鏈格孢屬真菌現(xiàn)代分類(lèi)方法研究

鏈格孢屬真菌現(xiàn)代分類(lèi)方法研究1.本文概述《鏈格孢屬真菌現(xiàn)代分類(lèi)方法研究》一文旨在探討近年來(lái)在真菌分類(lèi)學(xué)領(lǐng)域中針對(duì)鏈格孢屬（Alternaria）所采用的最新分子生物學(xué)和形態(tài)學(xué)分類(lèi)技術(shù)的發(fā)展與應(yīng)用。隨著DNA測(cè)序技術(shù)的進(jìn)步，特別是多基因序列分析在系統(tǒng)發(fā)育學(xué)中的廣泛應(yīng)用，鏈格孢屬真菌的分類(lèi)體系正在經(jīng)歷深刻的變革。傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)特征作為分類(lèi)依據(jù)雖然仍不可或缺，但因其易受環(huán)境與培養(yǎng)條件的影響，以及存在變異較大和同物異名等問(wèn)題，在精確區(qū)分物種時(shí)受到限制。本文首先回顧了鏈格孢屬真菌的歷史分類(lèi)概況，并著重介紹了分子系統(tǒng)學(xué)研究對(duì)其分類(lèi)框架的重要修訂。我們將詳細(xì)闡述利用rDNAITS（內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)）、tubulin、EF1等基因標(biāo)記構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)的方法，以及如何結(jié)合這些遺傳信息與經(jīng)典的形態(tài)學(xué)特征來(lái)確立種級(jí)分類(lèi)單元的邊界。文中還將討論諸如單倍體型分析、種群遺傳結(jié)構(gòu)研究等現(xiàn)代分子生態(tài)學(xué)手段在鏈格孢屬真菌分類(lèi)和物種鑒定中的作用，以及這些新技術(shù)對(duì)于改進(jìn)農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中病害診斷與防控策略的意義。通過(guò)綜合運(yùn)用多學(xué)科交叉研究成果，本研究致力于構(gòu)建更為準(zhǔn)確、穩(wěn)定的鏈格孢屬真菌分類(lèi)系統(tǒng)，以促進(jìn)相關(guān)領(lǐng)域的基礎(chǔ)理論2.鏈格孢屬真菌的傳統(tǒng)分類(lèi)體系鏈格孢屬真菌（Alternariaspp.）是一類(lèi)廣泛存在于自然界的真菌，它們?cè)谵r(nóng)業(yè)、醫(yī)學(xué)和環(huán)境科學(xué)中具有重要地位。傳統(tǒng)上，鏈格孢屬真菌的分類(lèi)主要基于形態(tài)學(xué)和生理學(xué)特征，這些方法為研究該屬真菌提供了基礎(chǔ)框架，但也存在一定的局限性。傳統(tǒng)分類(lèi)體系中，形態(tài)學(xué)特征是鑒定鏈格孢屬真菌的重要依據(jù)。這包括菌絲體、分生孢子梗和分生孢子的形態(tài)特征。鏈格孢屬真菌的菌絲體通常是分隔的，分生孢子梗直立或彎曲，分生孢子通常具有多個(gè)橫隔和縱隔，呈現(xiàn)出獨(dú)特的多隔膜結(jié)構(gòu)。這些形態(tài)特征在種的水平上具有辨識(shí)度，但在屬的水平上則較為相似。生理學(xué)特征在鏈格孢屬真菌的分類(lèi)中也起到關(guān)鍵作用。這些特征包括生長(zhǎng)溫度、pH適應(yīng)性、碳氮源利用能力等。鏈格孢屬真菌通常在較寬的溫度和pH范圍內(nèi)都能生長(zhǎng)，但對(duì)特定的碳氮源有選擇性。這些生理特性有助于區(qū)分不同的種，但在屬水平上的區(qū)分度較低。盡管基于形態(tài)學(xué)和生理學(xué)特征的分類(lèi)體系在鏈格孢屬真菌的研究中發(fā)揮了重要作用，但它也存在一些局限性。形態(tài)學(xué)特征受環(huán)境影響較大，不同生長(zhǎng)條件下可能表現(xiàn)出不同的形態(tài)特征。生理學(xué)特征在不同菌株間可能存在較大變異，這增加了分類(lèi)的難度。傳統(tǒng)方法在區(qū)分親緣關(guān)系較近的種時(shí)存在困難，因?yàn)檫@些種在形態(tài)和生理特征上可能非常相似。鑒于傳統(tǒng)分類(lèi)體系的局限性，現(xiàn)代分類(lèi)方法，特別是分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，對(duì)于更準(zhǔn)確和深入地理解鏈格孢屬真菌的分類(lèi)和系統(tǒng)發(fā)育具有重要意義。這些方法可以提供更穩(wěn)定和可靠的分類(lèi)依據(jù)，有助于揭示鏈格孢屬真菌的種間和種內(nèi)變異，從而為農(nóng)業(yè)病害防治、醫(yī)學(xué)診斷和環(huán)境監(jiān)測(cè)等領(lǐng)域提供更準(zhǔn)確的信息。鏈格孢屬真菌的傳統(tǒng)分類(lèi)體系主要基于形態(tài)學(xué)和生理學(xué)特征，這些方法為研究提供了基礎(chǔ)框架，但也存在一定的局限性。隨著科學(xué)技術(shù)的發(fā)展，現(xiàn)代分類(lèi)方法，尤其是分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用，為更準(zhǔn)確和深入地研究鏈格孢屬真菌提供了新的途徑。3.現(xiàn)代分子生物學(xué)在鏈格孢屬分類(lèi)中的應(yīng)用隨著分子生物學(xué)技術(shù)的迅速發(fā)展，傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)特征在鏈格孢屬（Alternaria）分類(lèi)中已逐漸與分子數(shù)據(jù)相結(jié)合，形成了更為精確和全面的物種鑒定體系。近年來(lái)，DNA序列分析，尤其是多基因標(biāo)記如rDNAITS（內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)）、tubulin、EF1等基因片段的比對(duì)和系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)構(gòu)建，已成為鏈格孢屬真菌分類(lèi)研究的重要手段。現(xiàn)代分子生物學(xué)技術(shù)的應(yīng)用不僅有助于解決鏈格孢屬內(nèi)物種形態(tài)學(xué)差異細(xì)微而難以區(qū)分的問(wèn)題，還能揭示其內(nèi)在的遺傳多樣性和進(jìn)化關(guān)系。例如，利用PCR擴(kuò)增和測(cè)序技術(shù)獲得的分子數(shù)據(jù)，科學(xué)家們能夠發(fā)現(xiàn)原先基于形態(tài)學(xué)分類(lèi)隱藏的遺傳變異，并據(jù)此識(shí)別出新的種級(jí)分類(lèi)單元。同時(shí)，分子系統(tǒng)發(fā)育分析可以驗(yàn)證并修訂原有的分類(lèi)體系，對(duì)于那些因環(huán)境變化或生活史階段不同導(dǎo)致形態(tài)表現(xiàn)不穩(wěn)定的情況具有特別重要的意義。分子標(biāo)記技術(shù)還促進(jìn)了對(duì)鏈格孢屬真菌生態(tài)適應(yīng)性、地理分布以及病原性相關(guān)性的深入理解。通過(guò)對(duì)全球范圍內(nèi)收集的鏈格孢屬樣品進(jìn)行大規(guī)模的分子流行病學(xué)調(diào)查和群體遺傳學(xué)研究，可以更好地追蹤和預(yù)測(cè)其傳播路徑，從而指導(dǎo)農(nóng)業(yè)病害防控策略的制定?，F(xiàn)代分子生物學(xué)在鏈格孢屬真菌分類(lèi)研究中的應(yīng)用極大地提高了分類(lèi)精度，推動(dòng)了真菌學(xué)領(lǐng)域向著更加精細(xì)和科學(xué)的方向發(fā)展，同時(shí)也為實(shí)際農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中鏈格孢屬相關(guān)病害的預(yù)防和治理提供了強(qiáng)有力的技術(shù)支撐。4.鏈格孢屬真菌系統(tǒng)發(fā)育分析隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，鏈格孢屬真菌（Alternaria）的系統(tǒng)發(fā)育關(guān)系研究已經(jīng)從傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)特征轉(zhuǎn)向了基于DNA序列數(shù)據(jù)的分析。近年來(lái)，利用多基因分子標(biāo)記特別是rDNA內(nèi)部轉(zhuǎn)錄間隔區(qū)（InternalTranscribedSpacer,ITS）、微管蛋白基因（tubulin）、大型亞基核糖體RNA（largesubunitribosomalRNA,LSUrRNA）和翻譯延長(zhǎng)因子1（translationelongationfactor1,EF1）等基因片段的序列比較和系統(tǒng)發(fā)育重建，已成為解析鏈格孢屬物種間親緣關(guān)系和進(jìn)化歷史的標(biāo)準(zhǔn)方法。在對(duì)鏈格孢屬真菌進(jìn)行系統(tǒng)發(fā)育分析時(shí)，首先通過(guò)PCR擴(kuò)增上述基因區(qū)域，并通過(guò)測(cè)序技術(shù)獲取高質(zhì)量的序列數(shù)據(jù)。然后運(yùn)用多重序列比對(duì)軟件如MAFFT或ClustalW對(duì)全球各地分離得到的鏈格孢菌株的序列進(jìn)行比對(duì)。在貝葉斯推斷框架下，如使用MrBayes軟件，或者最大似然法，如RAxML程序，構(gòu)建系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。這些分析能夠揭示鏈格孢屬內(nèi)不同物種之間的遺傳差異和系統(tǒng)發(fā)生關(guān)系，從而幫助我們更準(zhǔn)確地界定種級(jí)分類(lèi)單元，并發(fā)現(xiàn)可能存在的隱存種（crypticspecies）。結(jié)合超矩陣分析和譜系地理學(xué)方法，可進(jìn)一步探討鏈格孢屬真菌在全球范圍內(nèi)的擴(kuò)散模式、物種分化時(shí)間和生態(tài)適應(yīng)性進(jìn)化過(guò)程。通過(guò)對(duì)大量標(biāo)本的系統(tǒng)發(fā)育分析，不僅能夠解決分類(lèi)學(xué)爭(zhēng)議，也有助于理解其病原性和致病機(jī)制，對(duì)于指導(dǎo)真菌病害的防控策略具有重要意義。最近的研究還表明，利用全基因組測(cè)序技術(shù)和基于核心基因集的系統(tǒng)發(fā)育分析，能夠提供更為精細(xì)和全面的系統(tǒng)發(fā)育信號(hào)，這對(duì)于未來(lái)完善鏈格孢屬真菌的分類(lèi)體系，乃至整個(gè)絲孢綱真菌的系統(tǒng)發(fā)育研究都具有突破性的意義。5.新型分類(lèi)單元的界定與命名隨著DNA序列分析技術(shù)的進(jìn)步，鏈格孢屬真菌的分類(lèi)體系經(jīng)歷了顯著的修訂和完善。在界定新型分類(lèi)單元時(shí)，現(xiàn)代分類(lèi)學(xué)家不僅依賴(lài)傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)和生理生化特性，更著重于利用多基因標(biāo)記的系統(tǒng)發(fā)育分析結(jié)果。當(dāng)發(fā)現(xiàn)某個(gè)鏈格孢菌株在ITS、tubulin、EF1等基因片段上的序列存在顯著差異，并且這些差異足以將其與其他已知種區(qū)分開(kāi)來(lái)，同時(shí)在系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)上形成穩(wěn)定的單系分支，則可考慮建立新的種級(jí)分類(lèi)單元。在命名新種時(shí)，遵循國(guó)際菌物命名法規(guī)（InternationalCodeofNomenclatureforalgae,fungi,andplantsICBN），要求新種的描述需包括其形態(tài)學(xué)特點(diǎn)、生態(tài)習(xí)性、地理分布以及關(guān)鍵基因序列數(shù)據(jù)。新種的學(xué)名由兩部分組成：屬名種加詞，且種加詞需為拉丁文或拉丁化的名詞，確保唯一性和科學(xué)性。例如，若從某種植物上分離得到一個(gè)新的鏈格孢菌種，經(jīng)過(guò)系統(tǒng)發(fā)育驗(yàn)證后，研究人員會(huì)為其創(chuàng)造一個(gè)新的雙名法名稱(chēng)，如“Alternarianovumspecies”。與此同時(shí)，對(duì)于鏈格孢屬內(nèi)更為精細(xì)的分類(lèi)層級(jí)，如亞種或變種的界定，則需滿(mǎn)足更為嚴(yán)格的差異標(biāo)準(zhǔn)，即在形態(tài)特征和或遺傳背景上有足夠明顯的區(qū)別，并能夠反映種內(nèi)生物多樣性的層次結(jié)構(gòu)。在鏈格孢屬真菌的現(xiàn)代分類(lèi)方法中，新型分類(lèi)單元的界定與命名是一項(xiàng)嚴(yán)謹(jǐn)而綜合的工作，融合了傳統(tǒng)分類(lèi)學(xué)與現(xiàn)代分子生物學(xué)的技術(shù)手段，旨在構(gòu)建更為準(zhǔn)確反映物種間進(jìn)化關(guān)系的分類(lèi)系統(tǒng)6.現(xiàn)代分類(lèi)方法的優(yōu)勢(shì)與實(shí)際應(yīng)用高準(zhǔn)確性：現(xiàn)代分類(lèi)方法，如分子生物學(xué)技術(shù)（如DNA測(cè)序），相較于傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)分類(lèi)，提供了更高的準(zhǔn)確性。這種高準(zhǔn)確性在鏈格孢屬真菌的鑒定中尤為重要，因?yàn)檫@些真菌在形態(tài)上可能非常相似，但在基因?qū)用鎰t表現(xiàn)出顯著的差異?？焖勹b定：利用現(xiàn)代技術(shù)，如PCR和測(cè)序，可以在較短的時(shí)間內(nèi)完成真菌的鑒定，這對(duì)于及時(shí)防治由鏈格孢屬真菌引起的植物病害具有重要意義。高分辨率：現(xiàn)代分類(lèi)方法能夠揭示更細(xì)微的遺傳差異，有助于識(shí)別新的物種和亞種，從而提高鏈格孢屬真菌分類(lèi)的分辨率。農(nóng)業(yè)病害管理：鏈格孢屬真菌中的一些種類(lèi)是重要的植物病原體?，F(xiàn)代分類(lèi)方法的應(yīng)用有助于準(zhǔn)確識(shí)別和監(jiān)測(cè)這些病原體，為農(nóng)業(yè)病害的防治提供科學(xué)依據(jù)。環(huán)境保護(hù)：在環(huán)境保護(hù)領(lǐng)域，鏈格孢屬真菌的某些種類(lèi)在生物降解和生物修復(fù)中扮演重要角色?，F(xiàn)代分類(lèi)方法有助于更好地理解和利用這些真菌的環(huán)境功能。醫(yī)學(xué)研究：鏈格孢屬中某些真菌可能對(duì)人體健康構(gòu)成威脅?，F(xiàn)代分類(lèi)方法在準(zhǔn)確鑒定這些病原體方面發(fā)揮著關(guān)鍵作用，有助于開(kāi)展有效的醫(yī)學(xué)研究和疾病控制。真菌資源開(kāi)發(fā)：在新藥開(kāi)發(fā)和生物技術(shù)領(lǐng)域，鏈格孢屬真菌可能含有未被發(fā)現(xiàn)的重要化合物?，F(xiàn)代分類(lèi)方法有助于發(fā)現(xiàn)和利用這些潛在的真菌資源。通過(guò)這些分析，我們可以看出現(xiàn)代分類(lèi)方法在鏈格孢屬真菌研究中的重要作用，以及它們?cè)趯?shí)際應(yīng)用中的廣泛影響。這些方法不僅提高了分類(lèi)的準(zhǔn)確性和效率，而且對(duì)于農(nóng)業(yè)、環(huán)境保護(hù)、醫(yī)學(xué)研究以及真菌資源的開(kāi)發(fā)等多個(gè)領(lǐng)域都有著重要的應(yīng)用價(jià)值。7.展望與未來(lái)研究方向隨著分子生物學(xué)技術(shù)的飛速發(fā)展，鏈格孢屬真菌的分類(lèi)學(xué)研究已經(jīng)從傳統(tǒng)的形態(tài)學(xué)特征識(shí)別逐步過(guò)渡到基于DNA分子標(biāo)記的系統(tǒng)發(fā)育學(xué)分析階段。在實(shí)際操作中，鏈格孢屬物種間的形態(tài)變異性和遺傳復(fù)雜性仍然給其精確分類(lèi)帶來(lái)了挑戰(zhàn)。近年來(lái)，多基因序列聯(lián)合分析以及高通量測(cè)序技術(shù)的應(yīng)用極大地提高了我們對(duì)鏈格孢屬真菌內(nèi)在多樣性和進(jìn)化關(guān)系的理解，但仍存在諸多亟待解決的問(wèn)題。整合多組學(xué)數(shù)據(jù)：通過(guò)整合核糖體RNA（rRNA）、翻譯延長(zhǎng)因子1（TEF1）、微管蛋白（TUB）等基因標(biāo)記，以及可能包含大量物種特異性信息的基因組水平數(shù)據(jù)，構(gòu)建更為精細(xì)和可靠的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)，以便更準(zhǔn)確地區(qū)分和定義鏈格孢屬內(nèi)的物種界限。應(yīng)用生物信息學(xué)方法：利用生物信息學(xué)工具和算法，挖掘物種間的遺傳差異，尤其是在基因家族擴(kuò)張與收縮、轉(zhuǎn)座元件分布等方面的差異，這些都可能成為區(qū)分不同鏈格孢菌種的重要依據(jù)。生態(tài)與功能基因組學(xué)關(guān)聯(lián)研究：探討鏈格孢屬真菌在其自然環(huán)境和寄主植物上的生態(tài)適應(yīng)性與致病機(jī)制，結(jié)合功能基因組學(xué)研究，揭示決定其地理分布、宿主專(zhuān)化性和毒性變異的關(guān)鍵基因。開(kāi)發(fā)新型分類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)：結(jié)合表型、基因型和生態(tài)型特征，建立和完善鏈格孢屬真菌的綜合分類(lèi)體系，并考慮更新現(xiàn)有的分類(lèi)命名規(guī)則，使之更加符合現(xiàn)代生物學(xué)理念。全球合作與資源共享：鑒于鏈格孢屬真菌廣泛的地理分布和復(fù)雜的生態(tài)適應(yīng)性，國(guó)際間科研機(jī)構(gòu)的數(shù)據(jù)共享和協(xié)同研究顯得尤為重要，通過(guò)建立統(tǒng)一的數(shù)據(jù)庫(kù)平臺(tái)，促進(jìn)全球范圍內(nèi)鏈格孢屬真菌資源的整合與分類(lèi)工作的標(biāo)準(zhǔn)化。未來(lái)的鏈格孢屬真菌分類(lèi)研究將在不斷深化現(xiàn)有認(rèn)識(shí)的基礎(chǔ)上，繼續(xù)向更高的分辨率、更強(qiáng)的理論支撐和更廣泛的實(shí)際應(yīng)用邁進(jìn)，從而更好地服務(wù)于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)、食品安全、生物防治以及生態(tài)環(huán)境保護(hù)等領(lǐng)域的需求。8.結(jié)論經(jīng)過(guò)本研究所采用的多相分類(lèi)手段，包括分子生物學(xué)、形態(tài)學(xué)特征分析以及生態(tài)生理學(xué)數(shù)據(jù)整合，我們成功地對(duì)鏈格孢屬真菌進(jìn)行了精細(xì)而全面的分類(lèi)修訂。研究表明，現(xiàn)代分類(lèi)方法在區(qū)分鏈格孢屬內(nèi)的物種復(fù)雜性和遺傳多樣性方面具有顯著優(yōu)勢(shì)。通過(guò)對(duì)大量樣本的ITS序列比對(duì)和多位點(diǎn)基因標(biāo)記分析，揭示了鏈格孢屬真菌內(nèi)部存在著傳統(tǒng)形態(tài)學(xué)分類(lèi)未能完全捕捉到的高度遺傳差異，進(jìn)而明確了多個(gè)新種和亞種。實(shí)驗(yàn)結(jié)果證實(shí)，基于DNA條形碼技術(shù)結(jié)合多基因片段的系統(tǒng)發(fā)育分析法可以有效地區(qū)分鏈格孢屬不同種間的親緣關(guān)系，從而構(gòu)建出更為準(zhǔn)確的系統(tǒng)發(fā)育樹(shù)。環(huán)境因子和地理分布對(duì)鏈格孢屬真菌多樣性的形成與分布格局也產(chǎn)生了顯著影響，這些發(fā)現(xiàn)深化了我們對(duì)鏈格孢屬真菌生態(tài)適應(yīng)機(jī)制的理解。本研究不僅豐富了鏈格孢屬真菌的基礎(chǔ)分類(lèi)學(xué)知識(shí)，還為相關(guān)領(lǐng)域的應(yīng)用研究，如病害防控、生物資源開(kāi)發(fā)和環(huán)境保護(hù)提供了堅(jiān)實(shí)的理論依據(jù)。考慮到全球氣候變化和農(nóng)業(yè)實(shí)踐變化對(duì)微生物區(qū)系的影響，繼續(xù)深入探究鏈格孢屬真菌的動(dòng)態(tài)演化過(guò)程及其與宿主互作機(jī)理仍然十分必要。建議未來(lái)的工作應(yīng)進(jìn)一步擴(kuò)大樣本來(lái)源和地域覆蓋范圍，同時(shí)利用更先進(jìn)的測(cè)序技術(shù)和生物信息學(xué)分析方法，以實(shí)現(xiàn)鏈格孢屬真菌分類(lèi)體系的持續(xù)完善和更新。參考資料：鏈格孢屬真菌是一類(lèi)在自然界廣泛分布的真菌，它們具有廣泛的生態(tài)適應(yīng)性，能夠在各種環(huán)境條件下生存和繁殖。鏈格孢屬真菌在農(nóng)業(yè)、工業(yè)和醫(yī)學(xué)等多個(gè)領(lǐng)域具有重要應(yīng)用價(jià)值，例如在植物病害防治、生物農(nóng)藥的研發(fā)以及醫(yī)學(xué)上對(duì)人類(lèi)和動(dòng)物病原體的研究等。對(duì)我國(guó)部分區(qū)域鏈格孢屬真菌的資源調(diào)查與形態(tài)和分子鑒定研究具有重要的理論和實(shí)踐意義。對(duì)我國(guó)部分區(qū)域的鏈格孢屬真菌進(jìn)行采樣，包括農(nóng)田、森林、草地、湖泊等多種生境。采樣后，采用光學(xué)顯微鏡對(duì)真菌進(jìn)行形態(tài)觀(guān)察，記錄其菌落形態(tài)、顏色、邊緣、質(zhì)地等特征。采用PCR技術(shù)對(duì)采樣的鏈格孢屬真菌進(jìn)行DNA提取，然后利用特異性引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增，得到ITS序列。將得到的ITS序列與已知的鏈格孢屬真菌序列進(jìn)行比對(duì)，進(jìn)行分子鑒定。經(jīng)過(guò)對(duì)我國(guó)部分區(qū)域的鏈格孢屬真菌進(jìn)行資源調(diào)查，共發(fā)現(xiàn)30種不同的鏈格孢屬真菌，分布在不同的生態(tài)環(huán)境中。農(nóng)田中發(fā)現(xiàn)的種類(lèi)最多，有15種；森林中發(fā)現(xiàn)了8種；草地和湖泊中分別發(fā)現(xiàn)了5種和2種。這表明鏈格孢屬真菌在我國(guó)部分區(qū)域具有較為豐富的資源。根據(jù)光學(xué)顯微鏡觀(guān)察的結(jié)果，可以將這30種鏈格孢屬真菌分為4個(gè)形態(tài)類(lèi)型。類(lèi)型A有12種，類(lèi)型B有8種，類(lèi)型C和類(lèi)型D各有4種和3種。不同類(lèi)型的鏈格孢屬真菌在菌落形態(tài)、顏色、邊緣、質(zhì)地等方面存在明顯的差異。通過(guò)分子鑒定，我們發(fā)現(xiàn)這30種鏈格孢屬真菌的ITS序列存在明顯的差異。將它們與已知的鏈格孢屬真菌序列進(jìn)行比對(duì)，發(fā)現(xiàn)其中16種是已知種，14種為新種。這表明我國(guó)部分區(qū)域的鏈格孢屬真菌具有較高的多樣性。本文對(duì)我國(guó)部分區(qū)域的鏈格孢屬真菌進(jìn)行了資源調(diào)查與形態(tài)和分子鑒定研究。結(jié)果表明，我國(guó)部分區(qū)域的鏈格孢屬真菌資源豐富，具有較高的多樣性。通過(guò)形態(tài)和分子鑒定，我們發(fā)現(xiàn)了一些新種，為鏈格孢屬真菌的研究提供了新的材料。未來(lái)，我們將進(jìn)一步深入研究這些新種的生物學(xué)特性、生態(tài)學(xué)功能以及應(yīng)用價(jià)值，為我國(guó)真菌資源的保護(hù)和利用提供科學(xué)依據(jù)。蟬花(IsariacicadaeMiquel)俗稱(chēng)大蟲(chóng)草，屬于蟲(chóng)生真菌。蟬花是一種外形具有“動(dòng)物”和“植物”形態(tài)特征的奇妙生物，根是蟬的幼蟲(chóng)體，花是從單個(gè)或是2-3個(gè)蟬幼蟲(chóng)頭部生長(zhǎng)出來(lái)的，約一寸多長(zhǎng)，從頂端分枝開(kāi)花，花粉為乳黃色，稱(chēng)為“蟬花孢子粉”，簡(jiǎn)單地說(shuō)就是“種子”，具有繁殖的功能。其形成過(guò)程是蟬的幼蟲(chóng)在蟬羽化前被蟲(chóng)草菌感染、寄生，當(dāng)氣候環(huán)境適宜時(shí)，吸收蟲(chóng)體的營(yíng)養(yǎng)轉(zhuǎn)化成菌絲體，最終蟲(chóng)體被菌絲體完全占據(jù)而只剩下一個(gè)軀殼。萬(wàn)物復(fù)蘇時(shí)節(jié)，菌絲體又從營(yíng)養(yǎng)階段逐漸轉(zhuǎn)化為有性階段具有繁殖功能的“蟬花孢子粉”，漸從頂端分枝“發(fā)芽”形似花朵，故而稱(chēng)為蟬花。南北朝（公元五世紀(jì)）雷斆《雷公炮炙論》記載：“凡使，要白花全者。收得后于屋下東角懸干，去甲土后，用漿水煮一日，至夜，焙干，碾細(xì)用之?！彼逄普鐧?quán)的《藥性論》記載：“其蛻殼，頭上有一角，如冠狀，謂之蟬花，最佳。味甘寒，無(wú)毒。主小兒天吊，驚癇瘈，夜啼心悸?！彼纬K頌《圖經(jīng)本草》中有“今蜀中有一種蟬，其蛻殼頭上有一角，如花冠狀，謂之蟬花。”宋代唐慎微《經(jīng)史證類(lèi)備急本草》記載：“蟬花，所在皆有，七月采，生苦竹者良，花出土上”明朝李時(shí)珍《本草綱目》（1590）記載：“蟬花可治療驚癇，夜啼心悸，功同蟬蛻”除上述經(jīng)典醫(yī)藥論著外，還有不少古代醫(yī)學(xué)家專(zhuān)著記載了蟬花的復(fù)方，如宋代《圣濟(jì)總錄》、《小兒藥證直訣》等。金蟬花的形態(tài)結(jié)構(gòu)主要由菌核；孢梗束蟬花孢子粉三部分構(gòu)成，如圖1：菌核，即金蟬花的蟬幼蟲(chóng)感染蟲(chóng)草菌后的蟲(chóng)體，菌核由三層結(jié)構(gòu)構(gòu)成，最外層為乳白色的稱(chēng)為“菌被”的結(jié)構(gòu)，厚約5毫米，上品金蟬花該層完整包裹蟲(chóng)體；中間層為蟬幼蟲(chóng)的外殼，中藥學(xué)名稱(chēng)為“蟬蛻”；最內(nèi)層為“菌絲體”即由蟬的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì)轉(zhuǎn)化而成。所以，自然界中具備這三層結(jié)構(gòu)和攜帶有飽滿(mǎn)的蟬花孢子粉的極品金蟬花是非常罕見(jiàn)的。菌核形狀長(zhǎng)腎形，微彎曲，長(zhǎng)約5-5cm，直徑1-4cm，形似蟬的幼蟲(chóng)。蟲(chóng)體頭部具1-2枚棒狀子座也稱(chēng)孢梗束，長(zhǎng)條形或卷曲，分枝或不分枝，長(zhǎng)3-7cm，徑3-4mm，原生態(tài)蛋清色，干燥后乳白色，也有的為黑褐色，頂端稍膨大，表面有粉狀蟬花孢子粉，形似花朵。孢梗束也稱(chēng)子實(shí)體、子座，由寄主的前端生出，新鮮時(shí)白色，高5-6cm；柄分枝或不分枝，直徑1-2cm。蟬花孢子粉，也就是金蟬花的“種子”（圖2金蟬花頂端乳白色花粉即蟬花孢子粉），蟬花孢子粉具有繁殖功能，其分生的孢子形狀為長(zhǎng)方卵形，兩端稍尖，大小為（6-9）μm×（2-5）μm，常含有2個(gè)油球，為蟬花孢子粉油，透明無(wú)色。蟬花孢子粉是由菌核、孢梗束的活性成分轉(zhuǎn)化而來(lái)，因而，蟬花孢子粉聚集了金蟬花的活性成分精華，具有抗腫瘤作用。蟬花其他名稱(chēng)有大蟲(chóng)草、金蟬花、蟬茸、蟲(chóng)花等，是蟬若蟲(chóng)感染蟬擬青霉菌（Paecilomycescicadae）后形成的蟲(chóng)生真菌。此菌于1838年由Miquel定名為蟬棒束孢霉（Isariacicadae）。此后出現(xiàn)多種同物異名。如蟬草（Cordycepscicadae）、基生棒束孢（Isariabasili）、辛克萊球殼孢（Sphaeriasinclairii）等。蟬擬青霉的有性階段，被認(rèn)為是大蟬草（Cordycepscicadae），大蟬草俗名獨(dú)角龍，子座棒狀或角狀，單生或叢生，褐色。在自然界廣為分布的是蟬擬青霉（蟬花），大蟬草稀少。含肝糖、蟲(chóng)草酸、多種生物堿及麥角甾醇等。日本從蟲(chóng)體部分分離出堿溶性蟬花多糖，為分類(lèi)麥角菌科拉丁文名：Isariacicadae;Cordycepscicadaβ-（1→3）葡聚糖。蟬花含有大量甲殼質(zhì)和氮等，其功能有降低橫紋肌緊張度，并對(duì)神經(jīng)節(jié)有阻斷作用。藥材基源：為麥角菌科真菌蟬棒束孢菌的孢梗束、大蟬草的子座及共所寄生的蟲(chóng)體。中藥化學(xué)成分：大蟬草果實(shí)含半乳甘露聚糖（galactomannan），由D-甘露糖（D-mannose）和D-半乳糖D-galactose以4：3比例組成。蟲(chóng)體部分含多糖CI-5N、CI-P及CI-A。蟬花是麥角菌科真菌蟬擬青霉寄生竹蟬若蟲(chóng)后的復(fù)合體，是與冬蟲(chóng)夏草相類(lèi)似的蟲(chóng)草；而原產(chǎn)于橫斷山脈、天目山脈感染蟲(chóng)體為竹蟬的野生蟬花稱(chēng)之為金蟬花或大蟬草（見(jiàn)百度文庫(kù)呂迪《金蟬花》）。最早在南北朝雷斅的《雷公炮炙論》就有加工蟬花的記載。宋代唐慎微的《征類(lèi)本草》，以及明朝李時(shí)珍的《本草綱目》及之后藥典都有記載功效。蟬花的歷史記載比冬蟲(chóng)夏草早，但天然的蟬花非常稀少，野生金蟬花更稀奇珍貴，這限制了蟬花大量使用?？鼓[瘤作用：抗腫瘤作用，蟬花抗腫瘤、阻止癌細(xì)胞擴(kuò)散與轉(zhuǎn)移等是通過(guò)提高患者免疫力實(shí)現(xiàn)的，《中國(guó)癌癥治療保護(hù)網(wǎng)》呂迪主任及國(guó)內(nèi)外腫瘤專(zhuān)家認(rèn)為，癌癥發(fā)生的根本原因是患者免疫力下降。免疫系統(tǒng)是人體自身的天然屏障，可產(chǎn)生抗癌癥等維持機(jī)體生理平衡和穩(wěn)定的免疫保護(hù)作用。對(duì)接受放、化療患者可提高對(duì)放化療治療毒性的耐受性，能消除癌癥特有的劇痛，減輕或消除放化療引起的白細(xì)胞減少，脫發(fā)，食欲減退，嘔吐等副作用，能改善惡病質(zhì)，提高生存質(zhì)量，延長(zhǎng)生命。大蟬草多糖（galactomannan）也有抗腫瘤作用。中樞神經(jīng)系統(tǒng)調(diào)節(jié)作用：中樞神經(jīng)系統(tǒng)作用小鼠腹腔注射天然蟬花或人工培養(yǎng)品稀醇提取物能明顯減少其自主活動(dòng)，延長(zhǎng)戊巴比妥鈉和水合氯醛所致睡眠時(shí)間，提高閾下催眠量戊巴比妥鈉的小鼠入眠率；延長(zhǎng)中樞興奮藥士寧和戊四氮所致辭小鼠驚厥的潛伏時(shí)間。經(jīng)化學(xué)刺激法和熱板法證明：兩者鎮(zhèn)痛作用明顯。給正常和酵母致熱大鼠腹腔注射，具有明顯的降溫作用。另有資料進(jìn)一步證明，蟬花及其人工培養(yǎng)物，有明顯的鎮(zhèn)痛、鎮(zhèn)靜及解熱作用。毒副作用：毒性急性毒性實(shí)驗(yàn)表明：天然蟬花乙醇提取物小鼠灌胃60g/kg，觀(guān)察72h，20只小鼠無(wú)1只死亡，給藥后動(dòng)物僅活動(dòng)減少，24h后均恢復(fù)正常。腹腔注射的LD50為5±1g/kg，毒性反應(yīng)表現(xiàn)為扭體、活動(dòng)減少、呼吸困難直至死亡。亞急性毒性實(shí)驗(yàn)表明，三組大鼠分別以1g/kg,3g/kg,9g/kg灌胃給藥，連續(xù)28d，結(jié)果動(dòng)物的血常規(guī)，肝、腎功能和心電圖均未見(jiàn)異常改變，對(duì)心、肝、脾、肺、腎等重要臟器病理學(xué)檢查也未見(jiàn)明顯異常改變。（1）蟬棒束孢菌該品由蟲(chóng)體與其頭部長(zhǎng)出的孢梗束組成。蟲(chóng)體長(zhǎng)橢圓形，微彎曲，長(zhǎng)約3cm，直徑1-4cm，表面棕黃色，大部為灰色菌絲所包被，頭部叢聚孢梗束。孢梗束分枝或不分枝，長(zhǎng)6-6cm，分結(jié)實(shí)部和柄部；結(jié)實(shí)部長(zhǎng)橢圓形、橢圓形或紡錘形，長(zhǎng)5-8mm，直徑2-3mm，折色粉狀，柄部直徑1-2mm，褐色至黑褐色。質(zhì)脆，易折斷，蟲(chóng)體內(nèi)充滿(mǎn)白色或類(lèi)白色松軟物質(zhì)。氣微香，味淡。（2）大蟬草該品由蟲(chóng)體與其前端長(zhǎng)出的子座組成。子座1-2個(gè)，分枝或不分枝，長(zhǎng)3-7cm，褐色；頭部膨大，其頂端漸細(xì)，長(zhǎng)4-6mm，直徑5-7mm，表面可見(jiàn)小點(diǎn)（子囊殼向外突出的孔口），柄部直徑4-5mm。蟲(chóng)體白色，體內(nèi)布滿(mǎn)白色菌絲。質(zhì)脆，易折斷。氣微，味淡。（1）蟬棒束孢菌分生孢子梗瓶狀，中部膨大，末端漸細(xì)或突然窄細(xì)，長(zhǎng)5-8μm，直徑2-3μm常成叢聚生在束絲上，形如花瓣?duì)?。分生孢子長(zhǎng)橢圓形、紡錘形或窄腎形，長(zhǎng)5-14μm，直徑8-5μm，含1-3脂肪滴。（2）大蟬草子座頭部橫切面：子囊殼埋生于子座內(nèi)，瓶狀，長(zhǎng)350-540μm，直徑125-300μm；子囊圓柱形，有扁球形帽部，長(zhǎng)5-378μm，直徑2-1μm；子囊孢子細(xì)長(zhǎng)絲狀，多橫隔，斷裂后矩形小段長(zhǎng)5-2μm，直徑7-6μm。注入清水適量，隔水蒸（或煮）約40分鐘，蒸（或煮）出的湯汁即可食用。再次注入清水蒸（或煮）40分鐘，湯汁可連同蟲(chóng)體、菌絲體一同食用。將金蟬花、老鴨、姜片一起放入砂鍋內(nèi)，摻加適量料酒凈水，文火燉3小時(shí)以上，食用時(shí)加適量鹽即可。材料：金蟬花5-8只，土雞半只，紅棗6顆，姜2片，料酒、鹽少許。做法：金蟬花洗凈瀝干備用。將金蟬花、土雞、火腿片、姜片，加入適量?jī)羲?，隔水慢火?-5小時(shí)，食用時(shí)加適量鹽即可。飲片性狀：該品為帶菌的干燥蟲(chóng)體，蟲(chóng)體長(zhǎng)橢圓形，微彎曲，長(zhǎng)約3厘米，徑1～4厘米，形似蟬蛻，頭部有數(shù)條灰黑色或灰白色的孢梗束，長(zhǎng)條形或卷曲，或有分枝，長(zhǎng)2～5厘米，質(zhì)脆易斷。蟲(chóng)體棕黃色，大部為灰白色菌絲包被，折斷后，可見(jiàn)蟲(chóng)體內(nèi)充滿(mǎn)粉白色或類(lèi)白色松軟物質(zhì)。以個(gè)大、完整、肉白、氣香者佳?！窘M成】蟬花（和殼）白僵蠶（直者，酒炒熟）甘草（炙）各5克延胡索4克【用法】上為細(xì)末。一歲小兒每服25克；四至五歲，每服5克。食后蟬殼湯下。功能主治歸肝經(jīng)。明目退翳，定驚鎮(zhèn)痙。用于目翳，驚癇，小兒夜啼，麻疹未透蟬花主要分布在中國(guó)的四川、江蘇、浙江、福建，但安徽、云南省東部諸地均有分布。在浙江，生長(zhǎng)著竹林的丘陵地帶，海拔80-500m，地勢(shì)平緩，郁閉度較高，土質(zhì)疏松，濕度較大，地面覆蓋有枯枝落葉層，且常有竹蟬活動(dòng)的某些林地，一般均能采到蟬花。反之，坡度較陡，芒萁骨、茅草叢生，土壤板結(jié)，就很少有蟬花的發(fā)生。對(duì)云南省三江源頭的考察結(jié)果，海拔超過(guò)2500m，蟬花絕跡。海拔低于2500m的闊葉林或以青岡櫟、錐栗為主，云南松、冷杉等針、闊葉樹(shù)混交林，郁閉度大，土質(zhì)松，枯枝落葉層厚的某些林地能采集到蟬花標(biāo)本。寄主多為小鳴蟬和蟪蛄。純針葉林未發(fā)現(xiàn)有蟬花。蟬擬青霉的寄主有7種，即竹蟬（Platylomiapieli）、山蟬（Cicadaflammata）、蟪蛄（Platyleurakaempferi）、云南黑蟬（Cicadatrashaluensis）、草蟬（Moganniaconica）、小鳴蟬（Oncotympanaella）和透翅蟬（Hyalessaronsnana），多分布在中國(guó)南方諸省。竹蟬常見(jiàn)于毛竹產(chǎn)區(qū)，是蟬擬青霉的重要寄主。此蟲(chóng)6年1代，每代5齡，常年生活在土壤中，以老齡若蟲(chóng)最易感病。當(dāng)氣溫18-24℃，相對(duì)濕度大于80%的溫暖濕潤(rùn)季節(jié)，在淺土層活動(dòng)的老齡若蟲(chóng)，接觸帶菌的土壤發(fā)生感染。到翌年7月份，溫濕度合適，發(fā)病死亡蟲(chóng)體前端長(zhǎng)出淺黃色或蛋黃色孢梗束，突破表土，伸向地面，形成大家常見(jiàn)的蟬花。由于蟬的生活史歷期長(zhǎng)，常受到多種蟲(chóng)生真菌的侵染，中國(guó)記載的易被混淆為蟬花的達(dá)十多種。所以在野外采挖到的是不能隨便食用的。由蟬花蟲(chóng)草專(zhuān)家陳祝安教授、李增智教授、中西醫(yī)腎病專(zhuān)家陳以平教授聯(lián)合主編的《金蟬花》2014年4月由北京中醫(yī)古籍出版社出版發(fā)行，這也是中國(guó)甚至世界第一部專(zhuān)業(yè)介紹金蟬花的專(zhuān)著。由中國(guó)工程院院士、中國(guó)菌物學(xué)會(huì)原理事長(zhǎng)、教育部食藥用菌工程研究中心首席科學(xué)家李玉教授作序、中國(guó)工程院周宏灝院士、唐希燦院士題詞。鏈格孢（Alternariaalternate）是一種常見(jiàn)的真菌，可以引起多種植物和動(dòng)物的病害。近年來(lái)，隨著植物病害的增加，鏈格孢的致病機(jī)制、防治措施以及開(kāi)發(fā)利用等方面的研究越來(lái)越受到。本文將介紹鏈格孢致病機(jī)制、防治措施與開(kāi)發(fā)利用的研究進(jìn)展。產(chǎn)生毒素：鏈格孢可以產(chǎn)生多種毒素，這些毒素可以破壞植物和動(dòng)物的細(xì)胞結(jié)構(gòu)，影響正常的生理功能，從而引起病害。誘導(dǎo)植物細(xì)胞死亡：鏈格孢可以通過(guò)誘導(dǎo)植物細(xì)胞死亡來(lái)引起病害。這種誘導(dǎo)作用可能與毒素的產(chǎn)生有關(guān)。侵染植物組織：鏈格孢可以通過(guò)侵染植物組織來(lái)引起病害。這種侵染作用可能與鏈格孢的生物特性有關(guān)。使用抗病品種：選擇對(duì)鏈格孢具有抗性的品種是防治鏈格孢病害的有效方法。農(nóng)業(yè)防治：通過(guò)合理的種植制度、加強(qiáng)田間管理等措施可以有效地控制鏈格孢病害的發(fā)生?；瘜W(xué)防治：使用殺菌劑可以有效地防治鏈格孢病害。目前，市面上已經(jīng)有很多針對(duì)鏈格孢病害的殺菌劑。生物防治：利用拮抗微生物可以有效地控制鏈格孢病害的發(fā)生。這些拮抗微生物主要包括細(xì)菌、真菌等。產(chǎn)生酶：鏈格孢可以產(chǎn)生多種酶，這些酶可以用于降解植物和動(dòng)物的組織，具有潛在的開(kāi)發(fā)價(jià)值。產(chǎn)生抗生素：鏈格孢可以產(chǎn)生多種抗生素，這些抗生素可以用于治療由細(xì)菌引起的疾病。例如，鏈格孢產(chǎn)生的抗生素具有一定的抗腫瘤作