微生物接種技術

關于微生物接種技術一、實驗目的

掌握倒平板、斜面接種、液體接種、穿刺接種、平板接種等各種微生物接種的基本操作技術。第2頁,共13頁，2024年2月25日，星期天倒平板的方法

將培養(yǎng)基加熱融化，待冷卻至55－600C時，倒平板。三、實驗步驟第3頁,共13頁，2024年2月25日，星期天

將有菌的材料或純粹的菌種轉移到另一無菌的培養(yǎng)基上，這個過程就稱為接種。常用的幾種方法如下：斜面接種液體接種穿刺接種平板接種第4頁,共13頁，2024年2月25日，星期天1.斜面接種：

從已長好微生物移接到另一斜面管的方法。此法用于好氣性微生物的接種。左手持菌種管和斜面管，使斜面向上，并盡量放平。用右手先將塞擰轉松動，再拿接種環(huán)，用右手的小指、無名指和手掌撥下塞并夾緊，同時將管口在火焰上燃燒一圈，接種環(huán)灼燒滅菌后插入管內，冷卻、挑菌，立即轉入斜面管底部，沿斜面劃曲線或直線。第5頁,共13頁，2024年2月25日，星期天試管斜面接種1.兩支試管呈“V”字形

2.拔下試管塞3.火焰上微燒一周

4.接種環(huán)灼燒、冷卻5.接種、劃線

6.塞上塞子，灼燒接種環(huán)第6頁,共13頁，2024年2月25日，星期天2.液體接種：

將菌接種到液體培養(yǎng)基（試管、三角瓶等）中的方法。操作與上法基本一致，只是在將接種環(huán)送入液體培養(yǎng)基中時使環(huán)在液體與管壁接觸的地方輕輕磨擦，使菌體分散，然后塞上棉塞，再輕輕搖動均勻，即可培養(yǎng)。如果菌種是培養(yǎng)在液體培養(yǎng)基中時，一般用移液管或接種環(huán)接種。第7頁,共13頁，2024年2月25日，星期天3.穿刺接種：用接種針挑取菌種后，插入深層固體培養(yǎng)基內，（不要刺到底部），再沿原路拔出，此法用于厭氣性細菌接種、檢查細菌的運動能力。第8頁,共13頁，2024年2月25日，星期天4.平板接種：將菌種接至培養(yǎng)皿的方法，平板接種的目的是觀察菌落形態(tài)、分離純化菌種，活菌計數以及在平板上進行各種試驗時采用的一種接種方法，可分為下面幾種：

第9頁,共13頁，2024年2月25日，星期天（1）斜面接平板a.劃線法：見平板劃線分離法。b.點種法：一般用于觀察霉菌和酵母細胞，輕輕點在平板的表面即可。

（2）平板接斜面：一般是將經平板分散培養(yǎng)得到的單菌落接種到斜面，以便作鑒定或擴大培養(yǎng)、保存之用。

第10頁,共13頁，2024年2月25日，星期天（3）平板涂布法倒培養(yǎng)基，制成平板。凝固后，另取一支吸管吸取相應的菌液0.2mL放至平板上。用無菌三角玻棒將稀釋液在平板表面涂抹均勻。倒置于37℃條件下培養(yǎng)1～2d，觀察菌落形態(tài)及計數菌落。第11頁,共13頁，2024年2月25日，星期天凝固后37℃培養(yǎng)

涂布法流程圖第12頁,共13頁，202