SC-T 9447-2023 水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境（水體、底泥）中丁香酚的測定 氣相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法

ＩＣＳ

CCS

B

50備案號：XXXX-XXXX中華人民共和國水產(chǎn)行業(yè)標準SC／Ｔ

9447—2023-

2024

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2023－

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－中華人民共和國農(nóng)業(yè)農(nóng)村部 發(fā)布SC/T

９４４７—２０２３前言本文件按照

GB/T１１—２０２０?標準化工作導則第１部分:標準化文件的結(jié)構(gòu)和起草規(guī)則?的規(guī)定起草.本文件由農(nóng)業(yè)農(nóng)村部漁業(yè)漁政管理局提出.S本文件由全國水產(chǎn)標準化技術(shù)委員會漁業(yè)資源分技術(shù)委員會(AC/TC１５６/SC１０)歸口.S本文件起草單位:中國水產(chǎn)科學研究院南海水產(chǎn)研究所、中國水產(chǎn)科學研究院淡水漁業(yè)研究中心、中國水產(chǎn)科學研究院、廣東開放大學.本文件主要起草人:柯常亮、黃珂、李純厚、劉奇、王強、肖雅元、趙東豪、宋超、孫志偉、李晉成、金曉石.ⅠSC/T

９４４７—２０２３水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境(水體、底泥)中丁香酚的測定氣相色譜Ｇ串聯(lián)質(zhì)譜法范圍本文件描述了氣相色譜Ｇ串聯(lián)質(zhì)譜法測定水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境中丁香酚殘留量的原理,給出了測定所需的試劑和材料、儀器和設(shè)備,規(guī)定了測定與分析步驟、結(jié)果計算和檢測方法靈敏度、準確度、精密度.本文件適用于水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境(水體、底泥)中丁香酚殘留量的測定.規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款.其中,注日期的引用文件,僅該日期對應的版本適用于本文件;不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件.分析實驗室用水規(guī)格和試驗方法GB１７３７８５海洋監(jiān)測規(guī)范第５部分:沉積物分析SC/T９１０２２漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測規(guī)范第２部分:海洋SC/T９１０２３漁業(yè)生態(tài)環(huán)境監(jiān)測規(guī)范第３部分:淡水術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義.原理試樣中殘留的丁香酚經(jīng)正己烷提取,固相萃取柱凈化,氣相色譜Ｇ串聯(lián)質(zhì)譜法測定,內(nèi)標法定量.試劑和材料５１試劑５１１實驗用水為符合

規(guī)定的一級水.５１２正己烷(C

H１４):色譜純.５１３乙酸乙酯(CHCOOCHCH):色譜純.５１４丙酮(CHCOCH):色譜純.ρ５１５鹽酸:(HCl)＝１１９g/mL,優(yōu)級純.ρ ４５１６無水硫酸鈉(NaSO):優(yōu)級純,５０℃烘烤４h,冷卻后裝入玻璃瓶中密封, ４５２溶液配制１ ５ ５鹽酸溶液(＋５):取５０mL鹽酸(１５)慢慢加入２５０mL實驗用水１ ５ ５５３標準品９５３１丁香酚(Eugenol,C１０H１２O,CAS號:７Ｇ５３Ｇ０),含量≥９９０％.９Ｇ １５３２氘代丁香酚(EugenolD,C１０HDO,CAS號:３３５４０１Ｇ１７Ｇ６):含量Ｇ １５４標準溶液配制１ ５ ５５４１標準儲備液(００mg/L):?。保癿g丁香酚標準品(３１),精密稱定,用乙酸乙酯(１３)溶１ ５ ５定容于１００mL棕色容量瓶,配制成濃度為１００mg/L的丁香酚標準儲備液℃以下避光保存,有效期３個月.１ ５５５４２內(nèi)標儲備液(００mg/L):取１０mg氘代丁香酚標準品(３２),精密稱定,用乙酸乙１ ５５１SC/T

９４４７—２０２３解并定容于１００mL棕色容量瓶,配制成濃度為１００mg/L的內(nèi)標儲備液℃以下避光保存,有效期３個月.１ ５５４３標準使用液(００mg/L):準確量?。眒L丁香酚標準儲備液(４１)于１００mL棕色容量瓶１ ５５用乙酸乙酯(１３)定容,混勻,于４℃下避光保存,有效期１個月.５１ ５５４４內(nèi)標使用液(００mg/L):準確量?。眒L內(nèi)標儲備液(４２)于１００mL棕色容量瓶中,用乙１ ５５乙酯(１３)定容,混勻,于４℃下避光保存,有效期１個月.５５５材料５５５１銅粉:純度９９５％,使用前用鹽酸溶液(去除銅粉表面的氧化物,用實驗用水(５１１)沖洗除５５ ６酸,再用丙酮(１４)清洗,然后用氮吹儀(吹干待用.臨用前處理,５ ６５５５５２苯基固相萃取柱:００mL,或相當者.５５５５３氨基固相萃取柱:００mL,或相當者.儀器和設(shè)備６１氣相色譜三重四極桿串聯(lián)質(zhì)譜儀:配電子轟擊離子源(EI源).６２分析天平:感量０００００１g和６３渦旋混合器.６４固相萃取裝置,帶真空泵.５６５低速冷凍離心機:轉(zhuǎn)速≥５０００r/min.５６６離心管:０mL.６７超聲波振蕩器:頻率４０kHz.６８氮吹儀.１６９玻璃纖維濾膜:孔徑在４００℃烘烤１h,冷卻后儲于磨口玻璃瓶中密封保存.１６１０分液漏斗:００mL.樣品采集與保存４海水養(yǎng)殖環(huán)境樣品按照SC/T９１０２２的相關(guān)要求采集和保存,淡水養(yǎng)殖環(huán)境樣品按照SC/T９１０２３４的相關(guān)要求采集和保存.水樣灌裝時避免產(chǎn)生氣泡和攪動,使水樣充滿棕色玻璃瓶,不留頂部空間.底泥樣品剔除礫石和顆粒較大的動植物殘骸于潔凈磨口棕色玻璃瓶保存.運輸過程中應密封、避光、

℃以下冷藏.底泥樣品含水率按照

GB１７３７８５的規(guī)定執(zhí)行.測定步驟８１提?。福保彼畼犹幚恚叮?５水樣經(jīng)玻璃纖維濾膜(過濾后,量取１００

mL

水樣于分液漏斗中,加入１５０μL

內(nèi)標使用６５ ５(４４),加入１０mL正己烷(１２),充分振蕩后,靜置分層,取上層清液,重復提取一次,合并提取液,待凈化.８１２底泥處理５ ５５ ２ ５稱取已測定過含水率的底泥樣品５g(準確到于離心管中,加入５mL水,渦旋混５ ５５ ２ ５后,加入內(nèi)標使用液(４４),混勻,加入５mL正己烷(１２)渦旋混合２min,超聲提?。保癿in,于離心機中４℃離心５min,取上清液.重復提取一次,合并提取液,于提取液中依次加入２g無水硫酸鈉(１６)、g活化銅粉(５１),渦旋混合１min,待凈化.如渦旋結(jié)束后銅粉變黑,增加銅粉的量,直至銅粉不變色.８２凈化２化合物母離子m/z子離子m/z碰撞能量eV丁香酚１６４a１４９１０４１０表１表１多反應監(jiān)測母離子、子離子和碰撞能量參考條件３SC/T

９４４７—２０２３８２１水樣凈化５ ５ ５８５ ５ ５６取苯基固相萃取柱(５２),用３mL乙酸乙酯(１３)過柱并確保流干５ ５ ５８５ ５ ５６柱,保持柱頭浸潤.將水樣提取液(１１)加入固相萃取柱,待提取液全部流出后,用３

mL

正己烷(１２)淋洗,再用３mL乙酸乙酯(１３)洗脫并收集全部洗脫液,洗脫液用乙酸乙酯(１３)定容至３０mL,供氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(測定.８２２底泥凈化５ ５ ５８５５ ５６取氨基固相萃取柱(５３),用３mL乙酸乙酯(１３)過柱并確保流干５ ５ ５８５５ ５６柱,保持柱頭浸潤.將底泥提取液(１２)加入固相萃取柱,待提取液全部流出后,用３

mL

正己烷(１２)淋洗,再用３mL乙酸乙酯(１３)洗脫并收集全部洗脫液,洗脫液用乙酸乙酯(１３)定容至３０mL,供氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜儀(測定.８３標準曲線的制備５ ５ ５１ ５ １ ２分別移取適量丁香酚標準使用液(４３)和丁香酚內(nèi)標使用液(４４),用乙酸５ ５ ５１ ５ １ ２制成至少５個濃度點的標準系列,丁香酚的質(zhì)量濃度為５００μg/L、００μg/L、００μg/L,添加的內(nèi)標質(zhì)量濃度為也可根據(jù)儀器靈敏度或線性范圍配制能覆蓋樣品中目標物濃度的至少５個濃度水平的標準系列.８按照儀器參考條件(４１),從低濃度到高濃度依次進樣測定,測得不同濃度梯度目標物及其內(nèi)標物８的峰面積.以目標物濃度和對應內(nèi)標物濃度的比值為橫坐標,以目標物峰面積與對應內(nèi)標物峰面積的比值為縱坐標,繪制標準曲線.８４測定８４１氣相色譜串聯(lián)質(zhì)譜參考條件８４１１氣相色譜氣相色譜的參考條件如下:３１a)色譜柱:DBＧ１７MS石英色譜柱(０m×０２５mm,膜厚或性能相當者;３１b)

進樣量:

μL;c)

進樣方式:不分流進樣;２d)

載氣:氦氣,純度９９９９９％,流速為１０mL/min;２e)

進樣口溫度:８０℃;f)

升溫程序:初始溫度為８０℃,保持２min,以２０℃/min升至１８０℃保持１min,以３０℃/min升至２８０℃保持２min.８４１２質(zhì)譜串聯(lián)質(zhì)譜的參考條件如下:Ea)離子源:I源;E７b)

電子能量:０eV;７２１２c)

離子源溫度:３０℃;２１２d)

四極桿溫度:５０℃;e)

傳輸線溫度:８０℃;f)

淬滅氣:氦氣,流速為２２５mL/min;g)

碰撞氣:氮氣,純度９９９９９％,流速為１５mL/min;h)

監(jiān)測方式:多反應監(jiān)測模式,母離子、子離子和碰撞能量參考條件見表１.化合物母離子m/z子離子m/z碰撞能量eV氘代丁香酚１６７a１４９１０１２１１５a

表示為定量離子.相對離子豐度＞５０＞２０~５０＞１０~２０≤１０允許偏差±２０±２５±３０±５０ ()２

X ＝cs×A ×c ()

A ()２

X ＝cs×A ×c ()

A sc si

×A si

Ai ×V

X ＝cs×A×ci

A sc si

×A si

Ai ×V

m ×

(１－w)表１

(續(xù))８４２定性分析表１

(續(xù))８４２定性分析偏差不超過０５％;試樣中丁香酚監(jiān)測離子的相對豐度與濃度相當標準溶液的相對豐度應一致,其允許偏差應符合表２的要求.表２定性確證時相對離子豐度的允許偏差單位為百分號８４３定量測定取試樣溶液和相應的標準溶液等體積進樣測定,作單點或多點校準,以色譜峰面積定量,按內(nèi)標法單位為百分號８４３定量測定算.標準溶液及試樣溶液中丁香酚的響應值均應在儀器檢測的線性范圍內(nèi).上述氣相色譜Ｇ串聯(lián)質(zhì)譜條件下,標準溶液特征離子質(zhì)量色譜圖見附錄

A.８４４空白試驗取空白試料,除不加標準溶液外,采用相同的測定步驟進行平行操作.結(jié)果計算和表述１水樣中丁香酚的殘留量按標準曲線或公式()計算.１V式中:μμX

———試樣中丁香酚殘留量的數(shù)值,單位為微克每升(g/L);μμcs ———標準樣溶液中丁香酚濃度的數(shù)值,單位為微克每升(g/L);A

———試樣溶液中丁香酚的色譜峰面積;As

———標準溶液中丁香酚的色譜峰面積;i μi μc

———試樣溶液中內(nèi)標物的質(zhì)量濃度的數(shù)值i μi μcs ———標準溶液中內(nèi)標物的質(zhì)量濃度的數(shù)值,單位為微克每升(g/L);iAs

———標準溶液中內(nèi)標物的色譜峰面積;iAi

———試樣溶液中內(nèi)標物的色譜峰面積;V ———試樣溶液定容體積的數(shù)值,單位為毫升(mL);V

———試樣體積的數(shù)值,單位為毫升(mL).２底泥樣中丁香酚的殘留量按標準曲線或公式()計算.２１式中:μμX

———試樣中丁香酚殘留量的數(shù)值,單位為微克每千克(g/kg);μμcs

———標準樣溶液中丁香酚濃度的數(shù)值,單位為微克每升(g/L);A

———試樣溶液中丁香酚的色譜峰面積;As

———標準溶液中丁香酚的色譜峰面積;４SC/T

９４４７—２０２３i μμc

———試樣溶液中內(nèi)標物的質(zhì)量濃度的數(shù)值,單位為微克每升i μμcsi

———標準溶液中內(nèi)標物的質(zhì)量濃度的數(shù)值,單位為微克每升(g/L);Asi

———標準溶液中內(nèi)標物的色譜峰面積;Ai

———試樣溶液中內(nèi)標物的色譜峰面積;V ———試樣溶液定容體積的數(shù)值,單位為毫升(mL);gm

———試樣質(zhì)量的數(shù)值,單位為克();gw

———試樣含水率的數(shù)值,單位為百分號(％).１０方法靈敏度、準確度和精密度１０１靈敏度水樣中丁香酚的檢出限為０２μg/L,定量限為０５μg/L;底泥中丁香酚的檢出限為２μg/kg,定量限為５μg/kg.１０２準確度水樣中添加