輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣

臺灣輸血質(zhì)量管控及輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗分享張志升臺灣臺大醫(yī)院輸血移植組組長技術(shù)組長臺灣輸血學會理事暨教育訓練委員會召集人臺灣組織兼容免疫基因?qū)W會理事臺灣檢驗學會能力試驗委員會委員1輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024講在前頭周一開始上班前的節(jié)奏兩岸的法規(guī)制度不同，慣用的實驗方法不同，種族性血型分布不同，均有些微作法的異同處。兩岸制度及規(guī)范不同，環(huán)境及條件也有差異，不能混為一談。大陸法規(guī)較為完善，臺灣技術(shù)層面較為扎實。2輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024亞型輸紅細胞A2產(chǎn)生anti-A1的問題沒有產(chǎn)生抗A1,輸A1紅細胞產(chǎn)生抗A1,輸預(yù)溫法或抗人球A紅細胞交叉配血主側(cè)相合臺灣常見分生型A205,也有案例A205型輸一般A1型產(chǎn)生IgGanti-A1Ax輸O型紅細胞，Ａ型血漿Am(Bm)Ael(Bel)輸O型紅細胞,血漿類孟買A(或B)型輸A(或B)型紅細胞,血漿3輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024Rh陰性輸血小板(科學合理輸血)文獻證實Rh陰性輸Rh陽性血小板產(chǎn)生抗D無HTR溶血性輸血反應(yīng)。TRANSFUSIONVolume51,June2011.Rh陰性病患輸Rh陽性的機采血小板。除了未產(chǎn)生抗Ｄ孕齡期婦女非緊急下可選擇輸注Rh陽性機采血小板。已產(chǎn)生抗D的病患輸D陽性的血小板.(包括已產(chǎn)生anti-D孕齡期婦女)4輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024Rh陰性輸紅細胞(以風險控管及經(jīng)濟管理)孕齡期婦女(外國定義:五十歲左右)未產(chǎn)生抗D非緊急輸血下輸Rh陰性紅細胞。Rh陰性未產(chǎn)生抗D預(yù)期非長期輸血狀況下，無法立即取得Rh陰性血輸Rh陽性血。Rh陰性未產(chǎn)生抗D,擇期手術(shù)或緊急手術(shù)預(yù)期使用輸血量無法備足相關(guān)Rh陰性血液量，先輸Rh陽性紅細胞,把Rh陰性血保留到己產(chǎn)生抗Ｄ下救命用。Rh陰性產(chǎn)生抗D緊急下無D陰性血輸D陽性血。5輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024ISO15189醫(yī)學實驗室認證臺灣是由臺灣認證基金會TAFTaiwanaccreditationfoundation所辦理用國際標準規(guī)范質(zhì)量管理。取單一項目申請認證范圍(e.g.ABO定型，Rh定型，抗體篩檢，抗體鑒定，直抗）重視單一項目的標準化及實驗作業(yè)的偏移誤差。6輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024CAP美國病理學院認證CAP是專由臨床檢驗學家和病理學家組成的聯(lián)合會，被公認為是醫(yī)學實驗室質(zhì)量保證的領(lǐng)導(dǎo)者之一。CAP的一個重要內(nèi)容就是向世界各地的參與實驗室開展能力驗證活動（ProficiencyTesting,PT也稱為室間質(zhì)評）。通過室間質(zhì)評和實驗室實地評審進行CAP認證。CAP認證依據(jù)是CAP自己制定的標準，即評審檢查要點（CHECKLIST）,它主要參照了CLIA-88的標準和美國的法律法規(guī)。7輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024認證質(zhì)控的要求試劑/儀器的質(zhì)控確效室間質(zhì)量評價.實驗環(huán)境評估試劑的審批確效,導(dǎo)入,儲存運送確效.儀器的保養(yǎng)使用確效人員能力的確認新進人員教育訓練繼續(xù)教育訓練8輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024試劑的質(zhì)控9輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024免疫血液的內(nèi)部實驗品管試劑品管每日質(zhì)控dailyQC

/開新瓶批號修改質(zhì)控LotchangeQC/reagentallowableNewsystem/newmethod/newclone/newreagents:平行測試儀器品管離心機品管培溫器Incubator/加溫器Thermometer/冰箱滴管Pipette/吸管Dropper10輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024每日質(zhì)控DailyQC監(jiān)測試劑因儲存運送的穩(wěn)定性抗血清-A,-B,-D,Ac,Bc,使用可回溯性的陰性及陽性質(zhì)控液，強度在2+左右抗篩細胞每一抗篩細胞至少一個抗原(可相同)需受到監(jiān)控。原則上每個質(zhì)控項目只監(jiān)控單一項目抗A和A血細胞不能同為監(jiān)控.凝聚胺不能和抗篩細胞互為監(jiān)控目標.11輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024平行測試Newproductlot/newsystem/newmethod/newclone/newreagent/newmachine/newhomemakereagent30specimen:基準量監(jiān)測專一性敏感度Sensitivity,specificity12輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024儀器品管溫度品管定期校正每日溫度監(jiān)控。離心機品管校正維修允收FunctionalcheckPipette&Dropper

顯微鏡品管13輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024臺灣輸血學會教育培訓班輸血醫(yī)學工作人員基礎(chǔ)班（為一般必需輸血行業(yè)的大小醫(yī)療院所基礎(chǔ)血庫學培訓班）輸血醫(yī)學工作人員進階班（教導(dǎo)進階抗體血型及臨床輸血培訓班）輸血醫(yī)學醫(yī)師培訓班14輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024基礎(chǔ)班實驗方法實習課程ABO/Rh血液凝集及判讀口水唾液試驗弱亞血型吸附放散傳統(tǒng)抗人球抗體篩檢及凝聚胺法抗體篩檢簡易譜細胞抗體鑒定預(yù)溫法交叉配血或抗體篩檢15輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024試管法/凝集試驗的觀察方法輕輕搖動或傾斜試管，以重懸試管底部的紅血球；傾斜試管法乃利用上清液劃過cellbuttons，使紅血球輕輕脫離管壁，直至試管底部的紅血球完全被重懸，判斷凝集價數(shù)并立即記錄結(jié)果觀察血球cellbuttons被搖散時呈現(xiàn)的方式，包括凝集塊的大小、是否有松散凝塊、線狀凝塊、具折光性凝塊或混合視野型（mixed-field）結(jié)果，這可能對解決問題有所幫助：例某些抗體特異性（

anti-Lu,anti-Sda等）或輸血后檢體16輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024血液凝集的判讀標準判讀標準敘述備注分數(shù)4+一塊大塊的凝集123+數(shù)個大凝集102+許多中凝集塊，背景澄清81+許多細小的凝集，背景混濁5±巨視可見十分微小凝集0無凝集0mf微鏡下可見凝集及游離細胞限指微鏡下Ｈ上清液完全溶血，無細胞殘留PH上清液見明顯溶血，但底部仍有血細胞塊17輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024ABO/Rh的判讀原則Anti-AAnti-BAcellBcellAnti-D*定型00

2+

2+

2+O/Pos.00

2+

2+0O/Neg.

3+00

2+

2+A/Pos.

3+00

2+0A/Neg.0

3+

2+0

2+B/Pos.0

3+

2+00B/Neg

3+

3+00

2+AB/Pos.

3+

3+000AB/Neg.正定<3+,反定<2+,正定為O型,反定差價

2+也是屬于ABO定型不符(ABOdiscrepancy)<2+Ddiscrepancy*單克?。桑纾停琁gG/IgM混株,或DVI(-)試管法或凝膠直接凝集法,非高效價抗D

3+??

18輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024凝集價數(shù)判讀19輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024為什么要使用標準反應(yīng)價數(shù)顯現(xiàn)反應(yīng)之強度及狀況，ABO疑難血型的判別﹝含溶血、緡錢、混合視野之觀察﹞多重抗體之區(qū)分或劑量效應(yīng)之應(yīng)用。求取輸血科工作同仁實驗結(jié)果之一致性，回溯性，及標準化。作業(yè)標準化。20輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024ABO疑難血型的定義狹義：不合：正定和反定判讀結(jié)果不合。廣義：不合正定<3+,反定<2+反定結(jié)果A-B(B-A)≧2和歷史血型不合、和口述血型不合21輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024溫鹽水洗滌紅細胞移除自體抗體正定型先預(yù)溫一瓶溫鹽水，置37℃將紅細胞懸浮液置放于37℃heatblock;，15至60分鐘用37℃溫鹽水洗滌紅細胞數(shù)次以移除自體抗體使用已洗滌過的紅細胞與anti-A,anti-B,anti-D和6%BSA進行正定型，若6%BSA對照仍有反應(yīng)，則需再洗滌幾次則移除IgM自體抗體：DTTorAETtreated移除IgG自體抗體：45℃gentleheat/

chloroquine/acidglycine/EDTA(EGA)※亦可用coldautoadsorption(三個月內(nèi)未輸血)反定型以三組O型紅細胞混合吸附血漿，吸附后血漿執(zhí)行反定型。22輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024預(yù)溫法交叉配血pre-warmtechnique正常人存在一般冷凝集素，在低溫下

32效價。強力冷凝集素常造成定型疑難及配血疑集。強力有害冷凝集素的特點自身抗體，低溫效價高于640，溫度態(tài)度高于30°C，運用的實驗方法：冷凝抗體專一性確認，低溫冷凝抗體效價測定，溫態(tài)測試thermalamplitude23輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024預(yù)溫法prewarmtechnique將獻血員紅細胞及受血者血漿預(yù)先培

溫到37度，另準備已預(yù)溫的37度鹽水采嚴格限制的預(yù)溫把獻血員紅細胞及受者血漿加在一起培溫,培溫后不離心判讀,直接用預(yù)溫的37度鹽水洗滌后,再加抗人球試劑離心判讀。常用于解決強力的冷凝集素的交叉配血；或者是冷反應(yīng)的同種抗體(anti-Lea,-Leb,-P1,-M…等,不找抗原陰性，隨機取血使用預(yù)溫法交叉配血)24輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024？輸血前試驗流程

陽性不規(guī)則抗體篩檢病患血清+抗篩紅細胞陰性選擇可測得具臨床意義抗體的適當方法抗體特異性鑒定病患血漿+譜細胞主側(cè)配合試驗病患血清+獻血者紅細胞(+/-血袋相對應(yīng)抗原測試)*ABO血型檢查病患及獻血者MP法(或IS法)*相對抗原測試的效率比盲配較高25輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024例Allo-Ab!先找找看再說……可能是anti-M……可能是anti-C,-e……可能是anti-Mia+anti-?可否跳過”抗體鑒定”步驟，

直接作配合試驗?當此不規(guī)則抗體強度較低時，相對應(yīng)抗原表現(xiàn)較弱的血品（例：singledose）可能被測為”相合”。以系統(tǒng)性分析方式厘清抗體的特異性及反應(yīng)性，可以經(jīng)濟有效地尋得相合的血品。AntibodyScreening(MP)SISIISIIIAC0++026輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024常見異體抗體之血清學特性對應(yīng)抗體In-VitroHemolysis4C22C37CAHGCauses:HDNHTRAnti-DSomeMostMostYesYesAnti-CFewMostMostYesYesAnti-ESomeMostMostYesYesAnti-cRareMostMostYesYesAnti-eRareMostMostYesYesAnti-K0FewSomeMostYesYesAnti-k0FewFewMostYesYesAnti-JkaSomeFewFewMostMildYesAnti-JkbSomeFewFewMostMildYesAnti-Fya0RareRareMostYesYesAnti-Fyb0RareRareMostYesYesAnti-LeaSomeMostMostSomeManyNoFewAnti-LebRareMostMostFewSomeNoNoAnti-M0MostSomeFewFewFewFewAnti-N0MostFewOcc.Occ.RareNoAnti-S0FewSomeSomeMostYesYesAnti-s0NoFewFewMostYesYesAnti-P1Occ.MostSomeOccRareNoRareAnti-MiaSomeMostMostYesYesAnti-Dia0SomeSomeMostYesYes#摘自AABBTechnicalManual14thedition.Page288,317.27輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024國人的紅細胞次要抗原頻率抗原系統(tǒng)抗原抗原頻率(臺灣*)RhD99.6%C91%E43%c49%e94%KellK0%k100%KiddJka70%Jkb75%DuffyFya99.8%Fyb8%LewisLea23%Leb92%Le(a-b-):8%MNSsUM83%N68%S11%s99.5%Mia7%PP132%DiegoDia3%*國人抗原頻率摘自93年血庫在職人員基礎(chǔ)班講義，孫建峰主任28輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024進階班實驗課程內(nèi)容酵素一步法，二步法，化學試劑處理分離紅細胞，冷凍紅細胞，解凍紅細胞血清酸化法。血型物質(zhì)中和抑制法吸附放散法溫態(tài)測試thermalamplitude高頻抗原抗體鑒定，藥物抗體鑒定血小板抗體，白細胞抗體29輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202430輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024抗體篩檢結(jié)果分析要點僅部分篩檢細胞有反應(yīng)？可鑒定出特異性的異體抗體反應(yīng)強度一致？單一抗體或多重抗體血品核發(fā)策略？MP法？三相法？或僅作抗球蛋白期？或預(yù)溫技術(shù)？自體對照是否有陽性反應(yīng)？異體或自體抗體陽性反應(yīng)在哪一種方法/哪一期發(fā)生？溫型或冷型抗體MP篩檢陽性后，續(xù)以傳統(tǒng)三相法再做一次抗體篩檢＆自體對照優(yōu)點：1.藉三相法可分析抗體的基本性質(zhì)（溫型或冷型）

2.三相法之抗球蛋白期可減除冷凝集素或緡錢狀反應(yīng)的干擾

3.發(fā)現(xiàn)不同反應(yīng)期的反應(yīng)差異，有助于解決多重抗體或自體抗體合并異體抗體的復(fù)雜案例31輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024抗體鑒定難題(I)抗篩結(jié)果(+)

自身對照(-)與譜細胞反應(yīng)均(+)

或大部份譜細胞反應(yīng)為(+)

反應(yīng)期與反應(yīng)強度不ㄧ致與譜細胞反應(yīng)均(+)

反應(yīng)期與反應(yīng)強度ㄧ致疑為抗high-incidenceantigen的異體抗體疑為多重異體抗體仔細分析可能的特異性，選擇更多特定紅細胞反應(yīng)測試病人的紅細胞抗原分型利用輔助方法協(xié)助特異性鑒定根據(jù)反應(yīng)特性及病人種族，推測可能的特異性測試病人的紅細胞抗原分型(請病人的兄弟姐妹前來采血檢查)(交由咨詢實驗室鑒定抗體特異性)32輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024可能為自體抗體加上異體抗體(少數(shù)案例可見呈現(xiàn)特異性的自體抗體)抗體鑒定難題(II)抗體篩檢(+)

自身對照

(+)與譜細胞反應(yīng)均(+)

反應(yīng)期與反應(yīng)強度不ㄧ致與譜細胞反應(yīng)均(+)

反應(yīng)期與反應(yīng)強度ㄧ致疑為自體抗體(但仍須仔細排除異體抗體的可能)以自體吸收(三個月內(nèi)未輸過血者)或異體吸收法，移除自體抗體，以檢測異體抗體的存在。測試病人的紅細胞抗原分型(Rh,Kidd……)，可輔助異體抗體特異性鑒定；給予表現(xiàn)型相合血品可預(yù)防異體抗體產(chǎn)生直抗(+)※若為輸血后檢體，須小心排除對抗高頻率抗原之抗體的可能！33輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024高頻率抗原抗體HTLA手工凝聚胺法所有篩選細胞陽性3個月內(nèi)有輸血史，不要做凝聚胺法自身對照經(jīng)典IAT+自身細胞如果3個月內(nèi)無輸血史，凝聚胺和/或經(jīng)典IAT+自身對照自身對照陰性自身對照陽性所有反應(yīng)強度都一樣≦1+2倍稀釋~256效價≧32高效價低親和力抗體hightiterlowavidity一樣的反應(yīng)強度效價<32抗篩陽性IAT陰性

自身抗體藥物抗體-幾乎都是藥物依賴抗體自身細胞>抗篩自身抗體藥物抗體-藥物非依賴抗體.如果正定型是

O型,用

anti-H檢測H(-),孟買或類孟買H(+)所有細胞均反應(yīng)，但強度不同自身細胞

<抗篩細胞只有1個或幾個譜細胞不反應(yīng)種族

相關(guān)的高頻抗原D,s,Lea,Leb,Fya.表型多重抗體有劑量效應(yīng)的單一抗高頻抗原抗體見

:多重抗體抗體鑒定程序抗-Dib(MediproSRC)

抗-Wrb(有些譜細胞),

抗-k,

抗-Kpb檢測

Dia,Wra,K,Kpa表型都是一樣的混合外觀抗-Lub,

(DTT破壞)

抗-Sda(天竺鼠尿中和)與普通譜細胞的區(qū)別

藥物抗體的研究溫度反應(yīng)性評估Donath-Landsteiner實驗

冷凝集素效價

溫自免溶貧研究自身對照≧2+放散液和血清經(jīng)典IAT篩選細胞均陽性抗-Sda:混合外觀反應(yīng),用天竺鼠尿中和

抗-Rg/Ch:AB

血漿中和檢測

RhD,RhCE,Kidd,Duffy,MNSs,Kell血型Rh:抗-Hr0

Kidd:抗-Jk3

Duffy:抗-Fy3

MNSs:抗-U

Kell:抗-Ku,anti-Kx(弱

Kell)無花果酶(木瓜酶),

0.2MDTT

處理細胞臍血

i細胞,IgG1,IgG3

溶血性評估IgA/IgG分類酶

+,DTT+

抗-Jra

抗-Vel(臍血iw)抗-p抗-Tja酶

+,DTT0抗-Kpb抗-AnWj(臍血i0)抗-Jsb(EGA0)抗-Lub抗-Lu3~Lu21(除外.Lu8)酶

0,DTT0抗-JMH(臍血iw)抗-Inb抗-Yta

酶

0,DTT+

抗-Ch/Rg+:反應(yīng),0:不反應(yīng),w:弱反應(yīng)酶

:木瓜酶/無花果酶高效價低親和力

抗體是一組抗體群EGA:glycine-HCl-EDTA

處理紅細胞酶

0,DTT0:抗-JMH

酶

0,DTT+:抗-Ch/Rg酶

+,DTT+:抗-Csa酶

0,DTTw:Knop抗體

(anti-Kn,McCa,Sla,Yka)

Yka

可以被唾液酸苷酶破壞）如果懷疑是藥物抗體,

則放散液,

新鮮血清(要備補體),

及懷疑的藥物要準備一下,

以便進一步研究

34輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024多重抗體鑒定技巧仔細判讀反應(yīng)價數(shù)選擇適當?shù)蔫b定方法（傳統(tǒng)三相法通常優(yōu)于MP法）可針對每個phase，以排除法仔細分析特異性可獲知該抗體之血清學特性，輔助特異性鑒定參考病人的紅細胞抗原分型若病人之某ㄧ抗原為陽性，則可排除其對應(yīng)抗體的可能病人的抗原異體抗體？陽性不可能！陰性不能排除（無法下定論）35輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024紅細胞抗原分型的難題病人近日輸過血找出輸血前的檢體測試分離病人自身血球測試基因分型IgG或IgM抗體附著的紅細胞IgM附著：須移除自發(fā)性凝集IgG附著：多不影響分型，除非須用抗球蛋白試劑分型若輸注單位不多，仔細觀察mix-field反應(yīng)的有無，仍可得到可信的分型結(jié)果36輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024

簡易離心法(SimpleCentrifugation)分離自體紅細胞紅細胞以鹽水洗三次，最后一次離心1000×g5-15分鐘，于不破壞白膜層下盡量移除上清液。(或直接重離心2500g15分鐘取白膜層)充分混合均勻后，填滿十根毛細管(不含抗凝劑)，一端封口。

※注意！充填每ㄧ支毛細管前均須再次充份混合！離心15分鐘。割下十支毛細管頂端5mm，集中于ㄧ試管，加入鹽水。以滴管將紅細胞全沖出后，移至另一干凈試管。洗三次后泡成2-5%紅細胞懸浮液（參考資料：AABBTechnicalManual15thedition,Method2.15）新生自體紅細胞比重較低，可利用離心法將之與輸入的紅細胞分離注1:至少須輸血后3天的標本才有較佳的分離效果注2:此法不適用于網(wǎng)織細胞生成數(shù)較低的病人，亦不適用于有HemoglobinS或spherocyticdisorders病人注3:有些抗原在網(wǎng)織細胞的表現(xiàn)比在老舊的血球為弱，測E,e,c,Fya,Jka與Ge抗原要特別留意37輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024DTT處理紅細胞抗原Yta,JMH,Kna,McCa,Yka,LWa,LWb,Ge,AllKell,Lutheran,Dombrock,andCromerbloodgroupantigens0.2MDTT處理紅細胞抗原38輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024劑量效應(yīng)的快速記憶法:KiddsandDuffytheMonkey(Rh)eatlotsofM&NsJka,Jkb,Fya,Fyb,C,c,E,e(noD),M,N,S,sM&NsadaptedfromClinicalLaboratoryScienceReview:ABottomLineApproach(3rdEdition)M&NsKiddDuffyRhMNSs39輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024吸附法adsorption自身吸附autoadsorption冷吸附溫吸附

異體吸附Alloadsorption應(yīng)用于含有多重抗體復(fù)雜性高的吸附排除，配合放散可以區(qū)分出多重抗體。也可應(yīng)用于曾輸過血，不適合用自身吸附的自身含異體抗體的區(qū)別法40輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024放散Elution從致敏化紅細胞上游離出IgG抗體常應(yīng)用于輸血后產(chǎn)生抗體，但可能無法測出游離抗體，可以從致敏紅細胞上放散出抗體。放散法常應(yīng)用于新生兒溶血癥。多重抗體吸附后放散抗體鑒定濃縮低滴度抗體。（二體積血漿＋一體積紅細胞吸附后放散）41輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024放散技術(shù)ElutionTechniques改變溫度動力學如熱放散：包括微放散及強熱放散冷凍加溫放散Luifreeze-thawelution逆轉(zhuǎn)抗原抗體間吸引力e.g.Ether,xyleneordichloromethaneelution干擾抗原抗體的互補結(jié)構(gòu)e.g.酸放散，快速且敏感，不需用危險化學藥劑Ph6.8~7.2抗原抗體結(jié)合穩(wěn)定,降低到pH3則造成抗體游離超音波震蕩42輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024利用自身吸附法來吸附去除溫自身抗體溫自身抗體經(jīng)常會遮蓋了同種臨床有意義抗體的出現(xiàn)運用自身吸附法可以偵測到隱藏的同種抗體.解離紅細胞上的自身抗體，可以讓出更多位置來吸附其他游離自身抗體。利用酵素處理紅細胞也可以改變紅細胞膜的結(jié)構(gòu)，進而用來吸附不同的抗體。近期內(nèi)輸過血的標本不適合作自身吸附法43輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024異體吸附法近期內(nèi)輸過血無法使用自體吸附法。異體吸附法最好使用三組血球R1R1Jk(a+,b-),R2R2Jk(a-,b+),rr,(也可加一組酶處理血細胞)異體吸附法的應(yīng)用自體+異體抗體多重復(fù)雜抗體:單純多重抗體,高頻抗原抗體+其他抗體Anti-G,anti-D,anti-C或其他復(fù)合抗體44輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024稀釋法自身抗體多半具有低滴度高親合力，所以利用滴度的不同，稀釋法?？梢詤^(qū)分出隱藏的同種抗體。但偶而也會偽陰性，將滴度不高的同種抗體稀釋到無法鑒定的滴度。威力十足的窮人原子彈45輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024

運用酵素方法運用常用的酵法(木瓜酶,菠蘿密酶,無花果酶)處理紅細胞可以加強Rh,P1,I,Kidd,Lewis抗原的表現(xiàn),使其相對的抗體表達增強可以運用在卡片法傳統(tǒng)經(jīng)典IAT抗人球法無法運用在凝聚胺法PEG+放散液46輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024

酶處理紅細胞抗原M,N,S,Fya,Fyb,Yta,Ch.Rg,Pr,Tn,Mg,Mia/Vw,Cla,Jea,Nya,JMH,someGe,Inb47輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024有譜細胞就有譜48輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024酵素處理譜細胞未經(jīng)處理譜細胞49輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202450輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024波蘿密酶酸放散51輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202452輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024中和抑制法利用可溶性抗原，可以用來中和或抑制了某些抗體的活性，剩下的抗體就可以單獨表達出來。經(jīng)常有些不具臨床意義的抗體都可以被這些血型物質(zhì)中和或抑制：如Lea,Leb,P1血型物質(zhì)53輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024血型物質(zhì)的來源Anti-P1蚯蚓，烏龜?shù)鞍祝澴拥癆nti-Lewis混合血漿血清或口水唾液Anti-Chido,anti-Rogers混合血漿血清Anti-Sda

人或天竺鼠尿Anti-I人類母乳Anti-H口水唾液54輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024P1,LewiesBGS唾液Ｌｅａ，Ｌｅｂ，Ｈ鴿蛋55輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024Anti-LeaAnti-LebAnti-IAnti-P1Anti-MAnti-A,-B,-HAnti-NNaturallyOccurringLIiPMABHNIgMantibodies56輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024外部質(zhì)評能力測試ProficiencyTestingCAP質(zhì)評能力測試ABO/Rh,抗篩,抗體鑒定,抗原確認,交叉試驗,直抗檢測,抗體效滴度,放散實驗,血小板抗體RCPAQAP澳洲品保ABO/Rh,抗篩,抗體鑒定,抗原確認,交叉試驗,直抗檢測,抗體效滴度,放散實驗,臺灣醫(yī)檢學會質(zhì)評能力測試小組ABO/Rh定型,抗篩,抗體鑒定(選擇性),抗原確認,交叉合血,直抗檢測57輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202458輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024臺灣輸血醫(yī)學質(zhì)評能力測試每年二次依申請實驗室條件分成兩組，每次隨機兩組編碼分四支紅細胞懸液+血漿樣本測ABO/Rh(正反定型合并)，抗篩，抗體鑒定，直抗（每次二支紅細胞懸液標本），交叉配血(每次一支紅細胞懸液標本)，抗原確認（提供交叉配血標分依抗體種類作抗原分型，不計分）

。以往測試的特殊血型及抗體：A2,B3,類孟買血型，弱Ｄ，anti-D,-E,-c,-Dia,-Mia,-Fyb,-Jka,-Jkb,-P1.-M等,potentcoldanti-I,也試過多種抗體組合(如anti-c,-E,-Jka)。59輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024全國室間質(zhì)評能力測試比較定型判讀，可增加選擇測試項目。以最終判讀的結(jié)果為評分標準。（但有ABO正反不符的選項）可以后送單位的結(jié)果來因應(yīng)室間質(zhì)評能力測試的結(jié)果。有抗體鑒定結(jié)果，及交叉配血結(jié)果評定。有直抗評量及獻血員相對應(yīng)抗原定型。60輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024血小板抗體臺灣組織相容免疫基因?qū)W會能力試驗小組:HLA抗體PRA測試臺灣常用血小板抗體的監(jiān)測方法:ELISAPRA(酶標法),FlowPRA(流式細胞儀),LuminexPRA,SPRCA(交叉及PRA)適用:血小板輸注無效,新生兒血小板低小紫癜癥。61輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024血小板輸注無效癥輸血管理華人大部份的血小板輸注無效癥是來自HLA抗體評估使用CREGmatching(cross-reactivegroup),或HLAmatchmaker效果良好。臺灣血液基金會建立約六萬多筆常獻機采血小板獻血員HLAclassI資料,目前也建立多筆CD36及HPAIIIa,IVb抗原陰性獻血員臺大醫(yī)院每月約100筆HLA配血機采血小板62輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024MASPAT63輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024交叉配血的意義（主側(cè)）主側(cè)配血:確認血型相容是否有抗篩無法篩到的同種抗體或自身抗體。緊急輸血下主側(cè)交叉配血來不及執(zhí)行，可以省略。（緊急輸血，無標本下無血型記錄，無抗體篩查，應(yīng)以Ｏ型血不需配血直接輸注）一般交叉配血以凝聚胺法較為快速，若在抗篩完整下，以凝聚胺法主側(cè)配血是快速且安全的主側(cè)交叉配血法。（雖然凝聚胺及卡式配血那一種方法較敏感尚無定論，但凝聚胺的高敏感度及快速仍是主側(cè)交叉配血的主要方法）Transfusion.1987Mar-Apr;27(2):134-7.沒有擇定抗原陰性的交叉配血，凝聚胺法可以篩到更高比例的不合配血64輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024交叉配血的意義（次側(cè)）次側(cè)配血:確認血漿血型是否相容。因次側(cè)配血的意義在于確認血漿血型是否相容，理論上只要鹽水次側(cè)交叉配血即可。但一般次側(cè)配血也以卡片法或凝聚胺法執(zhí)行，當使用上述方法配血，主側(cè)相合，次側(cè)不合，但獻血員及受者血型可以確認同型輸血或相容輸血，可以勿略次側(cè)不合的情形（常因直抗陽性造成，更換多袋獻血員血液次側(cè)交叉仍是不合），此血仍可輸用。65輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024交叉配血的策略緊急下，來不及抽輸血前檢查標本，之前無二次血型資料，緊急輸Ｏ型懸紅。有確認定型資料，56天內(nèi)曾有輸血前檢查，期間無輸血，緊急下可輸給同型血，不做交叉。（政策指導(dǎo)下決策）一般輸血，主側(cè)凝聚胺交叉配血，次側(cè)可鹽水配血（選）。常規(guī)配血，條件不同可選主側(cè)凝聚胺或經(jīng)典-IAT配血，次側(cè)鹽水配血（選）。66輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024凝聚胺法解析凝聚胺的原理凝聚胺法注意事項凝聚胺法和傳統(tǒng)抗人球法67輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202468輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202469輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202470輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202471輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/202472輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024凝聚胺法Manualpolybrene

注意事項使用顯微鏡觀察1mL

LIM會比0.6mL

LIM較敏感些。使用LIM先洗滌cell會比較敏感些。使用0.05%

Polybrene判讀時間勿超過1min,加重懸液后加溫會有偽陽性.洗腎病人使用多陽離子heparin,或使用某些高劑量帶陽離子藥物，不適合使用凝聚胺法配血對冷反應(yīng)抗體較敏感(anti-Mia,-E,-e,-c,-D,-M,-Lea,-Leb…)，也可使用MPA方法區(qū)分或MPCAT。73輸血醫(yī)學實驗室認證經(jīng)驗臺灣5/9/2024凝聚胺法與傳統(tǒng)抗人球法比較方法凝聚胺法傳統(tǒng)抗人球（卡片）對Rh抗體敏感度相當高，尤以華人常出現(xiàn)的anti-E,anti-Mia,(華人的anti-E常以IgG/IgM型式表現(xiàn))好,尤以輸血后產(chǎn)生抗體（可能IgG型式）較凝聚胺高。對冷型自身或同種抗體或溫型自身抗體，HTLA高敏感度（交叉配血常受冷凝集素干擾，若抗篩陰性，主側(cè)交叉凝聚胺配血不合，常可能因存在冷凝集素造成交叉配血不合）除溫型自身抗體，無干擾對臨床有意義抗體配血有指標性意義.直抗比傳統(tǒng)法更敏感（但無法