水果硬糖中還原糖的測(cè)定

關(guān)于水果硬糖中還原糖的測(cè)定1、學(xué)習(xí)直接滴定法測(cè)定還原糖的原理，并掌握其測(cè)定的操作技術(shù)。2、通過(guò)對(duì)實(shí)驗(yàn)結(jié)果的分析，了解影響測(cè)定準(zhǔn)確性的因素。一、目的要求第2頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天二、實(shí)驗(yàn)原理

將等量的堿性酒石酸銅甲液，乙液混合時(shí)，立即生成天藍(lán)色的氫氧化銅沉淀，這種沉淀立即與酒石酸鉀鈉反應(yīng)，生成深藍(lán)色的可溶性酒石酸鉀鈉銅絡(luò)合物。此絡(luò)合物與還原糖共熱時(shí)，二價(jià)銅即被還原糖還原為一價(jià)的氧化亞銅沉淀，氧化亞銅與亞鐵氰化鉀反應(yīng)，生成可溶性化合物，達(dá)到終點(diǎn)時(shí)，稍微過(guò)量的還原糖將藍(lán)色的次甲基藍(lán)還原成無(wú)色，溶液呈淡黃色而指示滴定終點(diǎn)。根據(jù)還原糖標(biāo)準(zhǔn)溶液標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液相當(dāng)于還原糖的質(zhì)量，以及測(cè)定樣品液所消耗的體積，計(jì)算還原糖含量。第3頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天將一定量的堿性酒石酸銅甲液和乙液等體積混合時(shí)，硫酸銅與氫氧化鈉反應(yīng)，生成氫氧化銅沉淀：2NaOH+CuSO4=Cu(OH)2+Na2SO4所生成的氫氧化銅沉淀與酒石酸鈉反應(yīng)，生成可溶性的酒石酸鉀鈉銅：

COOKCOHHCOHCOONaHCOOKCOHCOCOONaHCu(OH)2+=Cu+2H2O第4頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天

在加熱條件下，檢測(cè)樣品中還原糖與酒石酸鉀鈉銅反應(yīng)，酒石酸鉀鈉銅被還原糖還原，產(chǎn)生紅色氧化亞銅沉淀，還原糖則被氧化和降解，其反應(yīng)如下：反應(yīng)生成的氧化亞銅沉淀與費(fèi)林試劑中的亞鐵氰化鉀（黃血鹽）反應(yīng)生成可溶性復(fù)鹽，便于觀察滴定終點(diǎn)。第5頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天滴定時(shí)以亞甲基藍(lán)為氧化－還原指示劑。因?yàn)閬喖谆{(lán)氧化能力比二價(jià)銅弱，待二價(jià)銅離子全部被還原后，稍過(guò)量的還原糖可使藍(lán)色的氧化型亞甲基藍(lán)還原為無(wú)色的還原型的亞甲基藍(lán)，即達(dá)滴定終點(diǎn)。根據(jù)樣液量可計(jì)算出還原糖含量。第6頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天三、主要儀器

1、定糖滴定裝置：150mL三角瓶，滴定管架，25mL滴定管2、電爐：500W。第7頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天四、儀器與試劑

1、堿性酒石酸銅甲液2、堿性酒石酸銅乙液3、葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液：準(zhǔn)確稱(chēng)取1.000g至96℃±2℃干燥2h的純葡萄糖，加水溶解后加入5mL鹽酸，并以水稀釋至1000mL。此溶液每毫升相當(dāng)于1.0mg葡萄糖。第8頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天五、實(shí)驗(yàn)步驟

（一）樣品處理

稱(chēng)取硬糖約1g左右（精確至0.1mg），加水溶解并定容至250mL，搖勻后備用。

第9頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天（二）標(biāo)定堿性酒石酸銅溶液

做三次平行試驗(yàn),取其平均值，按下式計(jì)算。5.0mL堿性酒石酸銅甲液5.0mL堿性酒石酸銅乙液150mL三角錐形瓶中加水10mL加入玻璃珠3粒從滴定管滴加約9mL葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液，搖勻電爐上加熱至沸

（在2min內(nèi)沸騰）沸騰后以每2S1滴的速度滴加葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液溶液藍(lán)色剛好褪去顯示淡黃色即為終點(diǎn)記錄消耗葡萄糖V第10頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天標(biāo)定后的計(jì)算：每10ml費(fèi)林試劑相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量（mg）A=VcA---每10ML費(fèi)林試劑相當(dāng)于葡萄糖的質(zhì)量（mg）V---標(biāo)定消耗的葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的體積mlC---葡萄糖標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度，mg/ml第11頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天（三）樣品溶液預(yù)備滴定（預(yù)測(cè)）

吸取5.0mL堿性酒石酸銅甲液及5.0mL乙液，置于150mL三角錐瓶，加水10mL，加入玻璃珠3粒，搖勻，在電爐上加熱至沸，趁熱以先快后慢的速度，從滴定管中滴加試樣溶液，并保持溶液沸騰狀態(tài)，待溶液顏色變淺時(shí)，以每?jī)擅?滴的迅速滴定，直至溶液藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)，記錄樣品溶液消耗體積V預(yù)。第12頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天（四）樣品溶液正式滴定

吸取5.0mL堿性酒石酸甲液及5.0mL乙液，置于150mL三角錐瓶，加水10mL，加入玻璃珠3粒，從滴定管加入比預(yù)備測(cè)定體積V預(yù)少1mL(即V預(yù)-1)的樣品溶液至三角錐瓶，搖勻，使其2min內(nèi)沸騰，以2S每滴的速度滴定，到藍(lán)色剛好褪去為終點(diǎn)。同法平行操作三份。平行試驗(yàn)的樣液消耗量相差不應(yīng)超過(guò)0.1ml第13頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天六、結(jié)果計(jì)算

式中

X——試樣中還原糖的含量（以某種還原糖計(jì)），單位為克每百克（g/100g）；A——堿性酒石酸銅溶液（甲、乙液各5mL）相當(dāng)于某種還原糖的質(zhì)量（mg）；m——樣品的質(zhì)量（g）；V——測(cè)定時(shí)平均消耗樣品溶液的體積（mL）。計(jì)算結(jié)果表示到小數(shù)點(diǎn)后一位。第14頁(yè),共16頁(yè)，2024年2月25日，星期天七、注意事項(xiàng)滴定必須是在沸騰條件下進(jìn)行，其原因一是加快還原糖與Cu2＋的反應(yīng)速度；二是亞甲基藍(lán)的變色反應(yīng)是可逆的，還原型的亞甲基藍(lán)遇空氣中的氧時(shí)會(huì)再被氧化為氧化型。此外，氧化亞銅也極不穩(wěn)定，易被空氣中的氧所氧化。保持反應(yīng)液沸騰可防止空氣進(jìn)入，避免亞甲基藍(lán)和氧化亞銅被氧化而增加消耗量。滴定時(shí)不能隨便搖動(dòng)錐形瓶，更不能把錐形瓶從電爐上取下來(lái)滴定，以防止空氣進(jìn)入到反應(yīng)液中。加熱溫度應(yīng)使溶液在2min內(nèi)沸騰，若煮沸的時(shí)間過(guò)長(zhǎng)會(huì)導(dǎo)致耗糖量增加。滴定速度應(yīng)盡量控制在2s加l滴，滴定速度快，耗糖增多；滴速慢，耗糖減少。滴定時(shí)間應(yīng)在1min內(nèi)，滴定時(shí)間延長(zhǎng)，耗糖量減少。

樣品溶液應(yīng)預(yù)測(cè)，其目的是通過(guò)預(yù)測(cè)可以知道樣液大概消耗量，以便在正式測(cè)定時(shí)，預(yù)先加入比實(shí)際