新版中藥制劑分析

第一節(jié)概述中藥制劑是依據(jù)藥典、制劑規(guī)范和其它要求處方，將中藥原料藥品加工制成含有一定規(guī)格，能夠直接用于防病、治病藥品。2024/4/19新版中藥制劑分析第1頁注意：中藥制劑必須是以中醫(yī)藥基礎(chǔ)理論和用藥標(biāo)準(zhǔn)為指導(dǎo)制成單方或復(fù)方制劑。中藥成方制劑又稱為中成藥。2024/4/19新版中藥制劑分析第2頁一、中藥制劑分析特點(diǎn)1.中藥市場(chǎng)混亂同物異名同名異物貫眾:30各種，止濼、貫節(jié)、貫渠、百頭、虎卷、扁苻、貫來、貫中、渠母、貫鐘、伯芹、藥渠、黃鐘、伯萍、樂藻、草鴟頭、伯藥、藥藻、鳳尾草、蕨薇菜根、貫仲、管仲、綿馬貫仲

2024/4/19新版中藥制劑分析第3頁同物異名現(xiàn)象嚴(yán)重：重樓為百合科ParispolyphyllaSmith根莖,又名七葉一枝花、蚤休、草河車。拳參為蓼科PolygonumbistraL.根莖又名草河車。2024/4/19新版中藥制劑分析第4頁2.中藥材質(zhì)量不穩(wěn)定性生長(zhǎng)環(huán)境、采收季節(jié)及部位差異GAP

中藥材生產(chǎn)質(zhì)量管理規(guī)范麻黃東北→西北（-）麻黃堿含量↑（+）麻黃堿含量↓2024/4/19新版中藥制劑分析第5頁丹參酮

11、12月份含量最高薄荷腦秋季葉變黃時(shí)含量最高益母草水蘇堿營養(yǎng)期含量最高益母草堿營養(yǎng)期含量最低2024/4/19新版中藥制劑分析第6頁不一樣部位人參皂苷含量

重量比(%)總皂苷含量(%)周皮6.92.60韌皮46.63.04木質(zhì)部46.50.312024/4/19新版中藥制劑分析第7頁3.各種有效成份在中藥中含量相差懸殊五倍子鞣質(zhì)（＞70%）槐米蘆丁（＞20%）長(zhǎng)春花長(zhǎng)春新堿（百萬分之一）美登木美登木堿（千萬分之一）2024/4/19新版中藥制劑分析第8頁4.成份復(fù)雜，而且大多數(shù)中藥有效成份尚不十分清楚。

中藥藥效發(fā)揮是各種成份協(xié)同作用結(jié)果，所以應(yīng)從整體上來控制中藥質(zhì)量。2024/4/19新版中藥制劑分析第9頁5.同一成份在不一樣藥材中藥理作用不一樣有效←→無效鞣質(zhì)地榆（止血）其它（無藥效）2024/4/19新版中藥制劑分析第10頁6.制劑工藝不一樣，有效成份量也不一樣例三黃瀉心湯干浸膏有效成份與濃縮干燥方法關(guān)系(%)常壓減壓逆浸透成份濃縮濃縮噴霧大黃酸葡萄糖苷41.151.696.8小檗堿34.537.594.5黃連堿6.312.093.7黃岑苷77.477.698.52024/4/19新版中藥制劑分析第11頁7.劑型繁多，輔料干擾大丸、散、片、錠、合、酒、酊、膏、露、茶、栓、顆粒、糖漿等2024/4/19新版中藥制劑分析第12頁蠟丸蜂蠟蜜丸蜂蜜糊劑糯米粉、黃米粉曲劑發(fā)酵膠劑豆油、黃酒、冰糖

針對(duì)不一樣劑型，采取對(duì)應(yīng)方法進(jìn)行分離純化后測(cè)定2024/4/19新版中藥制劑分析第13頁二、中藥制劑分類與質(zhì)量分析關(guān)鍵點(diǎn)中國藥典（年版）一部（二十六種）丸劑膠劑膏藥顆粒劑滴眼劑散劑合劑露劑糖漿劑軟膏劑片劑酒劑茶劑滴丸劑注射劑錠劑酊劑搽劑膠囊劑滴鼻劑栓劑巴布膏劑橡膠膏劑氣霧劑噴霧劑煎膏劑（膏滋）流浸膏劑與浸膏劑2024/4/19新版中藥制劑分析第14頁(一)中藥材及其炮制品中藥材及其炮制品是中藥制劑生產(chǎn)原料,是中藥生產(chǎn)過程中質(zhì)量確保首要步驟.中藥材及其炮制品質(zhì)量控制應(yīng)嚴(yán)格執(zhí)行國家藥品標(biāo)準(zhǔn)和中藥炮制規(guī)范.2024/4/19新版中藥制劑分析第15頁(二)液體制劑用藥材提取物制備液體制劑合劑、糖漿劑、酒劑、茶劑、酊劑滴鼻劑、滴眼劑、露劑、搽劑等（無植物組織與細(xì)胞，故無顯微判別）2024/4/19新版中藥制劑分析第16頁1.合劑與口服液合劑系指藥材用水或其它溶劑，采取適宜方法提取，經(jīng)濃縮制成內(nèi)服液體制劑。（單劑量合劑也可稱為“口服液”）普通檢驗(yàn)項(xiàng)目pH裝量相對(duì)密度微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第17頁2.酒劑與酊劑酒劑:藥材用蒸餾酒提取制成澄清液體制劑酊劑:藥品用要求濃度乙醇提取或溶解而制成澄清液體制劑普通檢驗(yàn)項(xiàng)目含乙醇量（GC）甲醇量檢驗(yàn)（GC）總固體裝量微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第18頁3.注射劑藥材經(jīng)提純后制成供注入人體內(nèi)溶液,乳狀液粉末.注射液注射用無菌粉末注射用濃溶液2024/4/19新版中藥制劑分析第19頁（三）半固體制劑軟膏：藥品、藥材細(xì)粉、藥材提取物與適量基質(zhì)混合制成半固體外用制劑。慣用基質(zhì)油脂性、水溶性乳劑型（乳膏劑）檢驗(yàn)項(xiàng)目裝量微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第20頁

藥材提取液濃縮液煎膏劑(膏滋)流浸膏劑與浸膏劑（半流體或固體）（無植物組織與細(xì)胞，故無顯微判別）2024/4/19新版中藥制劑分析第21頁1.煎膏劑(膏滋)

藥材用水煎煮、去渣濃縮后，加煉蜜或糖制成半流體制劑應(yīng)無焦臭、異味，無糖結(jié)晶析出檢驗(yàn)項(xiàng)目相對(duì)密度不溶物

裝量微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第22頁2.流浸膏劑與浸膏劑（半/固）藥材用適宜溶劑提取，蒸去部分或全部溶劑，調(diào)整濃度至要求標(biāo)準(zhǔn)而制成制劑。1ml流浸膏——1g原藥材1g浸膏——2~5g原藥材檢驗(yàn)項(xiàng)目裝量微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第23頁生產(chǎn)提取溶劑大多為水或稀醇檢測(cè)時(shí)普通需經(jīng)有機(jī)提取后分析（1）有效成份明確且有適當(dāng)方法，測(cè)定有效成份含量；（2）有效成份不明或無定量方法，可測(cè)一定溶劑浸出物含量；（3）對(duì)于流浸膏，有測(cè)總固體量以控制其質(zhì)量。2024/4/19新版中藥制劑分析第24頁（四）固體制劑

藥材提取物、藥材粉末加賦形劑、制備而成。丸劑、膠劑、顆粒劑、散劑、片劑、膠囊劑、錠劑、膠劑、茶劑、栓劑（有植物組織與細(xì)胞，可做顯微判別）2024/4/19新版中藥制劑分析第25頁1.丸劑

指藥材細(xì)粉或藥材提取物加適宜黏合劑或其它輔料制成球形或類球形制劑，分為蜜丸、水丸、水蜜丸、糊丸、濃縮丸、蠟丸、微丸等。檢驗(yàn)項(xiàng)目水分、重量差異(按丸或重量)裝量差異(按一次劑量分裝)溶散時(shí)限、微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第26頁水分要求：大蜜丸、小蜜丸、濃縮蜜丸≤15.0%水蜜丸、濃縮水蜜丸≤12.0%水丸、糊丸、濃縮水丸≤9.0%裝量差異：溶散時(shí)限：6丸，照崩解時(shí)限檢驗(yàn)法2024/4/19新版中藥制劑分析第27頁重量差異:第一法（按丸服用）每次最高丸數(shù)或丸（＞1.5g）10份高低高低第二法（按重量服）每份10丸，10份高低2024/4/19新版中藥制劑分析第28頁2.散劑

一個(gè)或各種藥材混合制成粉末狀制劑，分內(nèi)服和外用散劑。檢驗(yàn)項(xiàng)目均勻度水分裝量差異微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第29頁均勻度：取供試品適量置光滑紙上，平鋪約5cm2，將其表面壓平，在亮處觀察，應(yīng)展現(xiàn)均勻色澤，無花紋、色斑。水分：≤9.0%2024/4/19新版中藥制劑分析第30頁3.顆粒劑

藥材提取物與適宜輔料或藥材細(xì)粉制成顆粒狀制劑，分為可溶性顆粒劑、混懸性顆粒劑、泡騰性顆粒劑。檢驗(yàn)項(xiàng)目粒度水分溶化性裝量差異微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第31頁粒度＞1號(hào)篩＜4號(hào)篩≤8%(左右輕輕往返3分鐘)溶化裝量差異單劑量包裝同丸劑多劑量包裝最低裝量檢驗(yàn)法(附錄ⅫC)平均裝量≥標(biāo)示裝量每個(gè)裝量≥限量%

2024/4/19新版中藥制劑分析第32頁4.片劑

藥材提取物加藥材細(xì)粉或藥材細(xì)粉與適宜輔料混勻壓制而成園片狀或異形片狀制劑，分為浸膏片、半浸膏片和全粉片。檢驗(yàn)項(xiàng)目重量差異崩解時(shí)限微生物程度原粉片≤30′浸膏片≤1h薄膜衣片≤1h2024/4/19新版中藥制劑分析第33頁5.膠囊硬膠囊劑軟膠囊劑腸溶膠囊劑檢驗(yàn)項(xiàng)目水分重量差異崩解時(shí)限微生物程度2024/4/19新版中藥制劑分析第34頁(五)氣體制劑氣霧劑噴霧劑2024/4/19新版中藥制劑分析第35頁取樣判別提取純化檢驗(yàn)含量測(cè)定三.中藥及其制劑中待測(cè)成份提取分離與純化方法2024/4/19新版中藥制劑分析第36頁（一）提取方法1.萃取法

利用溶質(zhì)在兩種互不相溶溶劑中溶解度不一樣，使物質(zhì)從一個(gè)溶劑轉(zhuǎn)移到另一個(gè)溶劑中，將測(cè)定組分提取出來方法。2024/4/19新版中藥制劑分析第37頁（1）萃取溶劑選擇正丁醇

——用于皂苷類醋酸乙酯

——用于黃酮類氯仿

——用于生物堿類乙醚、石油醚

——用于揮發(fā)油（2）水相pH選擇酸性成份：比其pKa低1~2個(gè)pH單位堿性成份：比其pKa高1~2個(gè)pH單位2024/4/19新版中藥制劑分析第38頁（3）儀器和提取次數(shù)分液漏斗判別——1次含量測(cè)定——3~4次（4）酒劑和酊劑——先揮去乙醇（5）預(yù)防和消除乳化2024/4/19新版中藥制劑分析第39頁2.冷浸法

樣品置溶劑里，室溫下浸泡一段時(shí)間提取方法。適用范圍適宜植物性粉末不宜動(dòng)物性粉末特點(diǎn)適宜易溶出組分適宜遇熱不穩(wěn)定藥品費(fèi)時(shí)（8~24小時(shí)）2024/4/19新版中藥制劑分析第40頁親脂性←→親水性石油醚

苯氯仿

乙醚乙酸乙酯

丙酮乙醇

甲醇水2024/4/19新版中藥制劑分析第41頁3.回流提取法

樣品置有機(jī)溶劑中加熱回流提取方法特點(diǎn)加緊溶出速度，省時(shí)適宜受熱穩(wěn)定藥品適宜較難溶出組分儀器普通回流裝置經(jīng)過更換溶劑，使提取更完全2024/4/19新版中藥制劑分析第42頁4.連續(xù)回流提取樣品置有機(jī)溶劑中加熱，蒸發(fā)溶劑經(jīng)冷凝流回樣品管提取方法。特點(diǎn)節(jié)約溶劑，提升提取效率適宜受熱穩(wěn)定藥品費(fèi)時(shí)儀器索氏提取器2024/4/19新版中藥制劑分析第43頁5.水蒸氣蒸餾適合用于具揮發(fā)性可隨水蒸氣蒸出組分測(cè)定。麻黃堿、檳榔堿、丹皮酚、揮發(fā)油2024/4/19新版中藥制劑分析第44頁6.超聲提取法利用超聲波助溶作用進(jìn)行提取超聲波振蕩器（超聲波清洗器）簡(jiǎn)便、省時(shí)、提取率高原理：超聲波在液體中以疏密相間形式向物體輻射，出現(xiàn)“空化”現(xiàn)象（氣泡形成、產(chǎn)生及破裂現(xiàn)象），形成超出1000個(gè)大氣壓沖擊力。2024/4/19新版中藥制劑分析第45頁7.超臨界流體萃?。⊿FE法）超臨界流體：當(dāng)壓力和溫度超出氣體臨界點(diǎn)時(shí)所形成單一相態(tài)。是一個(gè)處于超臨界點(diǎn)之上流體，是介于氣體與液體之間一個(gè)物相，兼有氣體與液體一些特征。2024/4/19新版中藥制劑分析第46頁SFE工藝流程2024/4/19新版中藥制劑分析第47頁超臨界流體萃取與化學(xué)法萃取相比有以下突出優(yōu)點(diǎn)：（1）它含有與液體相同密度，因而含有與液體相同較強(qiáng)溶解能力；（2）溶質(zhì)在流體中擴(kuò)散系數(shù)與氣體相同，含有傳質(zhì)快，提取時(shí)間短優(yōu)點(diǎn)；（3）超臨界流體表面張力為零，易滲透到樣品中，帶走測(cè)定組分；2024/4/19新版中藥制劑分析第48頁（4）超臨界流體在通常狀態(tài)下為氣體，萃取后溶劑可馬上變成氣體而逸出，易到達(dá)濃集目標(biāo)；（5）CO2是一個(gè)不活潑氣體,萃取過程不發(fā)生化學(xué)反應(yīng),且屬于不燃性氣體,無味、無臭、無毒，故安全性好；（6）CO2價(jià)格廉價(jià)，純度高，輕易取得，且在生產(chǎn)過程中循環(huán)使用，從而降低成本；（7）該技術(shù)易與其它儀器聯(lián)用實(shí)現(xiàn)自動(dòng)化。2024/4/19新版中藥制劑分析第49頁（二）純化方法1.萃取法利用藥品與雜質(zhì)溶解性能不一樣進(jìn)行分離。例：含生物堿樣品H+H2O水層↓棄去氨水游離生物堿↓氯仿2024/4/19新版中藥制劑分析第50頁2.柱色譜法（1）保留測(cè)定組分在柱上，洗去雜質(zhì)，再用適當(dāng)溶劑洗下組分（2）保留雜質(zhì)于柱上慣用固定相硅膠氧化鋁大孔吸附樹脂2024/4/19新版中藥制劑分析第51頁第二節(jié)中藥及其制劑分析方法一、取樣與樣品保留中藥檢驗(yàn)，普通多采取預(yù)計(jì)取樣，即將整批中藥抽出一部分含有代表性供試樣品進(jìn)行分析、觀察，得出規(guī)律性“預(yù)計(jì)”一個(gè)方法。取樣代表性直接影響到檢定結(jié)果正確性2024/4/19新版中藥制劑分析第52頁1.供試品要含有一定代表性因?yàn)橹兴幐倪M(jìn)各不相同，有藥材，有制劑，有液體、固體。即使同為固體，還有粉末狀、顆粒狀等形態(tài)上不一樣，所以，取樣時(shí)應(yīng)分別對(duì)待，要考慮到取樣科學(xué)性、真實(shí)性、代表性。中藥材取樣要符合均勻、合理標(biāo)準(zhǔn)。2024/4/19新版中藥制劑分析第53頁2.必須嚴(yán)格按照要求取樣方法進(jìn)行取樣取樣部位不妥，操作方法不合理，會(huì)影響所取得供試品代表性。普通從包裝四角和中間五處取樣，袋裝可從中間直接插入，桶裝可在桶中央取樣，深度可達(dá)1/3~2/3處。數(shù)量最少夠3次檢驗(yàn)用量珍貴藥可酌情取樣。2024/4/19新版中藥制劑分析第54頁取得樣品可裝入清潔、干燥、具塞磨口容器中或密封塑料袋中，并標(biāo)上品名、批號(hào)、數(shù)量、取樣日期及取樣人等.取樣人員應(yīng)熟悉各類中成藥理化性質(zhì)，對(duì)外觀性狀已發(fā)生改變者應(yīng)分別取樣，裝入不一樣容器內(nèi)。2024/4/19新版中藥制劑分析第55頁（一）中藥材取樣法取樣前，應(yīng)注意品名、產(chǎn)地、規(guī)格等級(jí)及包件式樣是否一致，檢驗(yàn)包裝完整性、清潔程度以及有沒有水跡、霉變或其它物質(zhì)污染等情況，詳細(xì)統(tǒng)計(jì)。凡有異常情況包件，應(yīng)單獨(dú)檢驗(yàn)。2024/4/19新版中藥制劑分析第56頁從同批藥材包件中抽取檢定用樣品標(biāo)準(zhǔn)藥材總包件數(shù)<100件，取樣5件；100～1000件，按5％取樣；>1000件，超出部分按1％取樣；>5件，逐件取樣；珍貴藥材，不論包件多少均逐件取樣。2024/4/19新版中藥制劑分析第57頁對(duì)破碎、粉末狀或大小在1cm以下藥材，可用采樣器(探子)取樣，每件最少在不一樣部位抽取2～3份樣品,包件少抽取總量應(yīng)不少于試驗(yàn)用量3倍；2024/4/19新版中藥制劑分析第58頁包件多，每一包件取樣量要求普通藥材100～500g；粉末狀藥材25g；珍貴藥材5～10g；個(gè)體大藥材，依據(jù)實(shí)際情況抽取代表性供試品。如藥材個(gè)體較大時(shí)，可在包件不一樣部位（包件大應(yīng)從10cm以下深處）分別抽取。2024/4/19新版中藥制劑分析第59頁將所取樣品混合拌勻，即為總樣品。對(duì)個(gè)體較小藥材，應(yīng)攤成正方形，依對(duì)角線劃“×”字，使分為四等分，取用對(duì)角兩份（即“四分法”）；再如上操作，重復(fù)數(shù)次至最終剩下量足夠供檢驗(yàn)用，此為平均樣品。平均樣品量普通不得少于試驗(yàn)所需用3倍數(shù)，即1/3供試驗(yàn)室分析用，另1/3供復(fù)核用，其余1/3則為留樣保留，保留期最少1年。2024/4/19新版中藥制劑分析第60頁（二）中藥制劑取樣法

各類中藥制劑取樣量最少夠3次檢測(cè)用量，珍貴藥可酌情取樣。2024/4/19新版中藥制劑分析第61頁粉狀中藥制劑（散或顆粒劑）普通取樣100g，可從包裝上中下三層或等間隔部位取樣若干?；靹?，然后按“四分法”從中取出所需供試量。2024/4/19新版中藥制劑分析第62頁液體中藥制劑（口服液、酊劑、酒劑、糖漿）普通取樣200ml，同時(shí),須注意容器底部是否有沉渣，如有應(yīng)徹底搖勻，均勻取樣。固體中成藥（丸劑、片劑）普通片劑取量200片，未成片前已制成顆?？扇?00g。丸劑普通取10丸，2024/4/19新版中藥制劑分析第63頁膠囊取樣不得少于20個(gè)膠囊，傾出其中藥品并仔細(xì)將附著在膠囊上藥品刮下，合并，混勻稱定空膠囊重量，由原來總重量減去，即為膠囊內(nèi)藥品重量，普通取樣量100g。2024/4/19新版中藥制劑分析第64頁

注射液取樣要經(jīng)過兩次，配制后在灌注、熔封、滅菌前進(jìn)行一次取樣，經(jīng)滅菌后注射液須按原方法進(jìn)行，分析檢驗(yàn)合格后方可供藥用。已封好安瓿取樣量普通為200支。

其它劑型中藥制劑可依據(jù)詳細(xì)情況隨意抽取一定數(shù)量，作為隨機(jī)抽樣。2024/4/19新版中藥制劑分析第65頁二、中藥及其制劑判別試驗(yàn)判定有臨床療效已知成份黃連小檗堿（抗菌消炎）麻黃麻黃堿（支氣管哮喘）烏頭烏頭堿（毒性）洋地黃強(qiáng)心苷（強(qiáng)心）延胡索延胡索乙素（鎮(zhèn)痛）2024/4/19新版中藥制劑分析第66頁中藥及其制劑定性判別指檢定藥材真實(shí)性方法性狀判別顯微判別理化判別2024/4/19新版中藥制劑分析第67頁（一）

性狀判別系指對(duì)中藥外觀形狀、顏色、氣味等特征進(jìn)行描述。天南星科植物半夏干燥塊莖性狀描述為：本品呈類球形，有稍偏斜，直徑1～1.5cm。表面白色或淺黃色，頂端有凹陷莖痕，周圍密布麻點(diǎn)狀根痕；下面鈍圓，較光滑。質(zhì)堅(jiān)實(shí)，斷面雪白，富粉性。無臭，味辛辣、麻舌而剌喉。2024/4/19新版中藥制劑分析第68頁（二）顯微判別

1.顯微組織判別

顯微組織指用顯微鏡觀察藥材切片、粉末、解離組織或表面制片或中成藥組織、細(xì)胞、內(nèi)含物等特征。一樣取樣要求代表性，中成藥應(yīng)依據(jù)不一樣劑型適當(dāng)處理后制片，藥典中有不少中成藥判別都是采取粉末顯微判別方法2024/4/19新版中藥制劑分析第69頁2.顯微化學(xué)反應(yīng)判別顯微化學(xué)反應(yīng)利用一些中藥中所含有物質(zhì)理化性質(zhì)進(jìn)行定性判別?？蓽y(cè)定其理化常數(shù)和觀察理化性質(zhì)，也可選擇適當(dāng)化學(xué)反應(yīng)來檢驗(yàn)。如中藥中有香豆素類成份，可用顏色反應(yīng)或熒光反應(yīng)進(jìn)行分析。2024/4/19新版中藥制劑分析第70頁丸劑、片劑、膠囊劑、散劑快速，簡(jiǎn)便，覆蓋面大選擇標(biāo)準(zhǔn)：1、應(yīng)選有專屬性特征進(jìn)行判別2、多起源藥材應(yīng)選擇共有特征進(jìn)行判別2024/4/19新版中藥制劑分析第71頁安宮牛黃丸1、水牛角濃縮粉2、麝香3、珍珠4、朱砂5、雄黃6、黃連7、梔子8、郁金9、黃芩12134567892024/4/19新版中藥制劑分析第72頁（三）理化判別用化學(xué)或物理方法，對(duì)藥材中所含一些化學(xué)成份進(jìn)行判別試驗(yàn)。

1.顯微化學(xué)反應(yīng)

2.熒光法判別，將藥材（包含斷面、浸出物等）或經(jīng)酸、堿處理后，置紫外光燈下約10cm處觀察所產(chǎn)生熒光。

3.微量升華法判別,適合對(duì)一些會(huì)有升華性成份藥材及制劑判別，如薄荷升華物為無色針晶簇（薄荷醇）

4.顏色反應(yīng)及沉淀反應(yīng)法2024/4/19新版中藥制劑分析第73頁抗干擾能力差組分試劑顯色、↓、↑、熒光例

二妙丸中蒼術(shù)判別蒼術(shù)酮蒼術(shù)炔2024/4/19新版中藥制劑分析第74頁5.色譜判別TLC法——應(yīng)用最多（Rf、顏色、熒光）GC法

——適合用于含揮發(fā)性成份藥品

HPLC法——常與含量測(cè)定同時(shí)進(jìn)行2024/4/19新版中藥制劑分析第75頁陰、陽對(duì)照法陽性對(duì)照：將要判別藥材按制劑工藝處理，再按判別方法提取溶液。

陰性對(duì)照：把制劑中要判別藥材除去，用剩下各味藥按制劑工藝處理，再按判別方法提取溶液。2024/4/19新版中藥制劑分析第76頁例

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×××

陰樣陽對(duì)品對(duì)2024/4/19新版中藥制劑分析第77頁例大補(bǔ)陰丸黃柏TLC法判別

樣品對(duì)照藥材小檗堿2024/4/19新版中藥制劑分析第78頁薄層板選擇硅膠G板（可加0.3%~0.5%CMC-Na）氧化鋁板——慣用于生物堿類藥品聚酰胺板——慣用于黃酮類及酚類藥品維生素板——慣用于氨基酸類藥品2024/4/19新版中藥制劑分析第79頁三、中藥及其制劑雜質(zhì)檢驗(yàn)中藥及其制劑普通可允許少許雜質(zhì)存在，而中藥注射劑則不允許或只允許微量雜質(zhì)存在，但均要做限量檢驗(yàn)，以控制其質(zhì)量。除雜質(zhì)檢驗(yàn)外，與劑型相關(guān)普通項(xiàng)目檢驗(yàn)也屬此項(xiàng)內(nèi)容。另外，還有一些普通質(zhì)量檢驗(yàn)項(xiàng)目和必要理化常數(shù)測(cè)定等均為檢驗(yàn)范圍。2024/4/19新版中藥制劑分析第80頁雜質(zhì)檢驗(yàn)：雜質(zhì)限量檢驗(yàn)、灰分測(cè)定、酸堿度檢驗(yàn)、氯化物檢驗(yàn)、特殊雜質(zhì)與參偽物檢驗(yàn)等。普通理化檢驗(yàn)項(xiàng)目：浸出物及總固體測(cè)定、相對(duì)密度測(cè)定、旋光度測(cè)定、折光率測(cè)定、水分測(cè)定、干燥失重測(cè)定、乙醇含量測(cè)定等。2024/4/19新版中藥制劑分析第81頁（一）水分測(cè)定法1、烘干法適合用于不含或少含揮發(fā)油成份藥品

2-5g供試品－置于扁形稱量瓶中－在100至105攝氏度干燥5h－置于干燥器中放置30min－稱重－再干燥1h－連續(xù)兩次稱重差異不超出5mg（而在常壓恒溫干燥法中是干燥至恒重）－依據(jù)失重計(jì)算含水百分率2024/4/19新版中藥制劑分析第82頁2、甲苯法水與甲苯在69.3攝氏度共沸蒸出，搜集餾出液，待分層后由刻度管測(cè)出所含水量適合用于含揮發(fā)性成份樣品水分測(cè)定2024/4/19新版中藥制劑分析第83頁3、減壓干燥法適合用于含揮發(fā)性成份珍貴藥品減壓干燥器相對(duì)于常壓，減壓條件下(<20mmHg)干燥溫度更低，干燥時(shí)間更短。更適合用于熔點(diǎn)低，受熱不穩(wěn)定藥品。2024/4/19新版中藥制劑分析第84頁4、氣相色譜法無水乙醇浸提，抽提出樣品中水分以純水作為標(biāo)準(zhǔn)對(duì)照進(jìn)樣量：5ul載體：直徑為0.25－0.18mm二乙烯苯－乙基乙烯苯型高分子多孔小球柱溫：140－150攝氏度熱導(dǎo)監(jiān)測(cè)器外標(biāo)法計(jì)算2024/4/19新版中藥制劑分析第85頁水分檢驗(yàn)法小結(jié)以藥品性質(zhì)分：不含或少含揮發(fā)性成份－烘干法含較多揮發(fā)性成份珍貴藥品－減壓干燥法普通藥品－甲苯法不論是否含揮發(fā)性成份－氣相色譜法2024/4/19新版中藥制劑分析第86頁（二）總灰分和酸不溶性成份檢驗(yàn)生理灰分＋外來無機(jī)雜質(zhì)生理灰分:生藥本身經(jīng)灰化后殘留不揮發(fā)性無機(jī)鹽一些中藥生理灰分差異較大，總灰分不能說明外來雜質(zhì)量，所以要測(cè)酸不溶性灰分。

1.總灰分2024/4/19新版中藥制劑分析第87頁2.酸不溶性灰分測(cè)定法生理灰分－溶于鹽酸碳酸鹽外來雜質(zhì)－不溶于鹽酸硅酸鹽方法：總灰分＋10ml稀鹽酸－水浴加熱10min－無灰濾紙濾過－將殘?jiān)蜑V紙一起轉(zhuǎn)入坩鍋－炭化，炙灼至恒重－得酸不溶性灰分若酸不溶性灰分過高說明泥砂含量高例：海金沙酸不溶性灰分不得超出15%2024/4/19新版中藥制劑分析第88頁（三）重金屬檢驗(yàn)

因?yàn)榄h(huán)境污染和使用農(nóng)藥原因，輕易在藥材中引入重金屬雜質(zhì)。詳細(xì)參考教材“藥品雜質(zhì)檢驗(yàn)”一章

2024/4/19新版中藥制劑分析第89頁（四）砷鹽檢驗(yàn)

中藥制劑原料藥材因?yàn)槭艹輨?、殺蟲劑和化學(xué)肥料影響而引入檢驗(yàn)方法：1、古蔡法Ch.P()書上P.362、二乙基二硫代氨基甲酸銀法Ch.P()Ag(DDC)法3、原子吸收分光光度法（專屬、靈敏）2024/4/19新版中藥制劑分析第90頁檢驗(yàn)前樣品有機(jī)破壞堿融法－加堿后熾灼破壞，砷形成硝酸鹽，可防止砷揮發(fā)損失濕法破壞－含糖量高制劑

硝酸鎂乙醇溶液破壞（日本藥局方）－中藥制劑

2024/4/19新版中藥制劑分析第91頁（五）殘留農(nóng)藥檢驗(yàn)

藥用植物在栽培過程中為降低蟲害

，常需要噴灑農(nóng)藥,土壤中殘余農(nóng)藥也可能引入藥材中

接觸農(nóng)藥不明樣品－測(cè)定總有機(jī)氯量和總有機(jī)磷量

使用過已知農(nóng)藥樣品－采取氣相色譜法檢驗(yàn)相關(guān)農(nóng)藥

2024/4/19新版中藥制劑分析第92頁總氯量測(cè)定

取供試品細(xì)粉適量－加約10倍量乙腈：水

(65:35)－高速攪拌后過濾－取濾液用石油醚(30℃~60℃)萃取出農(nóng)藥－濃縮萃取液加于不含氯化物濾紙上－待溶劑揮干后－照氧瓶燃燒法燃燒破壞－取吸收液－按硫氰酸銨呈色法測(cè)定氯量

2024/4/19新版中藥制劑分析第93頁供試品用乙腈-水提取，植物藥中纖維、蛋白質(zhì)、糖、淀粉、脂肪等不能被提出。農(nóng)藥為脂溶性,再用石油醚萃取出農(nóng)藥,極性和中等極性有機(jī)成份可深入除去。2024/4/19新版中藥制劑分析第94頁

氧瓶燃燒破壞后有機(jī)氯轉(zhuǎn)化為無機(jī)氯,并吸收入水中。

取吸收液,加入硫氰酸汞試液,可定量生難解離氯化汞，并置換出相當(dāng)量硫氰酸根離子,再加入硫酸鐵銨溶液,生成紅色氰酸鐵配位離子，于460nm波優(yōu)點(diǎn)有最大吸收,吸收度與氯離子量呈線性關(guān)系,故可用比色法測(cè)定含氯量。2Cl-+Hg(SCN)2

一一→HgC12+2SCN-6SCN-+Fe3+一一→[Fe(SCN)6]3-2024/4/19新版中藥制劑分析第95頁2.總磷量測(cè)定

步驟：

取供試品細(xì)粉適量－加約10倍量乙腈：水

(65:35)－高速攪拌后過濾－取濾液用石油醚(30℃~60℃)萃?。^弗羅里(Florisil)硅土柱－用乙醚-石油醚(30℃~60℃)混合溶液洗脫－搜集洗脫液,濃縮后－用氧瓶燃燒法破壞處理－再用磷鉬酸比色法測(cè)定。2024/4/19新版中藥制劑分析第96頁原理：

磷酸鹽與鉬酸銨試液、硫酸試液反應(yīng)生成磷鉬酸,再與氨基萘磺酸試液反應(yīng),被還原為鉬藍(lán),在820nm處測(cè)定吸收度,同法制備標(biāo)準(zhǔn)曲線,按標(biāo)準(zhǔn)曲線法測(cè)定含量。

2024/4/19新版中藥制劑分析第97頁氣相色譜法

主要用于已知農(nóng)藥樣品測(cè)定分離效能高,含有高靈敏度專屬檢測(cè)器,是對(duì)殘留農(nóng)藥進(jìn)行定性和定量分析最慣用方法。2024/4/19新版中藥制劑分析第98頁

先用非極性有機(jī)溶劑萃取出殘留農(nóng)藥,普通需再過硅藻土或弗羅里硅土柱深入純化。

固定液：硅氧烷類,如OV-17,OV-21,SE30等載氣：氮?dú)鉁y(cè)定有機(jī)氯：電子捕捉檢測(cè)器(ECD）測(cè)定有機(jī)磷：火焰光度檢測(cè)器(FPD)火焰光度檢測(cè)器是測(cè)定硫、磷化合物專用檢測(cè)器。當(dāng)含磷化合物在富氫火焰中燃燒時(shí),產(chǎn)生HPO將發(fā)射526nm特征光,可專屬性地檢測(cè)磷。2024/4/19新版中藥制劑分析第99頁

比如：測(cè)定中藥中有機(jī)磷農(nóng)藥

氣相色譜條件:柱長(zhǎng)2m,內(nèi)徑3mm,擔(dān)體為ChromosorbW/AW-DWCS,涂布2.5%SE-30和3%QF-1混合固定液,火焰光度檢測(cè)器檢測(cè),進(jìn)樣口溫度220℃,柱溫180℃,載氣為氮?dú)?。?duì)照品溶液制備:精密稱取待測(cè)農(nóng)藥對(duì)照品適量,加苯或氯仿定量稀釋成每1ml含1mg溶液,作為貯備液。臨用前取貯備液適量,加二氯甲烷稀釋成每lml含1ug溶液,作為對(duì)照品溶液。2024/4/19新版中藥制劑分析第100頁供試品溶液制備:精密稱取中藥細(xì)粉1Og,置具塞錐形瓶中,加中性氧化鋁0.5g,精密加入二氯甲烷2Oml,振搖30min，

濾過,取續(xù)濾液進(jìn)樣。

若農(nóng)藥殘留量過低,可取濾液濃縮至一定體積后取樣。2024/4/19新版中藥制劑分析第101頁中藥中有機(jī)氯類農(nóng)藥殘留量測(cè)定方法方法:

采取在線法提取,硫酸磺化后直接測(cè)定法;選取SE－54和SPB-1701毛細(xì)管柱,經(jīng)過柱程序升溫伎倆,對(duì)十種農(nóng)藥進(jìn)行分離測(cè)定。

結(jié)果:SPB-1071分離效果優(yōu)于SE-54柱;十種農(nóng)藥在1ng/m~100ng/m1濃度范圍內(nèi)與峰值呈良好線性關(guān)系,其檢測(cè)限范圍為0.5pg-1.5pg.

2024/4/19新版中藥制劑分析第102頁

依據(jù)實(shí)際測(cè)定結(jié)果,提議中藥材和中成藥中總六六六、總滴滴涕、五氯硝基苯和艾氏劑允許限量分別為0.1、0.1、0.1、0.02mg/kg.本方法快速、簡(jiǎn)便、準(zhǔn)確、含有良好通用性。2024/4/19新版中藥制劑分析第103頁

中藥材農(nóng)藥污染現(xiàn)實(shí)狀況

污染路徑：直接污染：種植過程中農(nóng)藥直接噴灑間接污染：環(huán)境（水源、大氣、土壤等）對(duì)藥材污染采收、加工、儲(chǔ)備、運(yùn)輸過程中污染2024/4/19新版中藥制劑分析第104頁污染特點(diǎn)：普遍性種植藥材中含量高，野生藥材中痕量檢出同一地域同種藥材，同種藥材不一樣部位殘留量有較大差異2024/4/19新版中藥制劑分析第105頁對(duì)應(yīng)辦法和對(duì)策：制訂標(biāo)準(zhǔn)抗蟲藥材品種選育生物防治及生物農(nóng)藥使用科學(xué)地使用農(nóng)藥采收、加工、包裝質(zhì)量管理藥材種植環(huán)境選擇大力發(fā)展有機(jī)中藥材生產(chǎn)2024/4/19新版中藥制劑分析第106頁四、中藥及其制劑含量測(cè)定制劑中所選被測(cè)成份主要是：化學(xué)結(jié)構(gòu)已經(jīng)明確有效成份；能大致明確某類主要活性物質(zhì)；能反應(yīng)某味主要藥品特征指標(biāo)性成份；劇毒性成份或珍貴藥材成份。2024/4/19新版中藥制劑分析第107頁慣用方法：高效液相色譜法；氣相色譜法；薄層色譜法；紫外可見分光光度法；化學(xué)分析法重量分析法容量分析法2024/4/19新版中藥制劑分析第108頁（一）高效液相色譜法

內(nèi)標(biāo)法外標(biāo)法藥品分析大多采取外標(biāo)法2024/4/19新版中藥制劑分析第109頁

1.系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)包含色譜柱理論板數(shù)、分離度、重復(fù)性和拖尾因子等四個(gè)指標(biāo)。其中分離度和重復(fù)性更具實(shí)用意義。

系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)即用各品種項(xiàng)下要求對(duì)照品和條件對(duì)色譜系統(tǒng)進(jìn)行試驗(yàn)，應(yīng)符合要求。不然可對(duì)色譜分離條件作適當(dāng)調(diào)整。2024/4/19新版中藥制劑分析第110頁（1）色譜柱理論板數(shù)（n）考查柱效假如測(cè)得理論板數(shù)低于各品種項(xiàng)下要求最小理論板數(shù)，應(yīng)改變色譜柱一些條件（如柱長(zhǎng)、載體性能、色譜柱充填優(yōu)劣等），使理論板數(shù)到達(dá)要求。2024/4/19新版中藥制劑分析第111頁

（2）分離度（R）考查分離效果在要求條件下，注入對(duì)照液或供試液，統(tǒng)計(jì)色譜圖，按下式計(jì)算待測(cè)峰（定量峰）與相鄰峰分離度。除另有要求，分離度應(yīng)大于1.5。

2024/4/19新版中藥制劑分析第112頁（3）重復(fù)性考查測(cè)量精密度在要求條件下，取一定量對(duì)照液，連續(xù)進(jìn)樣3～5次，除另有要求外，其峰面積測(cè)量值相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差（RSD）應(yīng)小于2.0％。2024/4/19新版中藥制劑分析第113頁（4）拖尾因子（T）

考查色譜峰對(duì)稱性，確保測(cè)量準(zhǔn)確度。尤其是采取峰高法測(cè)量時(shí)，應(yīng)檢驗(yàn)待測(cè)峰T是否符合要求。除另有要求外，T應(yīng)在0.95～1.05之間。式中:W0.05h為0.05峰高處峰寬；d1為峰極大至峰前沿之間距離。2024/4/19新版中藥制劑分析第114頁

2.對(duì)照品溶液制備

3.供試品溶液制備

4.測(cè)定法

將上述兩種溶液分別注入色譜儀，統(tǒng)計(jì)色譜圖，按下式計(jì)算被測(cè)成份含量。（1）求出供試液中被測(cè)成份濃度C供

（2）求出藥品中被測(cè)成份含量C供＝C對(duì)A對(duì)A供C供X稀釋倍數(shù)含量（W/W）＝取樣量2024/4/19新版中藥制劑分析第115頁應(yīng)用實(shí)例

1.牛黃解毒片中黃芩含量測(cè)定本品由牛黃、大黃、黃芩、冰片、石膏等八味中藥制成。中國藥典以黃芩苷為指標(biāo)，采取HPLC測(cè)定其中黃芩含量。

（1）色譜條件與系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

固定相：用十八烷基硅烷鍵合硅膠；流動(dòng)相：甲醇-水-磷酸（45∶55∶0.2），流速1ml/min；檢測(cè)器：紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為315nm；理論塔板數(shù)按黃芩苷峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

2024/4/19新版中藥制劑分析第116頁（2）對(duì)照品溶液制備

精密稱取在60℃減壓干燥4小時(shí)黃芩苷對(duì)照品適量，以甲醇溶解配成每1ml中含31.2μg對(duì)照品溶液。2024/4/19新版中藥制劑分析第117頁

（3）供試品溶液制備

取牛黃解毒片20片，剝?nèi)ヌ且?，精密稱定（6.254g），研細(xì)，精密稱取1.045g，加70%乙醇30ml，超聲處理20分鐘，放冷，濾過，濾液置50ml量瓶中，用少許70%乙醇分次洗滌容器和殘?jiān)?，洗液濾于同一量瓶中，加70%乙醇至刻度，搖勻，即得。

（4）測(cè)定法分別精密吸收對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μl進(jìn)樣，測(cè)得對(duì)照品及供試品中黃芩苷峰面積分別為A供＝4340441，A對(duì)＝3945856。2024/4/19新版中藥制劑分析第118頁▲求算藥品中黃芩苷含量黃芩苷（mg/片）=C供×稀釋倍數(shù)×平均片重取樣量

=34.3（μg/ml）×10×50ml×312.7mg/片1045mg

=0.51

-32024/4/19新版中藥制劑分析第119頁

2.藿香正氣水中厚樸酚與和厚樸酚總量測(cè)定本品由蒼術(shù)、陳皮、厚樸（姜制）、白芷等十味中藥制成液體制劑，每支裝10ml（標(biāo)示裝量）。其中厚樸為要藥之一，故《中國藥典》采取HPLC，以厚樸酚及和厚樸酚總量為指標(biāo)，控制厚樸含量。

（1）色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)

用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-乙腈-水（50:20:40）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)294nm。理論板數(shù)按厚樸酚峰計(jì)算應(yīng)不低于5000。

（2）對(duì)照品溶液制備

取厚樸酚、和厚樸酚對(duì)照品適量，精密稱定，分別加甲醇制成每1ml含厚樸酚0.2mg、和厚樸酚0.1mg溶液，搖勻，即得。2024/4/19新版中藥制劑分析第120頁

（3）供試品溶液制備

精密量取裝量項(xiàng)下本品5ml，加鹽酸2滴，用氯仿振搖提取3次，每次10ml，合并氯仿液，蒸干，殘?jiān)眉状既芙獠⒕芟♂屩?0ml，精密量取5ml，置10ml量瓶中，加甲醇至刻度，搖勻，即得。

（4）測(cè)定法

精密吸收上述三種溶液各10μl，分別注入液相色譜儀測(cè)定，依據(jù)對(duì)照品峰面積（AR厚AR和）以及供試品中被測(cè)成份峰面積（AS厚AS和）計(jì)算厚樸含量。本品每支含厚樸以厚樸酚（C18H18O2

）及和厚樸酚（C18H18O2）總量計(jì)，不得少于5.8mg。

2.和厚樸酚3.厚樸酚5.6.其它成份峰混合對(duì)照品.和厚樸酚厚樸酚樣品2024/4/19新版中藥制劑分析第121頁（二）氣相色譜法內(nèi)標(biāo)法慣用于藥品分析。外標(biāo)法少用，因?yàn)镚C進(jìn)樣量小，造成誤差較大。2024/4/19新版中藥制劑分析第122頁

1.色譜條件和系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)

（1）色譜條件

主要包含載氣、色譜柱、檢測(cè)器、固定液（相）測(cè)試溫度、進(jìn)樣量、載體等。其中檢測(cè)器種類、固定液品種、以及色譜柱材質(zhì)不得改變，其它如柱子內(nèi)徑和長(zhǎng)度、載體種類和粒度、固定液涂布濃度、載氣流速、柱溫、進(jìn)樣量、檢測(cè)器靈敏度等可適當(dāng)改變，以適應(yīng)系統(tǒng)適用性試驗(yàn)要求。2024/4/19新版中藥制劑分析第123頁①載氣：普通為N2，還可用H2、He。②色譜柱：玻璃柱和不銹鋼柱。③檢測(cè)器:

氫火焰離子檢測(cè)器（氫焰檢測(cè)器FID）適合有機(jī)物檢測(cè)，靈敏度高，應(yīng)用廣泛。熱導(dǎo)檢測(cè)器（TCD）無機(jī)物、有機(jī)物均可檢測(cè)，靈敏度較低，用于水分測(cè)定。電子捕捉檢測(cè)器（ECD） 適合含鹵素、硫、氮等電負(fù)性強(qiáng)元素化合物測(cè)定。用于農(nóng)殘測(cè)定。2024/4/19新版中藥制劑分析第124頁④柱填料：吸附劑：硅膠、氧化鋁等。較少用。高分子多孔小球：慣用二乙烯苯乙基乙烯苯型。

比如甲（乙）醇量、水分測(cè)定。涂漬固定液載體（多用）：慣用經(jīng)酸洗并硅烷化硅藻土⑤固定液：慣用甲基聚硅氧烷（如SE-30、OV-17等）、聚乙二醇（如PEG-20等），普通涂布濃度為5～25％。（2）系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)（同HPLC）2024/4/19新版中藥制劑分析第125頁2.內(nèi)標(biāo)法（同乙醇量測(cè)定法）（1）標(biāo)準(zhǔn)液制備（2）供試液制備（3）校正因子（f）測(cè)定內(nèi)標(biāo)法特有參數(shù)。2024/4/19新版中藥制劑分析第126頁

應(yīng)用實(shí)例

十滴水軟膠囊中樟腦含量測(cè)定本品由樟腦、干姜、大黃、小茴香、肉桂、辣椒、桉油等七味中藥制成，樟腦是其主成份之一，具升華性，故采取氣相色譜法，以樟腦為對(duì)照品，薄荷腦為內(nèi)標(biāo)物，對(duì)其進(jìn)行含量測(cè)定。

1.色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以聚乙二醇（PEG）-20M為固定相，涂布濃度為10%，柱溫150℃。理論塔板數(shù)按樟腦峰計(jì)算應(yīng)不低于，樟腦峰與內(nèi)標(biāo)物質(zhì)峰分離度應(yīng)大于2。

2024/4/19新版中藥制劑分析第127頁

2.校正因子測(cè)定精密稱取樟腦對(duì)照品（r）50mg，置10ml量瓶中，精密加入薄荷腦內(nèi)標(biāo)物質(zhì)(s)50mg，加無水乙醇至刻度，搖勻，精密量取1～2μl，注入氣相色譜儀，Ar=211948、As=215835，計(jì)算校正因子（保留四位有效數(shù)字）。

3.測(cè)定法取裝量差異項(xiàng)下內(nèi)容物，混勻，取0.8g，精密稱定（0.7956g），置具塞試管中，用無水乙醇提取5次，每次4ml，分取乙醇提取液，合并，轉(zhuǎn)移至25ml量瓶中，精密加入薄荷腦125mg，使溶解，加無水乙醇稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液(i＋s)。精密量取1～2μl，注入氣相色譜儀測(cè)定，Ai＝108685、As＝123544，計(jì)算即得（保留兩位有效數(shù)字)。2024/4/19新版中藥制劑分析第128頁（三）薄層色譜掃描法指用一定波長(zhǎng)光照射在經(jīng)薄層層析后薄層板上,對(duì)有吸收或能產(chǎn)生熒光或能猝滅熒光斑點(diǎn)進(jìn)行掃描,用反射法或透射法測(cè)定光強(qiáng)度,以檢測(cè)層析譜一個(gè)方法。本法自60年代末發(fā)展以來,迄今已成為含有靈敏、快速、分離效能高、重現(xiàn)性好等特點(diǎn)新興儀器分析法,在中藥及中成藥提取分離、定性判別、含量

2024/4/19新版中藥制劑分析第129頁TLC技術(shù)應(yīng)用近年來發(fā)展迅猛,儀器設(shè)備,技術(shù)水平不停提升,科學(xué)化,當(dāng)代化,自動(dòng)化及規(guī)范化正在不停普及?！吨袊幍渲兴幈由V彩色圖集》已成為從事中藥檢驗(yàn)工作TLC判定主要工具書《中藥薄層色譜判別》等許多相關(guān)TLC資料給我們提供了必不可少參考資料2024/4/19新版中藥制劑分析第130頁薄層色譜掃描法系統(tǒng)適應(yīng)性試驗(yàn)檢測(cè)靈敏度分離度R=2(d1-d2)/(W1+W2)※R≥1.0重復(fù)性，相對(duì)標(biāo)準(zhǔn)偏差RSD≤3.0％顯色后測(cè)定，RSD≤5.0％

2024/4/19新版中藥制劑分析第131頁本法為香豆素類成份慣用測(cè)定方法之一，樣品經(jīng)薄層分離后，于熒光燈下定位，利用香豆素類成份含有紫外吸收或能產(chǎn)生熒光特征，不經(jīng)顯色，直接進(jìn)行掃描測(cè)定。2024/4/19新版中藥制劑分析第132頁健脾丸中熊果酸含量測(cè)定[含量測(cè)定]取小蜜丸或重量差異項(xiàng)下大蜜丸，剪碎，混勻，取約4g，精密稱定，加水30ml，放置使溶散，濾過，殘?jiān)盟?0ml洗滌，在室溫干燥至呈松軟粉末狀或低溫干燥后研細(xì)，連同濾紙一并置索氏提取器內(nèi)，加乙醚適量，加熱回流提取4小時(shí)，提取液回收乙醚至干，殘?jiān)檬兔眩?0~60℃）浸泡兩次，每次10ml（浸泡約2分鐘），傾去石油醚，殘?jiān)舆m量三氯甲烷-無水乙醇（2:3）混合液使溶解，轉(zhuǎn)移至2ml量瓶?jī)?nèi)，并稀釋至刻度，搖勻，作為供試品溶液。2024/4/19新版中藥制劑分析第133頁另取熊果酸對(duì)照品適量，精密稱定，加無水乙醇制成每1ml含0.5mg溶液，作為對(duì)照品溶液。照薄層色譜法（附錄VIB）試驗(yàn)，精密吸收供試品溶液4ul與6ul，對(duì)照品溶液2ul與4ul，分別交叉點(diǎn)于同一硅膠G薄層板上，以環(huán)已烷-三氯甲烷-乙酸乙酯-冰醋酸（20:5:8:0.5）為展開劑，展開，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105℃加熱至斑點(diǎn)顯色清楚，取出，在薄層板上覆蓋一樣大小玻璃板，周圍用膠布固定，進(jìn)行掃描，波長(zhǎng)：λS=540nm，λR=700nm，測(cè)量供試品吸收度積分值與對(duì)照品吸收度積分值，計(jì)算，即得。本品含山楂以熊果酸（C30H48O3）計(jì)，小蜜丸每1g不得少于0.10mg；大蜜丸每丸不得少于0.90mg。2024/4/19新版中藥制劑分析第134頁第三節(jié)中藥中藥指紋圖譜研究新技術(shù)中藥材或中藥制劑經(jīng)適當(dāng)處理后，采取一定分析伎倆，得到能夠標(biāo)定該中藥材或中藥制劑特征共有峰圖譜。2024/4/19新版中藥制劑分析第135頁20世紀(jì)70年代及80年代，出現(xiàn)薄層掃描儀，日本和我國部分學(xué)者用薄層掃描儀得到復(fù)方成藥掃描圖作為色譜指紋圖嘗試應(yīng)用于藥材及成藥分析。

20世紀(jì)80年代及90年代，高效液相技術(shù)得到發(fā)展，同時(shí)植物藥中化學(xué)成份分離判定、活性成份不停說明，高效液相廣泛應(yīng)用于定性、定量分析。西方普遍采取高效液相色譜法對(duì)植物藥中已知及未知組分進(jìn)行控制，并形成對(duì)應(yīng)規(guī)范。當(dāng)前高效液相色譜法已成為當(dāng)前研究指紋圖譜主要伎倆。2024/4/19新版中藥制劑分析第136頁一.色譜指紋圖譜定義及基本屬性

1、色譜指紋圖譜定義及其特點(diǎn)中藥指紋圖譜判別借用了法醫(yī)學(xué)指紋判定概念。

利用當(dāng)代分析技術(shù)對(duì)中藥化學(xué)信息以圖形（圖像）方式進(jìn)行表征并加以描述。

2024/4/19新版中藥制劑分析第137頁當(dāng)代分析技術(shù)：光譜波譜色譜核磁共振X射線衍射各種技術(shù)聯(lián)用。

2024/4/19新版中藥制劑分析第138頁中藥化學(xué)信息：植物藥（包含起源于植物中藥材）提取物（包含中藥湯藥）與化學(xué)合成藥最根本區(qū)分是，它（即使是單味藥材）是各種化學(xué)成份混合體。這種各種化學(xué)成份綜合體組成了“中藥化學(xué)信息”。2024/4/19新版中藥制劑分析第139頁因?yàn)橹兴幆熜в筛鞣N成份協(xié)同作用或“相克作用”，中藥中化學(xué)信息有一定含糊性。只有部分化學(xué)信息（包含已知活性成份、已知非活性成份、一部分未知成份）可表征于指紋圖譜中。2024/4/19新版中藥制劑分析第140頁表征和描述：“表征”是將中藥化學(xué)信息經(jīng)過色譜圖（液相色譜圖、氣相色譜圖或薄層色譜圖）等方式進(jìn)行表示；“描述”是對(duì)指紋圖譜經(jīng)過計(jì)算、分析、比較、評(píng)價(jià)等過程，以技術(shù)參數(shù)、指紋特征等加以說明。中藥指紋圖譜研究須經(jīng)過制備、分析、比較、評(píng)價(jià)和校驗(yàn)等過程。2024/4/19新版中藥制劑分析第141頁分析色譜指紋圖譜要求“準(zhǔn)確識(shí)別”，不是“精密測(cè)量”；比較供試品與對(duì)照品色譜指紋圖譜要求“相同”，而不是“相同”；評(píng)價(jià)色譜比較結(jié)果，是依據(jù)色譜指紋圖譜含糊屬性，著眼于宏觀規(guī)律性特征分析，即著重識(shí)別完整色譜“圖貌”，而不是求索細(xì)枝末節(jié)。分析比較結(jié)果，是對(duì)供試品與對(duì)照品之間差異或一致性作出評(píng)價(jià)。2024/4/19新版中藥制劑分析第142頁特點(diǎn)經(jīng)過指紋圖譜特異性，有效判別樣品真?zhèn)?、產(chǎn)地有效控制樣品質(zhì)量.2024/4/19新版中藥制劑分析第143頁（1）整體性：將指紋圖譜作為一個(gè)整體來分析和比較它綜合特征以到達(dá)判別目標(biāo)。（2）含糊性：強(qiáng)調(diào)分析、比較指紋圖譜相同性，而不是完全相同。它是一個(gè)綜合、量化色譜判別伎倆。2.色譜指紋圖譜基本屬性2024/4/19新版中藥制劑分析第144頁色譜指紋圖譜在中藥質(zhì)量評(píng)價(jià)中能夠盡可能多地反應(yīng)中藥全貌。不需要清楚每一個(gè)組分化學(xué)結(jié)構(gòu)；不需要對(duì)每一個(gè)組分都進(jìn)行定量；只要求不一樣批號(hào)同一個(gè)藥品指紋圖譜保持一致。2024/4/19新版中藥制劑分析第145頁3.指紋圖譜研究目標(biāo)與意義

（1）對(duì)中藥質(zhì)量控制補(bǔ)充和提升。（2）控制中間體、成品一致性，降低批間差異2024/4/19新版中藥制劑分析第146頁中藥指紋圖譜建立是全方面反應(yīng)中藥內(nèi)在化學(xué)成份種類與數(shù)量，進(jìn)而反應(yīng)中藥質(zhì)量.現(xiàn)階段中藥有效成份絕大多數(shù)沒有明確，采取中藥指紋圖譜方式，將有效地表征中藥質(zhì)量。指紋圖譜已為國際社會(huì)所認(rèn)可，有利于中藥及產(chǎn)品進(jìn)入國際市場(chǎng)。2024/4/19新版中藥制劑分析第147頁

4.建立中藥指紋圖譜標(biāo)準(zhǔn)以系統(tǒng)化學(xué)成份和藥理學(xué)研究為依靠，應(yīng)表達(dá)系統(tǒng)性、特征性、重現(xiàn)性三個(gè)基本標(biāo)準(zhǔn)。2024/4/19新版中藥制劑分析第148頁“系統(tǒng)性”是指指紋圖譜所反應(yīng)化學(xué)成份應(yīng)包含中藥有效部位所含大部分成份種類，或指標(biāo)成份全部.“特征性“是指指紋圖譜中反應(yīng)化學(xué)成份信息（詳細(xì)表現(xiàn)為保留時(shí)間或位移值）是含有高度選擇性，這些信息綜合結(jié)果，將能特征地域分中藥真?zhèn)闻c優(yōu)劣，成為中藥本身化學(xué)條碼。2024/4/19新版中藥制劑分析第149頁

“重現(xiàn)性”是指所建立指紋圖譜，在要求方法與條件下，不一樣操作者和不一樣試驗(yàn)室應(yīng)能作出相同指紋圖譜，其誤差應(yīng)在允許范圍內(nèi)，這么才能夠確保指紋圖譜使用含有通用性和實(shí)用性，也是作為標(biāo)準(zhǔn)方法所必備特征之一。2024/4/19新版中藥制劑分析第150頁從整體上評(píng)價(jià)中藥內(nèi)在質(zhì)量中藥指紋圖譜建立標(biāo)準(zhǔn)盡可能多覆蓋全貌特征顯著，專屬性強(qiáng)，重現(xiàn)性好方便操作與應(yīng)用2024/4/19新版中藥制劑分析第151頁二.中藥指紋圖譜類型1.按測(cè)定伎倆分類中藥化學(xué)(成份)指紋圖譜中藥生物指紋圖譜2.按應(yīng)用對(duì)象分類中藥材指紋圖譜中藥原藥指紋圖譜中間產(chǎn)物指紋圖譜中藥制劑指紋圖譜2024/4/19新版中藥制劑分析第152頁三.中藥色譜指紋圖譜研究技術(shù)關(guān)鍵指紋圖譜技術(shù)在植物藥領(lǐng)域已應(yīng)用十余年，研究方法與研究思緒相對(duì)成熟，已形成共識(shí)，普遍采取HPLC、TLC、GC或NIR（近紅外技術(shù)），對(duì)植物藥有效組分進(jìn)行全成份質(zhì)量控制，即指紋圖譜技術(shù)2024/4/19新版中藥制劑分析第153頁(一)研究思緒與內(nèi)容1.研究對(duì)象確實(shí)定植物藥或中藥成份可分為：蛋白質(zhì)、脂類、糖及衍生物、有機(jī)酸、酚類、鞣質(zhì)、醌類、內(nèi)酯、香豆精、黃酮類、皂苷類、生物堿類、甾體類、萜類、揮發(fā)油等。

2024/4/19新版中藥制劑分析第154頁當(dāng)研究某個(gè)注射劑品種指紋圖譜時(shí)，首先必須調(diào)研相關(guān)文件、新藥申報(bào)資料（質(zhì)量部分和工藝部分）及其它研究結(jié)果，盡可能詳盡地了解藥材、中間體及成品中所含水量成份種類及其理化性質(zhì)，經(jīng)綜合分析后找出成品中藥效成妥或有效成份，作為成品或中間體指紋圖譜研究對(duì)象，即分析檢測(cè)目標(biāo)。如：黃芪含黃酮、皂苷及多糖；黃芪多糖注射液是以黃芪中多糖為原料，所以對(duì)黃芪多糖注射液進(jìn)行指紋圖譜研究時(shí)應(yīng)以多糖作為研究對(duì)象；研究其中間體時(shí)也應(yīng)以多糖為研究對(duì)象；研究原藥材指紋圖譜時(shí)應(yīng)把黃酮、皂苷及多糖作為研究對(duì)象。復(fù)方應(yīng)以君藥、臣藥中有效成份作為主要研究對(duì)象，佐使藥中成份可采取其它指紋圖譜方法進(jìn)行輔助、補(bǔ)充研究。2024/4/19新版中藥制劑分析第155頁2.研究?jī)?nèi)容依據(jù)國家藥品監(jiān)督管理局下發(fā)《中藥注射劑指紋圖譜研究技術(shù)要求》（暫行）要求，主要研究?jī)?nèi)容有原藥材、中間體、注射劑指紋圖譜，包括樣品名稱、起源、制備、測(cè)定方法、指紋圖譜及技術(shù)參數(shù)等研究項(xiàng)。2024/4/19新版中藥制劑分析第156頁二.研究方案

主要采取色譜法。各種色譜法是互補(bǔ)，應(yīng)依據(jù)研究對(duì)象實(shí)際需要和可能以及按照不一樣色譜技術(shù)特點(diǎn)和優(yōu)勢(shì)而定，目標(biāo)是確保方法重現(xiàn)性和確能反應(yīng)產(chǎn)品質(zhì)量主要化學(xué)成份。一個(gè)中藥制劑指紋圖譜應(yīng)能夠同時(shí)采取兩種或更各種方法進(jìn)行研究。指紋圖譜研究方法應(yīng)依據(jù)研究對(duì)象物理化學(xué)性質(zhì)來選擇，大多數(shù)方法可采取HPLC法。通常揮發(fā)油類采取GC。一些難以檢測(cè)或采取上述方法得不到較理想分離效果時(shí)，可采取TLC或CE。2024/4/19新版中藥制劑分析第157頁1.原藥材、中間體及注射劑樣品選擇與搜集中藥是天然產(chǎn)物，中藥活性成份都是次生代謝產(chǎn)物，本身有它內(nèi)在不穩(wěn)定性。我國藥材品種多、產(chǎn)地廣、分散度大，造成了中藥材基源復(fù)雜，形成許多同名異物品種，這些品種在傳統(tǒng)中醫(yī)臨床中并未加以細(xì)分，其中多數(shù)已收入《中華人民共和國藥典》。對(duì)于《中國藥典》收載品種，從中醫(yī)角度均可入藥，這種多基源藥材增加了色譜指紋圖譜研究難度。

2024/4/19新版中藥制劑分析第158頁近年因?yàn)樗幉牧啃枨笤龃?，藥材資源破壞嚴(yán)重，藥材內(nèi)在質(zhì)量下降，炮制加工粗放造成有效成份流失，人為原因造成了藥材質(zhì)量不穩(wěn)定，不利于色譜指紋圖譜研究與應(yīng)用。我國藥材GAP工程已起步，將有利于中藥注射劑及其它制劑質(zhì)量控制。2024/4/19新版中藥制劑分析第159頁已生產(chǎn)注射劑，因生產(chǎn)中藥材起源基本確定，在補(bǔ)充其指紋圖譜時(shí)，原藥材樣品搜集應(yīng)遵照以下標(biāo)準(zhǔn)：①藥材盡可能固定產(chǎn)地（如道地藥材）、采收期、炮制方法；②對(duì)已往生產(chǎn)使用過藥材應(yīng)結(jié)合臨床使用情況選擇搜集樣品，對(duì)工藝穩(wěn)定、療效恒定、臨床使用中極少出現(xiàn)異常醫(yī)療事故藥材批次應(yīng)重點(diǎn)選擇；③另外還應(yīng)搜集不一樣產(chǎn)地、不一樣采收期藥材，這些藥材即使含量高低不一樣，組成百分比各異，但當(dāng)正常使用藥材一旦出現(xiàn)偏差時(shí)，可經(jīng)過這些批次藥材實(shí)施合理“勾兌”。經(jīng)過對(duì)指紋圖譜研究，能夠?qū)Α肮磧丁边^程進(jìn)行指導(dǎo)。

2024/4/19新版中藥制劑分析第160頁中間體、注射劑因其生產(chǎn)工藝已經(jīng)恒定，樣品搜集標(biāo)準(zhǔn)也應(yīng)重點(diǎn)選擇工藝穩(wěn)定、療效恒定、臨床使用中極少出現(xiàn)醫(yī)療事故批次。依據(jù)《中藥注射劑指紋圖譜研究技術(shù)要求》（暫行）之要求，原藥材、中間體及注射劑樣品最少應(yīng)搜集10批次。不能夠同一批次樣品分散成數(shù)個(gè)批次，充當(dāng)樣品。2024/4/19新版中藥制劑分析第161頁2.原藥材、中間體及注射劑預(yù)處理在指紋圖譜研究過程中，供試品（原藥材、中間體及注射劑）溶液制備過程不是關(guān)鍵性技術(shù)問題，但操作煩瑣。原藥材供試品制備最為復(fù)雜。原藥材所含各種組分混雜在一起，樣品制備時(shí)，應(yīng)依據(jù)所含成份和物理化學(xué)性質(zhì)，經(jīng)過萃取、沉淀、吸附或經(jīng)過化學(xué)反應(yīng)，分離富集樣品。

2024/4/19新版中藥制劑分析第162頁如：黃芪藥材中黃酮類成份經(jīng)過堿水萃取，皂苷類成份經(jīng)過大孔樹脂吸附；苦參中總生物堿經(jīng)過陽離子樹脂吸附與解吸附。中間體是原藥材經(jīng)過了多步處理而得，已經(jīng)濾過了大部分成份，只保留一小部分有效組分，樣品制備時(shí)，可針對(duì)有效成份處理，并參考原藥材制備方法。2024/4/19新版中藥制劑分析第163頁樣品富集后，尚需過氧化鋁預(yù)柱、C18預(yù)柱、硅膠預(yù)柱、聚酰胺預(yù)柱等，以除去色素等雜質(zhì)，防止干擾或?qū)ιV柱損耗。注射液中除少數(shù)品種添加助溶劑外，所含化學(xué)成份均含有很好水溶解性能，面且碩士產(chǎn)工藝時(shí)考慮到色素、生物大分子等原因，生產(chǎn)過程中已經(jīng)過微孔濾膜、脫色等操作，所以，樣品無需特殊處理，可直接分析檢測(cè)。2024/4/19新版中藥制劑分析第164頁3.參考物制備依據(jù)樣品化學(xué)成份性質(zhì)選擇2024/4/19新版中藥制劑分析第165頁4研究方法選擇色譜條件選擇指紋圖譜色譜條件是研究檢測(cè)方法過程中最主要、關(guān)鍵性內(nèi)容。我們以HPLC法為例，闡述各影響原因及處理路徑。2024/4/19新版中藥制劑分析第166頁流動(dòng)相可用作流動(dòng)相溶劑有：乙腈、甲醇、乙醇、四氫呋喃、氯仿、二氯甲烷、正已烷等。反相高效液相，以乙腈-水系統(tǒng)比較適合梯度洗脫。醇-水系統(tǒng)因?yàn)闊崃W(xué)和可壓縮性原因，在梯度洗脫時(shí)易造成基線漂移。在流動(dòng)相中可加入磷酸、乙酸、三乙胺、二乙胺、正丁基溴化胺、十二烷基磺酸鈉等各種改性劑，或采取磷酸-磷酸氫二鈉/磷酸二氫鈉、乙酸-乙酸鈉緩沖溶液，以到達(dá)改進(jìn)色譜峰分離程度及改進(jìn)峰形目標(biāo)。2024/4/19新版中藥制劑分析第167頁樣品中如有部分成份極性較小，在流動(dòng)相中可加入少許異丙醇、四氫呋喃、氯仿、環(huán)糊精等，增加流動(dòng)相對(duì)樣品溶解性，首先改進(jìn)峰形，另首先可快速洗脫。對(duì)黃酮類、酚酸類成份可參考選擇乙膊-水-酸系統(tǒng)流動(dòng)相；對(duì)皂苷類成份可參考選擇乙腈-水系統(tǒng)流動(dòng)相，生物堿類成份可參考選擇乙腈-水-三乙胺等系統(tǒng)流動(dòng)相。2024/4/19新版中藥制劑分析第168頁

檢測(cè)波長(zhǎng)選擇有以下方法：①參考樣品全波長(zhǎng)紫外線吸收?qǐng)D，選擇吸收峰值；②參考對(duì)照品全波長(zhǎng)紫外線吸收?qǐng)D，選擇吸收峰值；③依據(jù)君、臣、佐、使組方理論，在盡可能兼顧佐使藥同時(shí)，主要選擇君、臣藥中有效成妥及收峰值。2024/4/19新版中藥制劑分析第169頁一個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)下色譜圖如不能到達(dá)控制質(zhì)量目標(biāo)，可建立多個(gè)檢測(cè)波長(zhǎng)下指紋圖譜。2024/4/19新版中藥制劑分析第170頁

柱溫當(dāng)色譜圖某個(gè)色譜峰因溶解度差而峰形較“鈍”時(shí)，可適當(dāng)提升柱溫（30~50℃）；如樣品中組分在常溫或高溫下不穩(wěn)定，易發(fā)生水解、分解等改變時(shí)，可降低柱溫。2024/4/19新版中藥制劑分析第171頁色譜柱不一樣廠家色譜柱因?yàn)椴扇√盍喜灰粯?，柱效相差較大。即使流動(dòng)相條件一致，用不一樣填料色譜柱重復(fù)測(cè)試時(shí)，不但分離效果大不相同，而且保留時(shí)間遷移程度也比較顯著。2024/4/19新版中藥制劑分析第172頁因?yàn)橹兴帢悠窂?fù)雜性，首先所含成份極性高低不等，另首先部分成份結(jié)構(gòu)相同，極性相差不大，分離比較困難，所以選擇色譜柱時(shí)應(yīng)以主要成份得到分離為目標(biāo)，柱效不易過高。同時(shí)要考慮填料穩(wěn)定性和載樣量。指紋圖譜普通選取5~10μmC18填料柱，以4.6mm×250mm較適宜，其它特殊色譜柱，如氨基柱、腈基柱、酸性柱、堿性柱等，可視研究對(duì)象不一樣而采取。2024/4/19新版中藥制劑分析第173頁

進(jìn)樣量進(jìn)樣量對(duì)指紋圖譜結(jié)果影