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磺酸基(SP)陽離子交換介質(zhì)的制備及其對(duì)重組人乳鐵蛋白的純化的開題報(bào)告1.研究背景隨著生物技術(shù)的不斷發(fā)展,越來越多的重組蛋白得到了廣泛應(yīng)用,如何高效、低成本地純化這些蛋白成為了研究人員關(guān)注的一個(gè)重要問題。其中,陽離子交換介質(zhì)就是常見的純化手段之一。早期的陽離子交換介質(zhì)都是基于天然高分子材料的制備,如離子淀粉、離子瓊脂糖等,但由于它們的表面積小、孔徑分布窄,限制了其在分離大分子生物分子中的應(yīng)用。近年來,基于合成高分子材料的SP陽離子交換介質(zhì)由于其比表面積大、孔徑分布寬,已廣泛應(yīng)用于生物分子的純化中。2.研究?jī)?nèi)容本研究將制備一種新型的磺酸基(SP)陽離子交換介質(zhì),并研究其在重組人乳鐵蛋白的純化中的應(yīng)用。具體內(nèi)容如下:(1)合成具有大孔徑和高比表面積的SP陽離子交換介質(zhì);(2)研究不同參數(shù)對(duì)SP陽離子交換介質(zhì)吸附重組人乳鐵蛋白的影響,如pH、離子強(qiáng)度、流速等;(3)對(duì)比SP陽離子交換介質(zhì)和傳統(tǒng)的離子交換介質(zhì)在重組人乳鐵蛋白純化中的效果;(4)對(duì)純化后的重組人乳鐵蛋白進(jìn)行性質(zhì)研究。3.研究意義本研究的結(jié)果有望為重組蛋白的高效、低成本純化提供一種新的選擇,并探究了SP陽離子交換介質(zhì)在生物分子純化中的應(yīng)用。在生物技術(shù)的發(fā)展中具有一定的理論和應(yīng)用價(jià)值。4.研究方法(1)合成SP陽離子交換介質(zhì):采用烷基化劑法,在合成高分子材料的過程中引入磺酸基,制備大孔徑、高比表面積的SP陽離子交換介質(zhì)。(2)重組乳鐵蛋白的表達(dá)和純化:在大腸桿菌中進(jìn)行重組乳鐵蛋白的表達(dá),采用SP陽離子交換介質(zhì)進(jìn)行純化。(3)性質(zhì)鑒定:采用SDS、Westernblot、圓二色光譜等方法對(duì)純化后的重組乳鐵蛋白進(jìn)行性質(zhì)分析。5.預(yù)期結(jié)果(1)成功合成大孔徑、高比表面積的SP陽離子交換介質(zhì);(2)在不同的條件下研究SP陽離子交換介質(zhì)對(duì)重組人乳鐵蛋白的吸附效果,并找到最佳純化條件;(3)與傳統(tǒng)離子交換介質(zhì)比較,證明SP陽離子交換介質(zhì)在重組人乳鐵蛋白的純化中具有更高的效率和純度;(4)對(duì)純化后的重組人乳鐵蛋白進(jìn)行性質(zhì)研究,得出其分子量和分子構(gòu)象等數(shù)據(jù)。6.研究進(jìn)度安排第一年:(1)學(xué)習(xí)合成SP陽離子交換介質(zhì)的原理和方法;(2)進(jìn)行SP陽離子交換介質(zhì)的合成實(shí)驗(yàn);(3)根據(jù)SP陽離子交換介質(zhì)的性質(zhì)研究重組人乳鐵蛋白的吸附實(shí)驗(yàn)。第二年:(1)對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)分析,確定最佳純化條件;(2)與傳統(tǒng)離子交換介質(zhì)進(jìn)行對(duì)比實(shí)驗(yàn),驗(yàn)證SP陽離子交換介質(zhì)的優(yōu)點(diǎn);(3)對(duì)純化后的重組
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