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文檔簡介
一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌巨大芽孢桿菌nl-7及其應(yīng)用的制作方法專利名稱:一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌巨大芽孢桿菌nl-7及其應(yīng)用的制作方法技術(shù)領(lǐng)域:本發(fā)明屬于微生物技術(shù)領(lǐng)域,具體涉及一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌巨大芽孢桿菌NL-7及其應(yīng)用。背景技術(shù):客土噴播技術(shù)是將植物種子和生長基質(zhì)材料的混合物均勻、高壓噴播在巖土坡面上的綠化技術(shù)。該技術(shù)主要是針對(duì)巖石等硬質(zhì)邊坡研發(fā)的一種綠化技術(shù)。目前已廣泛應(yīng)用于水利、公路、鐵路等工程的坡面綠化中。但是,該技術(shù)針對(duì)于巖坡實(shí)現(xiàn)綠化必須具備兩個(gè)條件:一是巖面上有植物賴以持續(xù)生長的種植基質(zhì);二是種植基質(zhì)能長久固定在巖面上,抗風(fēng)吹、暴雨和流水的沖蝕。然而在實(shí)際工程中,目前的客土噴播技術(shù),難以解決上述兩個(gè)技術(shù)難題,噴播基質(zhì)難以長久的維持在巖石坡面上,使得這一技術(shù)的利用受到很多的限制。顯然噴播基質(zhì)已經(jīng)成為巖石邊坡客土噴播技術(shù)的核心內(nèi)容,這種基質(zhì)不僅要求提供適宜護(hù)坡植被生長的土壤性質(zhì),還要求具有粘著在巖石坡面上的粘結(jié)功能,與坡面實(shí)現(xiàn)完全長久的融合。巖石侵蝕微生物菌群能加速巖石的土壤化進(jìn)程,快速形成適應(yīng)植物生存所需的土壤,模擬自然生態(tài)環(huán)境,促進(jìn)巖石侵蝕成土的演替,為植物生長源源不斷地提供營養(yǎng)成分。在巖石侵蝕微生物菌群的作用下,在巖體和噴播基質(zhì)間形成了一個(gè)界面一生育基盤。這種生育基盤,既解決了巖面上植物賴以持續(xù)生長的種植基質(zhì)問題(包括提供營養(yǎng)元素),也解決了種植基質(zhì)能永久固定在巖面,實(shí)現(xiàn)巖面和種植基質(zhì)的融合,促進(jìn)了種植基質(zhì)和巖石的物質(zhì)循環(huán)。顯然,篩選高效巖石侵蝕微生物菌株是客土噴播覆綠技術(shù)長期維持和廣泛應(yīng)用的關(guān)鍵。目前,國內(nèi)針對(duì)不同巖石,篩選適宜的高效巖石侵蝕微生物菌株還未見報(bào)道。發(fā)明內(nèi)容發(fā)明目的:針對(duì)上述現(xiàn)有技術(shù)中存在的問題,本發(fā)明的目的是提供一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌巨大芽孢桿菌NL-7,為巖石高效侵蝕微生物菌庫的建立提供菌種支持。本發(fā)明的另一目的是提供上述石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌巨大芽孢桿菌NL-7的應(yīng)用。技術(shù)方案:為了實(shí)現(xiàn)上述發(fā)明目的,本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌,其分類命名為巨大芽孢桿菌iBacillusmegaterium)m,-l,已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號(hào)CCTCCNO:M2012452,保藏日期:2012年11月9日;保藏地址:中國武漢武漢大學(xué)。所述的石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌在侵蝕巖石中的應(yīng)用。所述的巖石為石灰?guī)r石。巨大芽孢桿菌NL-7,是從南京市幕府山裸露巖壁(其為石灰?guī)r,主要由CaCO3組成,富含Ca)表面篩選獲得的,能加速石灰?guī)r石中Ca、Mg、K、P等元素釋放。巨大芽孢桿菌NL-7菌株主要生物學(xué)特征:在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上28°C條件下培養(yǎng),菌體桿狀,末端圓,革蘭氏染色陽性,有芽孢,好氧菌。巨大芽孢桿菌NL-7菌株16SrDNA基因序列,見SEQIDNoI所示。將所測16SrDNA序列與GenBank數(shù)據(jù)庫中的序列進(jìn)行BLAST比對(duì)。結(jié)果表明,巨大芽孢桿菌NL-7菌株與Bacillus的相似度為99%。結(jié)合形態(tài)、生理生化特征及16SrDNA序列分析,鑒定為巨大芽孢桿菌{Bacillusmegaterium)0有益效果:與現(xiàn)有技術(shù)相比,本發(fā)明篩選出的高效侵蝕巖石菌巨大芽孢桿菌NL-7,對(duì)石灰?guī)r有很強(qiáng)的侵蝕能力,能促進(jìn)巖石中Ca、Mg等主要離子的釋放,加速石灰?guī)r侵蝕成土;同時(shí)兼有很強(qiáng)的解K、P的潛能;能降低噴播基質(zhì)容重,增強(qiáng)噴播基質(zhì)的抗沖性和抗剪性,具有很好的應(yīng)用開發(fā)前景。圖1是幕府山裸露巖壁上的米樣菌落圖2是牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上的巨大芽孢桿菌NL-7菌落圖3是巨大芽孢桿菌NL-7發(fā)酵培養(yǎng)15d,加菌發(fā)酵液與不加菌對(duì)照的可溶性Ca、Mg的比較結(jié)果圖4是巨大芽孢桿菌NL-7發(fā)酵培養(yǎng)15d,加菌發(fā)酵液與不加菌對(duì)照的可溶性K、P的比較結(jié)果圖。具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步的說明。實(shí)施例1囷株的犾得和鑒定:采集石灰?guī)r(江蘇省南京市幕府山)裸巖表面的菌落(見圖1),采用稀釋平板法,在28°C培養(yǎng)箱中,以篩選培養(yǎng)基(5g蔗糖,2gNa2HPO4,0.5gMgSO4.7H20,0.005gFeCl3,0.1gCaCO3,Ig石灰?guī)r石粉(清洗過的幕府山巖石,過200目篩,主要相關(guān)化學(xué)見表1),18g瓊脂粉,IOOOmL蒸餾水)培養(yǎng)48h左右,挑取單菌落,反復(fù)劃線純化,并將所得菌株分別接種于牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基斜面上,4°C冰箱保存,獲得純菌株。該菌株主要生物學(xué)特征:在牛肉膏蛋白胨固體培養(yǎng)基上28°C條件下培養(yǎng),菌體桿狀,末端圓,革蘭氏染色陽性,有芽孢,好氧菌(見圖2)。表I幕府山石灰?guī)r的主要相關(guān)化學(xué)成分.權(quán)利要求1.種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌,其分類命名為巨大芽孢桿菌megaterium)NL-7,已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號(hào)CCTCCNO:M2012452,保藏日期:2012年11月9日;保藏地址:中國武漢武漢大學(xué)。2.利要求1所述的石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌在侵蝕巖石中的應(yīng)用。3.據(jù)權(quán)利要求2所述的應(yīng)用,其特征在于:所述的巖石為石灰?guī)r石。全文摘要本發(fā)明公開了一種石灰?guī)r高效侵蝕細(xì)菌巨大芽孢桿菌NL-7及其應(yīng)用,所述高效侵蝕細(xì)菌的分類命名為巨大芽孢桿菌(Bacillusmegaterium)NL-7,已保藏于中國典型培養(yǎng)物保藏中心,保藏編號(hào)CCTCCNOM2012452,保藏日期2012年11月9日;保藏地址中國武漢武
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