自身抗體的檢測(cè)及其臨床意義

關(guān)于自身抗體的檢測(cè)及其臨床意義自身抗體是診斷自身免疫性疾病的重要依據(jù)

自身免疫泛指機(jī)體免疫系統(tǒng)受某些內(nèi)因、外因或遺傳等因素作用產(chǎn)生針對(duì)自身正常或變性的組織、器官、細(xì)胞、蛋白質(zhì)或酶類等自身抗原發(fā)生的免疫應(yīng)答反應(yīng)，出現(xiàn)自身抗體或自身致敏淋巴細(xì)胞的現(xiàn)象。

因自身免疫招致組織器官損傷或功能障礙所致疾病稱自身免疫性疾病。自身免疫性疾病患者血循環(huán)中針對(duì)自身組織器官、細(xì)胞及細(xì)胞內(nèi)成分的抗體，稱自身抗體。自身抗體是自身免疫性疾病的重要標(biāo)志。第2頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天自身免疫性疾病的共同特征1.可以有誘因，也可以無(wú)誘因，但多數(shù)病因不清。無(wú)誘因者多稱為“自發(fā)”性或“特發(fā)”性。2.患者以女性居多，并隨年齡增加發(fā)病率有所增加。3.有遺傳趨向。4.血清中有自身抗體或體內(nèi)有針對(duì)自身組織細(xì)胞的致敏淋巴細(xì)胞。自身抗體在不同的自身免疫病中有交叉和重疊現(xiàn)象。即在不同的自身免疫病患者中查到相同的自身抗體;在同一自身免疫病患者體內(nèi)可查到多種自身免疫抗體。5.疾病的重疊現(xiàn)象,即一個(gè)病人可同時(shí)患一種以上自身免疫病。6.自身免疫病一般病程較長(zhǎng),病情發(fā)展和緩解呈反復(fù)交替現(xiàn)象,易成為終生痼疾。免疫抑制劑治療可取得一定療效。第3頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天

自身免疫性疾病患者大多數(shù)體內(nèi)均可查出較高滴度的自身抗體，因此自身抗體的檢測(cè)可幫助臨床診斷，評(píng)價(jià)療效，估計(jì)預(yù)后。自身免疫性疾病以血清中出現(xiàn)大量自身抗體為特征，其中與某種疾病密切相關(guān)的自身抗體稱為該疾病的標(biāo)志抗體，標(biāo)志抗體的檢出有助于臨床醫(yī)生確診疾病，具有重要的價(jià)值。通過(guò)大量的研究及臨床資料統(tǒng)計(jì)，目前比較公認(rèn)的部分標(biāo)志抗體：第4頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天標(biāo)志抗體相關(guān)疾病抗Sm抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）抗dsDNA抗體系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）高滴度抗RNP抗體混合性結(jié)締組織?。∕CTD）抗SSB抗體干燥綜合征（SS）抗著絲點(diǎn)抗體進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥局限型抗Scl-70抗體進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥彌漫型抗Jo-1抗體多發(fā)性肌炎/皮肌炎（PM/DM）抗腎小球基底膜抗體（GBM）肺出血腎炎綜合征（Goodpasture）抗平滑肌抗體（ASMA）Ⅰ型自身免疫性肝病抗肝腎微粒體抗體（LKM-1）Ⅱ型自身免疫性肝病抗可溶性肝抗原抗體（SLA）Ⅲ型自身免疫性肝病抗線粒體抗體2型（AMA-2）原發(fā)性膽汁性肝硬化（PBC）抗角蛋白抗體（AKA）類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎（RA）第5頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天

歐蒙印跡法試劑盒用于體外定性檢測(cè)血清或血漿中的人抗nRNP、Sm、SS-A（天然SS-A和Ro-52）、SS-B、Scl-70、Jo-1、CENPB、dsDNA、核小體、組蛋白和核糖體P蛋白等14種不同抗原lgG類抗體。第6頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天免疫印跡技術(shù)（IBT）

免疫印跡技術(shù)屬于膜載體酶免疫技術(shù)，其固相載體為吸附有抗原的硝酸纖維膜。

基本原理是將從小牛或兔胸腔提取的抗原,經(jīng)SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳,按分子量大小分離成區(qū)帶,經(jīng)參照對(duì)應(yīng)分子量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)確定每一抗原區(qū)帶的分子量。然后將各抗原區(qū)帶轉(zhuǎn)印至硝酸纖維膜上制成抗原吸附載體膜。第7頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天

將待測(cè)血清加在已切成細(xì)條的硝酸纖維膜上,待測(cè)血清中存在的抗體分別與硝酸纖維膜上的相應(yīng)抗原區(qū)帶結(jié)合,當(dāng)再加入酶標(biāo)記抗人IgG抗體后形成抗原-抗體-酶標(biāo)記抗體復(fù)合物,再加入酶的底物,出現(xiàn)顯色反應(yīng)。凡有抗體與膜上抗原結(jié)合的位置,均會(huì)因酶促反應(yīng)而顯色。

參照此時(shí)抗原區(qū)帶的分子量及各區(qū)帶的相應(yīng)位置,可辨讀出各特異性抗體.第8頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天抗dsDNA抗體是SLE患者的特征性標(biāo)志抗該抗體陽(yáng)性為SLE的重要診斷標(biāo)準(zhǔn)之一。抗dsDNA抗體在SLE的發(fā)病機(jī)制中起重要作用，SLE并發(fā)的狼瘡性腎炎是由該抗體介導(dǎo)的免疫復(fù)合物病，抗dsDNA抗體可形成多種冷沉淀而致血管炎，SLE腎炎及典型的蝶形紅斑均與該抗體有關(guān)?？筪sDNA抗體診斷SLE的特異性可達(dá)95%～100%，但其敏感性僅為30%～50%，因此抗dsDNA抗體陰性不能排除SLE的診斷。第9頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天抗RNP抗體高滴度是混合性結(jié)締組織病(MCTD,夏普綜合征)的特異性標(biāo)志（陽(yáng)性率為95-100%），抗體滴度與疾病活動(dòng)性相關(guān)；低滴度可見(jiàn)于SLE（15-40%，常伴Sm抗體陽(yáng)性）。抗Sm抗體

SLE的標(biāo)志性抗體（5-30%），與dsDNA一起是SLE的診斷指標(biāo)，與疾病活動(dòng)性無(wú)關(guān)，一般伴有U1-RNP抗體陽(yáng)性?？购诵◇w抗體

SLE標(biāo)志性抗體（85%），可用于SLE的早期診斷，與狼瘡腎炎相關(guān)第10頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天抗SS-A抗體與各類自身免疫性疾病相關(guān)，最常見(jiàn)于干燥綜合征（40-80%）。SLE（20-60%）；新生兒紅斑狼瘡（100%），可引起先天性新生兒心臟傳導(dǎo)阻滯。與狼瘡腎病的發(fā)生相關(guān)。抗天然SS-A（60kDa）抗體對(duì)SS和SLE的特異性高。該抗體的產(chǎn)生與HLA有關(guān)?？筊o-52抗體 不具有疾病特異性，而且還可與抗Jo-1和RNP抗體發(fā)生交叉反應(yīng)?？筍S-B抗體 干燥綜合征（40-95%）；SLE（10-20%）；亞急性皮膚狼瘡（25-35%）。第11頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天抗Scl-70抗體進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（25-75%），與皮膚硬化、肺部受累及腫瘤有關(guān)；抗體滴度與疾病活動(dòng)性無(wú)關(guān)?？筆M-Scl抗體 多肌炎/皮肌炎（8%），彌散性硬皮?。?%）；50%PM-Scl抗體陽(yáng)性見(jiàn)于皮肌炎與硬化癥的重疊綜合征。抗Jo-1抗體 多肌炎特異性抗體（25-35%），伴肺間質(zhì)纖維化時(shí)可高達(dá)75%。高度提示抗合成酶綜合征。第12頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天抗PCNA

是增殖性細(xì)胞核抗原，是SLE的標(biāo)志性抗體（2-10%），與SLE彌散性腎小球腎炎相關(guān)，對(duì)激素治療敏感。抗組蛋白抗體 多種結(jié)締組織病中均可出現(xiàn)，在藥物誘導(dǎo)的SLE中較常見(jiàn)（陽(yáng)性率為95%）不具有疾病特異性。僅有此抗體陽(yáng)性，而不伴有其他ANA，則強(qiáng)烈支持DIL的診斷。與SLE活動(dòng)性及狼瘡腎病相關(guān)。第13頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天抗著絲點(diǎn)抗體 局限型彌散性硬皮?。?0%）；CREST綜合征（50-80%）；原發(fā)性雷諾現(xiàn)象（25%）；原發(fā)性膽汁性肝硬化（10-20%）。抗M2抗體 原發(fā)性膽汁性肝硬化特異性抗體（96%）；其它慢性肝病（30%）；進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥（7-25%）?？购颂求wP蛋白 是SLE的特異性抗體（5-20%）。第14頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天系統(tǒng)性紅斑狼瘡(SLE)靶抗原 陽(yáng)性率(%)dsDNA標(biāo)志性抗體 30-90Sm標(biāo)志性抗體 5-30核糖體P蛋白標(biāo)志性抗體 5-15核小體標(biāo)志性抗體 50-95PCNA標(biāo)志性抗體 3組蛋白 40-80RNP 15-40SS-A 20-60SS-B 10-20第15頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天新生兒紅斑狼瘡（NEL）靶抗原 陽(yáng)性率(%)SS-A

100藥物誘導(dǎo)的紅斑狼瘡（DIL）靶抗原 陽(yáng)性率(%)組蛋白

95第16頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天原發(fā)性干燥綜合征（SS）靶抗原 陽(yáng)性率(%)SS-A

40-95SS-B 40-95混合性結(jié)締組織?。∕CDT）靶抗原 陽(yáng)性率(%)RNP

95-100第17頁(yè),共20頁(yè)，2024年2月25日，星期天彌漫型進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥靶抗原 陽(yáng)性率(%)PM-Scl

3Scl-70標(biāo)志性抗體 25-75局限型進(jìn)行性系統(tǒng)性硬化癥靶抗原 陽(yáng)性率(%)著絲點(diǎn)