SNT 5362-2021 出口食品中氟啶蟲胺腈殘留量的測定-PDF解密

ICS67.050CCSX04中華人民共和國出入境檢驗(yàn)檢疫行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)SN/T5362—2021出口食品中氟啶蟲胺腈殘留量的測定DeterminationoftheSulfoxaflorresiduesinfoodsforexport2021-11-22發(fā)布2022-06-01實(shí)施中華人民共和國海關(guān)總署發(fā)布ⅠSN/T5362—2021本文件按照GB/T1.1—2020給出的規(guī)則起草。本文件由中華人民共和國海關(guān)總署提出并歸口。本文件起草單位:中華人民共和國長春海關(guān)。1SN/T5362—2021出口食品中氟啶蟲胺腈殘留量的測定1范圍本文件規(guī)定了出口食品中氟啶蟲胺腈殘留量的液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜(LC-MS/MS)和高效液相色譜(HPLC)檢測方法。氟啶蟲胺腈殘留量的測定。2規(guī)范性引用文件下列文件中的內(nèi)容通過文中的規(guī)范性引用而構(gòu)成本文件必不可少的條款。其中,注日期的引用文件,僅該日期對應(yīng)的版本適用于本文件;凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。GB/T6682分析實(shí)驗(yàn)室用水規(guī)格和試驗(yàn)方法GB/T2763—2019食品安全國家標(biāo)準(zhǔn)食品中農(nóng)藥最大殘留限量3術(shù)語和定義本文件沒有需要界定的術(shù)語和定義。第一法液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法4方法提要試樣中的氟啶蟲胺腈殘留采用乙腈提取,提取液經(jīng)無水硫酸鎂、石墨化炭黑、PSA粉末、C18固相吸附劑分散固相萃取凈化,用液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜方法檢測和確證,基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)曲線外標(biāo)法定量。5試劑和材料除另有說明外,所用試劑均為分析純,水為GB/T6682規(guī)定的一級水。5.1乙腈(CH3CN):色譜純。5.2甲酸(CH2O2):色譜純。5.3氯化鈉(NaCl)。5.4C18固相吸附劑:粒徑40μm~60μm。5.5無水硫酸鎂(MgSO4):550℃灼燒4h,在干燥器內(nèi)冷卻至室溫,貯于密封瓶中備用。5.6石墨化炭黑(GCB)。5.7乙二胺-N-丙基硅烷(PSA)吸附劑:粒徑40μm~60μm。5.8氟啶蟲胺腈標(biāo)準(zhǔn)品(Sulfoxaflor,C10H10F3N3OS,CAS號:946578-00-3,純度大于等于98%)。2SN/T5362—20215.9標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液:準(zhǔn)確稱取適量上述標(biāo)準(zhǔn)品,用乙腈溶解并配制成濃度為1mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)儲備溶液,-18℃下保存。5.10標(biāo)準(zhǔn)中間溶液:用乙腈稀釋標(biāo)準(zhǔn)儲備液至終濃度為10mg/L,4℃下保存。5.11基質(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液:吸取適量的標(biāo)準(zhǔn)中間溶液,用空白樣品提取液配成適當(dāng)濃度的基質(zhì)匹配標(biāo)準(zhǔn)工作溶液?，F(xiàn)配現(xiàn)用。5.12微孔濾膜:0.22μm,有機(jī)系。6儀器和設(shè)備6.1液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀:配電噴霧離子源(ESI)。6.2組織搗碎機(jī)。6.3粉碎機(jī)。6.4分析天平:感量0.01mg和0.01g。6.5均質(zhì)儀。6.6超聲波清洗器。6.7旋渦混合器。6.8低溫離心機(jī):10000r/min,控溫范圍為-10℃至室溫。6.9旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀。7樣品制備與保存7.1試樣制備樣部位按GB2763—2019附錄A執(zhí)行,經(jīng)搗碎機(jī)充分搗碎均勻;牛奶及蜂蜜混合均勻,裝入潔凈容器,密封,標(biāo)明標(biāo)記。7.2試樣保存雞蛋和牛奶等試樣于4℃以下保存;辣椒、黃瓜、蘋果、梨、牛肉、雞肉、魚、豬肝等試樣于-18℃以下保存。大米、高粱、松子仁及蜂蜜等試樣常溫保存。在制樣的操作過程中,應(yīng)防止樣品污染或發(fā)生殘留物含量的變化。8測定步驟8.1提取準(zhǔn)確稱取10g(精確到0.01g)試樣于50mL具塞離心管中,加入20mL乙腈、1.0g無水硫酸鎂、1.0g氯化鈉,高速均質(zhì)1min,超聲10min,10000r/min離心5min。上清液過濾紙收集到雞心瓶中,殘?jiān)尤?0mL乙腈重復(fù)提取一次,合并兩次上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至近干,用1mL乙腈復(fù)溶,待凈化。準(zhǔn)確稱取10g(精確到0.01g)試樣于50mL具塞離心管中,加入20mL乙腈、4.0g無水硫酸鎂、3SN/T5362—20212.0g氯化鈉,高速均質(zhì)1min,超聲10min,10000r/min離心5min。上清液過濾紙收集到雞心瓶中,殘?jiān)尤?0mL乙腈重復(fù)提取一次,合并兩次上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至近干,用1mL乙腈復(fù)溶,待凈化。準(zhǔn)確稱取10g(精確到0.01g)試樣于50mL具塞離心管中,加入20mL乙腈、2.0g無水硫酸鎂、2.0g氯化鈉,高速均質(zhì)1min,超聲10min,10000r/min離心5min。上清液過濾紙收集到雞心瓶中,殘?jiān)尤?0mL乙腈重復(fù)提取一次,合并兩次上清液于旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀上減壓蒸餾至近干,用1mL乙腈復(fù)溶,待凈化。8.2凈化將全部提取液轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有25mgC18、25mgPSA、50mg石墨化炭黑及150mg無水硫酸鎂的離心管中,渦旋30s,以4000r/min離心5min,靜置10min,過0.22μm濾膜后,吸取0.1mL凈化液,加入0.9mL超純水定容至1mL,供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀分析。將全部提取液轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有25mgC18、50mgPSA、50mg石墨化炭黑及150mg無水硫酸鎂的離心管中,渦旋30s,以4000r/min離心5min,靜置10min,過0.22μm濾膜后,吸取0.1mL凈化液,加入0.9mL超純水定容至1mL,供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀分析。將全部提取液轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有50mgC18、25mgPSA、50mg石墨化炭黑及150mg無水硫酸鎂的離心管中,渦旋30s,以4000r/min離心5min,靜置10min,過0.22μm濾膜后,吸取0.1mL凈化液,加入0.9mL超純水定容至1mL,供液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀分析。8.3測定8.3.1液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件1)如下:a)色譜柱:C18柱,100mm×2.1mm,3μm;或功能相當(dāng)者;b)流動(dòng)相:乙睛-0.1%甲酸水溶液,梯度洗脫程序見表1;c)流速:0.25mL/min;d)柱溫:30℃;e)進(jìn)樣量:5μL;f)離子源:電噴霧離子源;g)離子化模式:正離子;h)掃描方式:多反應(yīng)監(jiān)測(MRM);母離子m/z278.1,定量子離子m/z174.1,定性子離子m/i)其他質(zhì)譜條件參見附錄A。1)非商業(yè)性聲明:所提供參數(shù)是在安捷倫1200液相色譜儀和API4000質(zhì)譜儀上完成的,此處列出試驗(yàn)用儀器型號僅是為了提供參考,并不涉及商業(yè)目的,鼓勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)使用者嘗試不同廠家和型號的儀器。4SN/T5362—2021表1液相色譜洗脫條件時(shí)間(min)乙腈/%0.1%甲酸水/%0.010902.010905.090107.090107.1109010.010908.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制取空白樣品按照8.1及8.2處理。用所得的樣品溶液將氟啶蟲胺腈標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(5.10)稀釋得到的標(biāo)準(zhǔn)工作液,按濃度由低到高的順序進(jìn)樣檢測,以定量離子峰面積-濃度作圖,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。8.3.3定性測定按照上述條件測定試樣和標(biāo)準(zhǔn)工作溶液,如果試樣中的質(zhì)量色譜峰保留時(shí)間與標(biāo)準(zhǔn)工作溶液中對應(yīng)的保留時(shí)間的偏差在±2.5%,且樣品中目標(biāo)化合物的定性子離子的相對豐度與濃度相當(dāng)?shù)臉?biāo)準(zhǔn)工作溶液一致,相對豐度偏差不超過表2規(guī)定的范圍,則可判定樣品中存在氟啶蟲胺腈。標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖參見附錄B中圖B.1。表2定性確證時(shí)相對離子豐度的最大允許誤差相對離子豐度/%>50>20~50>10~20≤10允許的相對偏差/%±20±25±30±508.3.4定量測定待測樣液中氟啶蟲胺腈的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi),超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液中被測組分的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。在液相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件下,氟啶蟲胺腈的參考保留時(shí)間為5.31min,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖參見附錄B中圖B.1。8.3.5空白試驗(yàn)除不加試樣外,均按上述步驟進(jìn)行。9結(jié)果計(jì)算用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或按照式(1)計(jì)算樣品中待測物的殘留量,計(jì)算結(jié)果需扣除空白。X…………(1)式中:X—試樣中氟啶蟲胺腈殘留量,單位為毫克每千克(mg/kg);5SN/T5362—2021A—樣液中氟啶蟲胺腈的峰面積;c—從標(biāo)準(zhǔn)工作曲線得到的試樣溶液中氟啶蟲胺腈的濃度,單位為微克每毫升(μg/mL);V—樣液最終定容體積,單位為毫升(mL);As—標(biāo)準(zhǔn)工作液中氟啶蟲胺腈的峰面積;m—最終樣液所代表的試樣質(zhì)量,單位為克(g)。10測定低限、回收率和精密度10.1測定低限本方法的測定低限為0.005mg/kg。10.2回收率和精密度不同基質(zhì)中不同添加濃度水平的回收率范圍及精密度參見附錄C中的表C.1。第二法液相色譜法11方法提要試樣中氟啶蟲胺腈殘留采用乙腈提取,提取液經(jīng)無水硫酸鎂、石墨化炭黑、C18固相吸附劑分散固相萃取凈化,用配有紫外檢測器的液相色譜儀檢測,外標(biāo)法定量。12試劑和材料12.2除另有說明外,所用其他試劑和材料均同5.1~5.12。13儀器和設(shè)備12.140%乙腈溶液(乙腈+水=4+612.2除另有說明外,所用其他試劑和材料均同5.1~5.12。13儀器和設(shè)備13.1液相色譜儀:配有紫外檢測器。13.2除另有說明外,其他所用儀器和設(shè)備均同6.2~6.9。14測定步驟14.2凈化將提取液轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有25mgC18、50mg石墨化炭黑及150mg無水硫酸鎂的離心管中,渦旋30s,以4000r/min離心5min,靜置10min,吸取500μL上清液,加入500μL超純水定容至1mL,過0.22μm濾膜后,供液相色譜儀分析。6SN/T5362—2021將提取液轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有25mgC18、75mg石墨化炭黑及150mg無水硫酸鎂的離心管中,渦旋30s,以4000r/min離心5min,靜置10min,吸取500μL上清液,加入500μL超純水定容至1mL,過0.22μm濾膜后,供液相色譜儀分析。將提取液轉(zhuǎn)移至預(yù)先加有50mgC18、75mg石墨化炭黑及150mg無水硫酸鎂的離心管中,渦旋混合30s,以4000r/min離心5min,靜置10min,吸取500μL上清液,加入500μL超純水定容至1mL,過0.22μm濾膜后,供液相色譜儀分析。14.3.1液相色譜條件液相色譜條件2)如下:a)色譜柱:T3柱,250mm×4.6mm,5μm;或功能相當(dāng)者;b)流動(dòng)相:乙腈-水,梯度洗脫時(shí)間表參見表3;c)流速:1mL/min;d)柱溫:35℃;e)進(jìn)樣量:10μL;f)檢測波長:264nm。表3液相色譜洗脫條件時(shí)間(min)乙腈/%水/%0.040603.040607.0703010.07030406015.0406014.3.2標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制用40%乙腈溶液(12.1)將氟啶蟲胺腈標(biāo)準(zhǔn)中間溶液(5.10)稀釋得到的標(biāo)準(zhǔn)工作液,按濃度由低到高的順序進(jìn)樣檢測,以峰面積-濃度作圖,得到標(biāo)準(zhǔn)曲線。14.3.3定量測定待測樣液中氟啶蟲胺腈的響應(yīng)值應(yīng)在標(biāo)準(zhǔn)曲線線性范圍內(nèi),超過線性范圍則應(yīng)稀釋后再進(jìn)樣分析。2)非商業(yè)性聲明:所提供參數(shù)是在Waterse2695液相色譜儀上完成的,此處列出試驗(yàn)用儀器型號僅是為了提供參考,并不涉及商業(yè)目的,鼓勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)使用者嘗試不同廠家和型號的儀器。7SN/T5362—2021標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣液中被測組分的響應(yīng)值均應(yīng)在儀器線性響應(yīng)范圍內(nèi)。在高效液相色譜條件下,氟啶蟲胺腈的參考保留時(shí)間為3.585min,標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖參見附錄B中圖B.2。14.3.4空白試驗(yàn)除不加試樣外,均按上述步驟進(jìn)行。15結(jié)果計(jì)算同第9章。16測定低限、回收率和精密度16.1測定低限本方法的測定低限均為0.005mg/kg。16.2回收率和精密度不同基質(zhì)中不同添加濃度水平的回收率范圍及精密度參見附錄C中的表C.2。8SN/T5362—2021附錄A(資料性)質(zhì)譜測定參考條件A.1質(zhì)譜參考條件如下3):a)氣簾氣(CUR):0.31MPa(氮?dú)?;b)霧化氣(GAS1):0.24MPa(氮?dú)?;c)檢測方式:多反應(yīng)監(jiān)控(MRM);d)輔助氣(GAS2):0.28MPa(氮?dú)?;e)噴霧電壓(IS):5500V;f)碰撞氣(CAD):0.15MPa;g)離子源溫度(TEM):550℃;h)碰撞池出口電壓(CXP):14V;i)碰撞池入口電壓(EP):10V;j)其他質(zhì)譜參數(shù)見表A.1。表A.1主要參考質(zhì)譜條件化合物名稱母離子子離子碰撞氣能量(eV)去簇電壓(V)氟啶蟲胺腈174.1*112214137注:帶*的為定量離子。3)非商業(yè)性聲明:所提供參數(shù)是在API4000質(zhì)譜儀上完成的,此處列出試驗(yàn)用儀器型號僅是為了提供參考,并不涉及商業(yè)目的,鼓勵(lì)標(biāo)準(zhǔn)使用者嘗試不同廠家和型號的儀器。9SN/T5362—2021(資料性)多反應(yīng)監(jiān)測(MRM)色譜圖和液相色譜圖圖B.1氟啶蟲胺腈溶液的多反應(yīng)監(jiān)測色譜圖(0.005mg/L)10SN/T5362—2021圖B.2氯吭蟲股睛溶液的液相色譜圖(0.005mg/L)11SN/T5362—2021附錄C(資料性)各基質(zhì)添加水平、精密度及回收率范圍表C.1氟啶蟲胺腈各添加水平的回收率范圍及精密度(LC-MS/MS法)樣品種類加標(biāo)水平(mg/kg)回收率范圍(%)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)大米0.00581.0~98.87.00.01076.2~86.65.20.05084.5~95.14.4高粱0.00582.6~100.48.50.01086.2~93.22.90.05081.6~97.87.2辣椒0.00581.8~100.87.00.01080.0~93.15.40.05082.5~94.06.0黃瓜0.00580.3~86.77.20.01080.6~93.65.30.05083.7~96.26.8蘋果0.00587.3~90.04.70.01080.1~92.55.90.05089.7~96.94.5梨0.00585.0~98.08.20.01082.4~93.44.40.05089.2~96.44.7雞蛋0.00584.0~88.08.30.01080.1~93.65.60.05089.9~96.55.7牛肉0.00586.0~95.06.40.01082.4~93.14.50.05086.6~91.72.2雞肉0.00584.0~93.57.80.01080.6~92.64.60.05084.9~89.54.9魚0.00587.0~90.55.70.01080.8~89.93.80.05089.7~94.56.312SN/T5362—2021表C.1氟啶蟲胺腈各添加水平的回收率范圍及精密度(LC-MS/MS法)(續(xù))樣品種類加標(biāo)水平(mg/kg)回收率范圍(%)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)豬肝0.00589.9~89.86.70.01080.2~93.35.70.05084.5~98.0牛奶0.00586.0~95.07.20.01081.1~87.82.30.05086.6~91.73.7松子仁0.00582.4~89.67.00.01081.0~93.75.00.05089.7~96.95.3蜂蜜0.00574.0~90.07.40.01082.8~93.04.30.05089.2~96.45.9表C.2氟啶蟲胺腈各添加水平的回收率范圍及精密度(HPLC法)樣品種類加標(biāo)水平(mg/kg)回收率范圍(%)相對標(biāo)準(zhǔn)偏差(%)大米0.00585.6~98.45.30.01083.0~93.74.20.05082.6~97.55.8高粱0.00582.8~97.25.60.01081.5~93.55.70.05083.3~95.34.8辣椒0.00582.2~99.66.80.01083.4~92.74.