腫瘤篩查技術(shù)

腫瘤篩查腫瘤標(biāo)記物

腫瘤標(biāo)志物（TM），是指在腫瘤發(fā)生和增殖過程中,由腫瘤細(xì)胞所產(chǎn)生或分泌并釋放到血液、細(xì)胞、體液中，反映腫瘤存在和生長的一類物質(zhì)。腫瘤標(biāo)記物在臨床上主要用于對原發(fā)腫瘤的發(fā)現(xiàn)、腫瘤高危人群的篩選、良性和惡性腫瘤的鑒別診斷、腫瘤發(fā)展程度的判斷腫瘤治療效果的觀察和評價以及腫瘤復(fù)發(fā)和預(yù)后的預(yù)測等。腫瘤早期診斷的重要性我國癌癥死亡率一直呈持續(xù)增長趨勢，目前每年全球死于癌癥的人數(shù)約700萬，其中24%發(fā)生在中國，已成為威脅我國人民健康的頭號殺手。早發(fā)現(xiàn)、早治療是有效的手段。世界衛(wèi)生組織認(rèn)為，通過有效的早期診治，三分之一的癌癥是可以治愈。如胃癌早期行根治術(shù)，5年生存率達90%，如侵及肌層則下降為50-70%，如侵入漿膜則僅為8-17%。目前腫瘤檢測的手段一、影像學(xué)檢測

通過X線、B超、CT、核磁共振成像等手段。通?？砂l(fā)現(xiàn)時腫瘤基本已經(jīng)錯過治療的最佳時機。二、腫瘤標(biāo)志物檢測簡單易行，選擇合適的腫瘤標(biāo)志物便于早期發(fā)現(xiàn)三、醫(yī)生問詢目前對腫瘤的篩查一般采取3種方式結(jié)合的方式，因為任何一種方式對于早期腫瘤篩查不能作為確診的依據(jù)。四、病理切片檢測（金標(biāo)準(zhǔn)）

病理切片結(jié)果出來時腫瘤已經(jīng)到了中晚期了。目前TM檢測技術(shù)平臺膠體金法（國家已不再批準(zhǔn)新文號）敏感度低一般達到ng水平,用于定性檢測酶聯(lián)免疫法（目前多用于定性試劑,敏感度ng水平）化學(xué)發(fā)光法（敏感度高，達到pg水平，線性范圍寬）電化學(xué)發(fā)光免疫分析法（試劑成本高，需要配套全自動儀器ROCHE）常用腫瘤試劑項目腫瘤標(biāo)志物器官定位提示的腫瘤CEA廣譜結(jié)腸直腸癌，乳腺癌AFP肝臟睪丸癌，肝細(xì)胞癌CA125卵巢卵巢癌，胰腺癌，肺癌，乳腺癌CA19-9消化道胰腺癌，膽管癌，胃癌，腸癌CA72-4胃胃癌，卵巢癌CA15-3乳腺乳腺癌CA50廣譜胰腺癌，肝癌，卵巢癌，腸癌，胃癌，肺癌PSA前列腺前列腺癌HCG子宮胚胎細(xì)胞癌，滋養(yǎng)層腫瘤NSE肺小細(xì)胞肺癌，神經(jīng)內(nèi)分泌系統(tǒng)腫瘤SCC鱗癌鱗狀細(xì)胞癌（肺、食道、上鄂、宮頸、皮膚）CYFRA21-1肺非小細(xì)胞肺癌腫瘤標(biāo)記物的理想狀態(tài)與實際情況理想狀態(tài)實際狀態(tài)靈敏度、特異度均100%不能達到100%，此消彼長的關(guān)系器官特異性TM為一種器官所特有,測定該TM濃度即可對于腫瘤進行定位除PSA等少數(shù)TM，大多數(shù)不具器官特異性腫瘤分期相關(guān)性腫瘤越大或腫瘤越晚期,TM濃度越高具有部分相關(guān)性療效監(jiān)測TM濃度越高,預(yù)后越差,反之亦然TM濃度越高,預(yù)后越差,反之亦然預(yù)測價值能預(yù)測真正有病和無病的人群具有部分預(yù)測價值理想中的腫瘤標(biāo)志物⑴靈敏度100%；靈敏度＝真陽性結(jié)果總數(shù)/患病人群總數(shù)⑵特異性100%；特異性＝真陰性結(jié)果總數(shù)/對照組人群總數(shù)⑶器官特異性；（目前只有PSA）⑷與腫瘤的大小或分期有關(guān)；⑸與預(yù)后有關(guān)；⑹監(jiān)測腫瘤的復(fù)發(fā)。

然而目前所應(yīng)用的腫瘤標(biāo)志物均未達到上述要求，但如正確合理使用，仍有很大臨床價值，關(guān)鍵是要正確評價腫瘤標(biāo)志物檢測的臨床意義。細(xì)胞角蛋白概述什么是細(xì)胞角蛋白：細(xì)胞角蛋白是構(gòu)成上皮細(xì)胞內(nèi)細(xì)胞骨架的中間纖絲類蛋白質(zhì)，與細(xì)胞分裂、運動、分化以及凋亡等過程相關(guān)。來源于增殖或凋亡的細(xì)胞，是可以有效地反映腫瘤細(xì)胞活性的標(biāo)志物。角蛋白片段（CK）

屬于中微絲蛋白家族，是上皮細(xì)胞骨架的一部分根據(jù)其氨基酸序列不同已發(fā)現(xiàn)有20種，分別稱為角蛋白（CK）1-20.CK9-20為酸性肽稱為Ⅰ型；CK1-8為堿性稱為Ⅱ型。10細(xì)胞角蛋白腫瘤標(biāo)記物細(xì)胞骨架區(qū)主要成份，在正常人體液中表達極低最有可能實現(xiàn)腫瘤早期篩查的腫瘤標(biāo)記物幾乎對所有上皮源腫瘤都有特異性表達，具有廣譜性細(xì)胞角蛋白做為腫瘤標(biāo)志物的特點早期性

細(xì)胞角蛋白是正常細(xì)胞的骨架成分，細(xì)胞凋亡導(dǎo)致一些凋亡相關(guān)的蛋白酶（Caspases）的激活，這些特異性蛋白酶作用于細(xì)胞角蛋白中的一些特殊位點而導(dǎo)致一些特異性片段的產(chǎn)生。廣譜性與惡性腫瘤細(xì)胞的高度生長與增殖相關(guān)。在細(xì)胞高度分裂的過程中，細(xì)胞角蛋白正常的生物合成及修飾發(fā)生異常而導(dǎo)致大量片段的產(chǎn)生。（1）靈敏度高：K18試劑盒對胃癌的靈敏度為62.50%K19試劑盒對肺癌的靈敏度為88.41%（2）特異性好：K18試劑盒對非癌癥人群檢測，其特異性為96%K19試劑盒對非癌癥人群檢測，其特異性為97%（3）廣譜：由于角蛋白廣泛存在于上皮細(xì)胞，因此角蛋白K18、K19試劑盒對上皮源腫瘤均有特異性。角蛋白K18、K19檢測特點對胃炎患者診斷的假陽性率對肺炎患者診斷的假陽性率與其他產(chǎn)品比較腫瘤標(biāo)志物的器官廣譜性腫瘤標(biāo)志物器官定位提示的腫瘤細(xì)胞角蛋白18廣譜胃癌、膀胱癌、膽管癌、腎癌、卵巢癌、腸癌細(xì)胞角蛋白19廣譜肺癌、膀胱癌、食管癌、胰腺癌、鼻咽癌、子宮癌、乳腺癌體檢套餐配置體檢套餐配置的原則一、科學(xué)性：合理利用各種TM的優(yōu)勢，聯(lián)合檢測達到理想的檢測效果。測定方法的靈敏度、特異性高、重復(fù)性好。

原則上腫瘤檢測項目越多越好。二、篩查費用經(jīng)濟、合理。即根據(jù)不同的體檢套餐價格來配置腫瘤篩查項目體檢項目搭配腫瘤基本項：K18、K19、AFP女性基本項：K18、K19、AFP、CEA男性基本項：K18、K19、AFP、CEA、PSA女性腫瘤全項：K18、K19、AFP、CEA、CA125、CA15-3、CA19-9男性腫瘤全項：K18、K19、AFP、CEA、PSA、CA19-9腫瘤篩查數(shù)據(jù)記錄表307醫(yī)院血清復(fù)檢結(jié)果腫瘤特異性生長因子(TSGF)TSGF:惡性腫瘤生長相關(guān)的糖類物質(zhì)和代謝物（脂蛋白、酶、氨基酸）的統(tǒng)稱。TSGF的不足：一、特異性差：部分急性炎癥（肝炎、肺炎等）、自身免疫性疾病如系統(tǒng)性紅斑狼瘡、類風(fēng)濕等病癥可產(chǎn)生交叉反應(yīng)，引起假陽性。三、敏感度低：采用免疫比濁法和酶聯(lián)免疫法。其敏感度均低于化學(xué)發(fā)光法。二、晚期癌癥患者TSGF含量可能低于臨界值，造成假陰性多腫瘤標(biāo)志物蛋白芯片檢測系統(tǒng)(C12系統(tǒng))一、假陽性目前在上海、廣州大醫(yī)院體檢中心，都發(fā)現(xiàn)C12查腫瘤陽性率超過30%，這個數(shù)字很離譜。二、定量不準(zhǔn)確多種腫瘤標(biāo)志物共用一條校準(zhǔn)曲線來確定值。三、假陰性12種抗體包被在有限空間內(nèi)，包被抗體的量得多與少、抗體間的均勻性，互相干擾影響試劑盒性能。

基于以上不足，目前FDA沒有批準(zhǔn)任何一種用于診斷的蛋白芯片試劑

陽性處理意見當(dāng)出現(xiàn)陽性時試驗人員首先進行試驗復(fù)核，排除操作中的人為因素、試劑盒質(zhì)量因素、設(shè)備因素。如果排除以上因素，應(yīng)用其它腫瘤標(biāo)志物進行復(fù)查。以確定是否有一定的器官指向性如果復(fù)查結(jié)果K18、K19仍為陽性則應(yīng)間隔一個月復(fù)查排除一過性升高，同時了解體檢人員相關(guān)信息，包括性別、年齡、工作性質(zhì)、生活習(xí)慣、慢性病史、家族遺傳病史等，以及體檢中其它體征信息、和其它檢測信息。根據(jù)陽性數(shù)據(jù)人員體征情況和醫(yī)生意見，使用影像學(xué)或其它方法進行復(fù)查，或到醫(yī)院就診。如不能確診，繼續(xù)對其進行跟蹤隨訪臨界值（弱陽性）的處理各腫瘤標(biāo)志物的個體正常水平是未知的，可能非常低，但也能接近參考范圍上限值，甚至偶爾高于參考范圍上限。健康個體參考范圍上限并無很大意義，相反每個患者腫瘤標(biāo)志物水平的動態(tài)變化才是至關(guān)重要的。所以當(dāng)出現(xiàn)臨界值或弱陽性時不要恐慌，應(yīng)該間隔一個月復(fù)核一次，觀察是否有明顯升高。對K18、K19檢測結(jié)果陽性的處理流程及方法第一步：復(fù)核，排除假陽性。1、復(fù)核檢測結(jié)果。對K18、K19陽性，由另一操作員對陽性標(biāo)本進行再次檢測，以排除人為操作誤差；對其他標(biāo)記物陽性，選用其他廠家的同類試劑盒進行檢測，以排除因試劑盒質(zhì)量、設(shè)備所致的假陽性。2、如是因炎癥、發(fā)熱等癥狀出現(xiàn)陽性，應(yīng)提示受檢者待病情好轉(zhuǎn)后復(fù)檢。第二步：評估風(fēng)險程度及處理意見。方案一：K18、K19一個或兩個陽性，其它體檢信息指示患癌風(fēng)險程度高，評定為高危，建議醫(yī)院就診。方案二：K18、K19一個或兩個陽性，其它腫瘤標(biāo)志物一項以上為陽性，評定為高危，建議醫(yī)院就診。方案三：K18、K19兩個為陽性，其它腫瘤標(biāo)志物為陰性，評定為高危，建議跟蹤隨訪。套餐陽性處理意見編號K18K19其他腫瘤標(biāo)志物復(fù)查*風(fēng)險程度復(fù)查周期1弱陽性(5-10)陰性(0-2)均為陰性低危6、12個月復(fù)查一項為陽性中危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診2陽性(>10)陰性(0-2)均為陰性中危6、12個月復(fù)查一項為陽性高危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診3陰性(0-5)弱陽性(2-4)均為陰性低危6、12個月復(fù)查均為陰性中危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診4陰性(0-5)陽性(>4)均為陰性中危6、12個月復(fù)查一項為陽性高危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診5弱陽性(5-10)弱陽性(2-4)均為陰性中危6、12個月復(fù)查一項為陽性高危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診6陽性(>10)陽性(>4)均為陰性高危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診一項為陽性高危3、6、12個月復(fù)查，影像學(xué)檢查或醫(yī)院就診癌前疾病對檢測值的影響由于細(xì)胞角蛋白與細(xì)胞分裂、運動、分化以及凋亡等過程相關(guān)，因此一些癌前疾病同樣會導(dǎo)致細(xì)胞角蛋白片段的釋放，檢測結(jié)果會出現(xiàn)弱陽性或陽性。如以下疾?。海?）胃部幽門螺