動物血液學(xué)檢查專家講座

血液學(xué)檢驗(yàn)dxx動物血液學(xué)檢查專家講座第1頁血液學(xué)（hematology）是以血液和造血組織為主要研究對象醫(yī)學(xué)科學(xué)一個獨(dú)立分支學(xué)科。祖國醫(yī)學(xué)早在《黃帝內(nèi)經(jīng)》一書中相關(guān)于血液記載，國外在公元前3～4世紀(jì)時已經(jīng)有些人提到血液名字。然而對于血液組成和功效認(rèn)識長久以來是唯心和不完全，有些概念是從點(diǎn)滴現(xiàn)象和不完整觀察中推測出來。系統(tǒng)地和科學(xué)地研究血液開始于顯微鏡問世以后，用顯微鏡觀察血液中紅細(xì)胞（1673年）、白細(xì)胞（1749年）和血小板（1842年），稱為血液中有形部分，是血液學(xué)家研究重點(diǎn)對象。血液中體液部分，亦稱為血液無形成份（或血漿），許多年來由生物化學(xué)家和免疫學(xué)家所研究。動物血液學(xué)檢查專家講座第2頁目錄1，血液采取方法2，抗凝血制備3，血漿、血清制備4，血紅蛋白測定5，紅細(xì)胞(RBC)計數(shù)6，紅細(xì)胞壓積(PCV)測定方法7，紅細(xì)胞沉降率(ESR)測定8，白細(xì)胞(WBC)計數(shù)9，白細(xì)胞分類計數(shù)10，血小板(PC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第3頁血液組成血液是由液態(tài)血漿和懸浮在血漿中血細(xì)胞組成。全血＝45％血細(xì)胞＋55％血漿血細(xì)胞：紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血小板；血漿：（90－92％）水＋（8－10％）溶質(zhì)動物血液學(xué)檢查專家講座第4頁溶質(zhì)：血漿蛋白（白蛋白、球蛋白、纖維蛋白原）、無機(jī)鹽、非蛋白氮、不含氮有機(jī)物。血液流出血管后，如不經(jīng)抗凝處理，很快會凝集成血塊，伴隨血塊逐步縮緊還會析出淡黃色清亮液體，叫血清。血清中沒有纖維蛋白血清中缺乏血漿中參加凝血反應(yīng)一些成份。出血時，輸血清沒用，要輸血紅蛋白。血清是不含纖維蛋白原血漿。血液組成動物血液學(xué)檢查專家講座第5頁血液理化特征1.

顏色：紅色動脈血：鮮紅（血紅蛋白含氧多）

靜脈血：暗紅（血紅蛋白含氧少）2.密度：畜禽全血相對密度1.040-1.0753.氣味：血液中因?yàn)榇嬖趽]發(fā)性脂肪酸而有腥味，又因其中含有氯化鈉而稍帶咸味。動物血液學(xué)檢查專家講座第6頁血液樣品采集1.保定2.消毒3.采樣血液采取方法動物血液學(xué)檢查專家講座第7頁血液采取方法1，采血部位和方法犬采血部位在前肢前臂頭靜脈和后肢隱靜脈。采血時，犬側(cè)臥保定，局部剪毛消毒，助手或犬主人用手握住采血部向心端，或用橡皮條扎緊，使靜脈怒張，用消毒干燥注射器采血。2，注意事項(xiàng)（1）血樣必須在進(jìn)行任何藥品治療前采集，假如已經(jīng)進(jìn)行了治療，須在采血統(tǒng)計上給予注明，不然動物接收了一些藥品治療，一些檢驗(yàn)方法就無法得到準(zhǔn)確治療。（2）保定過程中盡可能降低動物應(yīng)激，不然會造成樣品結(jié)果誤差。動物血液學(xué)檢查專家講座第8頁抗凝血制備1，抗凝劑及其應(yīng)用血液檢驗(yàn)多用抗凝血液，為預(yù)防血液凝固，通常在血液中加一下抗凝劑，而制備抗凝血?？鼓齽┳饔眠m用范圍乙二胺四乙酸二鈉草酸鉀草酸銨與草酸鉀合劑枸櫞酸鈉肝素脫鈣作用脫鈣作用脫鈣作用

脫鈣作用抗凝血酶普通血液檢驗(yàn)不宜作鉀定量不宜作氮定量

血沉、血凝固普通血液檢驗(yàn)動物血液學(xué)檢查專家講座第9頁2，抗凝血制備方法根據(jù)檢測項(xiàng)目選擇特定抗凝劑。采集血樣后，將其裝入含有適當(dāng)抗凝劑容器內(nèi)，輕輕搖動，使其與抗凝劑混合。3，注意事項(xiàng)（1）血液采集后要盡快與適當(dāng)抗凝劑混合，搖動手法應(yīng)輕柔，猛烈晃動可造成溶血，紅細(xì)胞內(nèi)化學(xué)物質(zhì)釋放入血漿，從而影響分析結(jié)果準(zhǔn)確性。（2）采血后1h內(nèi)不進(jìn)行檢測樣品應(yīng)冷藏，檢測前應(yīng)先取出恢復(fù)到室溫，并輕輕搖勻?？鼓苽鋭游镅簩W(xué)檢查專家講座第10頁血漿、血清制備血液流出血管后，如不經(jīng)抗凝處理，很快會凝集成血塊，伴隨血塊逐步縮緊還會析出淡黃色清亮液體，叫血清。血清與血漿區(qū)分：（1）血清中不含纖維蛋白原，血漿中含有纖維蛋白原。（2）血清中缺乏凝血因子，血漿中含有凝血因子。動物血液學(xué)檢查專家講座第11頁動物血液學(xué)檢查專家講座第12頁血漿制備方法：（1）采集血液樣品，置于含有適量抗凝劑試管內(nèi)。（2）遲緩搖動試管，使抗凝劑與血液混勻。（3）-3000r/min離心5-10min，上層即為血漿。（4）小心地用毛細(xì)移液管將血漿層移出至空白試管內(nèi)。（5）標(biāo)識日期、采集時間、動物名稱和病歷號，冷藏或冷凍保留。血漿、血清制備動物血液學(xué)檢查專家講座第13頁血清制備方法：（1）采集血液樣品，并將其放置于不含有抗凝劑試管內(nèi)。（2）室溫下或25-37℃溫水中斜置，自然凝集20-30min。（3）密封試管，-3000r/min離心10min，析出淡黃澄清液體即為血清。（4）用毛細(xì)移液管將血清移出至空白試管內(nèi)。（5）標(biāo)識日期、采集時間、動物名稱和病歷號，冷藏或冷凍保留。血漿、血清制備動物血液學(xué)檢查專家講座第14頁動物血液學(xué)檢查專家講座第15頁血紅蛋白測定血紅蛋白測定通常是指測定血液中各種血紅蛋白總濃度，用g/L表示。1，器材與試劑（1）沙利氏血紅蛋白計。在測定管上有兩種刻度，一側(cè)表示血紅蛋白在每百毫升血液內(nèi)克數(shù)，另一側(cè)表示百分?jǐn)?shù)。國產(chǎn)血紅蛋白計是以每百毫升血液含14.5g血紅蛋白做為100%而設(shè)制。（2）0.1mol/L鹽酸

血紅蛋白測定-沙利氏法動物血液學(xué)檢查專家講座第16頁2，原理血紅蛋白本身色澤常隨結(jié)合氧量而改變，不便于比色。在定量鹽酸中加入少許稀鹽酸，Hb被酸化后變?yōu)楦哞FHb，展現(xiàn)穩(wěn)定褐色，與標(biāo)準(zhǔn)柱相比，求出每百毫升血液中血紅蛋白克數(shù)或百分?jǐn)?shù)。血紅蛋白測定動物血液學(xué)檢查專家講座第17頁3，操作步驟（1）向沙利氏比色管內(nèi)加入1%鹽酸5滴。（2）用沙利氏吸血管吸血至20μl刻度處，用干脫脂棉擦去吸管外沾附血液。（3）漸漸吹入沙利氏比色管內(nèi)，不要產(chǎn)生氣泡，再重復(fù)吸、吹數(shù)次，以洗出沙利氏吸血管中血液。輕輕振動比色管，使血液與鹽酸充分混合。（4）靜置10min，待血液變成褐色后，緩緩滴加蒸餾水，每加1滴，用細(xì)玻璃棒攪動一次，直到顏色與標(biāo)準(zhǔn)色柱完全相同為止。液柱凹面所指刻度數(shù)，即為每百毫升血液中血紅蛋白克數(shù)。血紅蛋白測定動物血液學(xué)檢查專家講座第18頁動物血液學(xué)檢查專家講座第19頁4，正常值犬血紅蛋白為120-194

g/L，貓為110

g/L5，臨床意義（1）血紅蛋白增多：主要是見于脫水而血液濃縮各種疾病，如腹瀉、嘔吐、大出汗、多尿等，也見于腸便秘及一些中毒??；血也見于真性紅細(xì)胞增多癥，是一個原因不明骨髓增生性疾病，當(dāng)前認(rèn)為是多能干細(xì)胞受累所致。其特點(diǎn)是紅細(xì)胞連續(xù)性顯著增多，全身總血量也增加，見于馬、牛、犬和貓。（2）血紅蛋白量降低：主要見于各種貧血。血紅蛋白測定動物血液學(xué)檢查專家講座第20頁紅細(xì)胞(RBC)計數(shù)紅細(xì)胞計數(shù)即測量單位體積（L）血液中紅細(xì)胞數(shù)量，用1012個/L表示。紅細(xì)胞計數(shù)顯微鏡計數(shù)法

紅細(xì)胞計數(shù)板動物血液學(xué)檢查專家講座第21頁1，器材與試劑（1）血細(xì)胞計數(shù)板。（2）血蓋片。（3）沙利氏吸管、小試管、試管架等。（4）赫姆氏稀釋液、生理鹽水。紅細(xì)胞(RBC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第22頁紅細(xì)胞(RBC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第23頁動物血液學(xué)檢查專家講座第24頁動物血液學(xué)檢查專家講座第25頁動物血液學(xué)檢查專家講座第26頁動物血液學(xué)檢查專家講座第27頁2，操作步驟（1）稀釋血液：用5mL刻度吸管吸收紅細(xì)胞稀釋液4.0ml。用沙利氏吸管準(zhǔn)確吸取供檢血液至10μl或20μl

刻度處，用棉球擦去管尖外部余血，將吸管插入盛有紅細(xì)胞稀釋液試管底部，輕輕將血放出，并吸收上清液洗吸管3次，使血液與稀釋液充分混合。（2）充液：將計數(shù)板和蓋玻片擦凈，玻棒蘸取1滴混懸液充入血細(xì)胞計數(shù)池內(nèi)，靜置2-3分鐘，待紅細(xì)胞下沉，開始鏡檢計數(shù)。計數(shù)時，先用低倍鏡后轉(zhuǎn)高倍鏡，依次計數(shù)中央大方格內(nèi)四角和正中五個中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)。對于壓線紅細(xì)胞，應(yīng)采取數(shù)上不數(shù)下，數(shù)左不數(shù)右標(biāo)準(zhǔn)，確保計數(shù)域一致性，使計數(shù)準(zhǔn)確。動物血液學(xué)檢查專家講座第28頁充液

計數(shù)方法動物血液學(xué)檢查專家講座第29頁3,計算紅細(xì)胞數(shù)（個/L）=5個中方格內(nèi)RBC數(shù)×5×10×106×血液稀釋倍數(shù)（400或200）式中：×5表示5個中方格內(nèi)紅細(xì)胞數(shù)折算為1個大方格紅細(xì)胞數(shù)×10因一個大格容積為0.1立方毫米，換算為1立方毫米×200血液稀釋倍數(shù)×106將1立方毫米換算為1L動物血液學(xué)檢查專家講座第30頁4，臨床意義（1）紅細(xì)胞數(shù)增多：相對性紅細(xì)胞增多：多為血液濃縮而引發(fā)，常見于腹瀉、嘔吐、大出汗、急性胃炎、腸阻塞、腸變位、滲出性胸膜炎、滲出性腹膜炎及發(fā)燒性疾病等。絕對性紅細(xì)胞增多：較為少見，多因?yàn)榧t細(xì)胞增生所致。（2）紅細(xì)胞數(shù)降低：見于各種類型貧血，如失血、溶血等。紅細(xì)胞(RBC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第31頁5，注意事項(xiàng)（1）紅細(xì)胞計數(shù)關(guān)鍵是防凝、防溶，取樣準(zhǔn)確。（2）稀釋液充入計數(shù)室量不可過多或過少。（3）顯微鏡載物臺應(yīng)保持水平，不然，計數(shù)室液體流向一側(cè)而使計數(shù)不準(zhǔn)。紅細(xì)胞(RBC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第32頁紅細(xì)胞壓積容量PCV-溫氏法紅細(xì)胞壓積(PCV)測定方法紅細(xì)胞壓積：壓緊紅細(xì)胞在全血中所占容積百分比，稱為紅細(xì)胞比容。動物血液學(xué)檢查專家講座第33頁紅細(xì)胞壓積(PCV)測定方法操作方法1，將雙草酸混合液0.5mla（或10%EDTA，2滴）放入小瓶中，將小瓶置于烤箱中烤干。2，用注射器抽血5ml，注入小瓶中，搖勻，勿使其凝固。3.用長針頭吸滿抗凝血,插入溫氏管底部,輕捏膠皮乳頭,自下而上擠入血液至刻度10處。4.置離心機(jī)中,以3000轉(zhuǎn)/min速度離心30-45min,取出觀察,統(tǒng)計紅細(xì)胞層高度,再離45min,如與第一離心高度一致,此時紅細(xì)胞柱層所占刻度數(shù),即為PCV數(shù)值,用%表示。如無離心機(jī),靜置24小時后,讀取數(shù)值。動物血液學(xué)檢查專家講座第34頁紅細(xì)胞沉降率(ESR)測定1，紅細(xì)胞沉降率是指將抗凝血裝入特制玻璃管內(nèi)，在一定時間內(nèi)觀察紅細(xì)胞下降毫米數(shù)，采取魏氏法測定。2，原理紅細(xì)胞沉降速度主要與紅細(xì)胞串錢狀形成、紅細(xì)胞數(shù)目標(biāo)多少、血漿蛋白組成相關(guān)。通常血漿中球蛋白、纖維蛋白原和膽固醇含量增多時，可加速紅細(xì)胞疊連、沉降。血漿中白蛋白和卵磷脂含量增多時，則紅細(xì)胞疊連、沉降減慢。動物血液學(xué)檢查專家講座第35頁3，臨床意義血沉測定是一個非特異性試驗(yàn)，它只能說明體內(nèi)存在有某種病理過程，不能單獨(dú)用于疾病診療。發(fā)現(xiàn)貧血時，血沉顯著加緊。脫水時，血沉顯著變慢。紅細(xì)胞沉降率(ESR)測定動物血液學(xué)檢查專家講座第36頁白細(xì)胞(WBC)計數(shù)白細(xì)胞計數(shù)是測定每升血液中各種白細(xì)胞總數(shù)，以109個/L表示。白細(xì)胞稀釋液：3%（V/V）冰醋酸溶液或1%鹽酸溶液，混合后加2滴10%結(jié)晶紫或1%美蘭染液，使呈淡紫色，方便與紅細(xì)胞稀釋液相區(qū)分。原理：一定量血液用冰醋酸溶液稀釋后，可將紅細(xì)胞破壞，然后在細(xì)胞計數(shù)板計數(shù)室內(nèi)計數(shù)一定容積白細(xì)胞，以此推算出每升血液內(nèi)白細(xì)胞數(shù)。動物血液學(xué)檢查專家講座第37頁

白細(xì)胞分類計數(shù)是將血液制成涂片，經(jīng)瑞氏或姬姆薩氏染色后在油鏡下按白細(xì)胞形態(tài)學(xué)特征進(jìn)行分類，求出各類型白細(xì)胞比值。白細(xì)胞分類計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第38頁血小板：是從骨髓成熟巨核細(xì)胞裂解脫落下來活細(xì)胞，無色、無細(xì)胞核，呈橢圓形、桿形或不規(guī)則形。常用復(fù)方尿素稀釋液。原理：尿素能溶解紅細(xì)胞和白細(xì)胞而保留完整形態(tài)血小板，血液經(jīng)此稀釋后在血細(xì)胞計數(shù)室內(nèi)直接計數(shù)，以求每升血液中血小板數(shù)，以109個/L表示。血小板(PC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第39頁

血小板含有主要保護(hù)機(jī)能，參加血液凝固。血小板計數(shù)對于評價血液凝固機(jī)制提供一定依據(jù)。血小板(PC)計數(shù)動物血液學(xué)檢查專家講座第40頁寵物血液生化意義1.血糖【正常值】3.9--5.9mmol/L（約60--110mg/dl）?！九R床意義】對于胰島素，糖皮質(zhì)激素、腎上腺素等分泌不足或過多有判別意義；對于監(jiān)測糖尿病治療效果有一定意2.葡萄糖耐量【正常值】服糖后60分鐘血糖<160mg/dl，（<9mmol/L）120分鐘恢復(fù)到空腹水平；各次尿中無糖?！九R床意義】糖耐量曲線，對于糖尿病、腎性糖尿病、甲亢等有診療和判別診療意義。

3.二氧化碳結(jié)協(xié)力【正常值】23--31mmol/L?！九R床意義】對于判斷代謝性或呼吸性酸中毒、堿中毒有一定意義。

4.尿素氮（BUN）【正常值】3.2--7mmol/L?！九R床意義】判定腎功效。增高可見于各種原因腎功效損害；肝功效嚴(yán)重?fù)p害時減低。動物血液學(xué)檢查專家講座第41頁寵物血液生化意義5.肌酐【正常值】88--177μmol/L?！九R床意義】對急、慢性腎炎診療和預(yù)后有主要意義。

6.肌酸【正常值】230--530μmol/L?！九R床意義】肌肉嚴(yán)重?fù)p傷，腎臟重度損害或尿閉時增高。

7.尿酸【正常值】119--238μmol/L。【臨床意義】增高：臨床多見于痛風(fēng)、急性及慢性腎炎、白血病、多發(fā)性骨髓瘤等。

8.鉀【正常值】3.5--5.3mmol/L?！九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。動物血液學(xué)檢查專家講座第42頁寵物血液生化意義9.鈉【正常值】136--145mmol/L?！九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。

10.氯【正常值】100--106mmol/L?！九R床意義】判定電解質(zhì)及酸堿平衡情況。

11.鈣【正常值】2.2--2.7mmol/L?！九R床意義】判定甲狀旁腺機(jī)能，維生素Ｄ缺乏癥，骨腫瘤，多發(fā)骨髓瘤有意義。

12.無機(jī)磷【正常值】1.0--1.6mmol/L。【臨床意義】判定甲狀旁腺機(jī)能，維生素Ｄ缺乏癥，骨腫瘤，多發(fā)骨髓瘤有意義。動物血液學(xué)檢查專家講座第43頁寵物血液生化意義13.鎂【正常值】0.8--1.2mmol/L?！九R床意義】判定腎功效、脫水甲亢、洋地黃中毒等有一定意義。

14.血清鐵【正常值】11--27pmol/L?！九R床意義】判別各種貧血有意義。

15.氨氮【正常值】6--35μmol/L。【臨床意義】判定肝昏迷有價值。

16.總蛋白【正常值】65--85g/L?！九R床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝普通情況：對肝腎損害，多發(fā)性骨髓瘤等有一定診療、判別診療意義。動物血液學(xué)檢查專家講座第44頁寵物血液生化意義17.白蛋白【正常值】35--55g/L?！九R床意義】可了解體內(nèi)蛋白質(zhì)代謝普通情況：對肝腎損害，多發(fā)性骨髓瘤等有一定診療、判別診療意義。

18.血清總膽紅質(zhì)【正常值】1.7--17.1μmol/L?！九R床意義】診療、判別診療黃疸類型有主要意義。

19.血清直接膽紅質(zhì)【正常值】0.3--3.4μmol/L?！九R床意義】診療、判別診療黃疸類型有主要意義。

20.丙谷轉(zhuǎn)氨酶（ALT）【正常值】20--40μ?！九R床意義】對心肌梗塞、肝臟實(shí)質(zhì)病變診療及病情改變觀察有主要意義。動物血液學(xué)檢查專家講座第45頁寵物血液生化意義21.門谷轉(zhuǎn)氨酶（AST）【正常值】<40μ?！九R床意義】急性心肌梗塞時升高，肝病及其它臟器炎癥時也常增高。

22.r--谷氨酰轉(zhuǎn)移酶或轉(zhuǎn)酞酶（r--GT）【正常值】6--