綠僵菌的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展

綠僵菌的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)2009年第40卷第11期?1443?綠僵菌的研究現(xiàn)狀及進(jìn)展果.CurrentsituationanddevelopmentresearchonMetarhiziumspp.(1AgriculturalCollege,GuangxiUnivitute,GuangxiAcademyofAgriculturalSciences,Nanning530007,China:3DepartmentofEntomology,CollegeofResourcesandEnvironment,SouthChinaAgriculturalUniversity,Guangzhou,Guangdong510640,China)Abstract:ThepresentstudysummarizestheresearchesOnclassification,separationandidentificationmethod,bio—logicalcharacteristicsandapplicationsofMetarhiziumspp.,atChinaandabroadduringrecentyears.Recently,themelee—ularsystemicresearch,genicinheritancebreeding,improvingdosageformulationandenlargingcontrolobjectsinMetadliziumspp.madeagreatprogress,butthereisstillalargegapcomparedtothatofinsecticidalmicroorganismsuchasBt.Therefore,thescreeningofhighlytoxicstrainofMetarhiziumndtheinfluenceofhumidi—violetradiations,soilmicroorganism,andsoilphysicalandchemicalcharacteristicsaffectingMetarhiziumspp.shouldbestudiedtoenhancethecontrollingeffectsofMetarhiziumspp.ontargetinsectpests.Keywords:Metarhiziumspp.;classification;separation;identification;biologicalcharacteristics;application自從1879年梅契尼柯夫最先從奧地利金龜上分離到金龜子綠僵菌以來，已有100多年的歷史.近20年來，隨著巴兩和澳大利亞廣泛使用金龜子綠僵菌防治甘蔗和牧草害蟲取得較大進(jìn)展.以及在非洲用黃綠綠僵菌(Metarhiziumflavoviride)防治蝗蟲實(shí)驗(yàn)的初步成功，借助于分子生物學(xué)技術(shù)和基因工程它的研究領(lǐng)域也在不斷深入，1綠僵菌屬的系統(tǒng)分類現(xiàn)狀自Sorokin于1883年建立綠僵菌屬M(fèi)etarhizium相繼發(fā)表多個(gè)新種，但由于對其特征描述不盡完善基金項(xiàng)目：國家科技支撐計(jì)劃項(xiàng)目(2007BAD30B03);廣西科學(xué)研究與技術(shù)開發(fā)計(jì)學(xué)院科技發(fā)展基金項(xiàng)目2006004(Z)防治研究工作.?1444?廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)2009年第40卷第11期和各自所依據(jù)分種標(biāo)準(zhǔn)不一，因此也出現(xiàn)了對本屬的鑒別性狀和顏色變化幅度等特征的描述不夠明確具體的現(xiàn)象.迄今為止，Driver等的研究是最為詳盡和完整的，基本解決了綠僵菌屬中的分類難題.他們將綠僵菌劃分為3個(gè)種：金龜子綠僵菌，黃綠綠僵菌和白色綠僵菌，其中黃綠綠僵菌下分5個(gè)變種，分別是黃綠綠僵菌新變種1,黃綠綠僵菌新變種2,黃綠綠僵菌新變種3,黃綠綠僵菌小孢變種，黃綠綠僵菌大孢變種；金龜子綠僵菌下分4個(gè)變種.分別是金龜子綠僵茵新變種1,金龜子綠僵菌新變種2,金龜子綠僵菌小孢變種，金龜子綠僵菌大孢變種.2綠僵菌的分離與鑒定方法2.1分離方法常規(guī)方法多是從體表有明顯真菌感染癥狀的僵蟲上分離.1986年ZimmermannE]將研究線蟲在土壤中發(fā)生率的"大蠟螟誘餌法"(GalleriaBaitMethod)引入昆蟲病原真菌生態(tài)學(xué)研究，檢驗(yàn)昆蟲病原真菌在土壤中的出現(xiàn)頻率.此方法簡便易行，可從土壤中誘集白僵菌，綠僵菌和擬青霉(Paecilomycesspp.)等病原真菌.黃運(yùn)霞等[4]探索了從活蟲體分離昆蟲效生防菌株DATF一001.2.2鑒定方法菌核糖體ITS(InternalTranscribedSpacer).即轉(zhuǎn)錄間度多態(tài)性(RestrictionFragmentLengthPolyRFLP),隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA(RandomAmplifiPolymorphicDNA,RAPD),SCAR(SequenceChatefizedAmplifiedregions),微衛(wèi)星序列(SiPCR技術(shù)基礎(chǔ)上的DNA隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性(RAPD)方上述鑒別方法都要經(jīng)過分離這一繁瑣的過程，3綠僵茵的生物學(xué)特性環(huán)境條件對綠僵菌的生長影響較大，不同菌株形成的溫度為25oC:在溫度高于40℃和低于7—8℃以98%～100%為最適.孢子的存活受物理和化學(xué)因存活的影響是相關(guān)的，在4℃時(shí)ORH和20℃時(shí)97%存14周后(5~C和15℃)萌發(fā)率為92.1%;30℃培養(yǎng)的究只證明在4cc,空氣相對濕度為0時(shí)孢子存活時(shí)間義.3.2綠僵菌的毒力段.樊美珍等F21分析了17株綠僵菌的酯酶同功酶4綠僵菌的應(yīng)用現(xiàn)狀個(gè)目42個(gè)科200多種昆蟲，還能寄生螨類及線蟲等.日本，安川榮曾試用金龜子綠僵菌防治金龜子獲得連續(xù)2年防效70%以上.黃基榮等在室內(nèi)用綠僵和直蜉金龜子的感病率分別為90.2%,50.0%和83.3%.曾傳芳等利用從田間蔗根土天牛分離到高可達(dá)100%.于鳳泉等在水稻移栽后5～7d,田間田間稻水象甲成蟲室內(nèi)飼養(yǎng)1～10d有近50%染病死66.7%～88-3%,按卵密度計(jì)算菌劑的防效為59.0%一82.7%,按幼蟲量計(jì)算的防效為68.4%～79.6%.程輝彩等30]在試驗(yàn)小區(qū)內(nèi)用綠僵菌油劑60mL/667m.設(shè)后12d.小區(qū)蟲口減退率為63.4%蝗綠僵菌生物農(nóng)藥(GreenGuard).并用于大面(BioCaneGranule).目前4個(gè)綠僵菌產(chǎn)品(Biotrol作項(xiàng)目組(CABIBioscience)研制的殺蝗綠僵菌生施藥10—15d后防效達(dá)到90%以上，成為有效的蝗蟲?1446?廣西農(nóng)業(yè)科學(xué)2009年第40卷第11期的綠僵菌產(chǎn)品(Metarhizin).德國登記了防治蠐的綠僵菌產(chǎn)品(Biol020).中國登記了防治蜚蠊的百澳克Bioc和防治蝗蟲的蝗敵19產(chǎn)品_31].衛(wèi)生等害蟲防治的綠僵菌商品制劑主要是金龜子綠僵菌，對棉鈴蟲(Helicoverpaarmigera),桃小食心蟲(Carosinanoilellsis),玉米螟(Ostrinialurnacalis),甘蔗桿草螟(Diatraeasaccharalis),甘薯華葉甲(Colasposomameta坩cLIm),斜紋夜蛾(Prodenialitura),剛竹毒蛾(Pantanaphyllostachysae),橄欖星室木虱(Pseudophacopteronanarium),松褐天牛(Monochamusalternatus),白楊透翅蛾(Paranthrenetabaniformis),馬尾松毛蟲(Endrolimuspunctatus),德國小蠊(Blat.tellagerman/ca)和黑翅土白蟻(0(tontotermesfOr-II]OSaBHS)等害蟲均有明顯控制效果.國內(nèi)重慶真菌農(nóng)藥研制工程中心獲得的殺蝗綠僵菌孢子母粉和殺蝗生物制劑"蝗敵1號"已在我國北方部分蝗蟲發(fā)生省區(qū)使用和推廣[3.在利用綠僵菌防治蔬菜害蟲領(lǐng)域，國內(nèi)外學(xué)者也作了相關(guān)研究.主要防治對象菜蛾，菜粉蝶和棉鈴蟲等害蟲.在長期的劑型研究與害蟲防治過程中，綠僵菌的劑型和應(yīng)用技術(shù)也得到了長足發(fā)展.到目前為劑型相配套的應(yīng)用技術(shù)也隨之得到發(fā)展.對于粉周后的孢子萌發(fā)率仍達(dá)到60%.5展望BritishMycologicalSociety,1976.66:407—411.ofMetarhiziumbasedonaphylogsequencedata[Jj.MycologicalResearch,2000,104:[3]ZimmermannG.TheGentomopathogenicfungiifromelmbarkandsoilwith[6]LinggAJ,DonaldsonMD.Bioticandabioticfactorsaf-fectingstabilityofBeauvedabassianaconidiainsoillJ』.Jlnve~ebrPathol,1981.38:191—200.CulextarsMis(Diptera:Culicidae)[J]entomopathogenic[J].Inve~ebrPathol,1992,65:186一amonggeographicalpopulationsofBeauvedabassiA,Vlak&D.Peters&Looijen.ProceedingsoftheFourthInternatiloquiumoflnvertebratePathology,1986:205—209.soilfungi[Mj.AcademicPress,1980:415.storageofMetarhiziumanisopliaeconidia:effectoftem—peratureandrelativehumid41:143一150.temperaturesOfftheviabilityofMetarhiziumtlavoconidiastoredinvegetablesandmineraloilslJ.JIn—118JMcClatchieGV,M