實驗一顯微鏡的使用和細胞形態(tài)的觀察

關(guān)于實驗一顯微鏡的使用和細胞形態(tài)的觀察目的要求學習并掌握顯微鏡油鏡的使用技術(shù)及維護的基本知識使用油鏡觀察細菌的幾種基本形態(tài)用懸滴法在高倍鏡或油鏡下觀察細菌的運動第2頁,共18頁，2024年2月25日，星期天顯微鏡油鏡使用的原理普通光學顯微鏡歐林巴斯（OLYMPUS）生物顯微鏡歐林巴斯（OLYMPUS）相差顯微鏡第3頁,共18頁，2024年2月25日，星期天普通光學顯微鏡Ⅰ顯微鏡的構(gòu)造

1.光學部分:接目鏡、接物鏡、照明裝置(聚光鏡、虹彩光圈、反光鏡等).它使檢視物放大,造成物象.

2.機械部分:鏡座、鏡臂、鏡筒、物鏡轉(zhuǎn)換器、載物臺、載物臺轉(zhuǎn)移器、粗調(diào)節(jié)器、細調(diào)節(jié)器等部件.它起著支持調(diào)節(jié)固定等作用.第4頁,共18頁，2024年2月25日，星期天普通光學顯微鏡Ⅱ顯微鏡的放大倍數(shù)和分辨率

1.放大倍數(shù)=接物鏡放大倍數(shù)×接目鏡放大倍數(shù)2.

顯微鏡的分辨率是表示顯微鏡辨析物體（兩端）兩點之間距離的能力，可用公式表示為：D=λ/2n·sin(α/2)

式中D：物鏡分辨出物體兩點間的最短距離。

：可見光的波長（平均0.55

m)n:

物鏡和被檢標本間介質(zhì)的折射率。：鏡口角（即入射角）。第5頁,共18頁，2024年2月25日，星期天普通光學顯微鏡Ⅲ油鏡使用的原理

油鏡，即油浸接物鏡。當光線由反光鏡通過玻片與鏡頭之間的空氣時，由于空氣與玻片的密度不同，使光線受到曲折，發(fā)生散射，降低了視野的照明度。若中間的介質(zhì)是一層油（其折射率與玻片的相近），則幾乎不發(fā)生折射，增加了視野的進光量，從而使物象更加清晰。第6頁,共18頁，2024年2月25日，星期天實驗材料顯微鏡（顯微鏡燈）、香柏油、二甲苯、擦鏡紙、吸水紙等。細菌三種形態(tài)的染色標本。培養(yǎng)12—18h的枯草桿菌（B.subtilis)蓋玻片、凹玻片、接種環(huán)、酒精燈。第7頁,共18頁，2024年2月25日，星期天實驗程序Ⅰ（顯微鏡的使用）主要是油鏡的使用

1.用前檢查：零件是否齊全，鏡頭是否清潔。2.調(diào)節(jié)光亮度3.低倍鏡觀察：粗調(diào)、細調(diào)4.依次再進行中倍、高倍觀察5.油鏡觀察：高倍鏡下找到清晰的物象后，提升聚光鏡，在標本中央滴一滴香柏油，使油鏡鏡頭浸入香柏油中，細調(diào)至看清物象為止。6.換片：另換新片，必須從第三條開始操作。7.用后復原：觀察完畢，上懸鏡筒，先用擦鏡紙擦去鏡頭上的油，然后再用擦鏡紙沾取少量二甲苯擦去殘留的油，最后用擦鏡紙擦去殘留的二甲苯，后將鏡體全部復原。

第8頁,共18頁，2024年2月25日，星期天實驗程序Ⅱ（顯微鏡的使用）顯微鏡保養(yǎng)和使用中的注意事項：

1.不準擅自拆卸顯微鏡的任何部件,以免損壞。2.鏡面只能用擦鏡紙擦，不能用手指或粗布，以保證光潔度3.觀察標本時，必須依次用低、中、高倍鏡，最后用油鏡。當目視接目鏡時，特別在使用油鏡時，切不可使用粗調(diào)節(jié)器，以免壓碎玻片或損傷鏡面。4.觀察時，兩眼睜開，養(yǎng)成兩眼能夠輪換觀察的習慣，以免眼睛疲勞，并且能夠在左眼觀察時，右眼注視繪圖。5.拿顯微鏡時，一定要右手拿鏡臂，左手托鏡座，不可單手拿，更不可傾斜拿。6.顯微鏡應存放在陰涼干燥處，以免鏡片滋生霉菌而腐蝕鏡片。第9頁,共18頁，2024年2月25日，星期天實驗程序III細菌三種基本形態(tài)的觀察：

菌落形態(tài)觀察和個體形態(tài)觀察，這里主要指個體形態(tài)的觀察。

1.

結(jié)合油鏡的使用，觀察三張細菌染色片（球狀菌、桿狀菌、和螺旋狀菌），邊觀察邊繪圖。

2.

看示范鏡：觀察雙球菌、四聯(lián)球菌，并繪圖。第10頁,共18頁，2024年2月25日，星期天實驗程序Ⅲ細菌運動性的觀察（示范）：一般采用水浸片法、懸滴法、半固體培養(yǎng)法，常用水浸法和懸滴法來觀察細菌的運動性。1.

水浸片法

2.

懸滴法第11頁,共18頁，2024年2月25日，星期天歐林巴斯（OLYMPUS）生物顯微鏡ⅠOLYMPUS生物顯微鏡是由日本進口的一種雙筒光學顯微鏡，它使用方便，分辨率高，并且有立體感。是目前研究微生物的良好工具。顯微鏡的結(jié)構(gòu)第12頁,共18頁，2024年2月25日，星期天錄像演示第13頁,共18頁，2024年2月25日，星期天歐林巴斯（OLYMPUS）生物顯微鏡Ⅱ（顯微鏡的使用方法）1.

接通電源。2.

打開主開關(guān)。3.

移動電壓調(diào)整旋，使亮度適中。4.

把標本固定在再物臺上。5.

放松粗調(diào)鎖擋。6.

用低倍物鏡，旋轉(zhuǎn)粗調(diào)和微控制鈕來進行對焦。7.

調(diào)節(jié)雙目鏡筒間距和視度差。8.

再適當調(diào)節(jié)照明度。9.

使焦點正確地對準標本。10.

鎖緊粗調(diào)鎖擋。11.

調(diào)節(jié)孔徑光欄。12.

依次用低、中、高倍鏡觀察。13.

油鏡觀察：與普通光學顯微鏡方法一致。14.

觀察完畢，復原：先將電壓調(diào)節(jié)旋鈕復原，關(guān)閉主開關(guān)，切斷電源，放開粗調(diào)鎖擋。油鏡的處理與普通光學顯微鏡方法一致。15.

放入保存箱中。第14頁,共18頁，2024年2月25日，星期天歐林巴斯（OLYMPUS）相差顯微鏡Ⅰ相差顯微鏡的工作原理

相差顯微鏡具有一個特殊的由環(huán)狀光圈與聚光鏡組合的轉(zhuǎn)盤聚光鏡，通過這個特殊的裝置，就可把光波的相位差異變?yōu)檎穹町?，從而使人們?nèi)庋奂茨苡^察到活細胞的細微結(jié)構(gòu)，并有立體感。常用來觀察活細胞結(jié)構(gòu)，鞭毛的運動等。相差顯微鏡的裝置

1.

環(huán)狀光圈2.

相差物鏡（具有環(huán)狀相板）3.

定中心望遠鏡（亦稱輔助目鏡）4.

輔助固定扳手5.

綠色濾光片第15頁,共18頁，2024年2月25日，星期天歐林巴斯（OLYMPUS）相差顯微鏡Ⅱ相差顯微鏡的使用方法

1.

相差裝置的安裝：轉(zhuǎn)盤聚光鏡綠色濾光片2.

相差物鏡的安裝3.

安放標本4.

對光5.

調(diào)焦：用粗調(diào)控制鈕和微調(diào)控制鈕調(diào)節(jié)焦，看清物象時為止6.

旋轉(zhuǎn)相差轉(zhuǎn)盤7.