課題菊花的組織培養(yǎng)絕好

關(guān)于課題菊花的組織培養(yǎng)絕好大多綠色開花植物都是靠種子來繁殖的。那有沒有不用種子來培育植物的方法呢？植物組織培養(yǎng)營養(yǎng)繁殖扦插嫁接壓條

第2頁,共33頁，星期六，2024年，5月一、基礎(chǔ)知識1、植物的組織培養(yǎng)（1）細(xì)胞的分化①概念：在個體發(fā)育中，相同細(xì)胞的后代在形態(tài)、結(jié)構(gòu)、生理功能上發(fā)生穩(wěn)定性差異的過程.②過程：如：受精卵增殖、生長、分化形成組織、器官、系統(tǒng).第3頁,共33頁，星期六，2024年，5月③特點：B.穩(wěn)定性：C.全能性：A.持久性：是一種持久性的變化，它發(fā)生在生物體的整個生命過程中,在胚胎期達(dá)到最大限度.細(xì)胞分化是穩(wěn)定的，一般是不可逆轉(zhuǎn)的.已分化的細(xì)胞，仍具有發(fā)育的潛能.第4頁,共33頁，星期六，2024年，5月⑤原因：基因在特定的時間和空間條件下的選擇性表達(dá)的結(jié)果.④結(jié)果：形成不同的細(xì)胞和組織（2）細(xì)胞的全能性①定義：生物體的細(xì)胞具有使后代細(xì)胞形成完整個體的潛能的特性.②原理：生物體的每一個細(xì)胞都包含有該物種所特有的全套遺傳物質(zhì)，都有發(fā)育成為完整個體所必需的全部基因.第5頁,共33頁，星期六，2024年，5月高度特化的動物細(xì)胞，從整個細(xì)胞來說，全能性受到限制。但它的細(xì)胞核仍然保持著全能性，這是因為細(xì)胞核內(nèi)含有該物種遺傳性所需要的遺傳物質(zhì).已分化的植物細(xì)胞，仍具有全能性.③實例受精卵>生殖細(xì)胞>體細(xì)胞④全能性的比較:第6頁,共33頁，星期六，2024年，5月（3）植物組織培養(yǎng)細(xì)胞離體①必要條件：一定的營養(yǎng)物質(zhì)、激素和其他外界條件②原理:細(xì)胞的全能性A.外植體：從活植物體上切下進(jìn)行培養(yǎng)的那部分細(xì)胞、組織或器官.③相關(guān)概念:第7頁,共33頁，星期六，2024年，5月什么叫脫（去）分化、再分化？愈傷組織的細(xì)胞有什么特點？如何控制細(xì)胞的脫分化與去分化？

（閱讀32-33頁第一段解決下列問題）二、植物組織培養(yǎng)的基本過程第8頁,共33頁，星期六，2024年，5月植物組織培養(yǎng)的基本過程第9頁,共33頁，星期六，2024年，5月細(xì)胞排列疏松而無規(guī)則，是一種高度液泡化的呈無定形狀態(tài)的薄壁細(xì)胞。愈傷組織第10頁,共33頁，星期六，2024年，5月人參的愈傷組織第11頁,共33頁，星期六，2024年，5月菠蘿的愈傷組織第12頁,共33頁，星期六，2024年，5月再分化

愈傷組織（脫分化）根或芽等器官第13頁,共33頁，星期六，2024年，5月（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素1、材料（外植體）的選?。?）不同植物的組織培養(yǎng)難度不同什么樣的植物容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？

（2）同一種植物的不同組織培養(yǎng)難度不同什么樣的組織容易進(jìn)行組織培養(yǎng)？容易進(jìn)行無性生殖的植物，如煙草、胡蘿卜幼齡、保存時間短的組織菊花的組織培養(yǎng)一般選用何種材料？未開花植物的莖上部新萌生的側(cè)枝第14頁,共33頁，星期六，2024年，5月（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素2、培養(yǎng)基的配制常用的一種培養(yǎng)基為___________其主要成分包括：______元素：C、H、O、N、P、K、Ca、Mg、S______元素：B、Mn、Cu、Zn、Fe、Mo、I、Co__________

：甘氨酸、煙酸、肌醇、維生素、蔗糖等___________

：生長素、細(xì)胞分裂素、赤霉素等MS培養(yǎng)基大量微量有機(jī)物植物激素第15頁,共33頁，星期六，2024年，5月旁欄思考：你能說出各種營養(yǎng)物質(zhì)的作用嗎？同專題2中微生物培養(yǎng)基的配方相比，MS培養(yǎng)基的配方有哪些明顯的不同？答：微量元素和大量元素提供植物細(xì)胞生活所必需的無機(jī)鹽；蔗糖提供碳源，同時能夠維持培養(yǎng)基的滲透壓；甘氨酸、維生素等物質(zhì)主要是為了滿足離體植物細(xì)胞在正常代謝途徑受到一定影響后所產(chǎn)生的特殊營養(yǎng)需求。2、培養(yǎng)基的配制(MS培養(yǎng)基)微生物培養(yǎng)基以有機(jī)營養(yǎng)為主。與微生物的培養(yǎng)不同，MS培養(yǎng)基則需提供大量無機(jī)營養(yǎng)，無機(jī)鹽混合物包括植物生長必須的大量元素和微量元素兩大類。第16頁,共33頁，星期六，2024年，5月植物激素中_______和___________是啟動細(xì)胞分裂、脫分化和再分化的關(guān)鍵性因素。_______________、_______________以及___________等，都會影響實驗結(jié)果。（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素3、不同植物激素使用順序和使用量生長素細(xì)胞分裂素植物激素的濃度使用的先后順序用量的比例①不同植物激素使用順序細(xì)胞分裂細(xì)胞不分化分化頻率第17頁,共33頁，星期六，2024年，5月（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素②不同植物激素使用量生長素用量比細(xì)胞分裂素用量，比值高時，有利于_________抑制_________；比值低時，有利于_________抑制________；比值適中時，促進(jìn)_________________。根的分化芽的形成芽的分化根的形成愈傷組織的形成第18頁,共33頁，星期六，2024年，5月（三）影響植物組織培養(yǎng)的因素一、基礎(chǔ)知識4、環(huán)境因素：不同的植物對各種條件的要求往往______。如進(jìn)行菊花的組織培養(yǎng)，一般將pH控制在__________左右；溫度控制在__________

；并且每天用日光燈照射_____

。不同5.818～22℃12h第19頁,共33頁，星期六，2024年，5月（二）影響植物組織培養(yǎng)的因素一、基礎(chǔ)知識5、消毒在培養(yǎng)的整個過程中，都需要是一個無菌環(huán)境。植物組織培養(yǎng)用的培養(yǎng)基，含有植物生長發(fā)育所需要的各種營養(yǎng)物質(zhì)，這些營養(yǎng)物質(zhì)同樣為細(xì)菌等微小的生物提供了適合的營養(yǎng)。在這種培養(yǎng)基上，細(xì)菌等微小的生物比植物細(xì)胞具有更強(qiáng)的新陳代謝能力，它們比植物細(xì)胞生長、繁殖得更快，而且它們會產(chǎn)生毒素，使培養(yǎng)的植物細(xì)胞很快中毒死亡。因此，植物組織培養(yǎng)要想取得成功，必須有效地防止細(xì)菌等的污染，保證培養(yǎng)材料、培養(yǎng)基、培養(yǎng)用具完全無菌。為了達(dá)到這一要求，就要在植物組織培養(yǎng)過程中進(jìn)行一系列的消毒、滅菌，并且要求無菌操作。第20頁,共33頁，星期六，2024年，5月3、植物組織培養(yǎng)過程:離體組織或細(xì)胞植物體脫分化細(xì)胞分裂素≈生長素愈傷組織芽根細(xì)胞分裂素>生長素細(xì)胞分裂素<生長素再分化植物細(xì)胞培養(yǎng)不需要光?需要光第21頁,共33頁，星期六，2024年，5月在培養(yǎng)過程中，是脫分化、再分化的過程，隨著芽和根的形成，就具有了自養(yǎng)的能力，是由細(xì)胞到一個個體的演變過程培養(yǎng)過程中為什么需要進(jìn)行光照？思考？第22頁,共33頁，星期六，2024年，5月制備MS固體培養(yǎng)基外植體消毒

接種

培養(yǎng)栽培四、實驗操作

移栽流水沖洗—無菌紙吸干—70%酒精—無菌水沖洗—無菌紙吸干—0.1%氯化汞—無菌水沖洗至少三次之上（哪6步？）1、配制各種母液（大量元素、微量元素各濃縮多少倍？用量較小的有機(jī)物呢？）2、配制培養(yǎng)基（菊花組培是否添加植物激素？）3、滅菌（哪種滅菌方法？）注意接種時的各種無菌操作。將菊花莖段插入培養(yǎng)基時特別應(yīng)注意什么？最好在哪兒培養(yǎng)？溫度？光照？定期消毒？直接移栽到土壤中嗎？第23頁,共33頁，星期六，2024年，5月

不是。對外植體進(jìn)行表面消毒時，既要考慮到消毒效果，又要考慮到植物的耐受能力。

在外植體消毒過程中，是不是強(qiáng)度越大越好，為什么？

思考？第24頁,共33頁，星期六，2024年，5月1你打算做幾組重復(fù)？你打算設(shè)置對照實驗嗎？

答：每種材料或配方至少要做一組以上的重復(fù)。設(shè)置對照實驗可以取用一個經(jīng)過滅菌的裝有培養(yǎng)基的錐形瓶，與接種操作后的錐形瓶一同培養(yǎng)，用以說明培養(yǎng)基制作合格，沒有被雜菌污染。在整個操作過程中，是如何來實現(xiàn)無菌環(huán)境的？1、培養(yǎng)基的滅菌（高壓蒸汽滅菌）2、外植體的消毒（酒精、氯化汞）3、接種的無菌操作（酒精、酒精燈——灼燒）4、無菌箱中的培養(yǎng)；5、移栽到消過毒的環(huán)境中生存一段時間。第25頁,共33頁，星期六，2024年，5月第26頁,共33頁，星期六，2024年，5月第27頁,共33頁，星期六，2024年，5月練習(xí)1.答：植物組織培養(yǎng)所利用的植物材料體積小、抗性差，對培養(yǎng)條件的要求較高。用于植物組織培養(yǎng)的培養(yǎng)基同樣適合于某些微生物的生長，如一些細(xì)菌、真菌等的生長。而培養(yǎng)物一旦受到微生物的污染，就會導(dǎo)致實驗前功盡棄，因此要進(jìn)行嚴(yán)格的無菌操作。2.答：外植體的生理狀態(tài)是成功進(jìn)行組織培養(yǎng)的重要條件之一。生長旺盛的嫩枝生理狀況好，容易誘導(dǎo)脫分化和再分化。第28頁,共33頁，星期六，2024年，5月(1)、培育無病毒植株(2)、培養(yǎng)紫草愈傷組織,提取紫草素（治療燙傷和割傷的藥物以及染料和化妝品的原料）(4)、基因工程中亦需用到植物組織培養(yǎng)的方法植物組織培養(yǎng)的應(yīng)用：(3)、誘導(dǎo)離體的植物組織形成具有生根發(fā)芽能力的胚狀結(jié)構(gòu)，包裹上人造種皮，制成人工種子，可以解決有些作物品種繁殖能力差，結(jié)子困難或發(fā)芽率低等問題.第29頁,共33頁，星期六，2024年，5月同常規(guī)的無性繁殖方法相比，組織培養(yǎng)快速繁殖法主要具有以下優(yōu)點：（1）快速。采用常規(guī)的方法如分株法，一棵花卉一年一般只能生產(chǎn)幾株或幾十株，但用組織培養(yǎng)的方法則每年可以繁殖出幾萬甚至數(shù)百萬的小植株。（2）周年生產(chǎn)?；ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖是在實驗室中進(jìn)行，因條件可控，所以不受季節(jié)限制，可以全年進(jìn)行連續(xù)生產(chǎn)。而常規(guī)的無性繁殖則受季節(jié)限制，只能在花卉生長季節(jié)進(jìn)行繁殖。（3）經(jīng)濟(jì)效益高?；ɑ芙M織培養(yǎng)快速繁殖所需要的空間小，在一個200平方米的培養(yǎng)室內(nèi)一年可生產(chǎn)試管苗上百萬株。如按每株1元計算，每年產(chǎn)值上百萬元。（4）以組織培養(yǎng)繁殖的種苗與母株有著相同的遺傳基因。所以使用這項技術(shù)可讓優(yōu)良的品種不斷地延續(xù)。組織培養(yǎng)與常規(guī)繁殖相比優(yōu)點眾多第30頁,共33頁，星期六，2024年，5月1.下列那組符合菊花組織培養(yǎng)的基本步驟（）A．制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→移栽→栽培B．制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→培養(yǎng)→栽培→移栽C．制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→栽培→培養(yǎng)→移栽D．制備MS培養(yǎng)基→外植體消毒→接種→移栽→培養(yǎng)→栽培練習(xí)2.在外植體脫分化形成愈傷組織的過程中，下列哪個條件是不需要的（）

A．消毒滅菌B．適宜的溫度

C．充足的光照D．適宜的養(yǎng)料和激素AC第31頁,共33頁，星期六，2024年，5月3．某同學(xué)在做菊花組織培養(yǎng)時，操作完成了3-4天后，觀察同一溫室中的外植體，發(fā)現(xiàn)有的瓶內(nèi)外植體正常生長，有的瓶內(nèi)外植體已經(jīng)死亡，你認(rèn)為死亡的原因不可能的是（）