DB32／T 4503-2023 羊人工授精技術(shù)規(guī)程

ICS65.020.20

CCSB43

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DB32/T4503—2023

羊人工授精技術(shù)規(guī)程

Technicalcodeofpracticeforsheep/goatartificialinsemination

2023-07-03發(fā)布2023-08-03實施

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DB32/T4503—2023

羊人工授精技術(shù)規(guī)程

1范圍

本文件規(guī)定了羊人工授精技術(shù)應(yīng)用的場地條件、準備事項、采精、精液品質(zhì)檢查、精液稀釋與保存、母

羊發(fā)情鑒定、輸精、配種記錄等技術(shù)要求。

本文件適用于羊的人工授精。

2規(guī)范性引用文件

下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文

件，僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改單）適用于本

文件。

GB20557—2006山羊冷凍精液

NY/T2169種羊場建設(shè)標準

3術(shù)語和定義

下列術(shù)語和定義適用于本文件。

3.1

臺羊dummysheep/goat

采精時專供公羊爬跨的被固定的活羊或固定好的假羊。

3.2

人工授精artificialinsemination

人為借助專門器械，將采集的種公羊精液經(jīng)檢查、稀釋、保存等處理合格后，輸入到發(fā)情母羊生殖道

內(nèi)，使其妊娠的一種繁殖技術(shù)。

[來源：NY/T1335—2022，3.1]

4場地條件

4.1配種羊舍

4.1.1新建羊場在規(guī)劃設(shè)計時應(yīng)包含配種羊舍，其他羊場也可通過改建或擴建設(shè)置配種羊舍，羊舍結(jié)構(gòu)

設(shè)計應(yīng)符合NY/T2169的規(guī)定。

4.1.2配種羊舍面積應(yīng)按每1000只可繁殖母羊1200m2進行設(shè)計，內(nèi)部空間應(yīng)包括空懷母羊圈、待配

母羊圈、種公羊圈、試情公羊圈和人工授精實驗室、采精間（場地）、輸精間（場地）等設(shè)施。

4.1.3配種舍羊圈宜采用雙列或多列平面布局，走道兩側(cè)羊圈應(yīng)設(shè)圈門，走道與羊床高度應(yīng)持平或高差

≤20cm。

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4.2人工授精實驗室

4.2.1建設(shè)面積一般為10m2~30m2。

4.2.2實驗室內(nèi)應(yīng)設(shè)置無菌間和器材洗滌消毒用的準備間。

4.2.3無菌間的門窗應(yīng)可密閉，室內(nèi)應(yīng)安裝紫外線消毒燈和空調(diào)。

4.2.4準備間應(yīng)配置清洗水池、消毒和干燥設(shè)備，電源功率>5kw。

4.3采精間

4.3.1采精間應(yīng)緊鄰人工授精實驗室，面積以8m2~10m2為宜。

4.3.2采精間內(nèi)應(yīng)設(shè)置水池和采精架，地面應(yīng)硬化并做防滑處理。采精架設(shè)計示意圖見附錄A。

4.4輸精間

4.4.1輸精間宜為獨立空間，可以是圍欄圍起來的專用場地，位置應(yīng)設(shè)在待配種母羊圈的附近。

4.4.2輸精間內(nèi)應(yīng)設(shè)置輸精操作臺或輸精保定欄桿。

5準備事項

5.1配種公羊

5.1.1要求

5.1.1.1應(yīng)符合該品種的種用標準。

5.1.1.2年齡以1歲~5歲為宜，體格健壯、睪丸發(fā)育良好、性欲旺盛。

5.1.1.3公羊與待配種母羊的比例可為1∶200~1∶400。

5.1.2調(diào)教

5.1.2.1調(diào)教時間

青年公羊采精前應(yīng)進行調(diào)教。調(diào)教時間宜從8月齡開始，剛開始每周采精1次，周歲后可按正常頻

率采精。

5.1.2.2調(diào)教方法

5.1.2.2.1開始調(diào)教時，可用體型較大的發(fā)情母羊作為臺羊保定在采精架上。采精成功3次后，發(fā)情母羊

即可換為非發(fā)情母羊或假羊。

5.1.2.2.2對于性欲不強或不會爬跨的后備公羊，可采用以下方法進行調(diào)教：

——在別的公羊配種時讓其在旁邊“觀看”，刺激形成性條件反射；

——將發(fā)情母羊分泌物抹在公羊鼻尖上刺激性欲；

——將種公羊放入非育種群發(fā)情母羊群中，使其先自然交配幾次，再進行采精訓(xùn)練；

——增加運動量和運動強度。

5.1.3補飼

配種期間應(yīng)加強配種公羊日糧營養(yǎng)，增喂雞蛋、胡蘿卜、復(fù)合維生素等。

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5.2試情公羊

5.2.1試情公羊應(yīng)選擇不參與配種、周歲以上的青年公羊，且體格健壯、性欲旺盛和無疾病的個體。

5.2.2試情公羊的數(shù)量可按配種母羊數(shù)量1∶100~1∶200比例準備。

5.2.3試情公羊參與試情期間應(yīng)單獨飼養(yǎng)。

5.3配種母羊

應(yīng)在配種期到來之前，及時做好羔羊斷奶、母羊整群、預(yù)防接種、驅(qū)蟲，并進行短期優(yōu)飼，母羊膘情以

中等水平為宜。

6采精

6.1準備工作

6.1.1器材和物品

人工授精所需的器材和物品應(yīng)在配種期到來之前準備齊全，器材和物品名錄見附錄B。

6.1.2器材清洗與消毒

器材清洗與消毒方法見附錄C。

6.2采精操作

6.2.1假陰道安裝

6.2.1.1將內(nèi)胎裝入外殼內(nèi)，將兩端露出的部分向外殼表面翻卷展平，內(nèi)胎應(yīng)松緊均勻、不扭曲。

6.2.1.2在安裝消毒好的假陰道一端安裝集精杯，從外殼中央充氣孔加入50℃~55℃的熱水至充氣口

處，然后在充氣孔上安裝好橡膠塞和充氣閥（氣嘴），從氣嘴吹入適量空氣，使假陰道采精口的一端內(nèi)胎呈

三角“Y”狀為宜。

6.2.1.3用消毒玻璃棒蘸取少許醫(yī)用凡士林均勻涂于假陰道采精口一端，深度約為內(nèi)胎1/2。

6.2.1.4把消毒過的玻璃棒式溫度計插入假陰道內(nèi)檢測溫度，溫度以40℃~42℃為宜。

6.2.2采精

6.2.2.1采精前先用濕毛巾把公羊陰莖周圍污物擦洗干凈。

6.2.2.2當公羊爬跨臺羊時，迅速拉開公羊，反復(fù)2次后再進行采精。

6.2.2.3采精時，操作人員用右手掌心握住假陰道和集精杯，氣嘴方向朝下，假陰道與地面呈35°~40°夾

角，在公羊爬跨臺羊伸出陰莖時，左手迅速輕托包皮將陰莖導(dǎo)入假陰道內(nèi)，公羊向前聳身射精后迅速將假

陰道豎起，集精杯一端向下。

6.2.2.4打開氣嘴放氣，取下集精杯，蓋上蓋，在采精杯外殼上注明公羊個體編號，盡快送到檢查室內(nèi)，并

放到30℃~37℃的恒溫環(huán)境中，集精杯應(yīng)避免陽光直射，防止污染。

6.2.2.5不宜將不同公羊的精液混合后使用。

6.2.3采精頻率

每只公羊以每天采精1次為宜，特殊情況下1d內(nèi)需采精2次的，則應(yīng)間隔1d后再采精。

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6.2.4采精記錄

應(yīng)及時做好當天種公羊的采精記錄，種公羊采精記錄表樣式見附錄D。

7精液品質(zhì)檢查

7.1色澤與氣味

正常精液應(yīng)為乳白色或淺乳黃色，略帶腥味，無異味。

7.2射精量

可用有刻度的集精杯或注射器測定，一次射精量如<0.5mL的，應(yīng)檢查公羊健康狀況或調(diào)整采精

頻率。

7.3精子密度

用于人工授精的鮮精的精子密度應(yīng)≥6×108個/mL?？刹捎醚蛴嫈?shù)板法或精子密度儀進行測定，

精子密度儀應(yīng)定期用血球計數(shù)板法進行校正。

7.4精子活力

用于人工授精的鮮精的精子活力應(yīng)≥60%。檢測方法按GB20557—2006中A.3的規(guī)定執(zhí)行。

7.5精子畸形率

用于人工授精的鮮精的精子畸形率應(yīng)≤15%。檢測方法按GB20557—2006中A.5的規(guī)定執(zhí)行。

8精液稀釋與保存

8.1精液稀釋液配制

常用精液稀釋液（以下簡稱“稀釋液”）配制方法見附錄E。

8.2稀釋方法

8.2.1精液和稀釋液的溫度應(yīng)保持相同或接近，稀釋過程中應(yīng)避免溫度大幅度反復(fù)波動。具體操作步驟

如下：

——將配制好的稀釋連瓶置于30℃~37℃的恒溫環(huán)境中；

——將檢查合格的精液連同玻璃容器（集精杯或試管）同樣置于相同的恒溫環(huán)境中；

——根據(jù)精子密度、活力和當天需要配種的母羊數(shù)確定稀釋倍數(shù)，應(yīng)保證每只羊每次輸精劑量

（0.1mL~0.2mL）的有效精子數(shù)不少于3000萬個；

——稀釋前用注射器先吸入少量稀釋液清洗內(nèi)壁，棄去后再按需要量正式吸入稀釋液，稀釋時應(yīng)沿

精液容器壁緩緩注入精液內(nèi)并輕輕搖動混勻；

——用移液槍吸取一滴稀釋后的精液，檢查精子活力；

——將稀釋后的精液放回30℃~37℃的恒溫環(huán)境中，蓋上蓋子；

8.2.2精液稀釋后，應(yīng)盡快使用。如有分裝和保存需要，應(yīng)在分裝瓶上注明公羊個體編號、采精時間、精

子密度、活力和稀釋倍數(shù)。

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8.3精液常溫保存

8.3.1將稀釋分裝好的精液置于20℃~25℃下1h~2h后，放入16℃~18℃恒溫箱內(nèi)避光保存；也可用

8層~10層紗布包裹嚴實直接放入16℃~18℃恒溫箱內(nèi)。

8.3.2保存的精液每隔8h~12h搖動一次，搖動時應(yīng)輕緩均勻。

8.3.3精液常溫保存時間不宜超過48h，使用前應(yīng)檢查精子活力，精子活力<30%的不宜使用。

8.4精液低溫保存

8.4.1將稀釋分裝好的精液用8層~10層紗布包裹嚴實，放于冰箱4℃~6℃保鮮層固定位置。

8.4.2保存期間應(yīng)避免頻繁開啟冰箱門。

8.4.3精液低溫保存時間不宜超過72h，使用前應(yīng)檢查精子活力，精子活力<30%的不宜使用。

9母羊發(fā)情鑒定

9.1宜采用“試情公羊”法進行發(fā)情鑒定，試情時間以每天早、晚飼喂前為宜。

9.2試情時，可用試情布兜住試情公羊腹部并確保覆蓋住陰莖。綿羊用試情布規(guī)格為50cm×40cm，山

羊用試情布規(guī)格為40cm×30cm。

9.3試情公羊應(yīng)放入母羊圈內(nèi)進行試情，配有運動場設(shè)施的也可在運動場內(nèi)進行試情。試情人員應(yīng)認

真觀察，遇到母羊擠在一起時，還應(yīng)進行人為驅(qū)散，以保證每只母羊均有接觸試情公羊的機會。

9.4以母羊站立不動、接受爬跨為發(fā)情配種的最佳時機。

9.5被試情公羊找出的所有發(fā)情母羊可集中到配種圈進行配種。

9.6每次試情完畢，應(yīng)將試情布解下，洗凈晾干備用。

10輸精

10.1母羊準備

10.1.1母羊保定可采用站立方式或倒立方式。每日配種母羊較多的羊場或體型較大的母羊適用站立方

式保定。

10.1.2站立方式保定可在距離輸精員站立地面1m左右的輸精臺上用保定架保定母羊，以使站在臺下

的輸精員視線比母羊的輸精部位高10cm~15cm為宜。

10.1.3倒立方式保定可在發(fā)情母羊圈旁設(shè)置一根高度在60cm~80cm可調(diào)的橫桿，將母羊后肢搭在橫

桿上，前肢著地進行保定，1次可保定多只母羊。

10.1.4母羊被保定在保定架上后，先用抹布蘸清水清除糞便等臟物，接著用紙巾擦干余液，再用無液滴

滲出的酒精紗布塊消毒，自然干燥即可。清洗時不應(yīng)使用消毒劑。

10.2輸精方法

10.2.1輸精時由助手掀起羊尾，輸精員配戴LED頭燈，左手將用生理鹽水溫潤過的閉合狀態(tài)的開膣器

沿母羊陰門的形狀緩慢插入陰道后，再輕輕轉(zhuǎn)動90°張開開膣器，調(diào)整頭燈照射角度觀察陰道內(nèi)有無出

血、炎癥等疾病癥狀，確認正常后，通過調(diào)節(jié)深度和角度找到子宮頸口，并穩(wěn)定住開膣器，右手將吸入精液

的輸精槍插入子宮頸口內(nèi)約1cm，同時注入精液，輸精完成后，右手先抽出輸精槍，然后左手一邊慢慢松

開開膣器，一邊從陰道中抽出。對于初產(chǎn)母羊，可采用羊用陰道內(nèi)窺鏡進行輔助輸精。

10.2.2輸精應(yīng)采用一次試情兩次輸精的方式，兩次輸精應(yīng)間隔12h，即早晨試情發(fā)情的母羊當日早、晚

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各輸精一次。完成兩次輸精的母羊即可放回圈內(nèi)，如果24h后母羊通過試情仍表現(xiàn)為發(fā)情，應(yīng)進行第三

次輸精，但在一個發(fā)情期內(nèi)，輸精不超過3次。

11配種記錄

11.1所有完成輸精的母羊應(yīng)及時作好配種記錄，并通過分析配種記錄評價配種成績，定期檢查受胎情

況。配種記錄表樣式見附錄F。

11.2超過三個情期仍未懷孕的母羊應(yīng)作為難孕羊處理。

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附錄A

（資料性）

羊用采精架設(shè)計示意圖

圖A.1給出了羊用采精架設(shè)計示意圖，可根據(jù)羊品種大小酌情調(diào)整。

單位為毫米

圖A.1羊用采精架設(shè)計示意圖

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附錄B

（資料性）

羊人工授精器材與物品

表B.1給出了羊人工授精所需器材與物品的名錄。

表B.1羊人工授精器材與物品

分類器材名稱規(guī)格單位數(shù)量備注

生物顯微鏡雙目鏡，帶顯示屏套1顯示屏分辨率1024×768以上

顯微鏡載物臺恒溫板室溫-50℃可調(diào)臺1數(shù)顯控溫

消毒柜上層臭氧、下層電熱臺1家用型

電子天平500g/0.01g臺1—

儀器設(shè)備恒溫水浴箱帶排水閥，數(shù)顯溫控臺1精液及稀釋液保溫

超聲波清洗機13cm×28cm×15cm臺1器材清洗

電冰箱24L數(shù)顯可調(diào)溫臺1精液低溫保存

電熱高壓消毒鍋18L自控臺1高壓蒸汽消毒

超純水機或蒸餾水機臺1稀釋液配制

蓋玻片20mm×20mm盒5每盒100片

載玻片76mm×26mm盒150片/盒

燒杯50mL~500mL個各2—

三角燒瓶50mL~500mL個各2—

容量瓶100mL~500mL個各2—

玻璃器材廣口瓶500mL（茶色、無色）個各2無色為酒精棉球用

玻璃磨砂下口瓶5000mL個1蒸餾水存用

量筒100mL~500mL個各2—

玻璃漏斗90mm個2—

玻璃攪拌棒250cm根4—

溫度計0℃~100℃支2—

移液槍0uL~200uL個2—

移液器吸頭200uL包11000支/包

移液器支架—個1—

不銹鋼鑷子20cm把1—

常用器械

不銹鋼消毒桶63cm×350cm個2金屬輸精器消毒用

不銹鋼藥勺—個2—

手術(shù)剪18cm把2—

試管架—個1—

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表B.1羊人工授精器材與物品（續(xù)）

分類器材名稱規(guī)格單位數(shù)量備注

假陰道外殼—個10—

假陰道內(nèi)胎—條20—

氣嘴—個20—

開膣器—把5—

專用器械

塑料量杯2000mL個2盛裝開膣器

集精瓶—個20—

頭燈LED、可調(diào)焦、充電式套2帶感應(yīng)控制開關(guān)

輸精器金屬支10—

75%酒精——適量—

檸檬酸鈉分析純、500g/瓶瓶1—

葡萄糖分析純、500g/瓶瓶1—

試劑耗材

青、鏈霉素80萬單位/瓶瓶各20—

生理鹽水——適量—

丁腈手套中號盒10—

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附錄C

（資料性）

器材清洗與消毒方法

C.1器材清洗

C.1.1器材清洗按照“浸泡→初步清洗→精細清洗→自來水沖洗→蒸餾水過洗”流程操作，洗滌劑宜選

用泡沫少、中性、易清除的產(chǎn)品，如家用洗潔精類。

C.1.2精細清洗過程宜用超聲波清洗機來完成。

C.1.3精細清洗后器材可置于自來水龍頭下反復(fù)沖洗，對于容器類器材可采用“灌入?倒出”方式反復(fù)

操作5次以上，此步驟不宜采用盆洗方式。

C.1.4自來水沖洗后器材可置于兩盆蒸餾水中分別過洗一次，對于直接與精液或稀釋液接觸的器材（如

輸精器、集精瓶、稀釋液儲存容器和載玻片等）可增加過洗次數(shù)。

C.2器材消毒

C.2.1金屬、玻璃器材宜采用電熱干燥箱120℃消毒30min。

C.2.2橡膠、尼龍、塑料等不耐高溫的器材宜采用紫外線或臭氧消毒。

C.2.3紗布、毛巾等器材宜采用蒸汽消毒，消毒時間達到30min。

C.2.4開膣器在每次清洗擦干后，可用酒精燈火焰消毒，然后插入生理鹽水杯中備用。

C.2.5輸精槍在每一只母羊輸精完成后，可用75%酒精棉球從后向前擦拭消毒，后用生理鹽水棉球反復(fù)

擦拭，然后再給另外一只母羊輸精。

C.2.6玻璃棒式溫度計可用75%酒精棉球擦拭消毒，后用生理鹽水棉球反復(fù)擦拭。

C.2.7采精、輸精器材不可放入水中煮沸消毒。

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頁

備注

輸精員

）：

只

授精母羊數(shù)量

簽字

（

mL

記錄人

輸精劑量

第

%

活力

h

保存精液

保存時間

：

D

）

來源

保存方式

資料性

（

錄附

%

活力

種公羊采精記錄表

1

種公羊采精記錄表

.

D

：

表

/mL

密度

年齡

億

稀釋比例

稀釋后精液品質(zhì)

。

）

：

代碼

品種

稀釋液

（

%

活力

/mL

密度

億

：

原精液品質(zhì)

mL

射精量

給出了種公羊采精記錄表的樣式

）

1

.

公羊個體編號

時

、

D

日

表

、

采精日期月

（

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附錄E

（資料性）

精液稀釋液配制

E.1基礎(chǔ)稀釋液配制

E.1.1基礎(chǔ)稀釋液配方

配方一：0.9%注射用生理鹽水。

配方二：葡萄糖3.3g，檸檬酸三鈉1.4g，溶于100mL的蒸餾水中。

配方三：乳糖5.5g，葡萄糖3.0g、檸檬酸三鈉1.5g、檸檬酸0.02g，溶于100mL的蒸餾水中。

基礎(chǔ)稀釋液僅用于輸精時的精液稀釋，不宜直接用于精液的保存。

E.1.2配制方法

E.1.2.1按配方稱取試劑放入燒杯中，再用量筒量取雙蒸餾水100mL加入其中，用磁力攪拌器或玻璃棒

攪拌使其溶解。

E.1.2.2將燒杯中的溶液，用一層定性濾紙過濾溶液至三角瓶中，三角瓶口用加硫酸紙或牛皮紙蓋住并

用橡皮筋固定，放在蓋有石棉網(wǎng)的電爐上加熱至沸騰，迅速將其取下，冷卻至常溫。也可裝入耐高溫樣品

瓶用高壓蒸汽滅菌。

E.1.2.3密封的基礎(chǔ)稀釋液可在低溫環(huán)境下長期保存，已啟用的基礎(chǔ)稀釋液可放入在2℃~5℃冰箱中

備用，保存時間不超過12h。

E.2常溫保存稀釋液配制

E.2.1取E.1.1中配方三配制的基礎(chǔ)稀釋液100mL放入消毒過的三角燒瓶或樣品瓶內(nèi)，加入青霉素和

鏈霉素各10萬單位，充分混合均勻后備用。

E.2.2常溫保存稀釋液不可用于精液低溫保存。

E.2.3常溫保存稀釋液現(xiàn)用現(xiàn)配，剩余的棄用。

E.3低溫保存稀釋液配制

E.3.1取E.1.1中配方三配制的基礎(chǔ)稀釋液80mL放入消毒過的三角燒瓶或樣品瓶內(nèi)，加入新鮮卵黃

20mL，再加入青霉素和鏈霉素各10萬單位，充分混合均勻后備用。

E.3.2低溫保存稀釋液也可用于常溫精液稀釋。

E.3.3低溫保存稀釋液現(xiàn)用現(xiàn)配，剩余的棄用。

12

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頁

備注

）

只

死胎

、

編號

畸形

（

♀

產(chǎn)羔登記

♂

）：

）

日

簽字

/