第5章 動物細胞制藥課件

第四節(jié)動物細胞的培養(yǎng)

條件和培養(yǎng)基細胞體外培養(yǎng)基本條件:①無菌②營養(yǎng)充足,防止有害物質③氧氣第5章動物細胞制藥2④隨時清除代謝有害物質⑤良好的生存外環(huán)境⑥及時分種第5章動物細胞制藥2一、動物細胞的培養(yǎng)條件⒈器材的清洗和消毒⑴器材的清洗浸泡、刷洗、泡酸、沖洗⑵器材的消毒滅菌物理消毒化學消毒第5章動物細胞制藥2第5章動物細胞制藥2第5章動物細胞制藥2⒉水質:電阻值大于18MΩ,

去熱原。⒊pH:7.2～7.4⒋滲透壓:290～300mOsm/kg⒌溫度:37±0.5C⒍空氣:氧的飽和質60%,氧分壓

4～0.7kPa第5章動物細胞制藥2第5章動物細胞制藥2二、動物細胞的培養(yǎng)

基的種類和組成分3類:⒈天然培養(yǎng)基⒉合成培養(yǎng)基⒊無血清培養(yǎng)基第5章動物細胞制藥2⒈天然培養(yǎng)基

血清、羊水、腹水等,成分復雜、成分不穩(wěn)定⒉合成培養(yǎng)基

DME、MEM、DMEM、HAMF12、RPMI1640第5章動物細胞制藥2⑴氨基酸⑵維生素⑶糖類⑷無機鹽⑸其它成分添加小牛血清：第5章動物細胞制藥2添加小牛血清的作用⑴提供生長因子和激素⑵提供貼附因子和伸展因子⑶提供結合蛋白⑷提供必需脂肪酸和微量元素第5章動物細胞制藥2⒊無血清培養(yǎng)基①提高重復性②減少微生物污染③供應充足穩(wěn)定④產品易純化⑤避免血清因素對細胞的毒性⑥減少血清中蛋白對生物測定的干擾第5章動物細胞制藥2無血清培養(yǎng)基加入添加劑⑴生長因子和激素⑵結合蛋白⑶貼附因子和伸展因子⑷有利細胞生長的因子和元素第5章動物細胞制藥2第五節(jié)動物細胞培養(yǎng)方

法和操作方式一、動物細胞大規(guī)模培養(yǎng)的方法依細胞種類:

原代培養(yǎng)、傳代培養(yǎng)依培養(yǎng)基:

液體培養(yǎng)、固體培養(yǎng)第5章動物細胞制藥2

依培養(yǎng)器和方式:

靜止培養(yǎng)、旋轉培養(yǎng)、攪拌培養(yǎng)、微載體培養(yǎng)、中空纖維培養(yǎng)、固定床或流化床培養(yǎng)第5章動物細胞制藥2

從生產實際分為:

懸浮培養(yǎng)貼壁培養(yǎng)貼壁-懸浮培養(yǎng)第5章動物細胞制藥2⒈懸浮培養(yǎng)讓細胞自由的懸浮于培養(yǎng)基內生長繁殖。⒉貼壁培養(yǎng)讓細胞貼附在某種基質上生長繁殖的培養(yǎng)方法。⒊貼壁-懸浮培養(yǎng)第5章動物細胞制藥2⒊貼壁-懸浮培養(yǎng)⑴微載體培養(yǎng)⑵包埋和微囊培養(yǎng)⑶結團培養(yǎng)第5章動物細胞制藥2二、動物細胞培養(yǎng)的操作

方式⒈分批式操作⒉半連續(xù)式操作⒊灌流式操作第5章動物細胞制藥2第六節(jié)動物細胞生物反應

器及其檢測控制系統(tǒng)一、動物細胞生物反應器的類型及其基本結構⒈攪拌式生物反應器⒉氣升式生物反應器⒊中空纖維式生物反應器⒋透析袋或膜式生物反應器⒌固定床或流化床式生物反應器第5章動物細胞制藥2⒈攪拌式生物反應器第5章動物細胞制藥2⒉氣升式生物反應器第5章動物細胞制藥2⒊中空纖維式生物反應器第5章動物細胞制藥2平床式中空纖維式生物反應器第5章動物細胞制藥2⒋透析袋或膜式生物反應器第5章動物細胞制藥2⒌固定床或流化床式生物反應器第5章動物細胞制藥2CellGenplus生物反應器第5章動物細胞制藥2二、動物細胞生物反應器的

檢測控制系統(tǒng)⒈培養(yǎng)過程需檢測的物化參數(shù)直接在線檢出取樣離線檢測檢測后計算⒉主要參數(shù)的檢測和控制方法第5章動物細胞制藥2⒉主要參數(shù)的檢測和控制方法⑴溫度⑵pH①在培養(yǎng)初期，控制進氧量②當細胞密度提高后控制

NaHCO3的量第5章動物細胞制藥2⑶溶氧⑷攪拌⑸進出液流量⑹其它第5章動物細胞制藥2第七節(jié)動物細胞制藥的前

景與展望一、提高產量降低成本和改進質量方面的研究二、轉基因動物的研究三、組織工程的研究第5章動物細胞制藥2一、提高產量、降低成本和改

進質量方面的研究

為了提高產量,要提高細胞表達水平。為降低成本，須改進培養(yǎng)基配方。為改進產品質量，關鍵是糖基化質量。改進工藝，生產設備等第5章動物細胞制藥2二、轉基因動物的研究

自1982年Palimiter提出用轉基因動物來生產藥用蛋白以來，發(fā)展迅速。優(yōu)點：產量高成本低質量與天然一樣?，F(xiàn)還有不成熟之處。對動物和人的健康的影響。第5章動物細胞制藥2三、組織工程的研究

組織工程：通過對大量細胞的培