GB 17378.6-2007 海洋監(jiān)測規(guī)范 第6部分 生物體分析

A45中華人民共和國國家標(biāo)準(zhǔn)海洋監(jiān)測規(guī)范Thespecificationformarinemonitoring—part6：organismanalysisⅠ前言 2規(guī)范性引用文件 3術(shù)語和定義 4一般規(guī)定 . .5.2冷原子吸收光度法 61無火焰原子吸收分光光度法（連續(xù)測定銅鉛和鎘） 6.2陽極溶出伏安法 .63火焰原子吸收分光光度法 . .71無火焰原子吸收分光光度法 .7.2陽極溶出伏安法 .73火焰原子吸收分光光度法 . 8.1無火焰原子吸收分光光度法 .82陽極溶出伏安法 ..83火焰原子吸收分光光度法 .9.1火焰原子吸收分光光度法20.92陽極溶出伏安法 . 10.1無火焰原子吸收分光光度法 .102二苯碳酰二肼分光光度法 . .112砷鉬酸-結(jié)晶紫分光光度法 ..113氫化物原子吸收分光光度法 ..114催化極譜法 . .121熒光分光光度法 ..122二氨基聯(lián)苯胺四鹽酸鹽分光光度法 . 油烴—熒光分光光度法 、氯聯(lián)苯—?dú)庀嗌V法47、氯聯(lián)苯—?dú)庀嗌V法47Ⅱ16狄氏劑—?dú)庀嗌V法 附錄A（規(guī)范性附錄）記錄表 附錄B（資料性附錄）方法檢出限 附錄C（資料性附錄）有機(jī)氯農(nóng)藥—毛細(xì)管氣相色譜測定法 附錄D（資料性附錄）多氯聯(lián)苯—毛細(xì)管氣相色譜測定法 圖1冷原子吸收測汞裝置 表1從分析樣中抽取檢查樣的比例 表2平行雙樣相對偏差表 表3有機(jī)氯農(nóng)藥標(biāo)準(zhǔn)溶液各組分含量一覽表 表A.1生物樣品分析標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線數(shù)據(jù)記錄（原子熒光法） 表A.2生物樣品分析記錄（原子熒光法） 表A.3生物樣品分析標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線數(shù)據(jù)記錄（分光光度法） 表A.4生物樣品分析記錄（分光光度法） 表A.5生物樣品分析標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線數(shù)據(jù)記錄（無火焰原子吸收分光光度法） 表A.6生物樣品分析記錄（無火焰原子吸收分光光度法） 表A.7生物樣品分析記錄（陽極溶出伏安法） 表A.8生物樣品分析標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線數(shù)據(jù)記錄（火焰原子吸收分光光度法） 表A.9生物樣品分析記錄（火焰原子吸收分光光度法） 表A.10生物樣品標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線數(shù)據(jù)記錄（催化極譜法） 表A.11生物樣品分析記錄（催化極譜法） 表A.12生物樣品分析標(biāo)準(zhǔn)（工作）曲線數(shù)據(jù)記錄（熒光分光光度法） 表A.13生物樣品分析記錄（熒光分光光度法） 表A.15生物樣品PCB分析記錄（氣相色譜法） 表A.16海洋監(jiān)測生物體分析結(jié)果報(bào)表 表B.1測定方法檢出限 表C.1海洋生物樣品中有機(jī)氯農(nóng)藥分析記錄表 表D.1海洋生物樣品中多氯聯(lián)苯分析記錄表 Ⅲ本部分的全部技術(shù)內(nèi)容為強(qiáng)制性?！?部分：數(shù)據(jù)處理與分析質(zhì)量控制；—第7部分：近海污染生態(tài)調(diào)查和生物監(jiān)測。本部分與GB17378.6—1998相比主要變化如下：—測定項(xiàng)目、方法及檢出限調(diào)整為“資料性附錄”(1998年版的第5章；本版的附錄B);—取消了總汞的“雙硫腙分光光度法”(1998年版的6.2);—修改了銅、鉛和鎘的無火焰原子吸收分光光度測定法，調(diào)整為“銅、鉛和鎘的連續(xù)測定法”(1998—取消了銅的“二乙基二硫代氨基甲酸鈉分光光度法”(1998年版的7.4);—取消了鉛的“雙硫腙分光光度法”(1998年版的8.3);—取消了鎘的“雙硫腙分光光度法”(1998年版的9.3—取消了鋅的“雙硫腙分光光度法”(1998年版的—修改了石油烴的“熒光分光光度法”(1998年版的第14章；本版的第13章—修改完善了各測試方法的記錄表格并調(diào)整為“規(guī)范性附錄”（見附錄A);—增加了有機(jī)氯農(nóng)藥的“毛細(xì)管氣相色譜法”（見附錄C);—增加了多氯聯(lián)苯的“毛細(xì)管氣相色譜法”（見附錄D)。本部分的附錄A為規(guī)范性附錄，附錄B、附錄C和附錄D為資料性附錄。本部分由國家海洋局提出。本部分由全國海洋標(biāo)準(zhǔn)化技術(shù)委員會(huì)(SAC/TC283)歸口。本部分起草單位：國家海洋環(huán)境監(jiān)測中心。本部分所代替標(biāo)準(zhǔn)的歷次版本發(fā)布情況為：1海洋監(jiān)測規(guī)范第6部分：生物體分析GB17378的本部分規(guī)定了貽貝、蝦及魚等海洋生物體中有害物質(zhì)殘留量的測定方法，并對樣品采集、運(yùn)輸、貯存、預(yù)處理和測定結(jié)果的計(jì)算等提出技術(shù)要求。本部分適用于大洋、近海和沿海水域的海洋生物污染調(diào)查與監(jiān)測。2規(guī)范性引用文件件，其隨后所有的修改單（不包括勘誤的內(nèi)容）或修訂版均不適用于本部分，然而，鼓勵(lì)根據(jù)本部分達(dá)成協(xié)議的各方研究是否可使用這些文件的最新版本。凡是不注日期的引用文件部分。GB17378.5海洋監(jiān)測規(guī)范3術(shù)語和定義下列術(shù)語和定義適用于GB17378的本部分。蒸至近干evaporationtodryness溶劑蒸發(fā)至小體積(0.2mL~0.3mL),留有殘?jiān)蕽駶櫊睢?biāo)線standardline計(jì)量容器體積的刻度線。4一般規(guī)定4.1樣品的采集與制備蠣等。4.1.2.1去離子水或等效蒸餾水，其痕量金屬含量應(yīng)低于分析方法的檢出限，或用未受沾污的海水。儀器和設(shè)備如下：—塑料冷凍箱：配有冰袋。用于貽貝貯存和運(yùn)輸時(shí)，底部應(yīng)具有柵板，以免樣品浸入水中；—冰箱；—低溫冰箱；—塑料板和尺子：用于長度測量；2—塑料刀；—玻璃或陶瓷碟：制備樣品用；—鑷子：塑料制品或其他合適材料的制品；—高密度聚乙烯袋和塑料容器：供速凍保存樣品用，裝樣前，應(yīng)用合成洗滌劑清洗，并用蒸餾水洗凈；—塑料洗瓶；—刮刀：供采集樣品用；—大號金屬刀：無銹斑，供切取魚組織用；—?jiǎng)驖{器：不銹鋼或其他適宜材料的制品；—電熱烘箱；—干燥箱；—冷凍干燥設(shè)備。用清潔刮刀從其附著物上采集貽貝樣。選取足夠數(shù)量的完好貽貝存于冷凍箱中。若需長途運(yùn)輸（炎熱天超過2h),應(yīng)把貽貝樣品盛于塑料桶中，將現(xiàn)場采集的清潔海水淋灑在貽貝上，樣品保持潤濕狀但不能浸入水中。若樣品處理須在采樣24h后進(jìn)行，可將貽貝樣存于高密度塑料袋中，壓出袋內(nèi)空氣，將袋口打結(jié)或熱封，將此袋和樣品標(biāo)簽一起放入聚乙烯袋中并封口，存于低溫冰箱中。按要求選取足夠數(shù)量的完好的生物樣，放入干凈的聚乙烯袋中，應(yīng)防止刺破袋子。擠出袋內(nèi)空氣，將袋口打結(jié)或熱封，將此袋和樣品標(biāo)簽一起放入另一聚乙烯袋中，并封口，低溫冷藏。若貯存期不太長時(shí)（熱天不超過48h),可用冰箱或冷凍箱存放樣品。測量并記下魚樣的叉長、體重和性別。用清潔的金屬刀切下至少100g肌肉組織，厚度至少5cm,樣品處理時(shí)，切除沾污或內(nèi)臟部分。存于清潔的聚乙烯袋中，擠出空氣并封口，將此袋與樣品標(biāo)簽一起放入另一聚乙烯袋中，封口，于低溫冰箱中貯存。若保存時(shí)間不太長（熱天不超過48h),可用冰箱或冷凍箱貯放樣品。樣品采集后，若長途運(yùn)輸，應(yīng)把樣品放入樣品箱（或塑料桶）中，對不需封裝的樣品應(yīng)將現(xiàn)場清潔海水淋灑在樣品上，保持樣品潤濕狀（不得浸入水中若樣品處理，應(yīng)在采樣24h后進(jìn)行，可將樣品放在聚乙烯袋中，壓出袋內(nèi)空氣，將袋口打結(jié)。將此袋和樣品標(biāo)簽一起放入另一聚乙烯袋（或潔凈的廣口玻必要時(shí)將冷凍樣品在冰箱(-2℃~4℃)中放置過夜，使部分解凍以便切片。用合成洗滌劑（見4.1.2.2)清洗塑料刀、碟、鑷子、塑料板及尺和稱重塑料膜，用蒸餾水或清潔海水3（見4.1.2.1)漂洗干凈。工作臺(tái)用洗凈的塑料膜罩上。用合成洗滌劑（見4.1.2.2)仔細(xì)地洗手，后用蒸用塑料刀或塑料刷除去貝殼外部所有的附著物。用蒸餾水或清潔海水（見4.1.2.1)漂洗每一個(gè)樣品個(gè)體，讓其自然流干，拉出足絲。用天平稱個(gè)體全重，并記下重量。用另一把塑料刀插入足絲伸出口，切斷閉合肌，打開貝殼。用蒸餾水或清潔海水（見4.1.2.1)洗貝殼內(nèi)的軟組織，用塑料刀和鑷子取出軟組織，讓水流盡。單個(gè)體樣品：將軟組織放入已稱重的塑料容器內(nèi)，再稱重，記下鮮重。蓋緊，貼上標(biāo)簽。用尺子測量并記錄貝殼長度。多個(gè)體樣品：按上述步驟將至少10個(gè)個(gè)體的軟組織放入已知重量的塑料容器中，稱重，記下鮮重。標(biāo)簽。各生物個(gè)體大小應(yīng)相近，并在取出生物組織前分別測量其個(gè)體長度和總重量。用尺子量蝦體長，將蝦放在聚乙烯稱樣膜上，稱重，記下長度和鮮重。用塑料刀將腹部與頭胸部及尾部分開，小心將其內(nèi)臟從腹部取出。腿全部切除。將腹部翻下，用塑料刀沿腹部外甲邊緣切開，用塑料鑷子取下內(nèi)側(cè)外甲并棄去。用另一把塑料刀松動(dòng)腹部肌肉，并用鑷子取出肌肉。檢查性腺，記錄所鑒別的性別。用鑷子將肌肉移入塑料容器中，稱重并記錄鮮重。蓋緊容器，標(biāo)上號碼。將幾個(gè)容器一起放入同一塑料袋中，并附樣品登記清單，結(jié)緊袋口，低溫冰箱中保存。按上述方法制備樣品，仔細(xì)地記錄各個(gè)體長度、鮮重、腹部肌肉重和性別。每個(gè)樣品須包括6個(gè)以上性別相同、大小相近的個(gè)體肌肉。將樣品放入勻漿器中勻化腹部肌肉，轉(zhuǎn)入已知重量的塑料容器中蓋緊，標(biāo)上號碼，稱重，記下鮮重和其他數(shù)據(jù)。將幾個(gè)塑料容器放在同一塑料袋中，并附上樣品登記清單，結(jié)緊袋口，在低溫冰箱中保存。測量魚的叉長，并于聚乙烯稱樣膜上稱重。鑒定性腺性別，記下叉長和體重。用蒸餾水或清潔海水（見4.1.2.1)洗滌魚樣，將它放在工作臺(tái)上，用塑料刀切除胸鰭并切開背鰭附近自頭至尾部的魚皮。在鰓附近和尾部，橫過魚體各切一刀；在腹部，鰓和尾部兩側(cè)各切一刀。四刀只切在魚體一側(cè)，且不得切太深，以免切開內(nèi)臟，沾污肉片。用鑷子將魚皮與肉片分離，謹(jǐn)防外表皮沾污肉片。重量。若一側(cè)的肌肉量不能滿足分析用量，取另一側(cè)肌肉補(bǔ)充。蓋緊容器，貼上標(biāo)簽或記號，做好記錄，于低溫冰箱中保存。仔細(xì)記下各個(gè)體體長、鮮重、肌肉重。鑒定性別。個(gè)體數(shù)不應(yīng)少于6個(gè)，且性別應(yīng)相同，大小相近。用勻漿器勻化魚組織，將勻漿樣轉(zhuǎn)入已知重量的塑料容器中，蓋緊，貼上標(biāo)簽并稱重，記下勻漿樣重4和其他數(shù)據(jù)。置于低溫冰箱中存放。若必要，將現(xiàn)場采集的樣品放在-2℃~4℃冰箱中過夜，使部分解凍以便于切片。用蒸餾水或清潔海水（見4.1.2.1)洗滌魚樣。將魚樣置于清潔的工作臺(tái)上，剔除殘存的皮和骨，用塑料刀切去表層，再用另一把塑料刀重復(fù)操作一次，留下不受污染的肌肉組織。將肌肉組織放入塑料容器中，蓋緊，貼上標(biāo)簽，稱重，將數(shù)據(jù)記入記錄表，樣品存于低溫冰箱中。將稱量瓶放入105℃烘箱，2h后，取出稱量瓶，置于干燥器中冷卻30min。蓋好瓶蓋，用分析天平稱重，記下重量。取5g~10g上述生物制備樣于稱量瓶中，蓋好瓶蓋，再稱重(±0.5mg)并記下重量。將盛樣品的稱量瓶半開蓋放入105℃烘箱中，24h后取出，置于干燥器中冷卻30min。蓋好瓶蓋后稱重并記錄所稱重量。重復(fù)烘干操作，至前后兩次烘干后的重量差小于總重量的0.5%。計(jì)算干重和干濕比。對類脂物含量高的生物樣品，不能烘干至恒重，則應(yīng)用冷凍干燥。準(zhǔn)確稱取1g~2g上述生物制備樣于干凈的冷凍干燥的樣品容器中，冷凍干燥24h后稱重一次。再次冷凍干燥24h,再稱重。兩次稱重的重量差應(yīng)小于總重量的0.5%。否則，應(yīng)繼續(xù)干燥至符合要求。計(jì)算干重和干濕比。本規(guī)定執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—在實(shí)驗(yàn)室附近采集貽貝，不存在特殊的運(yùn)輸和貯藏問題。運(yùn)往實(shí)驗(yàn)室時(shí)，應(yīng)使貽貝樣通風(fēng)并用海水保持潤濕。采自潮間帶的貽貝，在空氣中可生存24h。運(yùn)輸時(shí)不應(yīng)將貽貝放在水中；—手洗凈之后，不應(yīng)接觸解剖組織，應(yīng)帶上手套；若條件許可，準(zhǔn)備工作和樣品制備均應(yīng)在潔凈條件下進(jìn)行；—制備多個(gè)體樣品時(shí)，應(yīng)取性別相同、個(gè)體大小相近的生物。取出軟組織之前，應(yīng)分別測量各個(gè)體的體長和重量；—樣品消化前，將盛有樣品的容器總重量與貯存時(shí)之重量進(jìn)行比較，可發(fā)現(xiàn)貯存期間樣品是否失重；—不同部位肌肉的痕量金屬含量可能存在差別，故實(shí)際樣品的有關(guān)資料應(yīng)盡可能記錄詳細(xì)；—用于有機(jī)氯農(nóng)藥和石油烴測定的生物樣品，樣品采集和預(yù)處理的設(shè)備和試劑作適當(dāng)?shù)南鄳?yīng)改變，應(yīng)避免采用塑料器皿和含有鹵代烴試劑；—生物體中總汞及有害有機(jī)物的測定，不應(yīng)用干燥樣品，應(yīng)用濕樣測定，結(jié)果仍以干樣中被測物的含量來表示。4.2規(guī)定和要求4.2.2標(biāo)準(zhǔn)溶液配制中，所有的移液管和容量瓶均應(yīng)進(jìn)行檢定或容量校正。4.2.3除另有注明外，所用容器的凈化均先用硝酸溶液(1+3)浸泡2d~3d后，再用去離子水仔細(xì)淋洗干凈，晾干后備用。4.2.4pH值除注明測量方法外，均可用精密或廣泛pH試紙測量。4.2.5為檢查分析結(jié)果的質(zhì)量，應(yīng)從一批分析樣中按表1任意抽取檢查樣，分別裝袋并另編樣號，將基5本樣與檢查樣交分析測試人員，按以下要求進(jìn)行測定：—抽查樣的測項(xiàng)與基本樣相同；—當(dāng)分析樣數(shù)量較多時(shí)，基本樣與檢查樣可不應(yīng)安排在同批內(nèi)進(jìn)行測試；—測試所得結(jié)果按表2所列雙樣相對偏差值控制分析質(zhì)量。當(dāng)某測項(xiàng)雙樣檢查結(jié)果超差率大于30%時(shí)，此批基本樣中該測項(xiàng)應(yīng)全部重新稱樣測定；—若仍出現(xiàn)上述超差情況，分析測試人員應(yīng)認(rèn)真檢查分析原因（如標(biāo)準(zhǔn)溶液的配制，環(huán)境質(zhì)量，所用儀器設(shè)備有無不正常情況等）后，再進(jìn)行這批樣品（基本樣與檢查樣）的測定；—當(dāng)某測項(xiàng)雙樣檢查結(jié)果超差率小于30%時(shí)，超差的樣品應(yīng)重新稱樣進(jìn)行測定，直至新測定結(jié)果合格為止。按平行雙樣的均值報(bào)出結(jié)果；—每批分析的樣品(20個(gè)左右）應(yīng)插入2個(gè)~3個(gè)有證標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)樣品（另行編號以檢驗(yàn)有無系統(tǒng)誤差。表1從分析樣中抽取檢查樣的比例分析樣個(gè)數(shù)／個(gè)<10>30檢查樣抽取比例/%表2平行雙樣相對偏差表分析結(jié)果所在數(shù)量級相對偏差容許限/%484.3.1各種酸堿的密度(ρ)是指20℃時(shí)的質(zhì)量除以體積，單位為g/mL。4.3.2干燥劑在不指明具體名稱時(shí)，均指變色硅膠。4.3.3所配制的元素的標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度均指該元素的濃度。4.3.4沒有指明溶劑的溶液都是水溶液。本方法適用于海洋生物體中總汞的測定。本方法為仲裁方法。在硝酸-高氯酸消化體系中，生物體中的汞全量轉(zhuǎn)化為汞離子進(jìn)入溶液。用硼氫化鉀作為還原劑將溶液中的汞離子還原成汞蒸汽。以氬氣為載氣使原子汞蒸汽進(jìn)入原子熒光光度計(jì)的原子化器中，用特種汞空心陰極燈為激發(fā)光源，測定汞原子熒光強(qiáng)度。):ρ=1.42g/mL,優(yōu)級純。2C24·2H2O)。6中保存。0.5g硼氫化鉀（見5.1.3.5)溶解后前配制。5.1.3.10汞標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(1.00g/L)：準(zhǔn)確稱取0.1354g氯化汞(HgCl2,優(yōu)級純，預(yù)先在硫酸干燥儀器和設(shè)備如下：—原子熒光光度計(jì)；—電加熱板；—?dú)鍤?；—?shí)驗(yàn)室常用儀器與設(shè)備。5.1.5.1.2向原子熒光光度計(jì)的氫化物發(fā)生器中依次加入汞標(biāo)準(zhǔn)系列溶液各2mL,分別測定標(biāo)準(zhǔn)空I0)和標(biāo)準(zhǔn)樣品熒光強(qiáng)度（Ii)。Ii-I0)為縱坐標(biāo)，以汞的質(zhì)量(ng)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線（給出線性回歸方程）并計(jì)算線性回歸系數(shù)。140℃~160℃電熱板上加熱，消化至黃棕色煙霧散盡，消化液清亮透明，近無色或淺黃色為止。取下冷容至標(biāo)線，混勻，靜置20min后測試。除不加生物樣品外，其余步驟完全等同于樣品消化（見5.1.5.3.1)。由此制備的溶液作為分析空白液。度計(jì)的氫化物發(fā)生器中，分別測定分析空白熒光強(qiáng)度（Ib)和樣品消化液的熒光強(qiáng)度（Is-Ib)值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的汞的質(zhì)量(ng),或用線性回歸方程計(jì)算得出汞的質(zhì)量(ng)。將測定結(jié)果記入表A.2中，按式(1)計(jì)算生物體中汞的含量：狑Hg=V2·(1狑H2O)??????????????(1)式中：狑Hg—生物干樣中總汞的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-9);m—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的汞量，單位為納克(ng);V1—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V2—樣品測定分樣的體積，單位為毫升(mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g);狑H2O—濕樣的含水率（質(zhì)量分?jǐn)?shù)。汞含量為0.052×10-6時(shí)，再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為8%;平均相對誤差為1%;重復(fù)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水為去離子水或等效無汞水；—對含碘量高的生物樣品，應(yīng)加入適量的硝酸銀消除碘對測定的干擾；—試驗(yàn)用器皿用硝酸溶液(1+3)浸泡24h以上，洗凈，并檢查空白是否合格；—生物樣品取樣量較大時(shí)，可適當(dāng)增加硝酸用量；洗凈；—標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的介質(zhì)組成應(yīng)盡可能與試樣消化液組成相近；—所用的試劑，特別是硝酸和鹽酸，在使用前應(yīng)作空白試驗(yàn)；—適當(dāng)?shù)卣{(diào)節(jié)樣品的稱取量，確保測得值在標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍內(nèi)。5.2冷原子吸收光度法5.2.1適用范圍和應(yīng)用領(lǐng)域本方法適用于海洋生物體中總汞的測定。對含碘量高的生物樣品，應(yīng)添加適量硝酸銀消除碘對測定的干擾。以五氧化二釩作催化劑，用硝酸-硫酸消化生物樣品，將有機(jī)汞全部轉(zhuǎn)化為無機(jī)汞，再用氯化亞錫將汞離子還原成金屬汞，用氣-液平衡開路吸氣冷原子吸收測定系統(tǒng)于253.7nm波長測定總汞含量。5.2.3.2無水氯化鈣(CaCl2),用于裝填干燥管。加熱至溶解，冷卻后裝于棕色瓶內(nèi)，使用時(shí)用等體積水稀釋。若汞含量高，可用鼓泡法去除，直至溶液中78汞含量不能檢出。含量應(yīng)低于0.005μg/L。5.2.3.11汞標(biāo)準(zhǔn)貯備溶液(1.00mg/mL)：稱取0.1354g氯化汞(HgCl2,預(yù)先在硫酸干燥器中干燥）稀釋至標(biāo)線，混勻。保存期一年。儀器和設(shè)備如下：—測汞裝置（見圖1);—汞蒸氣發(fā)生瓶：250mL錐形洗瓶改制，將洗瓶通氣管下端截?cái)啵构芏藙傠x開待測溶液液面；—電熱板；—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。1—抽氣泵；2—空氣流量調(diào)節(jié)閥；3—含汞廢氣吸收器；4—測汞儀；5—光吸收池；6—干燥管；7—三通閥；8—汞蒸氣發(fā)生瓶；9—空氣凈化裝置；10—?dú)怏w流量計(jì)。圖1冷原子吸收測汞裝置按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：b)將測汞儀上的三通開關(guān)轉(zhuǎn)至調(diào)零檔，以1L/min~1.5L/min流量的空氣流通過光吸收池；c)將汞蒸氣發(fā)生瓶依次連接于測汞儀上，加入2mL氯化亞錫溶液（見5.2.3.9),迅速塞緊汞蒸氣發(fā)生瓶的塞子，振搖1min;9d)調(diào)節(jié)測汞儀零點(diǎn)，將三通開關(guān)轉(zhuǎn)到測定檔，測定吸光值（Ai)及標(biāo)準(zhǔn)空白吸光值（A0);e)將數(shù)據(jù)填入表A.3中。以吸光值A(chǔ)i-A0為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的汞含量(μg)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。量轉(zhuǎn)入100mL量瓶中，加水稀釋至標(biāo)線，混勻。此液為樣品消化液。同時(shí)制備分析空白試液。5.2.5.1.d)步驟測定吸光值（As)及分析空白吸光值（Ab)。以（As-Ab)的值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的汞的量(μg)。將測定數(shù)據(jù)填入表A.4中，按式(2)計(jì)算樣品干樣中汞的含量：WHg=????????????????(2)式中：WHg—生物干樣中總汞的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);m—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的汞的量，單位為微克(μg);V1—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V2—測定分樣體積，單位為毫升(mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g);F—樣品的干濕比。5.2.7精密度和準(zhǔn)確度汞含量為0.25×10-6時(shí)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4%;4個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一牡蠣互校樣，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水為去離子水或等效純水；—試驗(yàn)用器皿用硝酸溶液(1+3)浸泡24h以上，洗凈，并檢查空白是否合格；—用過的汞蒸氣發(fā)生瓶，應(yīng)用酸性高錳酸鉀溶液漂洗，用水洗凈；—繪制汞標(biāo)準(zhǔn)曲線時(shí)，也可用氯化鈉溶液代替低汞海水。6.1無火焰原子吸收分光光度法（連續(xù)測定銅、鉛和鎘）本法適用于海洋生物體中銅、鉛和鎘的連續(xù)測定。本方法為仲裁方法。進(jìn)行無火焰原子吸收測定。3):ρ=1.42g/mL,優(yōu)級純，經(jīng)石英亞沸蒸餾器蒸餾。):30%。99.99%)于3只50mL燒杯中，用水潤濕，加硝酸溶液（見6.1.3.3)溶解，必要時(shí)加熱直至溶解完全。稀釋至標(biāo)線，混勻。此溶液銅為20.0μg/mL,鉛為10.0μg/mL,鎘為2.0μg/mL。儀器和設(shè)備如下：—無火焰原子吸收分光光度計(jì)；—空心陰極燈；—電熱板。按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：c)將數(shù)值記入表A.5中，以吸光值（Ai-A0)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)金屬元素的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（見6.1.3.1),蓋上表面皿，置于電熱板上，低溫加熱至泡沫基本消失。200℃加熱約20min,補(bǔ)加1mL過氧化氫（見6.1.3.2),繼續(xù)加熱并蒸至約剩1mL。160℃~200℃加熱，并蒸至約0.5mL,全量轉(zhuǎn)入10mL具塞比色管中，加水至標(biāo)線，混勻。同時(shí)制備分析空白樣品。量取20μL樣品消化液，按選定的儀器技術(shù)參數(shù)測定相應(yīng)金屬元素的吸光值（As);同時(shí)，測定分析空白樣品吸光值（Ab)。以（As-Ab)的值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)金屬元素的濃度(μg/mL)。將測得數(shù)據(jù)記入表A.6中，按式(3)計(jì)算生物體干樣中銅、鉛和鎘的含量。式中：WMe—生物體干樣中銅、鉛和鎘的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);ρMe—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的銅、鉛和鎘的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);犞—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);M—干樣品稱取量，單位為克(g)。銅：六個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一互校生物樣，測定結(jié)果的再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.6%。鉛：平行6次測定三種生物樣品，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為7.5%,6.4%和2.7%;五個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定生物樣品（牡蠣平均值為1.68×10-6,再現(xiàn)性標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%;六個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定鉛含量為0.54×10-6的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，相對誤差平均為3.7%。鎘：平行6次測定三種生物樣品，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為13%、2.8%和3.6%;五個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定鎘含量為0.067×10-6的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)，誤差平均為7.2%;五個(gè)實(shí)驗(yàn)室分析同一生物樣品（牡蠣再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為8.2%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水為二次去離子水或等效純水；—試驗(yàn)用器皿用硝酸溶液(1+3)浸泡24h以上，洗凈，使用前用二次去離子水淋洗干凈，并檢查空白是否合格；—樣品消化時(shí)，應(yīng)始終蓋上表面皿；—不同型號的無火焰原子吸收分光光度計(jì)，自行選定儀器最佳技術(shù)參數(shù)。6.2陽極溶出伏安法本法適用于海洋生物體中銅的測定。生物樣經(jīng)硝酸-過氧化氫消化，用檸檬酸三銨掩蔽干擾離子。在pH值為8.2±0.2的乙二胺介質(zhì)中，當(dāng)在工作電極上施加一定電壓進(jìn)行電解時(shí)，銅被還原并沉積在懸滴汞電極上形成銅-汞齊，然后進(jìn)行反向電壓掃描，汞中的金屬銅被氧化溶出，所產(chǎn)生的氧化電流與溶液中銅的濃度呈正比關(guān)系，借以進(jìn)行定量測定。6.2.3.4檸檬酸三銨溶液(50g/L)：稱取5g檸檬酸三銨(C6H17N3O7)于150mL燒杯中，加水溶解6.2.3.5乙二胺(NH2CH2CH2NH2)：經(jīng)等溫?cái)U(kuò)散法提純。中，加水至近100mL,用乙二胺溶液（見6.2.3.5)調(diào)節(jié)pH值為3~4儀器和設(shè)備如下：—極譜儀：具有向正電壓方向掃描的功能。若用脈沖陽極溶出伏安法，需用脈沖極譜儀；—記錄儀：配用儀器自帶的圖形記錄儀或X-Y函數(shù)記錄儀；—電極；a)工作電極：懸滴汞電極；b)參比電極：Ag/AgCl電極；c)輔助電極：鉑金電極；—電解池：規(guī)格及形狀須一致；—恒速電磁攪拌器；—電熱板：溫度可調(diào)，鋪有薄型石棉板或3cm厚細(xì)砂；—電爐：鋪有石棉網(wǎng)；—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。160℃~200℃蒸至近干，分別補(bǔ)加0.5mL硝酸和過氧化氫，蒸至近干，再重復(fù)一次。用水洗凈表面皿，洗滌液并入消化液中，移去表面皿。繼續(xù)蒸干后移到電爐上，約450℃加熱至不溶物呈白色（除盡有機(jī)物質(zhì)加入2mL鹽酸（見6.2.3.3),于高溫電熱板上蒸干。取下冷卻，加入1mL鹽酸溶液(1+1),于電熱板上微熱浸取不溶物，全量轉(zhuǎn)入50mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻，制成樣品消化溶液，同時(shí)制備分析空白樣品。樣品的測定按以下步驟進(jìn)行：檢驗(yàn)；b)接通儀器（測定前開機(jī)預(yù)熱20min)。將三個(gè)電極插入電解池中，輸入選定的儀器參數(shù)；c)啟動(dòng)運(yùn)轉(zhuǎn)旋鈕，待運(yùn)轉(zhuǎn)結(jié)束，記下峰電流值Is1;按6.2.5.2步驟測定分析空白樣品，并記下空白峰電流值Ib1和添加銅標(biāo)準(zhǔn)溶液后的峰電流值Ib2。將所測得的峰電流值記入表A.7中，按式(4)計(jì)算樣品中銅的含量：式中：WCu—生物體干樣中銅的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);Is1—樣品消化液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Is2—樣品消化液加入銅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后所得的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib1—分析空白的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib2—分析空白液添加銅標(biāo)準(zhǔn)使用液后的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；V0—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V1—測定時(shí)量取樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V2—加入銅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的體積，單位為毫升(mL);ρCu—銅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);M—樣品的稱樣重量，單位為克(g)。6.2.7精密度和準(zhǔn)確度4個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一生物樣品（牡蠣平均值為65.3×10-6,再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為11%;測定銅含量為17.2×10-6的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，相對誤差平均為3.0%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水為二次去離子水或等效純水；—消化液中有機(jī)物質(zhì)應(yīng)除盡，否則會(huì)導(dǎo)致銅的測定結(jié)果偏低，甚至出現(xiàn)不正常溶出峰；—懸汞滴體積須一致；—電解池的容積、幾何形狀及電極的位置應(yīng)保持一致；—懸汞滴表面或毛細(xì)管口上部不應(yīng)有氣泡；—攪拌速率應(yīng)恒定；—電解時(shí)間、掃描速率、脈沖高度等均影響峰電流應(yīng)嚴(yán)加控制，力求一致；—毛細(xì)管沾污常會(huì)引起電流峰不重現(xiàn)，溶出曲線混亂或毛細(xì)管內(nèi)汞線斷開。毛細(xì)管不使用時(shí)，應(yīng)在空氣中干燥貯存。毛細(xì)管在浸入新的溶液之前應(yīng)先擠出一滴汞；—所用玻璃器皿應(yīng)用硝酸浸泡1d以上，用二次去離子水反復(fù)洗凈，再用無銅蒸餾水淋洗一遍。精密微量移液管的吸頭用同法浸泡及洗凈后，于低溫（低于60℃)烘干，可反復(fù)使用；—使用不同型號的極譜儀，應(yīng)選擇最佳儀器工作條件。6.3火焰原子吸收分光光度法本法適用于海洋生物中銅的測定。生物干樣經(jīng)硝酸-過氧化氫消化，于324.7nm波長處直接進(jìn)行火焰原子吸收分光光度測定。):30%。:ρ=1.42g/mL,優(yōu)級純。儀器和設(shè)備如下：—火焰原子吸收分光光度計(jì)；—銅空心陰極燈；—空氣壓縮機(jī)；—乙炔鋼瓶；—潔凈工作臺(tái)；—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。于10mL具塞比色管中，加水至標(biāo)線，混勻。按選定的儀器技術(shù)參數(shù)，用水調(diào)零，測定吸光值（Ai)。6.3.5.1.2將數(shù)據(jù)記入表A.8中，以吸光值（Ai-A0)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的銅的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。（見6.3.3.2),蓋上表面皿，于電熱板上低溫加熱至泡沫基本消失。200℃加熱2min左右。補(bǔ)加1mL過氧化氫（見6.3.3.1),繼續(xù)加熱并蒸至約1mL。160℃~200℃加熱，并蒸發(fā)至約0.5mL。冷卻后，全量轉(zhuǎn)入10mL具塞比色管中，加水至標(biāo)線，混勻，制得樣品消化液，同時(shí)，制備分析空白樣品。按選定的儀器測定參數(shù)，用水調(diào)零，測定樣品制備液的吸光值（As)和分析空白樣品吸光值（Ab)。以（As-Ab)值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的銅濃度(μg/mL)。將測得的數(shù)據(jù)記入表A.9中，按式(5)計(jì)算生物樣品的銅含量：式中：∞Cu—生物體干樣中銅的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);ρCu—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的銅的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);犞—樣品制備液的體積，單位為毫升(mL);M—樣品稱取量，單位為克(g)。6.3.7精密度和準(zhǔn)確度6個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一生物樣（牡蠣再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為2.7%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為二次去離子水或等效純水；—試驗(yàn)用器皿用硝酸溶液(1+3)浸泡24h以上，洗凈，使用前用二次去離子水淋洗干凈，并檢查空白是否合格；—樣品消化時(shí)，須始終蓋上表面皿；—不同型號的原子吸收分光光度計(jì)，須選定儀器最佳技術(shù)參數(shù)。7.1無火焰原子吸收分光光度法無火焰原子吸收分光光度法見6.1。7.2陽極溶出伏安法本方法適用于海洋生物體中鉛的測定。生物干樣經(jīng)硝酸-過氧化氫消化，在pH值為2.0~2.5的介質(zhì)中，當(dāng)對工作電極施加一定電壓進(jìn)行電解時(shí)，鉛被還原并沉積在懸滴汞電極上形成鉛-汞齊。然后進(jìn)行反向電壓掃描，汞齊中的金屬鉛被氧化溶出，其氧化電流與溶液中鉛的濃度呈正比關(guān)系，以此進(jìn)行定量測定。：用ρ=0.90g/mL的氨水經(jīng)等溫?cái)U(kuò)散法提純。參數(shù)。7.2.5.2.3啟動(dòng)儀器的運(yùn)轉(zhuǎn)旋鈕，待運(yùn)轉(zhuǎn)結(jié)束后，記下峰電流值Is1。值Is2。按7.2.5.2步驟測定分析空白制備液的峰電流值Ib1和添加鉛標(biāo)準(zhǔn)后的峰電流值Ib2。將所測得的峰電流值記入表A.7中，按式(6)計(jì)算樣品中鉛的含量：式中：∞Pb—生物體干樣中鉛的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);Is1—樣品消化液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Is2—樣品消化液加入鉛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后所得峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib1—分析空白試液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib2—分析空白試液加入鉛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后所得峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；V0—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V1—測定時(shí)量取樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V2—加入鉛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的體積，單位為毫升(mL);ρPb—鉛標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);M—樣品稱取量，單位為微克(g)。7.2.7精密度和準(zhǔn)確度鉛含量為1.98×10-6時(shí)，測定結(jié)果的平均值為1.94×10-6,再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為5.2%;含量為0.54×10-6時(shí)，測定結(jié)果的相對誤差為5.8%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水為去離子水或等效純水；—使用不同型號的極譜儀，應(yīng)選擇最佳儀器工作條件；7.3火焰原子吸收分光光度法本方法適用于海洋生物樣品中鉛的測定。生物干樣經(jīng)硝酸-高氯酸消化，在酸性介質(zhì)中，鉛與碘化鉀形成絡(luò)合物，用甲基異丁酮萃取后于波長217.0nm處進(jìn)行鉛的火焰原子吸收測定。):ρ=1.42g/mL,優(yōu)級純。7.3.3.4高氯酸(HClO4):ρ=1.67g7.3.3.5鹽酸(HCl):ρ=1.19g/mL,優(yōu)7.3.3.9碘化鉀溶液(4mol/L)：溶解166g碘化鉀(KI)于水中，加水至250mL,貯于棕色試劑瓶中，暗處保存。儀器和設(shè)備如下：—火焰原子吸收分光光度計(jì)；—鉛空心陰極燈；—空氣壓縮機(jī)；—乙炔鋼瓶；—精密可調(diào)微量移液管：100μL;—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：管加水，使有機(jī)相上升至量瓶頸部。按選定的儀器技術(shù)參數(shù)，以MIBK（用水飽和過）調(diào)零，測定有機(jī)相的吸光值（Ai)和（Ab);c)將數(shù)據(jù)記入表A.8中。以吸光值（Ai-Ab)曲線。至溶液呈透明的淡黃色，移開表面皿，蒸發(fā)至白煙冒盡，殘留物用10mL鹽酸（見7.3.3.5)加熱溶解，冷卻后全量轉(zhuǎn)入50mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻，制得樣品消化液。同時(shí)制備分析空白樣品。量取15mL樣品消化液于25mL量瓶中，其余按繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線7.3.5.1.b)步驟測定吸光值A(chǔ)s。同時(shí)按上述步驟測定分析空白樣品的吸光值A(chǔ)b。以（As-Ab)的值從工作曲線上查出相應(yīng)的鉛的量(μg)。將測得的數(shù)據(jù)記入表A.9中，按式(7)計(jì)算生物體中鉛的含量：WPb=?????????????????(7)式中：WPb—生物體干樣中鉛的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);m—從工作曲線上查得的相應(yīng)的鉛的量，單位為微克(μg);V1—樣品制備液的體積，單位為毫升(mL);V2—用于測定的樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g)。7.3.7精密度和準(zhǔn)確度鉛含量為2.20×10-6時(shí)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為10.5%;再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為13.9%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純。水為蒸餾水經(jīng)石英蒸餾器蒸餾或等效純水；—所有玻璃器皿應(yīng)經(jīng)(1+3)硝酸溶液浸泡3d以上，然后用水洗凈；—生物樣品消化時(shí)，初次加入濃硝酸后應(yīng)靜置至其大部分生物組織消解后再加熱；—MIBK萃取液應(yīng)在2h內(nèi)測定完畢；—根據(jù)原子吸收分光光度計(jì)的型號，選定最佳儀器技術(shù)參數(shù)。8.1無火焰原子吸收分光光度法無火焰原子吸收分光光度法見6.1。8.2陽極溶出伏安法本方法適用于海洋生物體中鎘的測定。生物干樣經(jīng)硝酸-過氧化氫消化，在pH值為2.0~2.5介質(zhì)中，當(dāng)在工作電極上施加一定電壓進(jìn)行電解時(shí)，鎘被還原并沉積在懸滴汞電極上形成鎘-汞齊。然后進(jìn)行反向電壓掃描，汞齊中的金屬鎘被氧化溶出，其氧化電流與溶液中鎘的濃度呈正比關(guān)系，借以進(jìn)行定量測定。8.2.3.4氨水(NH4OH)：經(jīng)等溫?cái)U(kuò)散法提純。參數(shù)。8.2.5.2.3啟動(dòng)儀器的運(yùn)轉(zhuǎn)旋鈕。待運(yùn)轉(zhuǎn)結(jié)束后，記下峰電流值Is1。值Is2。Ib1)和添加鎘標(biāo)準(zhǔn)后的峰電流值（I將測得的峰電流值記入表A.7中，按式(8)計(jì)算樣品鎘的含量：式中：∞Cd—生物體干樣中鎘的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);Is1—樣品消化液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Is2—樣品消化液中加入鎘標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后所得峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib1—分析空白消化液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib2—分析空白消化液中加入鎘標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；V0—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V1—測定時(shí)量取樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V2—加入鎘標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的體積，單位為毫升(mL);ρCd—鎘標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g)。8.2.7精密度和準(zhǔn)確度五個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一生物樣品（牡蠣測定結(jié)果的再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為8.4%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另有說明，本方法所用試劑均為分析純，水為去離子水或等效純水；—使用不同型號的極譜儀，應(yīng)選擇最佳儀器操作條件；8.3火焰原子吸收分光光度法本方法適用于海洋生物樣品中鎘的測定。生物干樣經(jīng)硝酸-高氯酸濕法消化，于波長228.8nm處進(jìn)行鎘的火焰原子吸收測定。):ρ=1.42g/mL,優(yōu)級純。8.3.3.4高氯酸(HClO4):ρ=1.678.3.3.5鹽酸(HCl):ρ=1.19g/mL儀器和設(shè)備如下：—火焰原子吸收分光光度計(jì)；—鎘空心陰極燈；—空氣壓縮機(jī)；—乙炔鋼瓶；—電熱板；—調(diào)壓變壓器；1kVA;—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：b)按選定的儀器技術(shù)參數(shù)，用水調(diào)零測定吸光值（Ai)及標(biāo)準(zhǔn)空白吸光值（A0);c)將測得吸光值記入表A.8中。以吸光值（Ai-A0)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的鎘的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。至溶液呈透明的淡黃色。移開表面皿蒸發(fā)至白煙冒盡，殘留物用10mL鹽酸溶液（見8.3.3.6)加熱溶解，冷卻后，全量轉(zhuǎn)入25mL量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線。制得樣品消化液，同時(shí)制備分析空白樣品。按選定的儀器技術(shù)參數(shù)，用水調(diào)零，直接測定樣品制備液的吸光值A(chǔ)s,同時(shí)測定分析空白樣品的吸光值A(chǔ)b。以As-Ab的值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的隔的濃度。將測得的數(shù)據(jù)記入表A.9中，按式(9)計(jì)算生物體樣品的鎘含量：式中：WCd—生物體干樣中鎘的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);ρCd—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的鎘的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);犞—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g)。8.3.7精密度和準(zhǔn)確度鎘含量為1.93×10-6時(shí)，測定結(jié)果的相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為1.1%;再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為8.7%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水用市售蒸餾水經(jīng)石英蒸餾器蒸餾或等效純水；—所有玻璃器皿經(jīng)硝酸溶液(1+3)浸泡2d以上，然后用水洗凈；—生物樣消化時(shí)初次加入濃硝酸后宜放置至其大部分生物組織消解后再加熱；—根據(jù)原子吸收分光光度計(jì)型號，選定最佳儀器技術(shù)參數(shù)。9.1火焰原子吸收分光光度法本方法適用于海洋生物中鋅的測定。本方法為仲裁方法。生物樣品經(jīng)硝酸-過氧化氫消化后，于213.8nm波長處直接進(jìn)行鋅的火焰原子吸收分光光度測定。3):30%。加入5mL硝酸溶液(1+1),蓋上表面皿，加熱溶解，冷卻后，全量移入200mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。儀器和設(shè)備如下：—火焰原子吸收分光光度計(jì)；—鋅空心陰極燈；—空氣壓縮機(jī)；—乙炔鋼瓶；—潔凈工作臺(tái)；—電熱板；—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。9.1.3.6)于6個(gè)10mL具塞比色管中，加水至標(biāo)線，混勻。按選定的儀器技術(shù)參數(shù)，用水調(diào)零，測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光值A(chǔ)i及標(biāo)準(zhǔn)空白吸光值A(chǔ)0。9.1.5.1.2將測得數(shù)據(jù)記入表A.8中，以吸光值A(chǔ)i-A0為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的鋅的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。按選定的儀器技術(shù)參數(shù)，用水調(diào)零，測定樣品消化液的吸光值A(chǔ)s和分析空白樣品的吸光值A(chǔ)b。以（As-Ab)的值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的鋅的濃度。將測得數(shù)據(jù)記入表A.9中，按式(10)計(jì)算樣品中鋅含量：式中：WZn—生物體干樣中鋅含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);ρZn—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查得的鋅的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);犞—樣品制備液的體積，單位為毫升(mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g)。六個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一生物樣品（牡蠣測定結(jié)果的再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為4.9%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另有說明，本方法所有試劑均為分析純，水為二次去離子水或等效純水；—本方法中所用器皿均先用硝酸溶液(1+3)浸泡1d以上，使用前用水淋洗干凈；—樣品消化時(shí)，應(yīng)始終蓋上表面皿；—不同型號的原子吸收分光光度計(jì)，自行選定儀器最佳技術(shù)參數(shù)。9.2陽極溶出伏安法本方法適用于海洋生物體中鋅的測定。樣品經(jīng)硝酸-過氧化氫消化。在鎵存在下，用氨水調(diào)節(jié)溶液pH值為2.2~2.8,當(dāng)對工作電極上施加一定電壓進(jìn)行電解時(shí)，鋅被還原并沉積在懸滴汞電極上形成鋅-汞齊。然后進(jìn)行反向電壓掃描，汞齊中的金屬鋅被氧化溶出，所產(chǎn)生的氧化電流與溶液中鋅的濃度是正比關(guān)系，以此進(jìn)行定量測定。9.2.3.2鹽酸(HCl):ρ=1.19g/mL,優(yōu)級純。9.2.3.4氨水(NH4OH)：經(jīng)等溫?cái)U(kuò)散法提純。9.2.3.6鎵貯備溶液(100μg/mL)：稱取0.0135g氧化鎵于燒杯中，用2mL鹽酸溶液(1+1)微熱溶蓋上表面皿，于電熱板上低溫加熱，待泡沫消失后，加入1mL過氧化氫（見9.2.3.3),低溫蒸至近干，補(bǔ)洗滌液并入消化液中，移去表面皿，繼續(xù)蒸干，然后移到電爐上約450℃,加熱至不溶物呈白色（除盡有機(jī)物加入2mL鹽酸（見9.2.3.2),于高溫電熱板上蒸干，取下冷卻，加入1mL鹽酸溶液(1+1),于電熱板上微熱浸取不溶物。冷卻后全量移入50mL量瓶中，加水到標(biāo)線，混勻，得樣品消化液。同時(shí)，制備分析空白樣品。樣品的測定按以下步驟進(jìn)行：b)接通儀器（測定前開機(jī)預(yù)熱20min)。將三種電極插入電解池中，輸入選定的儀器技術(shù)參數(shù)；c)啟動(dòng)儀器運(yùn)轉(zhuǎn)旋鈕，待運(yùn)轉(zhuǎn)結(jié)束后，記下峰電流值Is1;作。記下峰電流值Is2。按9.2.5.2步驟測定分析空白樣品的峰電流值Ib1和添加鋅標(biāo)準(zhǔn)后的峰電流值Ib2。將測得的峰電流值記入表A.7中，按式(11)計(jì)算樣品中鋅的含量：式中：∞Zn—生物體干樣中鋅的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);Is1—樣品消化液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Is2—樣品消化液加入鋅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib1—分析空白消化液的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；Ib2—分析空白制備液加入鋅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液后的峰電流值，單位為納安(nA)、毫米(mm)或格；V0—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V1—測定時(shí)量取樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V2—加入鋅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的體積，單位為毫升(mL);ρZn—鋅標(biāo)準(zhǔn)使用溶液的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);M—樣品的稱取量，單位為克(g)。9.2.7精密度和準(zhǔn)確度5.0%;測定含量為172×10-6的標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)時(shí)，測定結(jié)果的相對誤差平均為0.2%。10.1無火焰原子吸收分光光度法本方法適用于海洋生物中鉻的測定。本方法為仲裁方法。生物干樣經(jīng)硝酸-過氧化氫消化后，在357.9nm波長處，直接進(jìn)行鉻的無火焰原子吸收分光光度測定。3):ρ=1.42g/mL,優(yōu)級純，用石英亞沸蒸餾器蒸餾提純。2):30%。(K2Cr2O7,優(yōu)級純，預(yù)先于105℃~110℃烘干2h),溶于水中，全量轉(zhuǎn)入1000mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。儀器和設(shè)備如下：—無火焰原子吸收分光光度計(jì)；—?dú)鍤怃撈?；—鉻空心陰極燈；—潔凈工作臺(tái)；—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：b)量取10μL溶液加入石墨管中，按選定的儀器技術(shù)參數(shù)測定標(biāo)準(zhǔn)系列溶液的吸光值（Ai)及標(biāo)準(zhǔn)空白吸光值（A0);c)將測得數(shù)據(jù)記入表A.5中，以吸光值（Ai-A0)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的鉻的濃度(μg/mL)為橫坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。樣品的消化按以下步驟進(jìn)行：a)準(zhǔn)確稱取0.2g(±0.0001g)干樣于50mL燒杯中，用幾滴水濕潤樣品，加入2mL硝酸（見10.1.3.1),蓋上表面皿，置于電熱板，低溫加熱至泡沫基本消失；160℃~200℃加熱，并蒸發(fā)至約0.5mL,全量轉(zhuǎn)入10mL具塞比色管中，加1mL抗壞血酸溶液（見10.1.3.4),加水至標(biāo)線，混勻。制成樣品量取20μL樣品消化液，按選定的儀器技術(shù)參數(shù)測定吸光值（As)和分析空白樣品的吸光值（Ab)。以（As-Ab)的值從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出相應(yīng)的鉻的濃度(μg/mL)。將測定結(jié)果記入表A.6中，按式(12)計(jì)算生物樣品鉻含量：WCr=ρr式中：WCr—生物體干樣品中鉻的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);ρCr—從標(biāo)準(zhǔn)曲線上查出的鉻的濃度，單位為微克每毫升(μg/mL);犞—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);M—樣品重量，單位為克(g)。六個(gè)實(shí)驗(yàn)室測定同一生物樣（牡蠣測定結(jié)果的再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為10%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所有試劑為分析純，水為二次去離子水或等效純水；—所用器皿均先用硝酸溶液(1+1)浸泡1d以上，使用前用二次去離子水淋洗干凈；—樣品消化時(shí)應(yīng)始終蓋上表面皿；—若樣品制備液鉻的濃度超過標(biāo)準(zhǔn)曲線范圍時(shí)，應(yīng)作適當(dāng)稀釋并補(bǔ)加適量抗壞血酸，使其試液中鉻的濃度在標(biāo)準(zhǔn)曲線濃度范圍內(nèi)。此時(shí)，分析空白制備液也應(yīng)作相應(yīng)處理。結(jié)果計(jì)算中應(yīng)乘以稀釋因數(shù)；—不同型號的無火焰原子吸收分光光度計(jì)，自行選定儀器最佳技術(shù)參數(shù)。10.2二苯碳酰二肼分光光度法本方法適用于生物體中鉻的測定。生物干樣經(jīng)硝酸-硫酸-高氯酸消化后，在一定酸度下，用高錳酸鉀將三價(jià)鉻氧化為六價(jià)鉻，六價(jià)鉻離子與二苯碳酰二肼生成紫紅色絡(luò)合物，于540nm波長處進(jìn)行分光光度法測定。67g/mL,優(yōu)級純。10.2.3.4磷酸溶液(1+1)：將磷酸(ρ=1.69g/mL)與等體積水混合。10.2.3.7氫氧化銨(NH4OH):ρ=0.9g/mL。10.2.3.8高錳酸鉀溶液(5g/L)：稱取0.5g高錳酸鉀(KMnO4),溶于100mL沸水中，冷于棕色瓶中。10.2.3.9亞硝酸鈉溶液(100g/L)：稱取10g亞硝酸鈉(NaNO2),溶于水并稀釋至100mL。10.2.3.10尿素溶液(200g/L)：稱取20g尿素(CH4N2O),溶于水并稀釋至100mL,盛于棕色瓶。放置時(shí)間不宜太長。(C3H6O)溶解，然后用丙酮溶液（見10.2.3.15)稀釋至100mL,盛于棕色瓶中，置冰箱中保存。~110℃烘干2h),溶于水中，全量轉(zhuǎn)入1000mL量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。量瓶中，加水至標(biāo)線，混勻。10.2.3.15丙酮溶液(1+1)：將丙酮與等體積水混合。儀器和設(shè)備如下：—分光光度計(jì)；—電熱板；—實(shí)驗(yàn)室常備儀器及設(shè)備。按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：（見10.2.3.3),放入數(shù)粒玻璃珠，瓶口放一小玻璃漏斗，置于電熱板上，不超過180℃加熱至白煙冒盡；c)冷卻后，全量轉(zhuǎn)入50mL量瓶中，用水稀釋至標(biāo)準(zhǔn)，混勻；d)量取10mL上述消化液于50mL高型燒杯中，加數(shù)滴酚酞指示劑（見10.2.3.12),用氫氧化銨（見10.2.3.7)中和至溶液呈淡粉紅色，加數(shù)粒玻璃珠，加熱微沸至無氨味或用廣泛pH試紙于瓶口不變色為止；沙浴上(100℃左右）加熱氧化15min。加熱過程中，若紫紅色消失，應(yīng)補(bǔ)加高錳酸鉀溶液使保持紅色；至紫紅色剛剛消失。加2mL磷酸溶液（見10.2.3.4),混勻；g)將溶液全量轉(zhuǎn)入25mL量瓶或具塞比色管中，加1mL二苯碳酰二肼丙酮溶液（見10.2.3.11)立即加水至標(biāo)線并混勻。10min后，用3cm測定池，以水為參比，于540nm波長測定標(biāo)準(zhǔn)系列吸光值A(chǔ)i及標(biāo)準(zhǔn)空白的吸光值A(chǔ)0;h)將測定數(shù)據(jù)記入表A.3中。以吸光值（Ai-A0)為縱坐標(biāo)，相應(yīng)的鉻的含量(μg)為橫坐標(biāo)繪制工作曲線。樣品的消化按以下步驟進(jìn)行：b)加2mL高氯酸（見10.2.3.3),瓶口放一小玻璃漏斗，置于電熱板上，不超過180℃,加熱消化至白煙冒盡，溶液呈透明無色或淡黃色。在加熱過程中，若出現(xiàn)樣品碳化，顏色變深，需取下c)加10mL水稀釋，用中速定量濾紙濾去殘?jiān)⒂脽崴礈鞖堅(jiān)?，濾液和洗滌液收集于50mL量瓶中，用水稀釋至標(biāo)線，混勻。制得樣品消化液。同時(shí)，制備分析空白樣品。測定樣品制備液的吸光值（As)及分析空白樣品吸光值（Ab),以（As-Ab)的值從工作曲線上查出相應(yīng)的鉻含量。將測定數(shù)據(jù)記入表A.4中，按式(13)計(jì)算生物樣品中鉻的含量：WCr=?????????????????(13)式中：WCr—生物體干樣的總鉻的含量（質(zhì)量分?jǐn)?shù)，10-6);m—從工作曲線上查得的鉻的量，單位為微克(μg);V0—樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);V1—測定時(shí)量取樣品消化液的體積，單位為毫升(mL);M—樣品重量，單位為克(g)。鉻含量分別為0.85×10-6和2.88×10-6時(shí)，相對標(biāo)準(zhǔn)偏差分別為7.1%和6.1%;再現(xiàn)性相對標(biāo)準(zhǔn)偏差為18%。本方法執(zhí)行中應(yīng)注意如下事項(xiàng)：—除非另作說明，本方法所用試劑均為分析純，水為二次蒸餾水或等效純水；—三階鐵離子對本方法有干擾，可用磷酸或焦磷酸鈉消除；—所用玻璃器皿用稀王水洗滌，不得用重鉻酸鉀洗液，以免沾污；—滴加還原劑時(shí)，應(yīng)充分搖勻，細(xì)心控制用量，防止六價(jià)鉻被還原；—絡(luò)合物顏色穩(wěn)定性隨溫度升高而下降，一般應(yīng)在2h內(nèi)測定完畢；當(dāng)室溫高于30℃時(shí)，應(yīng)在半小時(shí)內(nèi)測定完畢；—二苯碳酰二肼丙酮溶液若變黃或渾濁時(shí)，應(yīng)重配。本方法適用于海洋生物體中砷的測定。本方法為仲裁方法。生物樣品經(jīng)硝酸-高氯酸消解后，以硼氫化鉀作還原劑將砷還原成揮發(fā)性氫化物，以氬氣為載氣使揮發(fā)性氫化物進(jìn)入原子熒光光度計(jì)的原子化器中，進(jìn)行原子熒光測定。344)。于250mL水中。使用前配制。105℃烘2h,保存于干燥器中置于100mL燒杯中，加入10mL氫氧化鈉溶液（見11.1.3.11),攪拌儀器和設(shè)備如下：—原子熒光光度計(jì)；—電加熱板；—?dú)鍤猓弧獙?shí)驗(yàn)室常用儀器與設(shè)備。按以下步驟繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線：b)按選