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文檔簡介
ICS67.120.30
B52
DB32
江蘇省地方標(biāo)準(zhǔn)
DB32/T3719—2020
中華絨螯蟹“諾亞1號”
Chinesemitten-handedcrabNoah’sArkNO.1
2020-01-06發(fā)布2020-01-30實施
江蘇省市場監(jiān)督管理局發(fā)布
DB32/T3719-2020
中華絨螯蟹“諾亞1號”
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了中華絨螯蟹“諾亞1號”產(chǎn)品的術(shù)語和定義、要求、規(guī)格、試驗方法、檢驗規(guī)則、捕
撈、暫養(yǎng)、標(biāo)志、捆扎、包裝、運(yùn)輸、貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華絨螯蟹“諾亞1號”的成品。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB/T191包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志
GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定
GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定
GB5009.5食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測定
GB5009.6食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測定
GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測定
GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定
GB5009.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎘的測定
GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測定
GB/T5009.19食品中有機(jī)氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定
GB/T5009.162動物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留量的測定
GB5009.190食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中指示性多氯聯(lián)苯含量的測定
GB5009.205食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中二噁英及其類似物毒性當(dāng)量的測定
GB5009.268食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多元素的測定
GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
GB11607漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)
GB/T17924地理標(biāo)志產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)通用要求
GB/T19783中華絨鰲蟹
GB/T19857水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測定
GB/T20014.14良好農(nóng)業(yè)規(guī)范第14部分:水產(chǎn)池塘養(yǎng)殖基礎(chǔ)控制點與符合性規(guī)范
GB/T20361水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測定高效液相色譜熒光檢測法
GB/T20366動物源產(chǎn)品中喹諾酮類殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
GB/T21317動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測方法
GB/T21323動物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
GB/T22338動物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測定
GB23200.92食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物源性食品中五氯酚殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜法
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DB32/T3719-2020
SC/T3015水產(chǎn)品中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的測定
SC/T3016水產(chǎn)品抽樣方法
SC/T9101淡水池塘養(yǎng)殖水排放要求
SN/T1928進(jìn)出口食品中硝基咪唑殘留量檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
SN/T3032出口食品中三聚氰胺和三聚氰酸檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
SN/T3235出口動物源食品中多類禁用藥物殘留量檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
DB32/T593中華絨螯蟹產(chǎn)品
農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
農(nóng)業(yè)部1025號公告-23-2008動物源食品中磺胺類藥物殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008水產(chǎn)品中17中磺胺類及15種諾喹酮類藥物殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜
法
3術(shù)語和定義
3.1中華絨螯蟹“諾亞1號”
中華絨螯蟹“諾亞1號”(以下統(tǒng)稱諾亞1號蟹)是指選用“諾亞1號”蟹種養(yǎng)殖的成蟹,其質(zhì)量符
合GB/T19783的要求。
4要求
4.1環(huán)境條件
水質(zhì)應(yīng)清新無污染,符合GB11607規(guī)定。pH值7.5-8.5,溶解氧≥5mg/L,水深1.2-2.0m,透明度0.4m
以上,池底平坦,淤泥少。
4.2蟹種
親本為諾亞方舟基地或長江水系培育而成的國家水產(chǎn)新品種“諾亞1號”,大眼幼體由諾亞方舟在
定點蟹苗繁育場繁育而成,規(guī)格為14萬頭/kg,一齡蟹種由諾亞方舟及子公司的蟹種培育基地培育成,
規(guī)格為20只/kg-120只/kg,并符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)。
4.3養(yǎng)殖周期
在養(yǎng)殖基地內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)周期不少于200天。
4.4感官要求
諾亞1號蟹的感官應(yīng)符合表1要求。
表1諾亞1號蟹的感官指標(biāo)
項目指標(biāo)
體表體表清潔,紋理清晰,沒有寄生蟲及其他附著物。背面淡青色或黃褐色,腹部灰白。
甲殼堅硬,頭胸甲呈方圓形,后半部寬于前半部,中央隆起,表面凹凸不平。
活力反應(yīng)靈敏,活力強(qiáng)。
氣味具有諾亞1號蟹固有的鮮味,無異味。
鰓鰓絲清晰完整,無色或微褐色。
附肢附肢完整,關(guān)節(jié)處肌肉飽滿。
組織肌肉紋理清晰,有彈性,不易剝離。
水煮肌肉組織緊密有彈性,肉質(zhì)鮮嫩,蟹黃厚實酥松,氣味微甜。
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4.5產(chǎn)品分級
4.5.1規(guī)格等級
諾亞1號蟹按個體體重的不同分成特級、一級、二級、三級、四級、五級,規(guī)格應(yīng)符合表2的規(guī)定。
表2諾亞1號蟹的規(guī)格等級
g/只
規(guī)格
雄蟹雌蟹
特級≥300≥200
一級250-299175-199
二級200-249150-174
三級175-199125-149
四級150-174100-124
五級<150<100
4.5.2質(zhì)量等級
諾亞1號蟹分為一級、二級共兩個質(zhì)量等級,等級指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。
表3諾亞1號蟹的質(zhì)量等級
項目一級二級
外觀蟹體清潔,無斑點,附肢齊全。蟹體清潔,斑點少,附肢齊全。
內(nèi)在品質(zhì)性腺飽滿,無透明區(qū)性腺有1-2mm透明區(qū)。
肥滿度,g/cm3≥0.41≥0.36
性腺占體重的百分比,%≥7.5≥6.5
4.6理化指標(biāo)
10月中旬至11月中旬,蟹體的理化指標(biāo)應(yīng)符合表4的規(guī)定。
表4諾亞1號蟹的理化指標(biāo)
項目雄蟹雌蟹
粗蛋白/(%)≥14.515.5
粗脂肪/(%)≥7.59.5
水分/(%)≤6865
灰分/(%)≤1.81.5
4.7安全衛(wèi)生指標(biāo)
安全指標(biāo)應(yīng)符合表5的規(guī)定。
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表5諾亞1號蟹的安全指標(biāo)
序號檢驗項目指標(biāo)檢測方法
1鎘(以Cd計),μg/kg≤500GB5009.15
GB/T19857
2孔雀石綠a不得檢出
GB/T20361
3氯霉素,μg/kg不得檢出GB/T22338
4氟苯尼考,μg/kg≤100GB/T22338
5呋喃唑酮代謝物不得檢出農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006
6呋喃它酮代謝物不得檢出農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006
7呋喃西林代謝物不得檢出農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006
8呋喃妥因代謝物不得檢出農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006
恩諾沙星(以恩諾沙星與環(huán)丙沙星之和GB/T20366
9≤5
計),μg/kg農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008
GB/T20366
10氧氟沙星不得檢出
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008
GB/T20366
11培氟沙星不得檢出
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008
GB/T20366
12洛美沙星不得檢出
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008
GB/T20366
13諾氟沙星不得檢出
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008
SC/T3015
14四環(huán)素,μg/kg≤100
GB/T21317
SC/T3015
15金霉素,μg/kg≤100
GB/T21317
SC/T3015
16土霉素,μg/kg≤100
GB/T21317
農(nóng)業(yè)部1025號公告-23-2008
17磺胺類(總量)b不得檢出
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008
18地西泮不得檢出SN/T3235
19甲硝唑不得檢出SN/T1928
20地美硝唑不得檢出SN/T1928
21洛硝噠唑不得檢出SN/T1928
22羥基甲硝唑c不得檢出SN/T1928
23羥甲基甲硝咪唑d不得檢出SN/T1928
24五氯酚酸鈉(以五氯酚計)不得檢出GB23200.92
25甲基汞,mg/kg≤0.5GB5009.17
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表5(續(xù))
序號檢驗項目指標(biāo)檢測方法
26無機(jī)砷,mg/kg≤0.5GB5009.11
27鉛,mg/kg≤0.3GB5009.12
28指示性多氯聯(lián)苯,mg/kg≤0.2GB5009.190
29己烯雌酚,μg/kg不得檢出SN/T3235
30溴氰菊酯,mg/kg不得檢出GB/T5009.162
注:a.孔雀石綠系指孔雀石綠及其代謝物隱色孔雀石綠殘留量之和,以孔雀石綠表示。
b.磺胺類(總量)項目至少包含磺胺嘧啶、磺胺二甲嘧啶、磺胺甲基嘧啶、磺胺甲惡唑、磺胺間二甲氧嘧啶、磺胺
鄰二甲氧嘧啶、磺胺間甲氧嘧啶、磺胺氯噠嗪、磺胺喹惡啉,如檢出其他磺胺藥物殘留,一并計入磺胺類(總量)并判定。
c.羥基甲硝唑為甲硝唑代謝物。
d.羥甲基甲硝咪唑為地美硝唑、洛硝噠唑代謝物。
4.8風(fēng)險監(jiān)控指標(biāo)
風(fēng)險監(jiān)控指標(biāo)應(yīng)符合表6要求。
表6諾亞1號蟹的風(fēng)險監(jiān)控指標(biāo)
序號項目類別項目指標(biāo)檢測方法
1四環(huán)素類強(qiáng)力霉素,μg/kg≤50GB/T21317
2結(jié)晶紫不得檢出
染料類GB/T19857
3隱性結(jié)晶紫不得檢出
4化學(xué)元素類銅,μg/kg≤20000GB5009.268
5氨基糖苷類新霉素,μg/kg≤500GB/T21323
6環(huán)境污染物二噁英及其多氯聯(lián)苯,pg/g≤6.5GB5009.205
7六六六,mg/kg≤0.05
殺蟲劑GB/T5009.19
8滴滴涕,mg/kg≤0.05
9非法添加物三聚氰胺不得檢出SN/T3032
10環(huán)丙沙星,μg/kg≤5
11丹諾沙星,μg/kg≤5
12沙拉沙星,μg/kg≤5
13喹諾酮類藥物麻保沙星,μg/kg≤5GB/T20366
14惡喹酸,μg/kg≤5
15氟甲喹,μg/kg≤5
16雙(二)氟沙星,μg/kg≤5
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5檢驗方法
5.1感官特征
5.1.1感官檢驗
將試樣放在白色搪瓷盤中,用目測、手掂、捏,鼻嗅檢查。當(dāng)感官難以判定產(chǎn)品質(zhì)量時,進(jìn)行水煮
試驗。
5.1.2水煮試驗
將2-3只蟹用清水洗凈放入蒸煮容器中,加少量水,以剛沒過整蟹為準(zhǔn),煮10-15分鐘,打開蓋,
聞其味,品嘗肉質(zhì)。
5.2等級檢驗
5.2.1規(guī)格等級
用靈敏度為0.1g的天秤稱重,進(jìn)行規(guī)格分級。
5.2.2肥滿度的測定
按DB32/T593的方法執(zhí)行。
5.3蛋白質(zhì)的測定
按GB5009.5的方法執(zhí)行。
5.4脂肪的測定
按GB5009.6的方法執(zhí)行。
5.5水分的測定
按GB5009.3的方法執(zhí)行。
5.6灰分的測定
按GB5009.4的方法執(zhí)行。
6檢驗規(guī)則
6.1組批規(guī)則
同一養(yǎng)殖場、同等級、同批次、同時收獲的諾亞1號蟹為一個檢驗批次。
6.2抽樣方法
按SC/T3016的規(guī)定執(zhí)行。
6.3檢驗分類
產(chǎn)品檢驗分為出場檢驗和型式檢驗。
6.3.1出場檢驗
每批產(chǎn)品出場前,出場檢驗由生產(chǎn)者執(zhí)行,檢驗項目為等級規(guī)格、感官指標(biāo)。
6.3.2型式檢驗
型式檢驗是對產(chǎn)品進(jìn)行全面考核,即對本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定的全部要求進(jìn)行檢驗,有下列情形之一者應(yīng)進(jìn)行
型式檢驗:
a)申請綠色食品農(nóng)產(chǎn)品標(biāo)識;
b)有關(guān)行政部門提出型式檢驗要求;
c)前后兩次抽樣檢驗結(jié)果差異較大;
d)正常養(yǎng)殖時,每年至少一次型式檢驗;
6.4判定規(guī)則
6.4.1所有檢驗指標(biāo)都符合本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,則判定該批次產(chǎn)品合格。
6.4.2衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)中有一項不符合本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,則判定該批次產(chǎn)品不合格。
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6.4.3除衛(wèi)生指標(biāo)外的其他指標(biāo)有兩項或兩項以上不符合本標(biāo)準(zhǔn)的規(guī)定,則判定該產(chǎn)品不合格,有一項
指標(biāo)不合格,可降級或進(jìn)行復(fù)檢,以復(fù)檢結(jié)果為準(zhǔn)。
7捕撈及暫養(yǎng)
7.1捕撈
捕撈方式可以是地籠捕撈、塘埂捕捉和干塘捕撈等,但不得使用燈光捕撈。捕撈后池塘尾水排放符
合SC/T9101的要求。
7.2暫養(yǎng)
成蟹捕撈后在暫養(yǎng)塘分規(guī)格分網(wǎng)箱暫養(yǎng),上市前經(jīng)專用清洗池清水暫養(yǎng)(15-30)分鐘,清洗用水
符合GB5749的規(guī)定,徹底去除成蟹鰓中泥沙。
8標(biāo)志、捆扎、包裝、運(yùn)輸、貯存
8.1標(biāo)志
諾亞1號蟹的標(biāo)志使用,應(yīng)符合GB/T17924規(guī)定。
8.2捆扎
諾亞1號蟹用棉繩或香草將蟹的兩只大螯及附肢捆扎住,捆扎物不得超過蟹體重量的5%。
8.3包裝
8.3.1將蟹頭部朝下整齊排列于包裝容器中,包裝容器應(yīng)有透氣孔;包裝材料應(yīng)衛(wèi)生、潔凈,無毒、無
害。
8.3.2運(yùn)輸包裝物的圖示標(biāo)志應(yīng)符合GB/T191的規(guī)定。
8.4運(yùn)輸、貯存
8.4.1在低溫清潔的環(huán)境中裝運(yùn),保證鮮活,防止擠壓。運(yùn)輸工具應(yīng)清潔衛(wèi)生、無毒、無異味,不得與
有毒有害物品混運(yùn)和重壓,嚴(yán)防運(yùn)輸污染。
8.4.2活體諾亞1號蟹應(yīng)貯存于潔凈環(huán)境中,防止有毒有害物質(zhì)的污染及其他損害。
9記錄
符合GB/T20014.14的要求,及時登記蟹種、飼料、餌料、藥物等投入品的使用情況,記錄保存時
間不得少于2年。
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附錄A
(規(guī)范性附錄)
A.1親本來源和類型
A.1.1親本來源
2005年采用長江水系野生中華絨螯蟹為基礎(chǔ)群體,經(jīng)群體繼代選育而成。2014年~2015年經(jīng)歷生產(chǎn)
小試、中試試驗,2017年4月經(jīng)全國水產(chǎn)原種和良種審定委員會審定,定名為諾亞1號(品種登記號:
GS-01-005-2016)。
A.1.2親本特性
形態(tài)指標(biāo):“青背、白肚、金爪、黃毛”,是指背甲淡青色,腹部銀白色或灰白色,螯足具有濃密
的絨毛,步足上的剛毛呈金黃色;步足長,額齒明顯,額齒間缺刻較深,呈“U”字型。
生物學(xué)指標(biāo):性腺發(fā)育良好,體重規(guī)格達(dá)標(biāo)(雄蟹大于200g,雌蟹大于150g)。
A.2主要特征
A.2.1形態(tài)學(xué)特征
頭胸甲呈方圓形,后半部寬于前半部,中央隆起,表面凹凸不平。額緣具4尖齒,齒間缺刻較深,
第4尖齒小而明顯,內(nèi)額齒間缺刻呈“U”型。額部兩側(cè)有一對帶柄的復(fù)眼。頭胸部兩側(cè)有5對足,第1
對為螯足,末端似鉗,布滿棕褐色絨毛,后4對為步足,長節(jié)末前角各有1尖齒。腹部覆以腹甲,腹部扁
平,雄蟹腹臍呈三角形,雌蟹腹臍呈卵圓形。頭胸甲背面淡青色或黃褐色,腹部灰白。
諾亞1號蟹的外部形態(tài)見圖1和圖2。
雌性雄性
圖1諾亞1號蟹外形(背面)
雌性雄性
圖2諾亞1號蟹外形(腹面)
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A.2.2可量性狀
諾亞1號蟹的主要形態(tài)性狀比值見表1。
表1諾亞1號蟹主要形態(tài)性狀比值
平均值±標(biāo)準(zhǔn)差
項目
雄雌
體高/頭胸甲長0.560±0.0220.574±0.018
頭胸甲寬/頭胸甲長1.106±0.0261.073±0.027
中額齒間距/頭胸甲長0.077±0.0060.072±0.009
兩側(cè)額齒間距/頭胸甲長0.228±0.0110.226±0.011
第一側(cè)齒間距/頭胸甲長0.603±0.0180.584±0.014
側(cè)缺刻至前疣狀突/頭胸甲長0.081±0.0100.081±0.007
側(cè)缺刻至中疣狀突/頭胸甲長0.189±0.0080.182±0.011
側(cè)缺刻至后疣狀突/頭胸甲長0.224±0.0110.216±0.012
第四側(cè)齒至中缺刻/頭胸甲長0.695±0.0110.671±0.013
第四側(cè)齒至側(cè)缺刻/頭胸甲長0.645±0.0120.628±0.012
第四側(cè)齒至前疣突/頭胸甲長0.637±0.0130.618±0.017
第二步足長節(jié)長/頭胸甲長0.778±0.0250.690±0.032
第二步足趾節(jié)長/頭胸甲長0.430±0.0600.407±0.027
A.3形體與繁殖
A.3.1形體指標(biāo)
諾亞1號蟹體重與頭胸甲長的關(guān)系式為:
雄蟹:W=0.0207L2.2173(R=0.8538),
雌蟹:W=0.0041L2.5372(R=0.8247)。
式中:
W——體重,g;
L——頭胸甲長,cm。
A.3.2繁殖
A.3.2.1諾亞1號蟹生殖洄游一般在10月中下旬-11月下旬。
A.3.2.2性成熟雌蟹可進(jìn)行一次交配,多次產(chǎn)卵。
A.3.2.3不同體重諾亞1號蟹抱卵量見表2。
表2不同體重諾亞1號蟹的抱卵量
體重/g抱卵量/粒
<100<400000
100~150350000~600000
150~200500000~800000
>200>750000
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A.4遺傳學(xué)特性
A.4.1細(xì)胞遺傳學(xué)特性
諾亞1號蟹的染色體數(shù)目為146(2n),為點狀型。
圖3諾亞1號蟹染色體
A.4.2生化遺傳學(xué)特性
諾亞1號蟹肌肉組織脂酶(EST)同工酶的電泳圖譜見圖4。
圖4諾亞1號蟹肌肉組織脂酶(EST)同工酶電泳圖
A.4.3分子遺傳學(xué)特性
A.4.3.1RAPD
篩選到2個RAPD引物S1與S15在諾亞1號蟹群體中擴(kuò)增條帶清晰,擴(kuò)增產(chǎn)物長度分別為950bp
和750bp(圖5,6)。
10
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圖5引物S1PCR擴(kuò)增
M:100bpDNAladder,1-15:雌蟹,16-24:雄蟹
圖6引物S15PCR擴(kuò)增
M:100bpDNAladder,1-15:雌蟹,16-24:雄蟹
A.4.3.2核糖體內(nèi)轉(zhuǎn)錄區(qū)1
用所設(shè)計的特異引物ITS1,在諾亞1號蟹群體中的核糖體轉(zhuǎn)錄區(qū)1中進(jìn)行擴(kuò)增,均可擴(kuò)出一條大
小為390bp的條帶,見圖7。
圖7引物ITS1PCR擴(kuò)增
M:DL2000,1-15:雌蟹,16-24:雄蟹
A.5檢測方法
A.5.1形態(tài)特征
目測檢查。
11
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A.5.2可量指標(biāo)
10月-11月取性成熟蟹,雌雄個體樣本數(shù)均大于30只。用感量不低于0.001g的天平稱重,計算,
取算術(shù)平均值。
A.5.3繁殖力測定
在繁殖季節(jié),將附著在抱卵蟹腹部剛毛上的受精卵刮下稱重。取3組樣品,采用0.001g電子天平
各稱取1g卵,在解剖鏡下計數(shù),計算平均每克卵粒數(shù)和抱卵數(shù)。
A.5.4染色體測定
按GB/T18654.12的規(guī)定執(zhí)行。
A.5.5同工酶測定
按GB17716中的第6章的規(guī)定執(zhí)行。
A.5.6隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)(RAPD)測定
A.5.6.1樣本采集與保存
取約200mg肌肉、肝臟、血液或性腺的新鮮樣品,于液氮、干冰及-30℃低溫保存,或于95%乙醇
保存。
A.5.7基因組DNA提取
采用酚-氯仿抽提法提取基因組DNA。
取個體新鮮肌肉組織(步足或螯足)約200mg,于冰上預(yù)冷的研缽內(nèi)研磨,放入1.5mL的eppendorf
離心管中,加入2倍體積的裂解緩沖液(10mmol/LTris-HCL,pH值8.0;0.1mol/LEDTA,pH值8.0;
0.5%SDS)混勻,加入蛋白酶K至終濃度為100μg/mL,56℃消化3-4h。冷卻至室溫后,室溫下13200r/min
離心10min,取上清液加入等體積的平衡酚-氯仿-異戊醇(25:24:1)劇烈混勻,13200r/min室溫離心
10min。取粘稠水相,加入2倍體積的無水乙醇,-20℃靜置30min,13200r/min室溫離心10min,棄上
清液晾干。將上述沉淀溶于200μLTE(2mlTE,pH值7.6,溶解2mg粗制胰蛋白酶RNaseI),37℃消
化30min。1%瓊脂糖凝膠電泳觀察提取的DNA濃度和純度,4℃保存。
A.5.7.1基因組DNA的PCR擴(kuò)增
在0.5mL的薄壁管中加入總體積為25μL的PCR反應(yīng)混合液。其中2.5μL10×PCR反應(yīng)緩沖液
(100mmol/LTris-HCL,500mmol/LKCl,1.3mg/mLBSA,0.01%Gelatin,pH值8.4);
2μLMgCl2(2.5mmol/L);1μLdNTP(2.5mmol/L);1μLRAPD引入物(10μmol/L);0.2μLTaq酶(5U/μL);
0.7μL基因組DNA;ddH2O補(bǔ)足體積。
PCR擴(kuò)增程序:94℃預(yù)變性7min;94℃變性1min,37℃退火1min,72℃延伸2min,40~45個循
環(huán);72℃延伸10min,4℃保存。每次反應(yīng)設(shè)置不含模板的空白對照。
A.5.7.2PCR擴(kuò)增產(chǎn)物的電泳分離與觀察
將擴(kuò)增產(chǎn)物置于1%瓊脂糖凝膠上進(jìn)行電泳,取10μLPCR擴(kuò)增產(chǎn)物,用移液器將樣品加入樣品孔。
以溴酚藍(lán)做指示劑,在5V/cm凝膠的電壓下進(jìn)行電泳。當(dāng)指示劑遷移至足夠分離DNA片段的距離時,
停止電泳。用0.5μg/mL的溴化乙錠染色20min后,在凝膠成像系統(tǒng)下觀察并照相。
___________________
12
DB32/T3719-2020
前言
本標(biāo)準(zhǔn)按照GB/T1.1—2009給出的規(guī)則起草。
本標(biāo)準(zhǔn)由江蘇諾亞方舟農(nóng)業(yè)科技有限公司提出。
本標(biāo)準(zhǔn)起草單位:江蘇諾亞方舟農(nóng)業(yè)科技有限公司、中國水產(chǎn)科學(xué)研究院淡水漁業(yè)研究中心。
本標(biāo)準(zhǔn)主要起草人:莊紅根、徐跑、戴飛、董在杰、郭風(fēng)英。
I
DB32/T3719-2020
中華絨螯蟹“諾亞1號”
1范圍
本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了中華絨螯蟹“諾亞1號”產(chǎn)品的術(shù)語和定義、要求、規(guī)格、試驗方法、檢驗規(guī)則、捕
撈、暫養(yǎng)、標(biāo)志、捆扎、包裝、運(yùn)輸、貯存。
本標(biāo)準(zhǔn)適用于中華絨螯蟹“諾亞1號”的成品。
2規(guī)范性引用文件
下列文件對于本文件的應(yīng)用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,僅注日期的版本適用于本文件。
凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。
GB/T191包裝儲運(yùn)圖示標(biāo)志
GB5009.3食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中水分的測定
GB5009.4食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中灰分的測定
GB5009.5食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中蛋白質(zhì)的測定
GB5009.6食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中脂肪的測定
GB5009.11食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總砷及無機(jī)砷的測定
GB5009.12食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鉛的測定
GB5009.15食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中鎘的測定
GB5009.17食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中總汞及有機(jī)汞的測定
GB/T5009.19食品中有機(jī)氯農(nóng)藥多組分殘留量的測定
GB/T5009.162動物性食品中有機(jī)氯農(nóng)藥和擬除蟲菊酯農(nóng)藥多組分殘留量的測定
GB5009.190食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中指示性多氯聯(lián)苯含量的測定
GB5009.205食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中二噁英及其類似物毒性當(dāng)量的測定
GB5009.268食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中多元素的測定
GB5749生活飲用水衛(wèi)生標(biāo)準(zhǔn)
GB11607漁業(yè)水質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)
GB/T17924地理標(biāo)志產(chǎn)品標(biāo)準(zhǔn)通用要求
GB/T19783中華絨鰲蟹
GB/T19857水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測定
GB/T20014.14良好農(nóng)業(yè)規(guī)范第14部分:水產(chǎn)池塘養(yǎng)殖基礎(chǔ)控制點與符合性規(guī)范
GB/T20361水產(chǎn)品中孔雀石綠和結(jié)晶紫殘留量的測定高效液相色譜熒光檢測法
GB/T20366動物源產(chǎn)品中喹諾酮類殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
GB/T21317動物源性食品中四環(huán)素類獸藥殘留量檢測方法
GB/T21323動物組織中氨基糖苷類藥物殘留量的測定高效液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
GB/T22338動物源性食品中氯霉素類藥物殘留量測定
GB23200.92食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)動物源性食品中五氯酚殘留量的測定液相色譜-質(zhì)譜法
1
DB32/T3719-2020
SC/T3015水產(chǎn)品中土霉素、四環(huán)素、金霉素殘留量的測定
SC/T3016水產(chǎn)品抽樣方法
SC/T9101淡水池塘養(yǎng)殖水排放要求
SN/T1928進(jìn)出口食品中硝基咪唑殘留量檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
SN/T3032出口食品中三聚氰胺和三聚氰酸檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
SN/T3235出口動物源食品中多類禁用藥物殘留量檢測方法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法
DB32/T593中華絨螯蟹產(chǎn)品
農(nóng)業(yè)部783號公告-1-2006水產(chǎn)品中硝基呋喃類代謝物殘留量的測定液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
農(nóng)業(yè)部1025號公告-23-2008動物源食品中磺胺類藥物殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法
農(nóng)業(yè)部1077號公告-1-2008水產(chǎn)品中17中磺胺類及15種諾喹酮類藥物殘留檢測液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜
法
3術(shù)語和定義
3.1中華絨螯蟹“諾亞1號”
中華絨螯蟹“諾亞1號”(以下統(tǒng)稱諾亞1號蟹)是指選用“諾亞1號”蟹種養(yǎng)殖的成蟹,其質(zhì)量符
合GB/T19783的要求。
4要求
4.1環(huán)境條件
水質(zhì)應(yīng)清新無污染,符合GB11607規(guī)定。pH值7.5-8.5,溶解氧≥5mg/L,水深1.2-2.0m,透明度0.4m
以上,池底平坦,淤泥少。
4.2蟹種
親本為諾亞方舟基地或長江水系培育而成的國家水產(chǎn)新品種“諾亞1號”,大眼幼體由諾亞方舟在
定點蟹苗繁育場繁育而成,規(guī)格為14萬頭/kg,一齡蟹種由諾亞方舟及子公司的蟹種培育基地培育成,
規(guī)格為20只/kg-120只/kg,并符合相應(yīng)的國家標(biāo)準(zhǔn)。
4.3養(yǎng)殖周期
在養(yǎng)殖基地內(nèi)連續(xù)飼養(yǎng)周期不少于200天。
4.4感官要求
諾亞1號蟹的感官應(yīng)符合表1要求。
表1諾亞1號蟹的感官指標(biāo)
項目指標(biāo)
體表體表清潔,紋理清晰,沒有寄生蟲及其他附著物。背面淡青色或黃褐色,腹部灰白。
甲殼堅硬,頭胸甲呈方圓形,后半部寬于前半部,中央隆起,表面凹凸不平。
活力反應(yīng)靈敏,活力強(qiáng)。
氣味具有諾亞1號蟹固有的鮮味,無異味。
鰓鰓絲清晰完整,無色或微褐色。
附肢附肢完整,關(guān)節(jié)處肌肉飽滿。
組織肌肉紋理清晰,有彈性,不易剝離。
水煮肌肉組織緊密有彈性,肉質(zhì)鮮嫩,蟹黃厚實酥松,氣味微甜。
2
DB32/T3719-2020
4.5產(chǎn)品分級
4.5.1規(guī)格等級
諾亞1號蟹按個體體重的不同分成特級、一級、二級、三級、四級、五級,規(guī)格應(yīng)符合表2的規(guī)定。
表2諾亞1號蟹的規(guī)格等級
g/只
規(guī)格
雄蟹雌蟹
特級≥300≥200
一級250-299175-199
二級200-249150-174
三級175-199125-149
四級150-174100-124
五級<150<100
4.5.2質(zhì)量等級
諾亞1號蟹分為一級、二級共兩個質(zhì)量等級,等級指標(biāo)應(yīng)符合表3的規(guī)定。
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