消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件

消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全5/9/20241消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件消毒滅菌常用術(shù)語滅菌（sterilization）：殺滅物體上所有微生物的方法。

消毒（disinfection）：殺死物體上或環(huán)境中的病原微生物的方法。防腐（antisepsis）：防止或抑制皮膚表面細(xì)菌生長繁殖的方法。5/9/20242消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件清潔（cleaning）：是指通過除去塵埃和一切污穢以減少微生物數(shù)量的過程。無菌（asepsis）：無菌是無活菌的意思，多是滅菌的結(jié)果。無菌操作技術(shù):防止細(xì)菌進(jìn)入人體或其它物品的操作技術(shù)。5/9/20243消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件物理方法化學(xué)方法第一節(jié)消毒滅菌的方法5/9/20244消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件（一）熱力滅菌法（干熱+濕熱）

1.干熱滅菌法

焚燒爐適用：廢棄的物品動(dòng)物尸體一、物理消毒滅菌法

焚燒5/9/20245消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件烤箱干烤用干烤滅菌箱，適用于高溫下不變質(zhì)，不損壞，不蒸發(fā)的物品。171℃1h160℃2h121℃16h5/9/20246消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件燒灼

用火焰滅菌，適用于微生物學(xué)實(shí)驗(yàn)室的接種環(huán)、試管口等的滅菌

5/9/20247消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件紅外線輻射

是一種0.77-1000微米波長的電磁波,紅外線為熱效應(yīng)殺菌,紅外線加熱速度快，但為表面照射，物體受熱不均。用紅外線烤箱滅菌，多用于醫(yī)療器械的滅菌。人受紅外線照射較長，會(huì)感覺眼睛疲勞及頭疼；長期照射會(huì)造成眼內(nèi)損傷。因此，工作人員應(yīng)戴防護(hù)鏡。5/9/20248消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件

巴氏消毒法(pasteurization):巴氏消毒法用較低溫度殺滅液體中的病原菌或特定微生物，而保持物品中所需的不耐熱成分不被破壞的消毒方法。主要應(yīng)用于乳制品的消毒。方法有兩種：①加熱到61.1-62.8℃30分鐘②71.7℃15-30秒。

2.濕熱滅菌法

5/9/20249消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件煮沸法煮沸溫度為100℃，一般細(xì)菌繁殖體5分鐘就殺死了，芽胞需要1-2小時(shí)才可被殺滅。

流動(dòng)蒸氣消毒法利用一個(gè)大氣壓下100℃的水蒸氣進(jìn)行消毒，細(xì)菌繁殖體15-30分鐘殺滅。蒸籠具有類似的原理。間歇蒸氣滅菌法利用反復(fù)多次的流動(dòng)蒸氣間歇加熱以達(dá)到滅菌消毒的目的。5/9/202410消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件高壓蒸氣滅菌法一種最有效的滅菌方法。滅菌的溫度取決于蒸氣的壓力。在103.4kPa蒸氣下，溫度達(dá)到121.3℃，維持15-20分鐘，可殺滅包括細(xì)菌芽胞在內(nèi)的所有微生物。高壓蒸汽滅菌器5/9/202411消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件

1.紫外線（265-266nm）

原理：其主要作用于DNA，使一條DNA鏈上相鄰的兩個(gè)胸腺嘧啶共價(jià)結(jié)合成二聚體，干擾DNA的復(fù)制與轉(zhuǎn)錄。特點(diǎn)：紫外線的穿透力弱適用范圍：因此一般用于手術(shù)室、傳染病房、細(xì)菌實(shí)驗(yàn)室的空氣消毒。注意：紫外線對人體皮膚、眼睛有損傷作用，應(yīng)注意防護(hù)。

（二）輻射殺菌法

5/9/202412消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件紫外線燈管5/9/202413消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件2.電離輻射

常用γ射線(鈷-60)和β射線。原理：

干擾代謝和DNA合成，破壞細(xì)胞膜、酶，產(chǎn)生H2O2、游離羥基殺菌。

5/9/202414消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件特點(diǎn)：

具有較高的能量與穿透力，可在常溫下對不耐熱的物品滅菌，故又稱“冷滅菌”。

運(yùn)用：可用于消毒不耐熱的塑料注射器和導(dǎo)管等，亦能用于食品、藥品、生物制品等的消毒滅菌。

5/9/202415消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件

微波是一種波長為1-1000mm的電磁波，頻率較高；一般認(rèn)為其殺菌機(jī)理除熱效應(yīng)以外;還有電磁共振效應(yīng)。可穿透玻璃、塑料薄膜與陶瓷等物質(zhì)，但不能穿透金屬；微波照射多用于食品加工。

3.微波（microwave）5/9/202416消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件

在醫(yī)院中可用于檢驗(yàn)室用品、非金屬器械、無菌病室的食品、食具、藥杯、及其它用品的消毒。 微波能殺滅各種微生物；可在1-5分鐘內(nèi)殺死各種細(xì)菌。微波長期照射可引起眼睛的晶狀體混濁、睪丸損傷和神經(jīng)功能紊亂等全身性反應(yīng)，因此必須關(guān)好門后才開始操作。5/9/202417消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件1.濾菌器(filter）----直徑是0.45um以下。

（三）濾過除菌法5/9/202418消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件2.空氣除菌采用生物潔凈技術(shù)

超凈工作臺(tái)層流室5/9/202419消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件（四）其他物理方法1、干燥與低溫抑菌法鹽或糖腌食物，冰箱冷凍食物2、超聲波滅菌法每秒鐘超過20,000次振動(dòng)的聲波不被人耳感受，稱為超聲波。利用在菌體內(nèi)的空化作用、機(jī)械裂解殺菌。尤其是革蘭陰性菌更為敏感，但不徹底，常有殘留。5/9/202420消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件二、化學(xué)消毒滅菌法5/9/202421消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件高效消毒劑原理適用范圍含氯消毒劑（次氯酸鈉、漂白粉）產(chǎn)生氯氣、次氯酸新生態(tài)氧排泄物、物體表面、飲用水等過氧化物消毒劑（過氧化氫、過氧乙酸）（二氧化氯）氧化作用物體表面、皮膚空氣凈化劑醛類消毒劑（戊二醛、甲醛）對細(xì)菌蛋白和核酸的烷化作用高效空氣過濾器消毒（對人有毒）環(huán)氧乙烷與醛類相同（一）高效消毒劑:可殺滅芽孢在內(nèi)的微生物適用不耐高溫，但必須進(jìn)入人體內(nèi)部的器械：內(nèi)窺鏡、塑料外科器械5/9/202422消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件

含碘消毒劑：碘伏、碘酊氧化作用，但有刺激性醇類消毒劑乙醇、異丙醇脫細(xì)胞膜的脂類，并使菌體蛋白變性

70-75%乙醇作用最強(qiáng)（二）中效消毒劑：殺細(xì)菌繁殖體，真菌和大部分病毒5/9/202423消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件（三）低效消毒劑：殺多數(shù)細(xì)菌繁殖體，不能殺芽孢和結(jié)核桿菌以及一些真菌和病毒新潔爾滅皮膚、粘膜、地面、物品表面（不與陰離子表面活性劑合用）洗必泰皮膚、粘膜、地面、物品表面（不與陰離子表面活性劑合用）高錳酸鉀氧化作用皮膚、粘膜、蔬菜、水果的消毒5/9/202424消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件第二節(jié)消毒滅菌的運(yùn)用1、高危器械物品用時(shí)需進(jìn)入無菌組織的物品。所有這些物品都應(yīng)該滅菌。2、中危器械物品用時(shí)不進(jìn)入無菌組織但接觸黏膜的器械。采用消毒即可。3、低危器械物品只接觸未損傷皮膚，不接觸黏膜和無菌組織的物品。一般用后清洗、消毒即可。4、快速周轉(zhuǎn)的醫(yī)療器械瞬時(shí)滅菌，高效消毒劑處理，微波滅菌等

（一）、醫(yī)療器械物品的消毒滅菌5/9/202425消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件1.物理消毒法

①紫外線照射最常用；

②濾過除菌：2．化學(xué)消毒法

包括化學(xué)消毒劑噴霧和熏蒸：

①過氧乙酸噴霧、熏蒸；

②過氧化氫噴霧；

③二氧化氯溶液噴灑；

④中草藥點(diǎn)燃煙熏。（二）、室內(nèi)空氣消毒滅菌5/9/202426消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件（三）手和皮膚的消毒

用肥皂和流動(dòng)水經(jīng)常并正確洗手

病原微生物污染時(shí)應(yīng)用消毒劑消毒。乙醇，碘伏（四）黏膜的消毒

口腔粘膜可用3%的雙氧水，腔道沖洗用1/1000的高錳酸鉀。5/9/202427消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件（五）病人排泄物與分泌物的消毒滅菌

50g/L的次氯酸鈉、漂白粉處理小時(shí)（六）病人污染物品的消毒

（七）飲水的消毒

氯氣或是漂白粉消毒（八）環(huán)境的消毒

5/9/202428消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件第三節(jié)影響消毒滅菌效果的因素1、微生物的種類

微生物對消毒滅菌敏感性由高到低一般是：真菌＜細(xì)菌繁殖體＜有包膜病毒＜無包膜病毒＜分枝桿菌＜細(xì)菌芽孢。2、微生物的物理狀態(tài)

在惡劣環(huán)境生長的細(xì)菌的抵抗力強(qiáng)于在營養(yǎng)豐富的環(huán)境生長的細(xì)菌3、微生物的數(shù)量

細(xì)菌越多，消毒時(shí)間越長，因此，消毒前的清潔很重要5/9/202429消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件4、消毒劑性質(zhì)、濃度與作用時(shí)間

消毒劑性質(zhì)不一樣，效果也不一樣。一般是濃度越高，效果越好，但乙醇是70%-75%效果好。時(shí)間越長，效果越好。5、溫度

溫度越高，效果越好6、酸堿度

與消毒劑性質(zhì)有關(guān)7、有機(jī)物

有有機(jī)物污染的，消毒效果不佳。5/9/202430消毒滅菌與病原微生物實(shí)驗(yàn)室生物安全專選課件（一）掌握消毒、滅菌、防腐、無菌及無菌操作的概念；巴氏消毒法的方法；高壓蒸汽滅菌的方法；紫外線消毒的