng)處理以獲得更多的卵細(xì)胞;體外受精前,精子需經(jīng)培育達(dá)到狀態(tài)。下列關(guān)于體外受精及胚胎工程的敘述,錯(cuò)誤的是A.精子和卵細(xì)胞表面有特異性相互識(shí)別的蛋白B.2-8細(xì)胞期的卵裂球每一個(gè)細(xì)胞都具有全能性C.中胚層是由外胚層的細(xì)胞增殖分裂形成的D.體外受精運(yùn)用的培育液和早期胚胎培育液成分相同(3)受精卵需經(jīng)早期發(fā)育培育,才能完成植入或著床,通常移植的最相宜時(shí)是。胚胎發(fā)育到肯定階段,會(huì)形成滋養(yǎng)層細(xì)胞,這部分細(xì)胞將發(fā)育成。(4)在英國(guó)獲得批準(zhǔn)的“三父母”技術(shù)則不同,是捐獻(xiàn)者的卵細(xì)胞與父親的精子經(jīng)體外受精形成的受精卵去核后,注入父、母親所形成受精卵的核,以剔除母親線粒體中有缺陷的基因信息。該過程涉及的生物技術(shù)有體外受精、、和胚胎移植。6.(溫州市二模17年2月32T)啤酒酵母是啤酒工業(yè)發(fā)酵菌種,對(duì)啤酒的品質(zhì)、風(fēng)味有很大影響。請(qǐng)回答:(1)科研人員將表達(dá)乙肝病毒表面抗原的基因構(gòu)建在重組質(zhì)粒中,進(jìn)而轉(zhuǎn)入,發(fā)酵生產(chǎn)轉(zhuǎn)基因酵母乙肝疫苗。在構(gòu)建重組質(zhì)粒過程中,通過同種限制性核酸內(nèi)切酶(-G↓AATTC-)切割得到的一個(gè)目的基因和一個(gè)開環(huán)質(zhì)粒,共有(A.1個(gè)B.2個(gè)C.3個(gè)D.4個(gè))粘性末端。將重組質(zhì)粒導(dǎo)入受體細(xì)胞的操作步驟完成以后,須要對(duì)全部受體細(xì)胞進(jìn)行篩選,這是因?yàn)?。該轉(zhuǎn)基因技術(shù)實(shí)踐應(yīng)用的勝利標(biāo)記是。(2)轉(zhuǎn)基因技術(shù)結(jié)合胚胎工程在高等動(dòng)物育種中也有成熟應(yīng)用。人們將經(jīng)過基因改造的胚胎干細(xì)胞核與融合,得到,并促使其在體外分裂發(fā)育成,再通過胚胎移植獲得后代。
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