臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集課件

第2章臨床微生物檢驗標(biāo)本

的采集

臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集

在臨床微生物檢驗工作中，標(biāo)本的正確選擇、采集和運送是保證實驗室質(zhì)量的重要環(huán)節(jié)，是實驗室工作準(zhǔn)確和有效的前提。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第一節(jié)標(biāo)本的采集和處理原則臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集的一般原則1.早期采集2.無菌采集3.根據(jù)目的菌的特性用不同的方法采集4.采集適量標(biāo)本5.安全采集臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、標(biāo)本的處理一些對環(huán)境敏感的細菌如腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌和流感嗜血桿菌等應(yīng)保溫并立即送檢厭氧性標(biāo)本應(yīng)放在專門的運送瓶或試管內(nèi)運送，有時可直接用抽取標(biāo)本的注射器運送。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集其他所有的標(biāo)本采集后最好在2h之內(nèi)送到實驗室。若不能及時送檢，標(biāo)本應(yīng)置于一定環(huán)境中保存，如支氣管洗液、心包液、痰、尿等標(biāo)本應(yīng)保存在4℃環(huán)境中，腦脊液等則要在25℃保存?；颊邩?biāo)本中可能含有大量致病菌，不管標(biāo)本運送距離遠近，都必須注意安全防護。標(biāo)本切勿污染容器的瓶口和外壁，容器必須包裝好，防止送檢過程中倒翻或碰破流出。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集臨床常見微生物學(xué)檢驗標(biāo)本通常有血液、腦脊液、尿液、傷口的膿液、胸水、腹水、糞便、痰液及泌尿生殖系統(tǒng)的分泌物等，下面分別介紹各種標(biāo)本的采集方法及檢測出不同病原體的臨床意義。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第二節(jié)血液臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集1.皮膚消毒程序嚴(yán)格執(zhí)行以下三步法:(1)70%酒精擦拭靜脈穿刺部位待30秒以上。

(2)1%～2%碘酊作用60秒或10%碘氟60～90秒，從穿刺點向外畫圈消毒,至消毒區(qū)域直徑達3cm以上。

(3)70%酒精脫碘：對碘過敏的患者，用70%酒精消毒60秒，待酒精揮發(fā)干燥后采血。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集2.采血部位通常采血部位為肘靜脈。疑似細菌性心內(nèi)膜炎時，以肘動脈或股動脈采血為宜。對疑為細菌性骨髓炎或傷寒患者，在病灶或者髂前（后）上棘處嚴(yán)格消毒后抽取骨髓1ml作增菌培養(yǎng)。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集3.靜脈穿刺和培養(yǎng)瓶接種程序在穿刺前或穿刺期間，為防止靜脈滑動，可戴乳膠手套固定靜脈，不可接觸穿刺點。(2)用注射器無菌穿刺取血后，勿換針頭直接注入血培養(yǎng)瓶，或嚴(yán)格按廠商推薦的方法采血。(3)血標(biāo)本接種到培養(yǎng)瓶后，輕輕顛倒混勻以防血液凝固。立即送檢，切勿冷藏。4.采血量

自動化儀器要求成人采血量是8～10ml/瓶，兒童1～5ml/瓶。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集5.血培養(yǎng)次數(shù)和采血時間只要懷疑血液細菌感染，應(yīng)即刻采集。采血培養(yǎng)應(yīng)該盡量在使用抗菌藥物之前進行，在1h內(nèi)采集2～3次做血培養(yǎng)。對間歇性寒戰(zhàn)或發(fā)熱應(yīng)在寒戰(zhàn)或體溫高峰到來之前0.5～1h采集血液，或于寒戰(zhàn)或發(fā)燒后1h進行。入院前兩周內(nèi)接受抗菌藥物治療的患者，連續(xù)3d，每天采2份。6.標(biāo)本運送采血后應(yīng)該立即送檢,如不能立即送檢，可室溫保存，切勿冷藏。

臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、血液中常見的病原體

種類病原菌革蘭陽性球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、肺炎鏈球菌、化膿鏈球菌、草綠色鏈球菌、腸球菌革蘭陽性桿菌結(jié)核分枝桿菌、產(chǎn)單核李斯特菌、陰道加特納菌革蘭陰性球菌腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌革蘭陰性桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、克雷伯桿菌、腸桿菌、變形桿菌、沙雷菌、沙門菌、不動桿菌、嗜肺軍團菌、嗜血桿菌真菌念球菌、曲霉菌、隱球菌、球孢子菌厭氧菌擬桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集三、臨床意義血液感染是一種危重的全身感染，對其進行病原菌的檢驗，提供病原學(xué)的診斷極為重要。當(dāng)少量細菌侵入血液循環(huán)，為一過性，不繁殖或很少繁殖，不引起或僅引起輕微的炎癥反應(yīng)者稱為菌血癥,若有全身性炎癥反應(yīng)的表現(xiàn)稱為膿毒癥。血液標(biāo)本的細菌培養(yǎng)是診斷菌血癥的基本而重要的方法，若從患者血液中檢出細菌，一般視為病原菌感染，提示有菌血癥。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第三節(jié)腦脊液臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集采集腦脊液一般用腰椎穿剌術(shù)獲得，特殊情況可采用小腦延髓池或腦室穿刺術(shù)。標(biāo)本采集后要立即送檢、化驗，一般不能超過1小時。腰穿法無菌取腦脊液3～5ml，置無菌管內(nèi)立即送檢。培養(yǎng)腦膜炎奈瑟菌、流感嗜血桿菌等苛養(yǎng)菌時，應(yīng)將標(biāo)本置于35℃條件下保溫送檢，不可置冰箱保存。但做病毒檢查的腦脊液標(biāo)本應(yīng)放置冰塊，可在4℃保存72h。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、腦脊液中常見病原體

`革蘭陰性菌病毒真菌及其他肺炎鏈球菌腦膜炎奈瑟菌乙型腦炎病毒新生隱球菌B群鏈球菌大腸埃希菌柯薩奇病毒A白假絲酵母菌A群鏈球菌銅綠假單胞菌柯薩奇病毒B鉤端螺旋體消化鏈球菌卡他布蘭漢菌脊髓灰質(zhì)炎病毒結(jié)核分枝桿菌擬桿菌新腸道病毒68～71產(chǎn)單核細胞李斯特菌不動桿菌狂犬病毒炭疽芽胞桿菌葡萄球菌肺炎克雷白桿菌流感嗜血桿菌臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集三、臨床意義細菌性腦膜炎：是中樞神經(jīng)系統(tǒng)感染的常見類型，其中以流行性腦脊髓膜炎為常見，有的呈暴發(fā)型，病情嚴(yán)重，病死率較高；多發(fā)年齡在5～29歲，冬春季多發(fā)，可用青霉素類、磺胺類、頭孢霉素類抗生素治療。結(jié)核性腦膜炎最常見，近幾年呈回升趨勢，為防治重點。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集真菌性腦膜炎：最常見于隱球菌腦膜炎，其他的真菌性腦膜炎如白假絲酵母菌、球孢子性腦膜炎日漸增多，特別是免疫功能低下和惡性疾病患者易并發(fā)，如AIDS、惡性腫瘤，嚴(yán)重糖尿病、SLE等患者易發(fā)生。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集流行性乙型腦炎：是一種人獸共患的自然疫源性疾病。傳染源為患者和家禽、家畜及野生動物，蚊蟲為傳播媒介，經(jīng)蚊蟲叮咬、吸血而傳播，人群對本病普遍易感，感染后多數(shù)人無癥狀而成為隱性感染。但可獲得持久免疫力，再次發(fā)病者極少見。少數(shù)患者病情嚴(yán)重，病死率高，可留有后遺癥。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第四節(jié)膿液臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集先清洗，再采集。膿性標(biāo)本是用針和注射器抽吸采集，如果沒有得到抽吸物，也可以用拭子在傷口深部采集滲出物。膿腫標(biāo)本以無菌注射器抽取為好，也可由排液法取得。厭氧菌感染的膿液常有腐臭應(yīng)予注意。特別要注意避免正常菌群所污染以及由采集至接種前盡量避免接觸空氣。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、膿液中常見病原體細菌種類革蘭陽性菌革蘭陰性菌球菌金黃色葡萄球菌、凝固酶陰性葡萄球菌、化膿鏈球菌、肺炎鏈球菌、腸球菌、消化鏈球菌、四聯(lián)球菌肺炎克雷白桿菌、變形桿菌、腦膜炎奈瑟菌、淋病奈瑟菌、卡他布蘭漢菌桿菌結(jié)核分枝桿菌、非結(jié)核分枝桿菌、破傷風(fēng)桿菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌、炭疽芽胞桿菌大腸埃希菌、銅綠假單胞菌、流感嗜血桿菌、擬桿菌、梭桿菌其他放線菌（衣氏放線菌、諾卡菌）臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集三、臨床意義由創(chuàng)傷、手術(shù)、侵入性器械操作等外科治療引起的感染最為常見。細菌造成傷口感染一般認為需每克組織內(nèi)細菌數(shù)量在105～106個以上。外傷性創(chuàng)傷感染以葡萄球菌和鏈球菌多見，且易發(fā)生混合感染。燒傷創(chuàng)面最常見革蘭陰性桿菌感染，如銅綠假單胞菌等，次為革蘭陽性球菌感染，可單獨也可混合細菌感染。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第五節(jié)痰液臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集自然咳痰法以晨痰為佳，盡可能在用抗菌藥物之前采集標(biāo)本。用力咳出呼吸道深部的痰，將痰液直接吐入無菌、清潔、干燥、不滲漏、不吸水的廣口帶蓋的容器中，標(biāo)本量應(yīng)≥1ml。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集支氣管鏡采集法、防污染毛刷采集法、環(huán)甲膜穿刺經(jīng)氣管吸引法、經(jīng)胸壁針穿刺吸引法和支氣管肺泡灌洗法均由臨床醫(yī)生按相應(yīng)操作規(guī)程采集，但必須注意采集標(biāo)本時盡可能避免咽喉部正常菌群的污染。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集小兒取痰法用彎壓舌板向后壓舌，將拭子伸入咽部，小兒經(jīng)壓舌刺激咳痰時，可噴出肺部或氣管分泌物粘在拭子上送檢。幼兒還可用手指輕叩胸骨柄上方，以誘發(fā)咳痰。

注意：對可疑烈性呼吸道傳染?。ㄈ鏢ARS、肺炭疽、肺鼠疫等）患者采集檢驗標(biāo)本時必須注意生物安全防護。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、痰標(biāo)本中常見病原體細菌金黃色葡萄球菌、肺炎鏈球菌、A群鏈球菌、腸球菌、卡他莫拉菌、腦膜炎奈瑟菌、白喉棒狀桿菌、類白喉棒狀桿菌、結(jié)核分枝桿菌、炭疽芽胞桿菌、流感嗜血桿菌、克雷伯桿菌、銅綠假單胞菌、大腸埃希菌、百日咳桿菌、軍團菌、支原體和衣原體等

真菌白假絲酵母菌、隱球菌、曲霉菌和毛霉菌等病毒腺病毒、流感病毒、副流感病毒、呼吸道合胞病毒、巨細胞病毒、單純皰疹病毒、冠狀病毒和麻疹病毒等。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集三、臨床意義下呼吸道感染是最常見的呼吸道感染癥，主要指肺實質(zhì)性炎癥的肺炎和支氣管黏膜炎癥的支氣管炎，是我國常見病和病死率高的感染性疾病。痰標(biāo)本的細菌學(xué)檢查對呼吸道感染的診斷有重要意義。

臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第六節(jié)糞便臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集用藥前自然排便，采集膿血、黏液部分2～3g。外觀無異常的糞便應(yīng)從糞便的表面不同部位取材。液體便取絮狀物1～2ml,置無菌容器內(nèi)送檢。如排便困難或嬰幼兒患者，可用直腸拭子法采集標(biāo)本。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集糞便標(biāo)本送檢對住院的腹瀉成人患者，應(yīng)采集住院3日內(nèi)糞便標(biāo)本送檢，標(biāo)本采集后應(yīng)盡快送檢，有條件的提倡使用運送培養(yǎng)基。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、糞便中常見的病原體腸毒素為主的病原菌侵襲性為主的病原菌病毒霍亂弧菌、志賀菌（福氏、宋內(nèi)）、大腸埃希菌（ETEC、EHEC、EAEC）、金黃色葡萄球菌、難辨梭菌、產(chǎn)氣莢膜梭菌沙門菌、大腸埃希菌（EPEC、EIEC）、志賀菌（鮑氏、志賀）、彎曲菌、副溶血弧菌、小腸結(jié)腸炎耶爾森菌、結(jié)核分枝桿菌、白假絲酵母菌輪狀病毒、?？刹《?、Norwolk病毒、甲型肝炎病毒、戊型肝炎病毒、腺病毒臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集三、臨床意義細菌性痢疾

（bacillarydysentery）

簡稱菌痢，主要是指由志賀菌引起的腸道傳染病，是腸道感染性腹瀉最常見的病種。細菌、真菌、病毒引起的胃腸炎

此癥最為常見，由多種病原體感染所致，臨床常表現(xiàn)為腹瀉、嘔吐、高熱等癥狀。胃腸炎的病毒感染常見于輪狀病毒等，常引起幼兒腹瀉。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集細菌性食物中毒?？晌＜吧?，常見于沙門菌、副溶血弧菌、致病性大腸埃希菌、葡萄球菌、肉毒梭菌、臘樣芽胞桿菌食物中毒。多發(fā)生在夏秋季，以暴發(fā)和集體發(fā)病為特征，是一種嚴(yán)重的病癥。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第七節(jié)尿液臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集采集方法采集清潔中段尿。必要時導(dǎo)尿或膀胱穿刺留尿標(biāo)本，但要注意導(dǎo)尿容易引起逆行性感染。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集采集容器的要求：潔凈、無菌、加蓋、封閉、防滲漏、廣口、容積應(yīng)>50ml、盒蓋易于開啟，不含防腐劑和抑菌劑。標(biāo)本采集后應(yīng)及時送檢、及時接種，室溫下保存時間不得超過2小時（夏季保存時間應(yīng)適當(dāng)縮短或冷藏保存），4℃冷藏保存時間不得超過8小時。但應(yīng)注意淋病奈瑟菌培養(yǎng)時標(biāo)本不能冷藏保存。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、常見病原體

尿液中常見病原體：80%為革蘭陰性桿菌，其中以大腸埃希菌最為常見。

20%為革蘭陽性菌，其中以腸球菌為多見。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集三、臨床意義尿路感染urinarytractinfection是指大量微生物在尿路中生長繁殖而引起的尿路炎癥?？煞譃樯夏蚵犯腥荆ㄖ饕心I盂腎炎）和下尿路感染（主要有膀胱炎和尿道炎）。為最常見的感染性疾病，發(fā)病率約占人口的2%。多見于成年女性。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集尿路感染主要經(jīng)尿道口上行感染所致，極少數(shù)為血行感染。尿路感染常見腎盂腎炎（急性和慢性）、膀胱炎（急性為主）、尿道炎（細菌性尿道炎、淋菌性尿道炎、非淋菌性尿道炎）、前列腺炎（慢性常見）等。尿路感染需要明確部位和急性與慢性，主要依病原菌檢測，還要緊密結(jié)合臨床綜合考慮做出診斷。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第八節(jié)生殖道標(biāo)本臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集

一、標(biāo)本采集

采集前清潔、消毒尿道口及外陰，尿道分泌物可將無菌棉拭子伸入尿道3～4cm捻轉(zhuǎn)拭子采集。陰道分泌物采集時可用無菌棉拭子自陰道深部或陰道穹隆后部，宮頸2～3cm處，轉(zhuǎn)動并停留10～30s取分泌物。淋球菌培養(yǎng)需保溫及時送檢，衣原體、支原體等培養(yǎng)無法及時送檢時應(yīng)4℃保存。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集二、常見的病原體生殖道標(biāo)本主要用以檢查引起性傳播疾?。╯exuallytransmitteddisease,STD）的病原體。性傳播疾病是指以性行為為主要傳播途徑的一組傳染病。STD有二十幾種，1991年8月我國衛(wèi)生部確認8種STD為重要防治與監(jiān)測的病種臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集8種STD分別是：艾滋病、淋病、梅毒、軟下疳、性病淋巴肉芽腫、非淋菌性尿道炎、尖銳濕疣、生殖器皰疹。其病原體分別為：人類免疫缺陷病毒、淋病奈瑟菌、梅毒螺旋體、杜克雷嗜血桿菌、沙眼衣原體L1、L2、L3血清型、支原體和衣原體、人類乳頭狀病毒、人類單純皰疹病毒2。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集第九節(jié)厭氧培養(yǎng)標(biāo)本的采集臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集一、標(biāo)本采集與運送標(biāo)本的采集與運送是否適當(dāng)，對厭氧菌培養(yǎng)能否成功至關(guān)重要。

注意：標(biāo)本不能被正常菌群所污染。應(yīng)盡量避免接觸空氣。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集標(biāo)本的采集方法

一般情況下，應(yīng)從無正常菌群寄居的部位采取標(biāo)本。臨床微生物檢驗標(biāo)本的采集不宜做厭氧菌培養(yǎng)①鼻咽拭子；②齒齦拭子；③痰和氣管抽取物；④胃和腸道內(nèi)容物、肛拭；⑤接近皮膚和黏膜的分泌物；⑥褥瘡潰瘍及黏膜層表面；⑦