食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)

食品生產(chǎn)環(huán)境的衛(wèi)生檢測(cè)1食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024新風(fēng)帶入的塵粒和微生物；作業(yè)人員發(fā)塵和散菌；建筑圍護(hù)結(jié)構(gòu)、設(shè)施的產(chǎn)塵；設(shè)備及產(chǎn)品生產(chǎn)過(guò)程的產(chǎn)塵。潔凈室污染源一、潔凈區(qū)污染2食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024一、潔凈區(qū)污染對(duì)潔凈區(qū)的空間、操作人員和設(shè)備（工作臺(tái)面）都必須進(jìn)行檢查，以確保分析結(jié)果的質(zhì)量不受這些環(huán)境因素的影響。有衛(wèi)生生產(chǎn)環(huán)境要求的潔凈生產(chǎn)區(qū)宜包括易腐性食品、即食半成品或成品的最后冷卻或包裝前的存放、前處理場(chǎng)所；不能最終滅菌的原料前處理、產(chǎn)品灌封、成型場(chǎng)所，產(chǎn)品最終滅菌后的暴露環(huán)境；內(nèi)包裝材料準(zhǔn)備室和內(nèi)包裝室以及為食品生產(chǎn)、改進(jìn)食品特性或保存性的加工處理場(chǎng)所和檢驗(yàn)室等。監(jiān)測(cè)項(xiàng)目和區(qū)域3食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024包括沉降菌和浮游菌，只是捕捉時(shí)的形態(tài)差異沉降菌指落在地面或物體表面的灰塵中攜帶的細(xì)菌；浮游菌指在空氣中漂浮的塵埃所攜帶的細(xì)菌。見(jiàn)相關(guān)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)沉降菌GB/T16294-2010浮游菌GB/T16293-2010一、潔凈區(qū)污染空間微生物4食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024懸浮在空氣中的活微生物粒子，通過(guò)專門(mén)的培養(yǎng)基，在適宜的生長(zhǎng)條件下繁殖到可見(jiàn)的菌落數(shù)。四、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）本標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定了醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)中浮游菌測(cè)試條件、測(cè)試方法。本標(biāo)準(zhǔn)適用于醫(yī)藥工業(yè)潔凈室和潔凈區(qū)，無(wú)菌室或無(wú)菌區(qū)域（包括潔凈工作臺(tái)）的浮游菌的測(cè)定和環(huán)境的驗(yàn)證。5食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）采樣器原理：撞擊法impactingmethod撞擊式空氣微生物采樣器采樣，通過(guò)抽氣動(dòng)力作用，使空氣通過(guò)狹縫或小孔而產(chǎn)生高速氣流，從而使懸浮在空氣中的帶菌粒子撞擊到瓊脂平板上，經(jīng)35℃，48h培養(yǎng)后，計(jì)算每立方米空氣中所含的細(xì)菌菌落數(shù)的采樣測(cè)定方法。6食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024

采樣點(diǎn)的布置

采樣點(diǎn)位置可以同懸浮粒子測(cè)試點(diǎn)。工作區(qū)測(cè)點(diǎn)位置離地0.8～1.5m左右（略高于工作面）。送風(fēng)口測(cè)點(diǎn)位置離開(kāi)送風(fēng)面30cm左右。可在關(guān)鍵設(shè)備或關(guān)鍵工作活動(dòng)范圍處增加測(cè)點(diǎn)。二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）采樣注意事項(xiàng)對(duì)于單向流或送風(fēng)口，采樣器采樣管口朝向應(yīng)正對(duì)氣流方向；對(duì)于非單向流，采樣管口向上。布置采樣點(diǎn)時(shí)，至少應(yīng)離開(kāi)塵粒較集中的回風(fēng)口1m以上采樣時(shí)，測(cè)試人員應(yīng)站在采樣口的下風(fēng)側(cè),并盡量少走動(dòng)采取一切措施防止采樣過(guò)程的污染和其他可能對(duì)樣本的污染。7食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）

采樣點(diǎn)的布置

8食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024

測(cè)試步驟

測(cè)試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。

采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤(pán)以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤(pán)。

采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)消毒時(shí)，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤(pán)上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。

狹縫式采樣器的采樣程序：開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開(kāi)啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）9食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024大豆酪蛋白瓊脂培養(yǎng)基（TSA）酪蛋白胰酶消化物15g提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子大豆粉木瓜蛋白酶消化物5g提供氮源、維生素和生長(zhǎng)因子氯化鈉5g調(diào)節(jié)滲透壓瓊脂15g凝固劑純化水1000mL30℃~35℃48h

二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）10食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024最小采樣量潔凈度級(jí)別采樣量（L/次）100級(jí)100010000級(jí)500100000級(jí)100300000級(jí)100二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）11食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024每個(gè)測(cè)點(diǎn)的浮游菌平均濃度的計(jì)算二、潔凈間浮游菌的檢測(cè)（AirborneMicrobe）示例1：某測(cè)點(diǎn)采樣量為400L，菌落數(shù)為1，則：

示例2：某測(cè)點(diǎn)采樣量為2m3，菌落數(shù)為3，則：12食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024表面菌附在人體表皮或設(shè)備表面的微生物三、潔凈間沉降菌的檢測(cè)（SettlingMicrobe）13食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024

測(cè)試步驟

測(cè)試前儀器、培養(yǎng)皿表面必須嚴(yán)格消毒。采樣器進(jìn)入被測(cè)房間前先用消毒房間的消毒劑滅菌，用消毒劑擦凈培養(yǎng)皿的外表面。

采樣前，先用消毒劑消毒采樣器的頂蓋、轉(zhuǎn)盤(pán)以及罩子的內(nèi)外面，采樣結(jié)束，再用消毒劑輕輕噴射罩子的內(nèi)壁和轉(zhuǎn)盤(pán)。

采樣口及采樣管，使用前必須高溫滅菌。如用消毒劑對(duì)消毒時(shí)，應(yīng)將管中的殘留液倒掉并晾干。采樣者應(yīng)穿戴與被測(cè)潔凈區(qū)域相應(yīng)的工作服，在轉(zhuǎn)盤(pán)上放入或調(diào)換培養(yǎng)皿前，雙手用消毒劑消毒。

狹縫式采樣器的采樣程序：開(kāi)動(dòng)真空泵抽氣，使儀器中的殘余消毒劑蒸發(fā)，時(shí)間不少于5min，并調(diào)好流量、轉(zhuǎn)盤(pán)轉(zhuǎn)速。關(guān)閉真空泵，放入培養(yǎng)皿，蓋上蓋子后調(diào)節(jié)采樣器縫隙高度。置采樣口于采樣點(diǎn)后，依次開(kāi)啟采樣器、真空泵，轉(zhuǎn)動(dòng)定時(shí)器，根據(jù)采樣量設(shè)定采樣時(shí)間。三、潔凈間沉降菌的檢測(cè)（SettlingMicrobe）14食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024TSA46±1℃保溫冷卻凝固倒置······30-35℃三、潔凈間沉降菌的檢測(cè)（SettlingMicrobe）采樣點(diǎn)布置同浮游菌，一般離地面0.8m高度的水平面上均勻布置。測(cè)定時(shí)，將已配置好的培養(yǎng)皿按采樣點(diǎn)要求逐個(gè)放置，然后從里到外逐個(gè)打開(kāi)培養(yǎng)皿蓋，使培養(yǎng)皿表面暴露在空氣中。靜態(tài)測(cè)試時(shí)，將培養(yǎng)皿暴露時(shí)間為30min以上。15食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024三、潔凈間沉降菌的檢測(cè)（SettlingMicrobe）用肉眼對(duì)培養(yǎng)皿上所有的菌落直接計(jì)數(shù)、標(biāo)記或在菌落計(jì)數(shù)器上點(diǎn)計(jì)，然后用5～10倍放大鏡檢查，有否遺漏。若平板上有2個(gè)或2個(gè)以上的菌落重疊，可分辨時(shí)仍以2個(gè)或2個(gè)以上菌落計(jì)數(shù)。式中：培養(yǎng)皿總數(shù)。平均菌落數(shù)；M1

1號(hào)平均菌落數(shù)；n號(hào)平均菌落數(shù)；2號(hào)平均菌落數(shù)；M2Mn

n

16食品生產(chǎn)環(huán)境菌落總數(shù)檢驗(yàn)技術(shù)5/9/2024把棉球剪去手接觸部分，棉拭子放入試管內(nèi)，搖勻四、食品接觸面、操作人手的衛(wèi)生檢測(cè)滅菌棉簽

食品接觸面

35±2℃培養(yǎng)48h連續(xù)采樣4個(gè)規(guī)格板面積，共采集100cm210ml滅菌生理鹽水營(yíng)養(yǎng)瓊脂5×5cm2滅菌規(guī)格版各10﹣1均勻涂抹5次46±1℃保溫10ml滅菌生理鹽水營(yíng)養(yǎng)瓊脂各10﹣146±1℃保溫把棉球剪去手接觸部分，棉拭子放入試管內(nèi)，搖勻五指并攏，右手指曲面指尖到指端涂擦10次

操作人手視頻視