體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座

學(xué)習(xí)目標(biāo)簡述哺乳動物體外受精技術(shù)主要操作步驟。簡述哺乳動物胚胎早期培養(yǎng)方法。認(rèn)同體外受精在家畜快速繁殖中主要意義。學(xué)習(xí)重點（1）體外受精在家畜快速繁殖中主要意義。（2）哺乳動物體外受精技術(shù)主要操作步驟。學(xué)習(xí)難點（1）卵母細胞采集和培養(yǎng)。（2）精子采集和獲能。體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第1頁1978年7月25日世界首例試管嬰兒體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第2頁1988年3月10日我國首例試管嬰兒誕生著名婦產(chǎn)科教授張麗珠教授與中國首例試管嬰兒體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第3頁1992年我國首例三胞胎試管嬰兒體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第4頁1978年7月25日世界首例試管嬰兒第一個試管嬰兒于1978年7月25日在英國奧爾德姆市醫(yī)院誕生，她名字叫路易絲.布朗。路易絲.布朗母親梅.布朗因輸卵管阻塞而不能生育。

醫(yī)生從梅.布朗（時年31歲）體內(nèi)提取卵子，再取她丈夫（時年38歲）精液，經(jīng)處理在體外使卵子受精，受精卵分裂形成16細胞胚后重新植入梅.布朗子宮內(nèi)。9個多月后就生下了路易絲.布朗。體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第5頁嬰兒真能在試管中發(fā)育嗎？體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第6頁

經(jīng)過

使卵子和精子在

下成熟和受精，并經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成

后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代技術(shù)。體外條件人工操作早期胚胎試管嬰兒技術(shù)：體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第7頁依據(jù)資料回答以下問題：1.試管嬰兒技術(shù)包含哪些操作步驟？（體外受精、早期胚胎培養(yǎng)和胚胎移植）2.試管嬰兒培育和母親正常懷孕過程有何異同？相同之處：都經(jīng)過有性生殖產(chǎn)生;都要在母體子宮內(nèi)發(fā)育形成胎兒。不一樣之處：受精作用在體外，并在體外發(fā)育成早期胚胎進行胚胎移植。體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第8頁一、從試管牛說起體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第9頁牛生育率即使很低，不過牛卵母細胞卻相當(dāng)多，其卵巢中卵母細胞數(shù)目要比一生中排卵數(shù)多1000倍左右公牛產(chǎn)生精子數(shù)目就更多了偉大構(gòu)想誕生了試管動物技術(shù)體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第10頁1982年世界首例試管牛犢問世體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第11頁試管動物技術(shù)是指經(jīng)過人工操作使卵子和精子在體外條件下成熟和受精，并經(jīng)過培養(yǎng)發(fā)育成早期胚胎后，再經(jīng)移植產(chǎn)生后代技術(shù)。精子卵子受精卵早期胚胎移植子宮個體體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第12頁1、快速繁殖動物優(yōu)良品種意義：試管動物技術(shù)2、能夠處理生育低問題3、能夠經(jīng)過普通家畜繁育良種家畜4、更多有效地利用卵母細胞體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第13頁試管動物技術(shù)過程：第一步：體外受精

第二步：胚胎早期培養(yǎng)第三步：胚胎移植體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第14頁問題：怎樣用一個流程圖表示體外受精過程？體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第15頁胚胎移植采集卵母細胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體動物（時期：）成熟卵子獲能精子MII中期體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第16頁主要包含

、

和

等幾個主要步驟。概念：采取雌性動物

和雄性動物

，使其在

受精。二、體外受精卵母細胞精子體外卵母細胞采集精子獲取受精體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第17頁a.怎樣使雌性動物排出更多卵子？b.對試驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊怎樣采集卵子？c.對于大家畜或大型動物怎樣采集卵子？d.采集卵子是否馬上能夠受精？閱讀P69、70思考以下問題：1.卵母細胞采集和培養(yǎng)體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第18頁采取主要方法是給供體注射

，使其排出更多卵子，之后從

中沖取卵子，直接與獲能精子在體外受精。促性腺激素輸卵管a.怎樣使雌性動物排出更多卵子？超數(shù)排卵處理b.對試驗動物小鼠、兔和小家畜豬、羊怎樣采集卵子？對不一樣動物,采集卵母細胞方法不一樣。1.卵母細胞采集和培養(yǎng)體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第19頁大家畜或大型動物，如牛，卵細胞采集：從屠宰場已屠宰母畜

中采集卵母細胞，也能夠借助

、

或

等工具，直接從活體動物卵巢中吸收卵母細胞。卵巢超聲波(B超)探測儀內(nèi)窺鏡腹腔鏡1.卵母細胞采集和培養(yǎng)c.對于大家畜或大型動物怎樣采集卵子？d.采集卵子是否馬上能夠受精？采集卵母細胞，都要在體外經(jīng)

后，才能與

精子結(jié)合完成受精。人工培養(yǎng)成熟獲能體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第20頁閱讀P70、71思索以下問題：a.精子采集有哪些方法？b.體外受精需要哪些前處理？2、精子細胞采集和獲能體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第21頁2、精子細胞采集和獲能（1）采集方法：假陰道法手握法電刺激法a.精子采集有哪些方法？

大家畜或大型動物豬、犬等體型較小，易于控制動物野生或經(jīng)濟動物另外，嚙齒類試驗動物可在處死后從附睪尾搜集精液。體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第22頁2、精子細胞采集和獲能（2）體外精子獲能方法：培養(yǎng)法:化學(xué)誘導(dǎo)法:如：嚙齒動物、家兔和豬等如：牛、羊等放入人工配制獲能液中放在一定濃度肝素或鈣離子載體A23187溶液中b.體外受精需要哪些前處理？體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第23頁卵巢卵母細胞新鮮或解凍精液卵母細胞培養(yǎng)精子離心處理MⅠ期卵母細胞MⅡ期卵母細胞精子獲能處理獲能精子體外受精受精卵培養(yǎng)在獲能溶液或?qū)Ｓ檬芫芤褐型瓿墒芫^程3、體外受精過程體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第24頁人工授精就是體外受精嗎？人工授精就是用人工方法將精液注入雌性動物體內(nèi)，所以受精過程在體內(nèi)完成。體外受精受精過程在體外完成。概念辨析體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第25頁CO2培養(yǎng)箱三、胚胎早期培養(yǎng)復(fù)習(xí)：動物細胞培養(yǎng)條件是什么？糖、氨基酸、促生長因子、無機鹽、微量元素、血清等動物細胞培養(yǎng)液成份?體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第26頁精子和卵子在體外受精后，應(yīng)將受精卵移入發(fā)育培養(yǎng)液中繼續(xù)培養(yǎng)，以檢驗受精情況和受精卵發(fā)育能力。培養(yǎng)液成份：有機鹽、無機鹽、維生素、激素、氨基酸、核苷酸、血清等三、胚胎早期培養(yǎng)體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第27頁動物胚胎培養(yǎng)液成份與動物細胞培養(yǎng)液成份比較項目動物胚胎培養(yǎng)液動物細胞培養(yǎng)液鹽類營養(yǎng)物質(zhì)調(diào)整物質(zhì)特有物質(zhì)無機鹽和有機鹽氨基酸、核苷酸維生素、激素血清無機鹽、微量元素促生長因子糖、氨基酸血清、血漿三、胚胎早期培養(yǎng)體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第28頁培養(yǎng)發(fā)育到適宜階段時，可將其取出向受體移植或冷動保留三、胚胎早期培養(yǎng)不一樣動物胚胎移植時間不一樣牛、羊：小鼠、家兔：試管嬰兒：桑椹胚或囊胚階段可在更早階段移植8~16個細胞階段注：胚胎發(fā)育主要場所是母體體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第29頁為充分利用屠宰母畜卵巢上卵母細胞，不妨將屠宰場和“胚胎工廠”合建。這么屠宰場產(chǎn)品就不但是鮮肉，還會生產(chǎn)出大量胚胎和胚胎工程所需原材料，你看這個想法可行嗎？奇思妙想當(dāng)前，從屠宰場廢棄卵巢中，每個卵巢平均可采集10枚左右可用卵母細胞，經(jīng)體外培養(yǎng)成熟和受精后約可獲4枚可用胚胎，經(jīng)過移植給受體母牛，最終可得到1～2頭犢牛。牛體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)已經(jīng)成為可能。體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第30頁體外受精過程檢驗受精情況和受精卵發(fā)育能力體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第31頁存放條件？體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第32頁采集良種母牛卵母細胞卵母細胞體外培養(yǎng)采集良種公牛精子精子體外獲能體外受精良種牛體外受精胚胎胚胎移植受體牛良種犢牛成熟期牛屠宰加工廠市場采集卵巢中卵母細胞“試管?！惫S化生產(chǎn)技術(shù)流程圖思索：試管牛產(chǎn)生屬于克隆嗎？體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第33頁早期胚胎胚胎移植C代孕母體D新個體（與B遺傳物質(zhì)相同）克隆動物培育過程A雌性動物卵子去核細胞質(zhì)取核B動物體細胞核移植顯微注射重組細胞體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第34頁有性生殖

無性生殖核移植技術(shù)、胚胎移植遵照

不遵照體外受精胚胎移植試管動物克隆動物發(fā)育起點生殖方式技術(shù)伎倆遺傳物質(zhì)遺傳規(guī)律比較試管動物和克隆動物來自2個個體主要來自核供體

受精卵重組細胞體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第35頁胚胎移植采集卵母細胞體外培養(yǎng)采集精子體外獲能體外受精早期胚胎培養(yǎng)受體牛小結(jié)（時期：）

1）超數(shù)排卵（試劑）

2）活體取卵（儀器）

3）從屠宰卵巢取卵方法①②③（方法，試劑）（試劑）（培養(yǎng)條件、目標(biāo)階段）成熟卵子獲能精子MII中期方法體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第36頁1、關(guān)于牛體外受精及胚胎工廠化生產(chǎn)敘述，正確是A.精子和卵細胞受精形成受精卵后即可移入母牛子宮B.采集卵母細胞應(yīng)馬上與精子共同放入培養(yǎng)液才能形成受精卵C.成熟卵細胞與搜集來精子相遇形成受精卵，需培養(yǎng)到一定階段才可移植D.體外受精胚胎工廠化生產(chǎn)即胚胎發(fā)育和受精過程只需在體外進行2、以下當(dāng)代生物技術(shù)結(jié)果取得必須經(jīng)過胚胎移植是

A.轉(zhuǎn)基因良種雞B.重組酵母乙肝疫苗

C.單克隆抗體D.試管嬰兒C

D

鞏固練習(xí)體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第37頁3、采集卵母細胞，在體外經(jīng)人工培養(yǎng)成熟后，才能與獲能精子受精，以下原因不正確是A.卵子從輸卵管中沖出也要經(jīng)歷類似精子獲能過程B.動物排出卵子成熟程度不一樣C.體外人工培養(yǎng)至減數(shù)分裂第二次分裂中期時才成熟D.沖出卵子還需要培養(yǎng)一段時間由小變大D

4、以下關(guān)于滋養(yǎng)層細胞敘述，不正確是 A.囊胚滋養(yǎng)層細胞未來發(fā)育成胎盤和胎膜B.能夠用滋養(yǎng)層細胞做DNA分析性別判定C.囊胚滋養(yǎng)層細胞就是未來原腸胚外胚層D.滋養(yǎng)層細胞沿透明帶內(nèi)壁擴展和排列C

體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第38頁

5、以下相關(guān)胚胎工程敘述，正確是

A.“試管動物”生殖方式屬于無性生殖

B.卵裂球時期每一個細胞體積比受精卵大

C.經(jīng)過胚胎移植技術(shù)可充分發(fā)揮良種母畜繁殖潛力

D.對某一胚胎干細胞移植，產(chǎn)生動物中雄性和雌性概率各占1/2C

6、以下關(guān)于胚胎工程敘述，正確是（ ）

A.經(jīng)過胚胎體外培養(yǎng)可直接取得新生兒

B.超數(shù)排卵技術(shù)要使用一定激素

C.胚胎移植中受體與供體必須都為優(yōu)良品種

D.受體母畜需要遺傳性狀優(yōu)良品種，供體母畜可用遺傳性狀普通品種B

體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第39頁7、“試管嬰兒”技術(shù)是經(jīng)過將不孕夫婦精子和卵細胞取出在試管中完成受精，并在試管中培養(yǎng)受精卵使其發(fā)育到桑椹胚或囊胚階段，再將胚胎移入女性子宮內(nèi)發(fā)育成胎兒。它不但使一部分不能生育男女重新取得了生育機會，也為人類優(yōu)生開辟了新路徑。據(jù)此回答：（1）“試管嬰兒”技術(shù)在生物學(xué)上所依據(jù)原理是

A.有性生殖 B.組織培養(yǎng)

C.克隆技術(shù) D.基因工程（2）“試管嬰兒”形成用到以下哪些技術(shù)？

（填序號）①體外培養(yǎng)②人工授精 ③胚胎移植④核移植A①②③體外受和早期胚胎發(fā)育專家講座第40頁8、下列圖是培育能產(chǎn)生凝血因子牛過程示意圖，回答相關(guān)問題：（1）為能從良種母牛體內(nèi)一次取得多枚卵子，能夠采取

方法。據(jù)報道，這種技術(shù)已經(jīng)被濫用于人類生育中，從而出現(xiàn)許多人工“多胞胎”，這種技術(shù)帶來危害之一是

。（2）在過程③中，當(dāng)一個精子進入卵細胞后會激發(fā)卵子發(fā)生反應(yīng)，如透明帶反應(yīng)等，其意義是

。過程⑥包括技術(shù)是