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第第頁木質(zhì)素(Lignin)含量試劑盒說明書木質(zhì)素(Lignin)含量試劑盒說明書微量法100管/96樣注意:正式測定之前選擇23個預(yù)期差別大的樣本做猜測定。測定意義:木質(zhì)素是構(gòu)成植物細(xì)胞壁的成分之一,是由聚合的芳香醇構(gòu)成的一類物質(zhì),存在于木質(zhì)組織中,重要作用是通過形成交織網(wǎng)來硬化細(xì)胞壁。木質(zhì)素重要位于纖維素纖維之間,起抗壓作用。測定原理:木質(zhì)素中的酚羥基發(fā)生乙?;笤?80nm處有特征汲取峰,280nm的吸光值高處與低處與木質(zhì)素含量正相關(guān)。需自備的儀器和用品:天平、40目篩,玻璃試管、燒杯、離心機(jī),恒溫水浴鍋、封口膜、烘箱、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板(UV板)、高氯酸,濃硫酸。試劑構(gòu)成和配制:試劑一:液體50mL×1瓶,4℃保管。試劑二:液體50mL×1瓶,4℃保管。試劑三:液體100mL×1瓶,4℃保管。樣品處理:樣品80℃烘干至恒重,粉碎,過40目篩,稱取約2mg(記為W)于10mL玻璃試管中(務(wù)bi用玻璃試管,不行用Ep管)測定操作表:空白管測定管樣本(mg)2試劑一(μL)500500高氯酸(μL)2020于10mL玻璃試管中,用封口膜密封,充分混勻,80℃水浴40min,每隔10min震蕩一次,然后自然冷卻試劑二(μL)500500充分混勻上清(μL)2020試劑三(μL)980(參照注意事項(xiàng)四)980(參照注意事項(xiàng)四)取200μL于微量石英比色皿/96孔板,測定280nm處吸光值A(chǔ)。分別記為A空白管和A測定管,ΔA=A測定管A空白管計(jì)算公式:標(biāo)準(zhǔn)曲線:y=0.0347x+0.0068,R2=0.9889Lignin(mg/g干重)=(ΔA0.0068)÷0.0347×V反總×103÷W×T=0.0294×(ΔA0.0068)÷0.002×50V反總:反應(yīng)總體積:1.02mL;W:樣本質(zhì)量,g;T:稀釋倍數(shù)注意事項(xiàng):1.試劑一有毒性,請操作時做好防護(hù)措施,加熱前必需用封口膜密封,以防氣體溢出。2.加熱過程中有猛烈反應(yīng),震蕩時輕搖,以免壓力過大噴出造成人身損害。3.試劑三具有強(qiáng)刺激性,建議操作過程全部在通風(fēng)櫥子操作。4.取上清加試劑三步驟依

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