培養(yǎng)基生產(chǎn)工藝六要素

培養(yǎng)基生產(chǎn)工藝六要素現(xiàn)代細(xì)胞培養(yǎng)基通常包含0至100種成分，數(shù)百種成分的選擇以及每種成分都可以從多種渠道來(lái)源獲得。這導(dǎo)致了錯(cuò)綜復(fù)雜的供應(yīng)商網(wǎng)絡(luò)和可能的變異性?？紤]到這種復(fù)雜性，我們需要從不同角度對(duì)培養(yǎng)基生產(chǎn)穩(wěn)定性進(jìn)行控制，并完善供應(yīng)管理網(wǎng)絡(luò)。今天我們將從6個(gè)角度解析良好的培養(yǎng)基生產(chǎn)工藝。01原材料的供應(yīng)商管理培養(yǎng)基成分中微量的微量元素雜質(zhì)可能對(duì)最終培養(yǎng)基的組成產(chǎn)生累積影響，并影響細(xì)胞的多個(gè)信號(hào)通路，從而導(dǎo)致收獲的蛋白質(zhì)發(fā)生變異。例如，一些微量金屬會(huì)影響糖基轉(zhuǎn)移酶，并可能改變蛋白質(zhì)的糖基化特性。同樣，銅、錳、鋅和硒等微量元素的濃度也會(huì)直接影響蛋白質(zhì)質(zhì)量。不管微量金屬是培養(yǎng)基配方中的特定成分還是雜質(zhì)，微量成分都會(huì)產(chǎn)生不同的影響，其理想濃度可能根據(jù)特定的工藝而不同。為避免產(chǎn)品質(zhì)量問(wèn)題，生物制藥公司必須了解金屬元素在生物工藝中的影響。獲取細(xì)胞培養(yǎng)產(chǎn)品的ICP-MS結(jié)果以幫助控制變異性。因此，培養(yǎng)基生產(chǎn)商在選擇供應(yīng)商時(shí)，應(yīng)該對(duì)產(chǎn)品進(jìn)行充分表征。Vendor1Lol1-h?—Vendor1Lot2VendorHLot3Vendor1Lol1-h?—Vendor1Lot2VendorHLot3Vendor2Lot1—?—Vendor2Lot2—?—Vendof2Lui3―i—Vendor3Lot Vendof3Loi2 Vendor3Lot3ControlAverageViableCellDensityfromCHO-K1GSCallsP550.00-45.00-40.00-35.00-30.00-25.00-20.00-15.00-10.00-5.00-0.00-0.0 48.1 719 9S.4 119.S 143.8 166.6 216.0ofCulture(Hours*IgGProductioninCH0-K1GSP5CellsComparing

TyrosineSources500.03&0.0□.C45D.0400.0300.0250.0200.0150.010D.050.0Vendor1Vendor1500.03&0.0□.C45D.0400.0300.0250.0200.0150.010D.050.0Vendor1Vendor1Vendor1Vendor2Vendor2Vendor2Vendor3Vendur3Vendor3ControlLot1Let2Lol3Lal1Lol2Lot3Lol1Lot2Lot3（不同供應(yīng)商來(lái)源的原材料對(duì)細(xì)胞生長(zhǎng)和蛋白表達(dá)的影響）來(lái)自不同供應(yīng)商的同一種原料，以及同一供應(yīng)商的不同批次原料都會(huì)由于雜志含量不同導(dǎo)致細(xì)胞生長(zhǎng)結(jié)果產(chǎn)生差異。因此，需要對(duì)原料供應(yīng)商進(jìn)行深度考察，確保供應(yīng)商原料的質(zhì)量，以及穩(wěn)定性，將雜質(zhì)水平控制在限度范圍內(nèi)，從而保證培養(yǎng)基批次生產(chǎn)的穩(wěn)定性。以圖中案例應(yīng)選擇供應(yīng)商B。

SupplierC3X^aE■EQQCurrenlsupplierSupplier&SupplierC3X^aE■EQQCurrenlsupplierSupplier&（不同供應(yīng)商來(lái)源鐵鹽中的錳離子含量）02干粉研磨工藝影響培養(yǎng)基穩(wěn)定性的干粉研磨工藝干粉研磨工藝是培養(yǎng)基穩(wěn)定性的另一要素。該過(guò)程中的混合、研磨、冷卻等方式選擇、技術(shù)參數(shù)顯著影響干粉性能。細(xì)胞培養(yǎng)基顆粒越細(xì)，同質(zhì)條件下比表面積越大，其溶解性越好，而其成品細(xì)度是由物料的研磨過(guò)程直接決定。對(duì)于物料的研磨，針磨工藝是現(xiàn)階段比較有優(yōu)勢(shì)的工藝，具有批量大、混合均勻等優(yōu)點(diǎn)。研磨過(guò)程中的冷卻至關(guān)重要，物料在研磨過(guò)程中由于研磨速度較快會(huì)產(chǎn)生大量熱量，非常容易被氧化，導(dǎo)致物料性狀發(fā)生改變，從而影響培養(yǎng)基穩(wěn)定性。利用冷卻水夾套進(jìn)行降溫是傳統(tǒng)降溫方式，但由于無(wú)法接觸研磨的溫度中心，會(huì)導(dǎo)致物料在內(nèi)部高溫的部位發(fā)生氧化等化學(xué)反應(yīng)，甚至培養(yǎng)基粉末顏色會(huì)發(fā)生肉眼可見(jiàn)的加深。因此**在干粉研磨工藝中通常采用液氮揮發(fā)出的冷卻氮?dú)怆S物料一起進(jìn)入研磨過(guò)程進(jìn)行冷卻，效果顯著，產(chǎn)品顏色淺淡，氧化程度更低。03培養(yǎng)基干粉顆粒化技術(shù)培養(yǎng)基干粉顆?；梢詷O大的縮小干粉儲(chǔ)存的體積，并且使得稱(chēng)量干粉變得更為方便。并且培養(yǎng)基干粉顆?；梢源蟠罂s小培養(yǎng)基攪拌溶解的時(shí)間，提高培養(yǎng)基配制效率。測(cè)試表明，相同質(zhì)量的培養(yǎng)基，干粉溶解的時(shí)間為30min，而顆粒溶解的時(shí)間僅為7min。灌流工藝由于培養(yǎng)基用量顯著增加，使得該技術(shù)在灌流工藝的培養(yǎng)基配制中優(yōu)勢(shì)更加明顯。04建立靈活的制造網(wǎng)絡(luò)生物制藥企業(yè)在不同階段對(duì)培養(yǎng)基用量的要求有所差異，而且目前越來(lái)越多的制藥企業(yè)開(kāi)始尋求定制化的培養(yǎng)基，因此良好的培養(yǎng)基生產(chǎn)商會(huì)擁有更小規(guī)模干粉培養(yǎng)基的試生產(chǎn)用于樣品生產(chǎn)問(wèn)題排除以及規(guī)模放大試生產(chǎn)。我們通常通過(guò)綜合評(píng)估市場(chǎng)趨勢(shì)，設(shè)備運(yùn)行要求，并與客戶(hù)合作，以幫助進(jìn)一步指導(dǎo)生產(chǎn)網(wǎng)絡(luò)的發(fā)展。目前，用于臨床和商業(yè)用途的定制和目錄培養(yǎng)基，干粉培養(yǎng)基的批量大小為25-6000Kgs，液體培養(yǎng)基的批量大小為50-10,000L。一般需要提供包裝、壓實(shí)等多種方式給貨。對(duì)于GMP之前的生物藥工藝開(kāi)發(fā)研究，干粉培養(yǎng)基的定制規(guī)格為0.5-20Kgs，液體培養(yǎng)基的定制規(guī)格為1-200L。05建立雙重制造機(jī)制隨著生物制品制造商對(duì)其產(chǎn)品的商業(yè)化發(fā)展，防止中斷的能力變得至關(guān)重要。良好的培養(yǎng)及生產(chǎn)是會(huì)讓不同生產(chǎn)基地都采用相同的技術(shù)和可比較的工藝流程來(lái)提供細(xì)胞培養(yǎng)基，從而達(dá)到可重復(fù)的化學(xué)成分、粒徑/體積密度、最終產(chǎn)品技術(shù)參數(shù)和細(xì)胞培養(yǎng)性能。通過(guò)使用相同的原材料、自動(dòng)工藝控制、等效的驗(yàn)證標(biāo)準(zhǔn)和文檔，可以進(jìn)一步實(shí)現(xiàn)制造的一致性和連續(xù)性，從一個(gè)供應(yīng)商實(shí)現(xiàn)雙重采購(gòu)。描述DarmstadtIrvine無(wú)動(dòng)物成分/非動(dòng)物來(lái)源的制造是是隔離的，含動(dòng)物成分的制品是無(wú)制造批量大小范圍25-4000kg25-6000kg針磨技術(shù)是的,w/N2是的,w/N2錐形和滾筒式攪拌混合技術(shù)：

預(yù)混錐形攪拌機(jī)機(jī)后混合錐形攪拌機(jī)滾筒攪拌機(jī)全球原料供應(yīng)是是GMP質(zhì)量體系和ISO9001：201是是5包裝能力：是是標(biāo)準(zhǔn)包裝：瓶子、圓筒和桶是是EZBioPAC?和合適的尺寸稱(chēng)重表1.**位于美國(guó)和英國(guó)的生產(chǎn)基地在干粉細(xì)胞培養(yǎng)基生產(chǎn)中都采用了相同的技術(shù)和可比較的工藝流程，從而提供了可靠的產(chǎn)品可比性。止匕外，每個(gè)生產(chǎn)基地都自愿遵守《IPEC-PQG藥用輔料良好生產(chǎn)規(guī)范(GMP)聯(lián)合指南》以及《歐盟藥品良好生產(chǎn)規(guī)范指南》附件1的適用章節(jié)。06全球統(tǒng)一的質(zhì)量管理機(jī)制全球化必然帶來(lái)多原料來(lái)源，多生產(chǎn)場(chǎng)所，各地區(qū)標(biāo)準(zhǔn)差異等多種問(wèn)題。這使得建立全球統(tǒng)一的質(zhì)量管理機(jī)制變得十分必要。因此**全球供應(yīng)商質(zhì)量團(tuán)隊(duì)與相應(yīng)的內(nèi)部團(tuán)隊(duì)(如技術(shù)運(yùn)營(yíng)、研發(fā)和質(zhì)量控制團(tuán)隊(duì))密切合作，以落實(shí)正確的原材料技術(shù)參數(shù)，采用基于風(fēng)險(xiǎn)的方法進(jìn)行變更管理，以及共同管理原材料和供應(yīng)商。本地采購(gòu)團(tuán)隊(duì)和庫(kù)存系統(tǒng)需要進(jìn)行全球整合，以最大程度地減少供應(yīng)中斷的可能性，并可以在各生產(chǎn)基地之間共享原材料批次。本地管理采購(gòu)和庫(kù)存系統(tǒng)作為其中的一部分，共同組成了全球供應(yīng)鏈管理項(xiàng)目。結(jié)論細(xì)胞培養(yǎng)基在生物制劑的開(kāi)發(fā)中起著至關(guān)重要的作用。除了選擇優(yōu)化的配方外，持續(xù)可靠的培養(yǎng)基供應(yīng)對(duì)于成功開(kāi)發(fā)