紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定

第第頁紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定紫外分光光度法鑒定未知芳香化合物及萘的測定[目的要求]1、學(xué)習(xí)和把握用紫外分光光度法定性的原理和方法。2、學(xué)習(xí)紫外分光光度計(jì)的使用方法，了解基本結(jié)構(gòu)，把握紫外分光光度法定量的原理和方法。[基本原理]紫外分光光度法其比較緊要的用途是用于有機(jī)化合物的定性和定量分析方面。由于很多有機(jī)化合物及其衍生物在紫外波段有強(qiáng)的汲取光譜，可以把未知試樣的紫外汲取光譜圖和標(biāo)準(zhǔn)試樣（或與標(biāo)準(zhǔn)準(zhǔn)圖譜）比較，當(dāng)濃度和溶劑相同時(shí)，若兩者的譜圖相同（峰、微小值和拐點(diǎn)的λ相同），而且未知樣品大體已知時(shí)，可以說明它們是同一個(gè)化合物。但是在紫外和可見光區(qū)域，這些特征的峰、微小值和拐點(diǎn)的數(shù)目往往是有限的，且紫外汲取光譜的汲取峰還較寬，兩種不同的化合物可能有相同的紫外汲取光譜，對于完全未知的有機(jī)化合物，有時(shí)可以通過改換溶劑和適當(dāng)?shù)幕瘜W(xué)處理之后所得的未知標(biāo)準(zhǔn)光譜對比，不僅比較λ，還要比較它們的λmax和A，來進(jìn)一步確證，甚至還要進(jìn)一步借助紅外、核磁和質(zhì)譜等手段才能*后得出結(jié)論。紫外分光光度法進(jìn)行定量分析是有快速，靈敏度高及分析混合物中各組份有時(shí)不需要事前分別，不需要顯色劑，因而不受顯色劑溫度及顯色時(shí)間等因素的影響，操作簡便等優(yōu)點(diǎn)。目前廣泛用于微量或痕量分析中。但有一個(gè)局限性，就是待測試樣必需在紫外區(qū)有汲取并且在測試濃度范圍服從比耳定律才行。利用紫外光度法測定試樣中單組份含量時(shí)，通常先測定物質(zhì)的汲取光譜，然后選擇*大汲取峰的波上進(jìn)行測定。其原理與一般比色分析相同。可用標(biāo)準(zhǔn)工作曲線法。假如通過試驗(yàn)證明，在測定條件下符合比耳定律，也可以不用標(biāo)準(zhǔn)曲線而與標(biāo)準(zhǔn)品的已知濃度溶液比較求出未知樣品濃度。[儀器與試劑]751G型，752型及53WB型紫外可見分光光度計(jì)；1cm石英比色皿未知物1—環(huán)己烷溶液；未知物2—環(huán)己烷溶液；未知物3—乙醇溶液；未知物4—乙醇溶液；萘的標(biāo)準(zhǔn)溶液：（1）1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)萘溶液：精準(zhǔn)稱取50毫克色譜純的萘于小燒杯中，以無水乙醇溶液溶解后定量移入50毫升容量瓶中，以無水乙醇稀至刻度，搖勻；（2）10μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)萘溶液，由1mg/mL萘標(biāo)液精準(zhǔn)稀釋100倍即成；（3）1μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)萘溶液：由10μg/mL萘標(biāo)液精準(zhǔn)稀釋10倍即成。[試驗(yàn)步驟]1、以試樣的溶劑為參比對未知芳香化合物的溶液測定，其紫外汲取光譜波長一般從220nm—300nm。間隔自選（一般間隔1—2nm）。2、繪制出汲取曲線后從“UltraioletSpectraofAromaticCompounds”（芳香族化合物的紫外光譜）一書中的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對比查出屬于何種有機(jī)化合物。3、以95%乙醇為參比溶液，用1cm石英比色皿對標(biāo)準(zhǔn)萘—乙醇溶液測定紫外汲取光譜，波段從210nm—230nm，只要找出*大汲取峰位置即可。4、在儀器上以*大汲取峰測定已知濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液。（1）用10mL帶塞比色管6支，配制濃度分別為0.2、0.4、0.6、0.8、1.0、1.5μg/mL的標(biāo)準(zhǔn)溶液系列各10mL。（2）在分光光度計(jì)上以*大汲取峰波長（～220nm）測定標(biāo)準(zhǔn)系列的吸光度，濃度從低到高，記錄汲取值。5、對未知樣品進(jìn)行測定。對幾個(gè)未知樣品中的萘含量進(jìn)行測定時(shí)的條件應(yīng)與標(biāo)準(zhǔn)系列一致。試樣中含量高，可用乙醇稀釋后測定。[結(jié)果處理]式中：C標(biāo)、C樣—分別為標(biāo)準(zhǔn)液和試樣中萘的濃度；A標(biāo)、A樣—分別為標(biāo)準(zhǔn)液和試樣液的吸光度；W樣—試樣重。[注意事項(xiàng)]